黑皮素受体-1在自体中厚移植皮片中的表达

目的检测MC-1R在自体移植皮片中的表达,并与自身正常皮肤作对照,初步认识MC-1R在自体移植皮片过度色素沉着中的作用.方法利用免疫组织化学方法检测自体中厚移植皮片与供区及受区周围自体正常对照皮肤中MC-1R的表达,并行统计学分析.结果 MC-1R的表达定位于表皮基底部黑素细胞、角朊细胞的胞浆及胞膜,在大部分自体中厚移植皮片中呈强阳性表达,其强阳性表达率为67.7%,与在自体正常对照皮肤中的表达差异有显著意义(P＜0.01);MC-1R在受区周围与供区正常对照皮肤中的表达差异无显著意义(P＞0.01).结论 MC-1R在自体中厚移植皮片中的表达较在自体正常对照皮肤中显著增高,在自体移植皮片过度色素沉着中起重要调控作用.     

I型IP_3受体在自体中厚移植皮片中的表达

目的：检测I型1,4,5--三磷酸肌醇受体（type I inositol 1,4,5-t riphosphate receptor,IP3R1）在人自体中厚移植皮片中的表达,初步认识由IP3受体介导的钙信号转导在自体中厚移植皮片过度色素沉着发生机制中的作用。方法：利用免疫组化SP方法,检测IP3R1在自体移植中厚皮片、受区周围与供区正常皮肤中的表达并进行统计学分析。结果：IP3R1的表达定位于表皮基底部黑素细胞、角质形成细胞胞浆,在大部分自体中厚移植皮片中呈强阳性表达,与自体正常对照皮肤中的表达差异有显著性意义（P〈0.05）;IP3R1在受区周围和供区正常对照皮肤中的表达差异无显著性意义。结论：IP3R1在自体中厚移植皮片中的表达比自体正常对照皮肤中显著提高,推测由IP3R1介导的胞内钙库钙离子释放参与了钙信号转导在自体移植皮片过度色素沉着中的调控作用。     

α-黑素细胞刺激素在自体中厚移植皮片中的表达

目的检测α黑素细胞刺激素(αmelanocytestimulatinghormone,αMSH)在人体自体中厚移植皮片中的表达,并与自身正常皮肤作对照,初步认识αMSH在自体移植皮片过度色素沉着中的作用。方法利用免疫组织化学方法,检测人体自体中厚移植皮片与原供区及受区周围自体正常对照皮肤中αMSH的蛋白表达,并行统计学分析。结果αMSH的表达定位于表皮基底部黑素细胞、角朊细胞胞浆,在大部分自体中厚移植皮片中呈强阳性表达,表达率为611%,与自体正常对照皮肤中的表达差异有非常显著性意义(P<001);αMSH在受区与原供区周围正常对照皮肤中的表达差异无显著性意义。结论αMSH在自体中厚移植皮片中的表达较在自体正常对照皮肤中显著增高,在自体移植皮片过度色素沉着中起重要调控作用。     

α-黑素细胞刺激素在自体移植皮片中的mRNA表达及意义

目的初步探索α-黑素细胞刺激素(α-melanocyte-stimulatinghormone,α-MSH)在自体移植皮片过度色素沉着中的作用。方法标本取自颈部自体中厚移植皮片术后1年,局部需再次矫正的18例患者。在切取颈部自体中厚移植皮片同时于每例移植皮片受区及原供区腹部周围分别切取正常皮肤作对照,切取范围1.0cm×0.5cm。分别利用RT-PCR、银染-丽春红染色法计算自体中厚移植皮片、原供区及受区周围自体正常对照皮肤中α-MSHmRNA电泳条带及表皮的灰度值,测定各组中α-MSHmRNA的半定量表达及黑色素的含量。结果α-MSH在自体中厚移植皮片中的mRNA表达明显高于自体正常对照皮肤,差异有统计学意义(P<0.01);自体中厚移植皮片表皮中黑色素含量较自体正常对照皮肤表皮中的黑色素含量明显增多,差异亦有统计学意义(P<0.01);且表皮中黑色素的含量与α-MSH的mRNA表达量呈正相关。结论α-MSH在自体中厚移植皮片中的表达较在自体正常对照皮肤中显著增高,致皮片中黑色素含量升高,在自体移植皮片过度色素沉着中起重要调控作用。     

干细胞生长因子在自体移植中厚皮片中的表达

目的检测干细胞因子（Stem cell factor，SCF）在人自体移植中厚皮片中的表达，初步认识干细胞因子在自体移植皮片色素沉着发生机制中的作用。方法取面颈部自体中厚皮片移植术后1年左右的色素沉着皮片，以自身正常皮肤作为对照，组成配对资料（n=16），利用S—P免疫组化方法，检测SCF在受区移植皮片、受区周围与供区周围正常皮肤的表达与分布，使用MIQAS医学图像定量分析系统，定量检测各组标本中SCF阳性表达面积（PA）、阳性表达强度（OD），计算出阳性表达指数（PI，PI=PA×OD），并就PI值行统计学分析。结果SCF表达定位于表皮基底层的黑素细胞与角朊细胞的胞浆及胞膜表面。SCF在受区移植皮片、受区周围及原供区周围正常皮肤中的PI值分别为158830±53753、86839±21381、85033±16972。SCF在受区移植皮片组的表达与两正常对照组相比具有显著性差异（p〈0．01）；SCF在受区周围正常对照皮肤与原供区周围正常皮肤中的表达无差异。结论SCF在自体中厚移植皮片中的表达较在自体正常对照皮肤中显著增高，推测SCF在自体移植皮片色素过度沉着中可能起重要调控作用。     

自体移植皮片中黑皮素-1受体mRNA的表达及意义

目的：探讨黑皮素-1受体在自体移植皮片过度色素沉着中的作用.方法：利用RT-PCR、Ma sson-Fontana stain方法检测人体自体中厚移植皮片与原供区及受区周围自体正常对照皮肤中黑皮素-1受体mRNA的表达及表皮中黑色素的含量,并行统计学分析.结果：黑皮素-1受体在自体中厚移植皮片中的mRNA表达明显高于自身正常对照皮肤,其表达差异有显著性意义（P＜0.01）;自体中厚移植皮片表皮中黑色素含量较自身正常对照皮肤表皮中的黑色素含量亦明显增多,其含量的差异亦有显著性意义（P＜0.01）;且表皮中黑色素的含量与黑皮素-1受体的mRNA表达量呈正相关.结论：黑皮素-1受体在自体移植皮片过度色素沉着中起重要调控作用.     

钙调蛋白在自体中厚移植皮片中的表达

目的 检测钙调蛋白在人自体中厚移植皮片中的表达,初步认识钙信号转导途径在自体移植皮片过度色素沉着发生机制中的作用.方法 利用免疫组织化学方法,检测钙调蛋白在受区移植皮片、受区周围与供区周围正常皮肤中的表达并进行统计学分析.结果 钙调蛋白的表达定位于表皮基底部黑素细胞、角质形成细胞的胞浆中;在自体移植中厚皮片组中,其表达的平均光密度值为0.49±0.08,显著高于受区周围正常皮肤对照组的平均光密度值0.23±0.08和原供区周围正常皮肤组的平均光密度值0.17±0.06,并与自体正常皮肤对照组中的表达差异有显著的统计学意义(P <0.01);钙调蛋白在受区和供区周围正常皮肤对照组中的表达差异无统计学意义(P >0.05).结论 钙调蛋白在自体中厚移植皮片中的表达较在自体正常对照皮肤组中显著提高,推测钙信号转导途径在自体移植皮片色素过度沉着中起着重要的调控作用.     

自体移植皮片中黑皮素1受体表达与黑色素含量的相关性研究

目的检测黑皮素1受体(melanocortin 1 receptor,MC-1R)及黑色素在不同类型自体移植皮片中的表达,并与自身正常皮肤作对照,初步认识MC-1R在自体移植皮片过度色素沉着中的作用。方法取颈部自体皮片移植术后1年的皮片(包括全厚皮片、中厚皮片及刃厚皮片),以及原供区、受区周围皮肤作为正常对照,采用免疫组织化学方法、银染-丽春红法检测自体移植皮片与正常皮肤中MC-1R表达及黑色素含量。结果MC-1R的表达定位于表皮基底部黑色素细胞、角质形成细胞胞浆;在各类自体移植皮片中均呈阳性表达,皮片愈薄MC-1R表达愈明显;MC-1R在各类移植皮片中的表达与两类正常对照皮肤比较差异均有统计学意义(P<0.01),但两类正常对照皮肤内的表达差异无统计学意义(P>0.01)。不同类型移植皮片表皮中黑色素含量较两种正常对照皮肤均明显增加,且差异有统计学意义(P<0.01);且不同类型移植皮片表皮中黑色素含量的差异亦均有统计学意义(P<0.01),皮片愈薄,黑色素含量愈多;皮片中黑色素含量与MC-1R表达量呈正相关。结论自体移植皮片中黑色素含量与MC-1R表达量呈正相关,MC-1R在自体移植皮片中的高表达能使皮片中黑色素含量增加,在自体移植皮片过度色素沉着中起重要调控作用。     

自体移植皮片中黑素细胞的密度和功能变化

目的：通过对自体移植皮片中黑素细胞密度和功能变化的测定,进一步认识黑素细胞密度变化在自体移植皮片过度色素沉着中的作用。方法：利用免疫组织化学方法测定自体中厚移植皮片黑素细胞中特异性抗原显示黑素细胞,计算表皮中黑素细胞的密度,并与自体正常皮肤对照;利用银染-丽春红法检测自体中厚移植皮片和正常皮肤中黑素含量。结果：自体移植皮片与自体对照正常皮肤中黑素细胞的密度差异无显著性（P〉0.05）;自体中厚移植皮片中黑色素含量较自体正常对照皮肤中的黑色素含量明显增多,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：自体皮片移植后表皮中黑素细胞密度无明显变化,与皮片色素沉着程度无显著相关性。     

刺鼠信号蛋白对自体移植皮片中酪氨酸酶的活性影响

目的检测刺鼠信号蛋白对自体移植皮片中酪氨酸酶的活性影响,进一步认识自体移植皮片过度色素沉着的原因.方法建立过度色素沉着的自体移植皮片的动物模型;利用免疫组织化学方法分别检测刺鼠信号蛋白作用前后自体移植皮片中酪氨酸酶的表达,并与对照治疗组及正常皮肤相比较.结果酪氨酸酶的表达定位于表皮基底部黑色素细胞的胞浆,在大部分组织中呈阳性表达,经刺鼠信号蛋白作用后酪氨酸酶在自体移植皮片中的表达明显减少,与在其他各对照组中的表达差异有极显著意义(P＜0.01).结论刺鼠信号蛋白在自体移植皮片中能竞争性拮抗α-MSH的黑色素合成,使皮片着色能力降低,从而证明皮片移植后表皮细胞中α-MSH的表达上调是皮片呈过度色素沉着的重要原因.     

自体刃厚头皮片移植厚中厚皮片供区以抑制瘢痕增生

目的:探讨应用自体刃厚头皮片移植厚中厚皮片供区以抑制瘢痕增生的可行性及应用效果。方法:烧伤后全身大范围的增生性瘢痕患者24例,行功能部位的增生性瘢痕切除,应用非功能部位的大张厚中厚皮片修复,厚中厚皮片供区应用刃厚头皮片移植修复。结果:24例患者非功能部位厚中厚皮片供区经刃厚头皮片移植后,未见有明显的瘢痕增生。经随访半年至2年11例,2年以上3例,均未见有明显的瘢痕增生。头皮片供区无瘢痕形成,头发生长良好。结论:应用自体刃厚头皮片移植厚中厚皮片供区抑制瘢痕增生是一种可行的方法,值得临床推广。     

人增生性瘢痕组织内下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴成分的表达

目的 探讨增生性瘢痕组织中下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴成分的表达及意义.方法 应用实时荧光定量PCR法,检测人增生性瘢痕(12例)和正常皮肤(7例)组织中HPA轴的活性物质促肾上腺皮质素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRH-R1)、阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)、黑素皮质素受体2(MC-2R)以及糖皮质激素受体α(GR-α)的mRNA表达差异,免疫组织化学法观察CRH、CRH-R1、促肾上腺皮质激素(ACTH)、MC-2R以及GR-α的分布差异.对数据进行独立样本t检验. 结果 PCR结果显示,增生性瘢痕组织标本中CRH、CRH-R1、POMC及GR-α的mRNA表达分别为3.1±0.8、0.05±0.03、0.020±0.007、0.0000±0.0010,均低于正常皮肤组织的20.6±4.7、0.30±0.12、0.060±0.020、0.0200±0.0070,差异有统计学意义(t值为2.10-4.75,P值均小于0.05);但2种组织中MC-2R mRNA表达水平接近(t=1.48,P=0.15).免疫组织化学法检测结果显示,CRH,CRH-R1、ACTH、MC-2R以及GR-α分布于瘢痕组织的表皮基底层、真皮层的Fb和汗腺管壁中.在正常皮肤组织中阳性细胞除分布于上述部位外,还可见于毛囊和皮脂腺. 结论 增生性瘢痕形成与组织中HPA轴的活性物质表达降低有关.     

黑皮素-1受体在瘢痕疙瘩中的表达及基因沉默黑皮素-1受体对成纤维细胞增殖的影响

目的检测黑皮素-1受体(MC-1R)在瘢痕疙瘩中的表达,同时研究基因沉默黑皮素-1受体对成纤维细胞增殖的影响。方法用MTT法比较α-MSH对正常皮肤成纤维细胞(hDF)和瘢痕疙瘩成纤维细胞(hKF)增殖能力的影响;用qPCR法检测正常皮肤及瘢痕疙瘩组织中MC-1R的表达水平;用MTT法检测RNA干扰MC-1R基因后对α-MSH抑制hDF增殖能力的影响。结果α-MSH可抑制hDF的增殖,而未对hKF的增殖产生明显影响;与正常皮肤组织相比,瘢痕疙瘩组织中MC-1R的mRNA表达水平明显下降,而α-MSH的表达增加;最后,将hDF转染MC-1R siRNA后,α-MSH对其增殖能力的抑制程度显著降低。结论瘢痕疙瘩中MC-1R表达降低,导致α-MSH抑制hKF增殖的功能无法实现,促进了瘢痕疙瘩的形成。