慢性牙周炎患者的龈下微生物与吸烟状况

目的　评价慢性牙周炎患者的吸烟状况与龈下牙周致病微生物的百分比。方法　 112例慢性牙周炎患者 ,根据吸烟状况分为 :①重度吸烟组 >10支 /天 (n =32 ) ;②轻度吸烟组≤ 10支 /天 (n =18) ;③戒烟者组 (n =2 4 ) ;④非吸烟组 (n =38)。观察者口内每个象限 ,选取探诊最深的 1或 2个位点 ,纸捻法取龈下菌斑 ,厌氧培养 ;并测量该位点的探诊深度 (ProbeDepth ,PD)、附着丧失 (AttachmentLoss,AL)和探诊后出血 (Bleedingofprobe ,BOP)。结果　①取样位点临床指标的均值为PD :6 .3mm、AL :6 .5mm及BOP :89% ,各组间无显著性差异。②组间菌落形成单位和龈下微生物伴放线放线杆菌 (Actinobacillusactinomycetemcomitans,A .a)、牙龈卟啉单胞菌 (Porphyromanasgingivalis,P .g)、中间普氏菌 (Prevotellaintermedia ,P .i)、核梭杆菌 (Fusobacteriumnucleatum ,F .n)和微消化球菌(Peptostreptococcusmicros,P .m)的百分比均无差异。③方差分析显示仅轻度吸烟组福赛类杆菌 (Bacteroidesforsythus,B .f)的百分比略高于其它组 (P <0 .0 4 )。结论　慢性牙周炎患者 ,探诊深度和附着丧失相似的位点 ,吸烟组、戒烟组和非吸烟组的龈下牙周致病微生物百分比 (B .f除外 )无显著差异。     

侵袭性牙周炎和慢性牙周炎的龈下优势菌分析

目的 :分析侵袭性牙周炎 (aggressiveperiodontitis ,AgP)与慢性牙周炎 (chronicperiodontitis ,CP)的龈下优势菌群 ,为探讨牙周炎分类、病因和诊断提供实验依据。方法 :将中学生流调筛选 (16例 )及牙周病专科就诊(2 4例 )的AgP和CP患者 ,采集龈下菌斑样本 ,在厌氧菌基础培养基 (CDC)和选择性培养基 (TSBV)上培养分析。结果 :局限型AgP患者的伴放线放线杆菌 (Actinobacillusactinomycetemcomitans ,Aa)及兼性厌氧菌的检出率显著高于中度CP患者 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,而广泛型AgP和重度CP患者的厌氧菌总数较局限型AgP和中度CP患者显著增加 (P <0 .0 5 )。结论 :局限型AgP和中度CP的龈下优势菌有明显差别 ,Aa是一个重要的危险因子。     

实验性牙周炎动物模型的微生物研究

目的 利用Beagle犬建立一种近似人类临床牙周炎的牙周炎动物模型.方法 在6只Beagle犬牙颈部龈缘水平结扎丝线并配以形成牙周炎食谱饲养,分别于实验的第0、1、3、7、14 d,1、2、3个月检查实验动物的临床牙周状况和提取颊侧牙周龈下微生物标本,并用多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测龈下标本8种常见牙周炎致病菌,记录结果.结果 所有动物实验侧牙齿的牙周均形成近似人类临床牙周炎的实验性牙周炎,但严重程度和龈下致病菌种类不一.结论 在Beagle犬建立的牙周炎模型是较近似于人类临床牙周炎的实验性牙周炎动物模型.     

广泛型侵袭性牙周炎多种等位基因的筛查与分析

目的 通过比较多种等位基因在广泛型侵袭性牙周炎患者和健康对照组中的携带频率,明确广泛型侵袭性牙周炎的易感等位基因,并分析不同数目易感等位基因的携带对广泛型侵袭性牙周炎发生、发展的影响. 方法 采用聚合酶链反应和酶切相结合的方法检测33例广泛型侵袭性牙周炎患者和33名健康对照者5种基因型不同等位基因的携带频率,应用Z检验和方差分析对检测结果进行分析. 结果 HLA-DRB1*1501等位基因纯合子,TNF-A-308等位基因Ⅱ,IL-1B+3953等位基因Ⅱ,维生素D受体等位基因A、T,雌激素受体等位基因X在广泛型侵袭性牙周炎患者中的携带频率显著高于健康对照组;携带3种以上(含3种)易感等位基因的个体其牙周探诊深度[(4.67±1.09)mm]、临床附着丧失[(4.81±1.36)mm]、松动度(0.81±0.56)较携带3种以下(不含3种)易感等位基因者[分别为(3.46±0.62)mm、(3.57±1.45)mm、(0.51±0.36)]重. 结论 HLA-DRB1*501等位基因纯合子,TNF-A-308等位基因Ⅱ,IL-1B+3953等位基因Ⅱ,维生素D受体等位基因A、T,雌激素受体等位基因X是广泛型侵袭性牙周炎的易感等位基因,多种(3种以上)易感等位基因的携带对广泛型侵袭性牙周炎的发展有重要影响.     

两种重度牙周炎相关微生物高通量检测

目的:利用高通量测序(high-throughput sequencing, HTS)技术分析广泛型侵袭性牙周炎(generalized aggressive periodontitis, GAgP)和重度慢性牙周炎(severe chronic periodontitis, SCP)龈下微生物群的组成和差异。方法:分别选择20例GAgP、22例SCP及20例牙周健康者,采集龈下菌斑,提取DNA,利用Illumina MiSeq测序平台基于16S rDNA的V4可变区检测龈下菌群。结果:(1)优势菌群分析：GAgP组和SCP组的优势菌群结构相似,包括牙髓卟啉单胞菌等;而牙周健康组的优势菌群结构与GAgP组和SCP组不同,包括副流感嗜血杆菌等。(2)LEfSe分析：GAgP组和SCP组之间比较无差异性生物标志物;GAgP组、SCP组分别与牙周健康组比较均存在差异性生物标志物。结论:GAgP和SCP龈下微生物群结构相似,而GAgP和SCP与牙周健康者龈下微生物群结构不同。未发现GAgP和SCP的差异性生物标志物。     

二甲胺四环素软膏治疗牙周炎的研究

本文的目的是研究牙周袋内放置二甲胺四环素软膏治疗牙周炎的临床和微生物学疗效。将２１名中度牙周炎患者的７６颗患牙随机分组，每周局部给药，连续四周。用药前及用药后２、４、７周分别检测临床指数，并采取龈下菌斑，检测螺旋体的百分比以及其中的牙龈类杆菌。结果证实局部应用二甲胺四环素软膏是一种有效地治疗牙周炎的手段。     

不同方法检测牙菌斑中幽门螺杆菌的比较

目的 探讨用二氧化硅微粒法提取DNA检测口腔标本中幽门螺杆菌可行性及临床应用的意义。方法 选择50例因上腹部症状且有不同程度牙周炎的胃镜检查者50例。每例均取口腔标本。比较二氧化硅微粒法与DNA快提法两种不同方法提取胃及口腔样本中的DNA，引物选用尿素酶C基因和CagA基因进行PCR扩增。结果 SiO2微粒法提取DNA检测菌斑和含漱液中的幽门螺杆菌与Instagene Matrix提取DNA(Bio-rad)比较灵敏度为93．8％(30／32)，特异性为100％(68／68)。结论 SiO2微粒法提取菌斑和含漱液中的DNA操作简便，可作为Instagene Matrix替代方法检测口腔中的Hp。     

冠状动脉粥样硬化斑块中牙周炎致病菌的检测

目的探讨牙周炎与冠状动脉粥样硬化性心脏病（以下简称冠心病）发病的相关机制。方法收集31例行冠状动脉搭桥手术并伴有牙周炎的患者冠状动脉粥样硬化斑块和龈下菌斑，采用Chelex-100法提取细菌DNA，以聚合酶链反应（PCR）法检测冠状动脉粥样硬化斑块和龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，Pg）、伴放线放线杆菌（Actinobacillus actinomycetemcomitans，Aa）、具核梭杆菌（Fusobacterium nucleatum，Fn）、中间普氏菌（Prevotella intermedia，Pi）、福赛拟杆菌（Bacteroides forsythus，Bf）5种牙周炎相关致病菌。结果在31例患者冠状动脉粥样硬化斑块中，各种牙周炎相关致病菌的检出率分别为：Pg 38．7％、Aa 0％、Pi 12．9％、Fn 22．6％、Bf 38．7％；在本组同一患者冠状动脉粥样硬化斑块及龈下菌斑中同时检出Pg 5例、Aa 0例、Pi 2例、Fn 4例、Bf 8例，一致率分别为Pg 16．1％、Aa 0％、Pi 6．5％、Fn 12．9％、Bf 25．8％。结论在冠状动脉粥样硬化斑块中牙周炎相关致病菌DNA的检出，提示牙周炎相关致病菌在冠心病的发生、发展中可能起着重要的作用，为冠心病危险因素的研究和冠心病防治策略的制定提供了参考依据。     

慢性牙周炎龈下菌斑和唾液微生物群落分析

目的:运用DGGE技术检测慢性牙周炎龈下菌斑和唾液微生物群落结构,分析其菌群之间的关系。方法:选取34名慢性牙周炎志愿者,分别采集龈下菌斑和唾液样本,采用PCR扩增细菌16Sr RNA V3区后,运用DGGE技术分析各组样本微生物群落结构。通过数字化软件Im age J将DGGE凝胶图谱转成数字信息,对所得矩阵进行主成分分析(Princ ipal ComponentAnalysis,PCA)、聚类分析(C luster Analysis)和偏最小二乘法(Partial Least Squares,PLS)分析。结果:DGGE图谱显示:龈下菌斑DGGE条带数目为11～28,,平均19;唾液DGGE条带数目为11～24,平均17;PCA结果显示:龈下菌斑与唾液比较有明显的差异;聚类分析显示:龈下菌斑、唾液形成5个明显聚类群,在同一聚类群中相似度高,在不同聚类群中相似度低,表示龈下菌斑与唾液菌群之间有显著差异;PLS结果显示:慢性牙周炎龈下菌斑与唾液菌群有显著差异。结论:DGGE是一种能直观显示微生物群落的指纹技术。通过该技术能检测牙周、唾液微生物群落的结构和组成,本结果显示,慢性牙周炎龈下菌斑与唾液微生物群落结构有明显差异。     

牙周炎及胃病患者牙菌斑中的幽门螺杆菌

目的 明确牙周炎及胃病患者的牙菌斑中是否存在幽门螺杆菌（Ｈｐ）及Ｈｐ是否为细胞毒素相关基因Ａ阳性。方法 利用尿素酶Ｃ基因和ｃａｇＡ设计引物,通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测口腔中的Ｈｐ。选择１３例胃病及１０例牙周炎患者,每例患者选６个有牙龈炎症的牙位取龈上、龈下菌斑,共计２７６份样本用于ＰＣＲ检测。结果 胃病组１１例患者和牙周炎组全部病例均少有１份菌斑样本检出Ｈｐ,其中尿素酶Ｃ基因在胃病组的阳性率为     

伴2型糖尿病的慢性牙周炎牙周可疑致病菌的检测

目的 检测伴2型糖尿病(diabetes mellitus,DM)的慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)患者龈下菌斑中牙周可疑致病菌的种类和构成,从微生物学角度探讨牙周炎与DM的相互作用机制.方法 采集伴2型DM的CP患者154例(DM组)、不伴DM的单纯CP患者120例(CP组)及40名全身及牙周健康者(N组)的龈下集合菌斑,传统酚-氯仿法提取菌斑DNA,以牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg),伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa),具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn),中间普氏菌(Prevotella intermedia,Pi),福塞坦氏菌(Tannerella forsythia,Tf),齿垢密螺旋体(Treponema denticola,Td)为目标菌,应用以16SrRNA为基础的聚合酶链反应(PCR)技术对龈下菌群进行检测.结果 Pg、Aa、Fn、Pi、Tf、Td在DM组中均可检出;与CP组相比,在性别、年龄、牙周状况基本一致的情况下,轻度牙周炎者DM组Pi的检出率为35%(8/23),CP组为65%(13/20),两组间差异有统计学意义(P<0.05);重度牙周炎者DM组Pg、Aa、Tf的检出率分别为78%(72/92)、27%(25/92)、67%(62/92),CP组分别为58%(35/60)、17%(10/60)、43%(26/60),DM组均显著高于CP组,差异有统计学意义(P<0.05).同时,DM组Aa、Tf PCR产物的平均灰度值(average gradation,AVG)比值显著高于CP组,Pi的AVG比值明显低于CP组,P<0.05.结论 与单纯CP相比,伴2型DM的牙周炎患者龈下菌斑中Pg、Aa、Tf的数量增多,Pi的数量减少.     

牙周基础治疗对口腔幽门螺杆菌的影响及其基因型关系的研究

目的 :明确牙周基础治疗与口腔幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori ,Hp)存在的关系。分析胃Hp与口腔Hp的基因型 ,以明确胃与口腔的Hp是否具有同源性。 方法 :选择 5 6例有慢性中度牙周炎且胃镜活检Hp感染阳性患者分为 2组。提取所有口腔样本中的DNA ,PCR扩增 ,比较药物治疗组与药物治疗加牙周基础治疗组治疗前后 2组口腔Hp检出率的差别。对比分析其中 5位患者和 1位家属胃和口腔PCR产物的序列。结果 :2组患者不同的治疗后口腔Hp检出率有显著性差别 ( 3 .0 %vs 2 6.1% ,P <0 .0 5 )。胃和口腔Hp的序列相比较 ,相同者 1例 ,可能相同者 1例 ,有 1～ 4个碱基不同者 2例。 1例患者及其家属口腔中均检出Hp ,两者的序列有 3个不同。 结论 :牙周基础治疗有助于口腔Hp的根除。口腔中有可能同时存在多个Hp菌株 ,口腔Hp与胃Hp感染的复发或再感染有关     

Prevalence and quantification of the uncommon Archaea phylotype Thermoplasmata in chronic periodontitis

ObjectiveChronic periodontitis is a chronic inflammatory disease of the periodontal tissues and is caused by invasion of certain types of bacteria and Archaea, with Methanobrevibacter oralis as the predominant archaeon. In this study, we investigated the prevalence and quantity of the newly discovered Archaea phylotype Thermoplasmata in patients with chronic periodontitis.MethodsSubgingival plaque samples were obtained from 49 patients with chronic periodontitis and 45 periodontally healthy subjects. Qualitative analyses of Archaea and class Thermoplasmata were carried out by amplification of 16S rRNA genes in DNA extracts from plaque samples, and all the samples were quantitatively analyzed by real-time polymerase chain reaction (PCR).ResultsThe prevalence of Archaea in patients with chronic periodontitis was 69.4% according to the conventional PCR results, but was 87.8% according to real-time PCR. In the control group, three samples were detected as positive, but none of these were confirmed in qualitative analyses. The prevalence of class Thermoplasmata was 18.4% by nested PCR and 24.5% by quantitative PCR in the chronic periodontitis group. The prevalence of Thermoplasmata was significantly lower than that of total Archaea. The relative abundances of Archaea and Thermoplasmata varied among samples. Thermoplasmata were not the predominant archaeons in the subgingival dental plaque. Among the clinical parameters of patients with periodontitis, probing depth was positively associated with Archaea detection.ConclusionsThe existence of Archaea was correlated closely with the presence of chronic periodontitis. Thermoplasmata represented a minor archaeon in periodontal infection.     

牙龈卟啉单胞菌在龈下菌斑中的分布

研究牙龈卟啉单胞菌在牙周炎患者病变部位和健康部位龈下菌班中的分布情况,方法：选择６４例成年牙周炎患者,取龈下菌斑,经厌氧培养,挑战产黑色素菌落,经多聚酶链反应鉴定牙龈卟啉单胞菌。结果：产黑色素Ｇ＾－厌氧杆菌和牙龈卟啉单胞菌的患者检出率分别是６７．２％和６０．９％。牙龈卟啉单胞菌在病变部位和健康部位的检出率分别是３５．９％和２８．１％,二者差异无统计学意义;牙龈卟啉单胞菌在病变部位和健康部位的检出株     

不同牙周状况龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌和福赛斯坦纳菌的分布

目的 分析中国牙周健康者和慢性牙周炎患者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌和福赛斯坦纳菌的分布情况,探讨两种细菌在中国慢性牙周炎患者中的分布及其致病机理.方法 收集65例牙周健康者、62例慢性牙周炎患者的龈下菌斑,采用16S rRNA PCR方法检测牙龈卟啉单胞菌和福赛斯坦纳菌的分布.结果 牙周健康者牙龈卟啉单胞菌和福赛斯坦纳菌的检出率分别是21.6%、12.3%,慢性牙周炎患者病变位点两菌检出率分别为74.2%、58.1%,牙周炎健康位点两菌的检出率分别是22.6%、4.8%.牙周炎病变位点两种细菌的检出率均明显高于牙周健康者和牙周炎健康位点(P＜0.001);福赛斯坦纳菌在牙周健康者中的检出率高于牙周炎健康位点(P＜0.05);牙周健康者和牙周炎健康位点牙龈卟啉单胞菌的检出率没有差异.慢性牙周炎患者两菌联合检出率为51.6%.结论 牙龈卟啉单胞菌、福赛斯坦纳菌以及两种细菌联合感染与牙周炎密切相关.     

牙周炎患者健康部位与病变部位龈下菌群细菌学研究

本研究着重比较牙周炎患者病变部位与健康部位龈下菌群的细菌组成差异,寻找优势菌及其相互关系.结果显示血链球菌是健康部位主要优势菌,血链球菌与产黑色素G~-厌氧杆菌部位百分比呈负相关,牙周可疑致病菌之间呈正相关关系.比较同一患者病变部位与健康部位龈下菌群变化,对研究牙周微生态环境有指导意义.     

Characterization and serotype distribution of Aggregatibacter actinomycetemcomitans isolated from a population of periodontitis patients in Spain

ObjectiveThere is no study characterizing the variability of Aggregatibacter actinomycetemcomitans isolates in periodontitis patients in Spain. It is therefore the aim of this investigation to study the serotype distribution of A. actinomycetemcomitans strains isolated from periodontitis patients in Spain. The polymorphism of the genes that codifies the leukotoxin and the operon of the cytolethal-distending toxin (cdt) will also be investigated.DesignFrom a total of 701 patients samples, 40 A. actinomycetemcomitans-positive periodontitis patients were included in the study (mean age 45.3, 62.5% females) and their clinical periodontal status was assessed. On average, 1–3 isolates from each patient were sub-cultured and characterized by PCR.ResultsUsing culture the prevalence of A. actinomycetemcomitans was 5.7%. The most frequent serotype was “b”, being 30 patients infected by a unique serotype, while 7 patients showed co-colonization, mostly with serotypes “a” and “b”. From the 79 pure isolates obtained, 24 were from serotype “a”, 30 from serotype “b”, 12 from serotype “c” and 4 from serotype “d”. Further characterization of these samples showed that none of these 79 isolates demonstrated the 530-bp deletion in the leukotoxin's promoter region that characterizes the JP2 strain. Conversely 65.8% of the isolates were cdt+.ConclusionsThe most common serotypes were “a” and “b”, being serotype “b” the most prevalent in mono-colonization, while serotypes “e” and “f” were not detected. In the majority of samples, operon that codifies the cdt (65.8%) and the genes responsible for the codification of leukotoxin (100%) were found. None of the isolates were JP2 strains.