用~3H-TdR掺入法淋转和~3H-UR掺入试验观察癌病人的细胞免疫功能

我们用~3H—TdR掺入法淋转测定了73例癌症病人的细胞免疫功能。同时,还用~3H—UR(~3H—尿嘧啶核苷)掺入试验对37例癌症病人作了与~3H—TdR掺入法淋转的比较,现小结如下: 一、方法:(1)~3H—TdR掺入淋转按文献介绍进行。(2)~3H—UR掺入试验:取全血     

硫酸镍对类淋巴母细胞株细胞生长和EB病毒抗原表达的影响

广东省的鼻咽癌环境病因调查研究发现,鼻咽癌高发区大米和水中的镍含量显著高于低发区。本文用三种带EB病毒基因组的类淋巴母细胞株作为靶细胞初步研究了硫酸镍对细胞生长的影响及EB病毒抗原表达上的作用。 用染料排斥法每24小时取样计算活细胞数和用[H]~3—TdR掺入法测定表明,10—20μg/ml硫酸镍均能抑制Raji和B_(95-8)细胞的生长,1μg/ml硫酸镍对Raji细胞的生长无明显影响,但能轻微刺激B_(95-8)细胞的生长,而1—20μg/ml硫酸镍对P_3HR—1细胞的生长却有促进作用。1—20μg/ml Ni_2SO_4均抑制Raji,B_(95-8)细胞~3H—TdR的DNA掺入,而对P_3HR—1细胞~3H—TdR的DNA掺入却有促进作用。用间接免疫萤光法检测硫酸镍对三株细胞EB病毒抗原表达的影响显示,硫酸镍能诱发Raji细胞EA抗原的表达,增高B_(95-8)细胞VCA抗原的阳性率,相反,却抑制P_3HR—1细胞VCA抗原的表达。     

93例鼻咽癌病人自然杀伤细胞活性分析

用~(51)Cr释放试验检测93例鼻咽癌病人和83例正常人外周血自然杀伤细胞活性,其裂解K_(562)肿瘤靶细胞率分别为58±18.0％和54.0±12.8％。两组间没有明显差异。31例鼻咽癌病人同时检测了血清EB病毒VCA—IgA抗体滴度,分析了病期、肿瘤转移和EB病毒VCA—IgA抗体滴度与病人NK细胞活性的关系。结果表明。病期和肿瘤转移对鼻咽癌病人的NK细胞活性和EB病毒VCA—IgA抗体滴度之间有正相关关系。本文结果支持EB病毒感染可以提高病人NK细胞活性的推测。     

BCG—CW对荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性及胸腺细胞增殖能力的影响

目的 探讨卡介苗细胞壁(BCG—CW)对荷瘤鼠脾脏NK细胞杀伤活性及胸腺细胞增殖能力的影响。方法 以小鼠脾脏NK细胞为效应细胞,以~3H—TdR标记的YAC—1细胞为靶细胞,测定NK细胞杀伤活性;胸腺细胞增殖能力采用~3H—TdR掺入法测定。结果 BCG—CW组和BCG—CW 5—Fu组荷瘤鼠脾脏NK细胞杀伤活性与肿瘤对照组比较,差异显著(P<0.05;P<0.001),而且在胸腺细胞增殖能力上也明显高于肿瘤对照组,并且与5—Fu组比较也有显著差异(P<0.001)。结论 BCG—CW对荷瘤鼠免疫系统有明显的调节作用,可增强荷瘤鼠NK细胞杀伤活性,促进小鼠胸腺细胞增殖能力。     

WB852对EAC细胞和骨髓细胞DNA,RNA和蛋白质合成的影响(摘要)

体外培养同位素掺入实验表明,WB_(852)能明显抑制EAC细胞~3H—TdR、~3H—Urd和~3H—Leu的掺入。在50ug/ml范围内。量效关系明显。在50ug/ml时对~3H—TdR、~3H—Urd和~3H—Leu掘入DNA。RNA和蛋白质的抑制率分别为99％,9O％和68％。从结果看出,对核酸的抑制作用较强,对蛋白质     

肿瘤病人的天然杀伤(NK)细胞活性的测定——3~H—TdR掺入法

应用简易而稳定的。~3H—TdR掺入法测定NK细胞的活性。观察了43人次肿瘤病人,发现食道癌患者NK细胞活性明显降低,乳癌患者则在正常范围,两类病人的差异有显著性,提示鳞癌患者的NK细胞活性下降,但受一个疗程~(60)Co照射后NK细胞的活性略有增高。对本实验的方法进行了讨论。     

日本血吸虫病与大肠癌关系的实验研究

昆明种小鼠感染日本血吸虫尾蚴10条,两个月后皮下注射二甲肼(DMH)20mg/Kg体重,每周一次,到第8周时大肠粘膜细胞~3H—TdR掺入率为493±18cpm/μgDNA—p,显著高于正常组动物(p<0.001)。注射DMH组动物的3~H—TdR掺入率于第10周才开始明显升高(594±15cpm/μgDNA—P),比血吸虫病合并DMH处理组晚两周。血吸虫病动物于感染尾蚴后21、25、29和35周共排出粪便总胆汁酸和脱氧胆酸13.0±0.39和2.23±1.00mg/kg体重/日,分别为对照组动物的131％和152％,两组动物之间差别非常显著(P<0.01)。但血吸虫病DMH处理组动物该两种酸排出量波动在对照组测定值的范围内。     

鼻咽癌免疫抑制因子的研究——鼻咽癌组织液对淋巴细胞~3H-TdR摄取和E—玫瑰花试验的影响

本文应用氚—胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)掺入法测定在不同条件下加入鼻咽癌组织液对淋巴细胞摄取~3H—TdR的影响,同时也观察鼻咽癌组织液对E-玫瑰花形成的影响,进一步探讨免疫抑制因子对细胞免疫功能的作用,现把实验结果报告如下: 实验材料及方法 (一)鼻咽癌组织液的提取(略) (二)扁桃体组织液的提取(略)     

癌灵Ⅰ号体外抗癌活性检测

癌灵I号是哈尔滨医科大学附属医院药厂生产的抗癌药物。我们采用两株人白血病细胞株及体外四种常用的药物筛选方法(死活细胞计数法、~3H—TdR、~3H—uR掺入法、克隆法),检测癌灵I号在体外的抗癌活性,并同高三尖杉酯碱抗癌活性相比较。材料与方法药物:癌灵I号(哈医大附院药厂生产,0.1％注射液) 高三尖杉酯碱(杭州制药厂生产)     

IL-2、IL-15增强免疫编辑后NK细胞NKG2D的表达及其对鼻咽癌CNE2细胞的杀伤活性

目的：观察IL2、IL15对免疫编辑后NK细胞NKG2D的表达及其对鼻咽癌CNE2细胞杀伤活性的影响。方法：抗CD56磁珠纯化NK细胞后分为4组：（1）编辑前NK细胞组：加入100 U/ml IL2;（2）单纯编辑组：NK细胞与CNE2细胞10∶1混合,加入100U/ml IL2;（3）IL2再培养组：纯化编辑后的NK细胞,加入1 000 U/ml IL2;（4）IL15再培养组：纯化编辑后的NK细胞,加入10 ng/ml IL15。24 h后,流式细胞仪检测各组NK细胞表面NKG2D的表达;LDH释放测定法测定效靶比20∶1时各组NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性。结果：编辑前NK细胞组、单纯编辑组、IL2再培养组、IL15再培养组NK细胞表面NKG2D的表达率分别为(97.63±0.83)%、(53.50±1.25)%、(94.47±1.00)%、(98.07±0.21)%。IL2、IL15再培养组NK细胞 NKG2D的表达分别比单纯编辑组有显著的增加（P<0.01),该4组NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性分别为(35.90±3.27)%、(4.70±2.30)%、(31.70±3.56)%、(40.18±2.94)%,IL2再培养组、IL15再培养组明显提高编辑后NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性（P<0.01）, IL15的作用强于IL2。结论：高剂量IL2、IL15可以上调免疫编辑后NK细胞表面NKG2D的表达,恢复编辑后NK细胞对鼻咽癌细胞CNE2的杀伤活性,IL15的作用强于IL2。     

加热抑制HL—60细胞核酸合成与集落形成具有部分可逆性

本文证实加热(42℃,60分钟)对 HL—60细胞的损伤程度存在异质性,短期(24小时)液体培养能使受抑制 HL—60细胞的集落存活率及~3H—TdR 掺入率获得部分恢复。结果提示,加热对白血病细胞 DNA 合成及集落形成抑制具有部分可逆性。作者对其临床意义及发生机理也进行了分析。     

鼻咽癌高发区四会县鼻咽癌病人与健康人血清及头发中硒含量的测定

用2,3—二氨基萘荧光法测定了鼻咽癌高发区四会县鼻咽癌病人与健康人血清及头发中硒的含量。结果表明,50例鼻咽癌病人血清硒平均含量(0.084±0.016ppm)显著地低于56例健康人(0.096±0.029ppm);54例鼻咽癌病人头发硒平均含量(0.443±0.070ppm)显著地低于53例健康人(0.469±0.066ppm)。     

美洛昔康抑制肝癌生长的实验研究

目的研究选择性环氧合酶2(cyclooxygenase2,COX2)抑制剂美洛昔康对肝癌生长的影响。方法采用甲基3H胸腺嘧啶核苷(3H TdR)掺入、AnnexinV荧光标记法与TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测美洛昔康对体外培养人肝癌HepG2细胞生长的影响及凋亡的诱导作用。建立裸鼠人肝癌原位移植瘤模型,给予美洛昔康治疗8周,观察其对裸鼠体内肝癌生长的影响。用免疫组化法检测美洛昔康对肝癌细胞及组织中增殖细胞核抗原表达的影响。结果美洛昔康可明显降低肝癌细胞的3H TdR掺入,其抑制作用与药物浓度呈明显正相关;美洛昔康还可诱导人肝癌细胞凋亡,其诱导的早期及晚期凋亡细胞阳性率分别为(21.7±2.4)%和(31.7±3.1)%。美洛昔康可抑制裸鼠人肝癌原位移植瘤生长,其抑瘤率为55.1%。美洛昔康还能明显抑制肝癌细胞和组织中PCNA表达。结论美洛昔康能有效抑制肝癌生长。     

抗瘤药与胸腺素对小鼠脾细胞自然杀伤活性的影响

本文用~3H—TdR释放法检测了平阳霉素、阿霉素及胸腺素对BALB/C小鼠脾细胞杀伤YAC—1瘤细胞活性影响。结果显示一定量的平阳霉素除了能直接杀伤瘤细胞外,也能增强脾细胞NK样杀伤活性;并证明阿霉素有相同的作用;当平阳霉素、阿霉素分别与胸腺素合用后,这种增强作用更为明显。     

抗瘤药与胸腺素对小鼠脾细胞自然杀伤活性的影响

本文用~3H—TdR释放法检测了平阳霉素、阿霉素及胸腺素对BALB/C小鼠脾细胞杀伤YAC—1瘤细胞活性影响。结果显示一定量的平阳霉素除了能直接杀伤瘤细胞外,也能增强脾细胞NK样杀伤活性;并证明阿霉素有相同的作用;当平阳霉素、阿霉素分别与胸腺素合用后,这种增强作用更为明显。     

NKG2D介导NK 细胞对鼻咽癌细胞杀伤作用的体外研究

 目的 探讨鼻咽癌CNE2细胞表面HLA-Ⅰ类分子表型和NKG2D配体的表达情况，进一步了解其对同种异体NK细胞杀伤活性的影响。方法 流式细胞仪检测NKG2D的配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3在K562、CNE2细胞的表达情况。PCR-SSP法分析CNE2细胞HLA-A、B、Cw分型和NK细胞KIR分型。LDH释放法测定5例健康者NK细胞在不同效靶比时对K562、CNE2细胞的杀伤活性，效靶比20：1时观察抗NKG2D配体的单抗对NK细胞杀伤K562、CNE2细胞活性的影响。结果 CNE2细胞表达MICA、MICB、ULBP2，不表达ULBP1、ULBP3。K562细胞表面表达MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3。5例健康者NK细胞抑制性KIR与CNE2细胞表面的HLA-Ⅰ类分子之间存在错配。效靶比5：1、10：1、20：1、30：1时NK细胞对K562、CNE2细胞的杀伤活性分别为（29．02±0．45）％、（10．50±2．17）％；（44．43±1．36）％、（27．68±1．47）％；（57．82±1．35）％、（36．99±3．13）％：（71．24±2．36）％、（55．00±2．20）％，在各效靶比时NK细胞对K562细胞的杀伤活性较CNE2细胞明显增强（P=0．000）；在效靶比20：1时anti-MICA、anti-MICB、anti-ULBP1、anti—ULBP2、anti-ULBP3可明显抑制NK细胞对K562细胞的杀伤活性，与阻断前相比有显著性差异（P=0．000）；anti—MICA、anti—MICB、anti—ULBP2可明显抑制NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性，与阻断前相比有显著性差异（P〈0．01），但anti—ULBP1、anti—ULBP3不能阻断NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性。结论 NKG2D配体影响NK细胞对靶细胞的杀伤活性，提高NKG2D配体的表达有可能提高NK细胞的抗肿瘤活性。     

铂类抗癌药CHIP和CDDP在DNA分子上作用位置的探讨

本文研究了二羟二氯二异丙胺合铂(以下简称CHIP)和顺氯氨铂(以下简称CDDP)与DNA分子的相互作用。实验发现,外源性的鸟嘌呤核苷预先与CHIP或CDDP作用后,可以部分地扭转两药对~3H—TdR掺入小鼠艾氏腹水癌(EAC)细胞的抑制作用,而鸟嘌呤核苷本身对~3H—TdR的掺入并无影响;外源性的腺嘌呤核苷不能改变CHIP或CDDP的作用;外源性的胸腺嘧啶核苷和胞嘧啶核苷本身可强烈抑制~3H—TdR的掺入。我们推论,CHIP和CDDP在DNA分子上的主要结合位置可能是鸟嘌呤碱基。     

气功外气对人鼻咽癌细胞株的抑制作用和DNA合成影响的初步探讨

为寻找祖国医学治疗鼻咽癌的新途径,我们进行了气功外气对体外培养的人鼻咽低分化鳞癌细胞株(CNE—2)的抑制作用试验,实验共进行了三次,光镜观察受功组比对照组生长缓慢,外气对细胞生长的抑制率分别为33％(P<0.05);43％(P<0.05);55％(P<0.001)。同时进行了~3H—TdR掺入试验,观察外气对CNE—2细胞株DNA合成的影响。实验进行了四次,其抑制率分别为:34％(P<0.01);35％(P<0.01);39％(P<0.01),53％(P<0.001),模仿者为17％(P>0.05)。     

鼻咽癌病人放疗前后超氧化物歧化酶活性的研究

鼻咽癌病人放疗前后超氧化物歧化酶活性的研究郑美莲１毛志达２黄惠英２李辉梅１表１放疗前后ＮＰＣ病人和健康人ＳＯＤ活性比较（ｘ±ｓ）组别对照组ＮＰＣ病人放疗前放疗后例数３８６３６３ＳＯＤ活性（ｕ／ｍｌ）１１６０．４１±２９８．９６５２３．６７±１７０．９...     

交链孢酚单甲醚对人淋巴细胞增殖反应的影响

本实验运用PHA诱导的淋巴细胞增殖~3H—TdR掺入法,对食管癌高发区河南省林县粮食中分离的优势污染菌互隔交链孢霉(亦称链格孢菌)的毒素之一——交链孢酚单甲醚(AME)的免疫抑制作用进行了研究。实验结果表明:AME能明显抑制淋巴细胞对~3H—TdR的摄取,在浓度为25、50、75和100μg/ml,其抑制率分别是76.9％、89.2％、91.3％和94.9％,与对照组相比有显著性意义(P<0.01),且存在一定的剂量—效应关系。结果提示AME可能抑制细胞免疫功能。