烟酰胺对长波紫外线照射黑素细胞黑素合成的干预

目的研究烟酰胺对长波紫外线（UVA）致人皮肤黑素细胞黑素合成的干预作用。方法观察0．2J／cm^2 UVA（365nm）照射人皮肤黑素细胞后，烟酰胺在不同剂量时对人皮肤黑素细胞中黑素合成和转运的干预作用。结果0．2J／cm^2 UVA照射后，黑素细胞中黑素含量明显增加，UVA照射后的人皮肤黑素细胞给予不同剂量的烟酰胺时，黑素细胞中黑素含量明显下降，10．0mmol／ml时作用更为明显。烟酰胺在有效抑制黑素含量的同时，对黑素细胞的细胞周期、细胞凋亡及DNA指数无明显影响；0．2J／cm^2 UVA照射后立即给予烟酰胺时，烟酰胺可以调节黑素细胞中mRNA的表达水平。结论烟酰胺能够拮抗UVA的致黑作用；10．0mmol／ml烟酰胺在干预UVA所致的黑素细胞致黑作用的同时，对黑素细胞的作用浓度是安全的；烟酰胺参与其中黑素的转运；鉴于烟酰胺拮抗UVA致黑作用的有效结果，烟酰胺有望用于防护UVA照射所引起的晒黑作用。     

长波紫外线照射对小鼠黑素瘤细胞的影响

[目的]研究不同剂量UVA照射对体外培养B_16小鼠黑素瘤细胞的形态、增殖率、黑素含量和酪氨酸酶活性的影响。[方法]选用B_16小鼠黑素瘤细胞 ,经不同剂量的UVA照射后 ,采用MTT法测定细胞的增殖 ,参照HideyaAndo等的方法测定酪氨酸酶活性和黑素含量。[结果]UVA照射后 ,黑素含量增加 (P<0.01) ,酪氨酸酶活性提高 (P<0.05) ,细胞增殖率上升 ,照射剂量在0.6、1.2、1.8J/cm2时 ,细胞增殖率的变化有显著性 (t=2.495、2.645、3.081,均为P<0.05)。[结论]随着照射剂量的增加 ,黑素含量增加 ,酪氨酸酶活性提高 ,细胞的增殖率增加 ,但UVA的促黑素瘤细胞增殖作用是有限的     

红景天多糖对长波紫外线致大鼠氧化损伤的保护作用

[目的]探讨红景天多糖对长波紫外线（ultravioletA,UVA）辐照大鼠损伤的防护效果。[方法]用红景天多糖干预UVA辐射大鼠,检测各组血清、肝脏匀浆中超氧化物歧化物（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）,丙二醛（malondialdehyde,MDA）及羟自由基,观察红景天多糖的防护效果。[结果]981．71J／em2UVA辐射组血清中SOD、GSH、抑制羟自由基能力明显低于正常对照组（P〈0．05）,MDA含量明显高于正常对照组（P〈0．05）。经高剂量红景天多糖干预的UVA辐射组血清中GSH和抑制羟自由基能力明显高于UVA辐射组（P〈0．05）,MDA含量明显低于UVA辐射组（P〈0．05）;低剂量组MDA含量明显低于UVA辐射组（P〈0．05）,抑制羟自由基能力明显高于UVA辐射组（P〈0．05）。肝组织匀浆中,UVA辐射组SOD活性、抑制羟自由基能力明显低于正常对照组（P〈0．05）;高剂量组SOD活性、抑制羟自由基能力明显高于UVA辐射组（P〈0．05）,MDA含量明显低于UVA辐射组（P〈0．05o[结论]红景天多糖对UVA辐照所导致的氧化损伤有一定的修复能力,具体机制尚有待进一步研究。     

太阳光及紫外线照射诱发M13mp2噬菌体DNA产生8-OHdG的作用

[目的 ]分析太阳光及长波紫外线 (UVA)、中波紫外线 (UVB)诱发Ml3mp2噬菌体DNA产生 8 羟基脱氧鸟苷(8 OHdG)的作用。 [方法 ]用太阳光、UVA和UVB照射处理M13mp2噬菌体样品 ,以HPLC EC检测DNA样品中的 8 OHdG。 [结果 ] 1、3、5h太阳光照射和 2 8、10 8、2 5 0、5 0 0kJ/m2 剂量UVA照射后的样品均可检测到 8 OHdG含量增加 ,并存在与照射剂量的依存关系。较高剂量 (2 6kJ/m2 )UVB照射也可引起 8 OHdG的产生。 [结论 ]太阳光照射致M13mp2噬菌体突变作用中 ,存在DNA的氧化损伤 ,主要是UVA的作用。     

紫外线对人角朊细胞的氧化损伤及防护研究

目的 探讨紫外线A（UVA）对原代培养人皮肤角朊细胞的氧化损伤及防晒化妆品的防护效果。方法 利用原代培养人皮肤角朊细胞,采用不同剂量的UVA照射,测定细胞上清液丙二醛,细胞内过氧化氢酶和超氧化物歧化酶,并对防晒化妆品的防护作用进行评价。结果 UVA照射剂量从2．88J／cm^2到11．52J／cm^2,MDA含量由2．54μmol/L增加到6．75μmol/L,CAT含量由15．75U／mg(prot)减少至6．33U／mg(prot),SOD含量由25．55NU／mg(prot)降至23．81NU／mg(prot)。涂抹广 谱防晒化妆品后照射同样剂量的UVA,MDA由2．18μmol/L增至4．82μmol/L,CAT由17．19U／mg(prot)减少至10．35U／mg(prot),SOD由26．52NU／mg(prot)降至24．51NU／mg(prot)。结论 UVA对人皮肤角朊细胞具有明显的氧化损伤作用,本实验条件下的广谱防晒化妆品对细胞具有一定的防护功能。     

光毒性试验方法研究

目的：探讨采用单纯紫外线A（UVA）为照射光源的光毒性试验的影响因素及试验条件。方法：观察了照射强度随照射时间的变化及照射时间对照射野内温度的影响。选择健康成年白化豚鼠，以10J／cm^2剂量UVA照射50min观察阳性对照8－甲氧基补骨旨（8－MOP）的皮肤光毒性。结果：照射开始后100min内光强度稳定在3．3－3．4mW/cm^2,室温18℃时照射100min后照射野内温度上升1．5℃，8－MOP具有明显皮肤光毒性。结论：该方法可准确测定化学物质的光毒性，具有良好的科学性和可行性。     

烟酰胺对长波紫外线致人皮肤黑素细胞增殖的干预作用

目的研究烟酰胺对长波紫外线(UVA)致人皮肤黑素细胞增殖的干预作用。方法观察UVA(365nm)0.2cm2照射人皮肤黑素细胞后立即和照射后48h给予不同剂量烟酰胺后的细胞增殖率、细胞内钙离子浓度和Na+-K+、Ca2+-ATP酶活力。结果UVA照射黑素细胞后给予1.000mg/ml烟酰胺,24h即出现抑制黑素细胞增殖的作用,至48h时作用更为明显,自0.125mg/ml组就出现明显的抑制作用;烟酰胺1.25mg/ml可使黑素细胞内钙离子浓度增高;0.250mg/ml可使黑素细胞内Na+-K+、Ca2+-ATP酶活力增高,差异有统计学意义(P<0.05)。经UVA照射后立即给予不同浓度烟酰胺时,细胞内钙离子浓度和Na+-K+、Ca2+-ATP酶活力差异均无统计学意义(P>0.05)。结论UVA照射黑素细胞后即给予烟酰胺对经UVA照射后的保护作用较照射后经过一段时间再给予的作用效果明显。通过影响Ca2+及细胞内钙泵的活性很可能是烟酰胺干预黑素细胞增殖的途径之一。     

紫外线诱导HaCaT细胞IL10 mRNA及蛋白表达

目的探讨紫外线致机体免疫抑制的作用机制。方法体外培养人角质形成细胞系（HaCaT）,以0.6,1.2,1.8,2.4,3.0,3.6 J/cm^2长波紫外线（UVA）照射,采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测细胞活力。以2.4 J/cm^2UVA照射HaCaT细胞,于0,2,4,12,24,48 h收集细胞及培养掖,分别采用RT-PCR和双抗夹心ELISA方法,检测白细胞介素10（IL10）mRNA及其蛋白表达。结果3.0,3.6 J/cm^2UVA照射使体外培养的HaCaT细胞活力明显降低（P〈0.05）;0.6～2.4 J/cm^2UVA照射对细胞活力无明显影响（P〉0.05）。HaCaT细胞经2.4J/cm^2UVA照射后12h,IL19 mRNA呈弱表达;照射后24h,培养液中IL10蛋白水平为（17.45±0.65）pg/ml;照射组其他各检测时点及对照组细胞未见IL10 mRNA及蛋白表达。结论正常情况下HaCaT细胞并不表达IL10,UVA照射可诱导其表达。     

老年2型糖尿病合并骨质疏松症患者发病韵相关因素分析

目的探讨老年2型糖尿病合并骨质疏松症患者发病的相关危险因素。方法对本院106例老年2型糖尿病合并骨质疏松症患者的年龄、体重指数（BMI）、糖尿病病程与其骨密度（BMD）进行相关因素分析。结果老年2型糖尿病合并骨质疏松症患者中,80岁组的腰椎[（0．756±0．099）g／cm^2]、股骨颈[（0．658±0．111）g／cm^2]及Wards三角[（0．525±0．064）g／cm^2]BMD值较60岁组[（0．883±0．112）g／cm^2、（0．781±0．130）g／cm^2、（0．6274±0．118）g／cm^2]明显下降（P〈0．05）。低体重组（BMI≤20kg／m^2）的腰椎[（0．738±O．114）g／cm^2）]、股骨颈[（0．664±O．112）g／cm^2）]BMD值较正常体重组[（0．816±0．138）g／cm^2、（0．727±0．134）g／cm^2]明显下降（P〈0．05）。糖尿病病程〉10年组的腰椎[（0．743±O．122）g／cm^2]、股骨颈[（0．719±0．147）g／cm^2]BMD值较病程〈5年组[（0．886±0．132）g／cm^2、（0．792±0．122）g／cm^2]明显下降（P〈0．05）。骨密度与年龄、糖尿病病程呈负相关（P〈0．05）,与体重指数呈正相关（P〈0．05）。结论老年2型糖尿病合并骨质疏松症患者发病与高龄、低体重指数、糖尿病病程长的危险因素密切相关。     

4种皮肤美白剂对小鼠黑素瘤细胞的功效评价

[目的]探讨4种常用皮肤美白剂的美白效果。[方法]选用B-16小鼠黑素瘤细胞,分别加入熊果苷、曲酸衍生物、BL-99和氢醌酯等4种常用皮肤美白剂3d后,用台盼蓝排斥法计数活细胞数,参照HideyaAndo等的方法测定酪氨酸酶活性和黑素含量。[结果]4种美白剂均可明显抑制B-16小鼠黑素瘤细胞生长和黑素合成,改变细胞形态。氢醌酯对细胞生长数量的控制作用最大,熊果苷最弱。熊果苷对酪氨酸酶活性具有抑制作用;氢醌酯虽可导致B-16细胞的酪氨酸酶活性呈下降趋势,但与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);曲酸衍生物和BL-99均可致B-16细胞中酪氨酸酶活性呈波动性变化。[结论]4种皮肤美白剂均可抑制黑素细胞的生长和黑素合成,具有一定的美白效果,其机制可能不仅仅与酪氨酸酶活性有关。     

长波紫外线对人皮肤成纤维细胞生长的影响

[目的 ]　观察长波紫外线 (UVA)对人皮肤成纤维细胞生长的影响 ,探讨皮肤光老化机制。　 [方法 ]　将原代培养的人皮肤成纤维细胞经UVA照射后 ,采用细胞成像、四唑盐比色实验 (MTT)、乳酸脱氢酶 (LDH)检测UVA对皮肤细胞的损伤。　 [结果 ]　随UVA照射剂量增加 ,成纤维细胞由正常细长梭状逐渐变圆、皱缩 ;UVA照射剂量为 9J/cm2 时 ,LDH从 ( 5 6.82± 4.78)U /dl上升至 ( 12 0 .40± 7.16U ) /dl;UVA照射剂量为 45J/cm2 时 ,成纤维细胞抑制率达到67.12 %。　 [结论 ]　UVA可损伤原代培养的人皮肤成纤维细胞     

构树总黄酮对长波紫外线引起人角质形成细胞损伤的防护作用

目的研究长波紫外线(UVA)照射对人角质形成细胞的氧化损伤以及构树总黄酮(totalflavonoids of broussonetia papyrifera,TFBP)的防护效果。方法在人角质形成细胞培养的基础上,实验组在照射前加入不同剂量的TFBP,然后和处理组一起接受UVA照射,通过噻唑蓝(MTT)染色法检测细胞活性、裂解液中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,对构树叶提取物的抗氧化效果进行评价。结果随着UVA剂量的增高(0.46~2.76J/cm2),细胞的活性逐渐降低(96.3%~37.5%),添加TFBP10~200mg/L后,细胞活性升高,MDA含量由(5.14±0.58)nmol/mg pro降低到(2.98±0.14)nmol/mg pro,SOD活力由(23.09±3.91)U/mg pro增加到(34.50±1.59)U/mg pro,GSH-Px活力也有所升高。结论本试验条件下,UVA对人角质形成细胞有明显的氧化损伤,TFBP对这种氧化损伤有防护作用。     

长波紫外线对大鼠皮肤脂质过氧化和胶原的影响及防晒剂的防护

[目的 ]　探讨长波紫外线 (UVA )对大鼠皮肤脂质过氧化和胶原合成的影响及防晒化妆品的防护效果。　[方法 ]　UVA照射组和涂抹防晒化妆品组大鼠经UVA照射 8周后 (总计量为 30 6 1.8J/cm2 ) ,测定皮肤丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、总胶原和可溶性胶原的含量。　 [结果 ]　UVA照射组大鼠皮肤MDA(11.36± 1.92nmol/mL)高于对照组 (7.0 3± 1.11nmol/mL) (P <0 .0 1) ,高于防晒化妆品组 (8.0 5± 1.2 8nmol/mL) (P <0 .0 1)。UVA照射组总胶原(2 5 .98± 3.0 6mg/g)低于对照组 (31.36± 3.99mg/ g) (P <0 .0 5 ) ,与防晒化妆品组 (2 8.71± 3.72mg/ g)差异无显著性 (P>0 .0 5 )。UVA照射组可溶性胶原 (4.2 5± 0 .83mg/ g)低于对照组 (6 .33± 1.19mg/g) (P <0 .0 1) ,低于防晒化妆品组(5 .70± 1.14mg/g) (P <0 .0 5 )。对照组、UVA照射组和防晒化妆品组的SOD分别为 18.6 9± 2 .82 U/mL、16 .40± 2 .14U /mL、17.86± 2 .95U/mL ,三者差异没有显著性 (P >0 .0 5 )。　 [结论 ]　UVA能使皮肤脂质发生过氧化和降低皮肤可溶性胶原的含量 ,防晒化妆品有一定的防护效果。     

腺相关病毒载体介导的人类HIF-1α基因对海马神经细胞凋亡的影响

目的构建人类缺氧诱导因子-1α(human hypoxia inducible factor,HIF-1α)的腺病毒相关载体(rAAV-HIF-1α),并观察其对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导原代培养海马神经细胞凋亡及细胞内游离钙离子浓度的影响。方法构建含人类HIF-1α基因的AVV载体rAAV-HIF-1α转染BHK21细胞并选择培养获得的G418抗性细胞,即AVV载体细胞株。以重组单纯疱疹病毒感染此细胞株获得rAAV-HIF-1α,PCR技术鉴定病毒,地高辛标记的CMV探针点杂交方法测定重组病毒滴度电泳测定病毒纯度,SDS-PAGE电泳测定病毒纯度,Aβ25-35旅导原代培养海马神经细胞凋亡。Western印迹检测目的蛋白的表达。流式细胞术分析细胞凋亡百分率,激光共聚焦显微镜测定细胞内游离钙离子浓度。结果 PCR证实rAAV-HIF-1α内含有人HIF-1α基因序列,病毒滴度为1×1012/ml,纯度大于98%,感染原代培养海马神经细胞后能够表达目的蛋白,同时可显著降低Aβ25-35诱导海马神经细胞凋亡百分率及细胞内游离子浓度上调(P0.05)。结论缺氧诱导因子-1α基因转染可能通过抑制细胞内游离钙离子浓度上调使海马神经细胞对Aβ25-35产生抗凋亡作用。     

Inhibitory effects of progestogens on the estrogen stimulation of melanocytes in vitro

Background

The use of oral estrogen-progestogen contraceptives may cause melasma, an epidermal hyperpigmentation in sun-exposed areas of the face. It is assumed that elevated estrogen levels lead to the activation of melanocytes, while the role of the gestagen component of contraceptives in pigmentation remains unclear and may vary between the different progestogens. In this study, we analyzed the distinct effects of progesterone and chlormadinone acetate (CMA) on melanocytes in comparison with estrogen.

Study Design

Human melanocytes were exposed to different concentrations of 17β-estradiol and progestogens and analyzed for proliferation by a fluorometric cell viability assay and for pigmentation by a ³H-labeled tyrosine assay. Subgroups of cells were additionally irradiated with UVA or UVB.

Results

Proliferation of melanocytes was induced by 17β-estradiol (0.1 and 1 nM) in approximately half of the experiments, while progesterone (100 nM) and CMA (100 nM) reduced the proliferation rate by 38% and 27%, respectively. The pigmentation activity was slightly stimulated by 17β-estradiol, whereas progestogens had no effect on the tyrosinase activity.

Conclusions

Our data suggest that progesterone and CMA can inhibit proliferation of human melanocytes, which counteracts the stimulatory effects of estrogen. This may be of relevance for the choice of progestogen in oral contraceptives to prevent the development of melasma.     

食品中汞的热分解齐化原子吸收测定法

目的使用直接测汞仪,建立测定食品中汞含量的新方法。方法采用热分解齐化原子吸收法,直接测定食品中汞的含量。结果回归方程为A=0.043 0 Hg+0.0160相关系数为R=0.999 5,线性范围为0.00～10.00 ng,精密度为0.62%～17.2%,回收率为85.8%～105.8%,检出限为0.03 ngHg。结论该方法操作简便快速,各项指标均可满足食品中汞的测定要求。