胆囊良恶性病变组织中CD63和MAGE-1表达及临床病理意义

目的 研究胆囊良恶性病变组织中CD63和黑色素瘤抗原-1(melanoma antigen-1,MAGE-1)表达水平并探讨其临床病理意义.方法 108例胆囊腺癌、46例癌旁组织、15例腺瘤性息肉和35例慢性胆囊炎组织常规制作石蜡包埋切片,CD63和MAGE-1染色方法为EnVisionTM免疫组化法.结果 胆囊腺癌CD63表达阳性率明显地低于癌旁组织(X2=15.77,P<0.01)、腺瘤性息肉(x=10.81,P<0.01)和慢性胆囊炎(X2=26.47,P<0.01);胆囊腺癌MAGE-1表达阳性率明显地高于癌旁组织(X2=31.27,P<0.01)、腺瘤性息肉(X2=13.57,P<0.01)和慢性胆囊炎(X2=35.47,P<0.01);腺瘤癌变、肿块最大径<2 cm、无淋巴结转移和未侵犯周围组织器官病例CD63表达阳性率明显高于中或低分化腺癌、肿块最大径≥2 cm、淋巴结转移及侵犯周围组织器官病例(P<0.05或P<0.01),但MAGE-1表达则相反(P<0.01).结论 CD63和MEGE-1表达水平与胆囊腺癌发生、进展、转移、侵袭能力及预后有密切关系.     

胃良恶性病变组织中TAG72和GRP94表达及其临床病理意义

目的研究胃良恶性病变组织中肿瘤相关糖蛋白72(TAG72)和葡萄糖调节蛋白94(GRP94)表达水平及其临床病理意义。方法将49例胃癌,20例癌旁组织,36例淋巴结转移灶及80例不同类型胃良性病变患者手术切除标本或胃镜活检标本行常规石蜡切片,采用免疫组化法检测TAG72和GRP94的表达。结果胃癌组织TAG72和GRP94表达阳性率高于癌旁组织及各类型胃良性病变(P<0.05或P<0.01);TAG72和/或GRP94阳性表达的癌旁组织及胃良性病变黏膜上皮均呈轻至重度不典型增生;胃癌原发灶与相应淋巴结转移灶之间TAG72和GRP94表达阳性率均无统计学差异(均P>0.05);浸润深度T1+T2者、无区域淋巴结转移及无远处器官转移者TAG72和GRP94表达阳性率均明显低于浸润深度T3+T4者、区域淋巴结转移及远处器官转移者(P<0.05或P<0.01);组织学分级II级及N1站淋巴结转移者TAG72和GRP94表达阳性率低于组织学III+IV级及N2+N3站淋巴结转移者,但差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 TAG72和GRP94表达水平对胃癌发生、进展和临床生物学行为方面可能有促进作用,TAG72和...     

胆囊良恶性病变中胆囊星形细胞标记物及其调控因子的表达研究

目的 探讨胆囊腺癌、癌旁组织和慢性胆囊炎组织中GSCs和其调控因子TGF β1mRNA和CTGFmRNA表达水平及其临床病理意义。方法 108例胆囊腺癌、46例癌旁组织和35例慢性胆囊炎手术切除标本常规石蜡包埋切片，GSCs染色方法为平滑肌肌动蛋白（α SMA）单抗EnVisiomTM免疫组化法，TGF β1mRNA和CTGFmRNA染色方法为原位杂交法。结果 胆囊腺癌α SMA，TGF β1mRNA，CTGFmRNA表达阳性率及其评分明显高于癌旁组织和慢性胆囊炎（P<0.05或P<0.01）；但腺瘤癌变、肿块最大径<2cm、无淋巴结转移和未侵犯周围组织者的α SMA，TGF β1mRNA，CTGFmRNA表达阳性率及其评分明显高于低分化腺癌、肿块最大径≥2cm、淋巴结转移和侵犯周围组织器官者（P<0.05或P<0.01）；胆囊腺癌中α SMA，TGF β1mRNA，CTGFmRNA表达评分之间均呈高度密切正相关（α SMA vs TGF β1mRNA, r=0.82; α SMA vs CTGFmRNA r=0.75; TGF β1mRNA vs CTGFmRNA, r=0.78）结论 α SMA，TGF β1mRNA，CTGFmRNA均为反映胆囊腺癌进展、生物学行为及预后的重要生物学标记物，TGF β1和CTGF在活化GSCs方面可能具有重要调控作用。     

胆囊良恶性病变组织中IGF-1及其IGF-1R表达的研究

目的:研究胆囊腺癌、癌旁组织、腺瘤性息肉和慢性胆囊炎组织中IGF-1和IGF-1R的表达水平及其临床病理意义。方法:取108例胆囊腺癌、46例癌旁组织、15例腺瘤性息肉和35例慢性胆囊炎手术切除标本,常规制作石蜡包埋切片，IGF-1和IGF-1R染色方法均为EnVisionTM免疫组化法。结果: 胆囊腺癌IGF-1和IGF-1R表达阳性率分别为53.7%和51.9%,明显高于癌旁组织的23.9%和26.1%,腺瘤性息肉的13.3%和13.3%和慢性胆囊炎的5.7%和5.7%，均有高度显著性差异（均P<0.01）。高分化腺癌,肿块最大径<2 cm,无淋巴结转移及未侵犯周围组织者IGF-1和IGF-1R表达阳性率明显低于低分化腺癌,肿块最大径≥2 cm,淋巴结转移及侵犯周围组织者（P<0.05或P<0.01）。胆囊腺癌中IGF-1和IGF-1R表达呈高度一致性（χ2=65.32, P<0.01）。结论:IGF-1和IGF-1R表达水平可能是反映胆囊腺癌发生、进展、临床生物学行为及预后的重要标记物。     

胆囊良恶性病变组织中ABCG2、SFRP2、BRMS1和HPA的表达及临床病理意义

目的 研究胆囊良恶性病变组织中三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2 (ABCG2),分泌型Frizzled相关蛋白2(SFRP2),乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)和乙酰肝素酶(HPA)的表达水平及其临床病理意义。方法 将108例胆囊腺癌、46例癌旁组织、15例腺瘤性息肉和35例慢性胆囊炎手术切除标本常规制作石蜡包埋切片,ABCG2、SFRP2、BRMSl和HPA染色方法均为EnVision免疫组化法。结果 胆囊腺癌ABCG2和HPA表达阳性率明显高于癌旁组织、腺瘤性息肉和慢性胆囊炎(P＜0.05或P＜0.01);胆囊腺癌SFRP2和BRMS1表达阳性率明显低于癌旁组织、腺瘤性息肉和慢性胆囊炎（P＜0.05或P＜0.01）;ABCG2和（或）HPA表达阳性及BRMS1和（或）SFRP2表达阴性的良性病例胆囊上皮均呈中至重度不典型增生。高分化腺癌、无淋巴结转移及未侵犯周围组织器官病例,ABCG2和HPA表达阳性率明显低于低分化腺癌、淋巴结转移及侵犯周围组织器官病例(P＜0.05或P＜0.01),但SFRP2和BRMS1表达则相反（P＜0.05或P＜0.01）。经Kaplan-Meier生存分析发现,ABCG2和HPA表达阳性病例术后生存期明显低于阴性表达病例(P=0.017,P=0.016),而SFRP2和BRMS1表达阳性病例术后生存期明显高于阴性表达病例(P=0.019,P=0.008);Cox多变量回归分析显示,ABCG2和（或）HPA阳性表达以及SFRP2和（或）BRMS1阴性表达均为危险因素,是反映胆囊腺癌预后不良的重要指标。结论 ABCG2、SFRP2、BRMS1和HPA表达与胆囊腺痛发生、临床生物学行为及预后有密切关系,ABCG2和（或）HPA阳性表达者及SFRP2和（或）BRMS1阴性表达者预后不良。     

胆囊良恶性病变组织中蛋白基因产物9.5的表达及临床意义

目的研究胆囊腺癌、癌旁组织、慢性胆囊炎组织中蛋白基因产物9.5(PGP9.5)表达及其临床病理意义。方法108例胆囊腺癌、46例癌旁组织和35例慢性胆囊炎切除标本常规石蜡包埋切片,PGP9.5染色方法为EnVisionTM免疫组化法。结果胆囊腺癌PGP9.5表达阳性率(45.4%)和评分(1.94±1.84)明显高于癌旁组织(17.4%,!2=10.83,P<0.01;0.86±1.41,t=3.60,P<0.01)和慢性胆囊炎组织(11.4%,!2=13.06,P<0.01;0.58±1.29,t=4.08,P<0.01);PGP9.5阳性良性病变胆囊上皮均呈中至重度不典型增生。患者年龄≤45岁、腺瘤癌变或高分化腺癌、肿块最大径<2cm、无淋巴结转移和未侵犯周围组织病例PGP9.5表达阳性率及其评分明显低于年龄>45岁、低分化腺癌、肿块最大径≥2cm、淋巴结转移和侵犯周围组织病例(P<0.05或P<0.01)。结论PGP9.5表达可能是反映胆囊腺癌发生、进展和预后的重要生物学标志物,检测胆囊良性病例PGP9.5表达水平对于预防和早期发现胆囊癌可能有重要临床意义。     

胆囊恶性病变组织中癌干细胞标记物的表达及临床病理意义

目的 研究胆囊腺癌、癌旁组织和慢性胆囊炎组织中CD24和CD44v6表达水平及其临床病理学意义.方法 将108例胆囊腺癌、46例癌旁组织和35例慢性胆囊炎手术切除标本常规制作石蜡包埋切片,CD24和CD44v6染色方法均为EnvisionTM免疫组化法.将实验数据输入SPSS13.0统计软件包行x2检验和t检验及Fisher's精确概率法.结果 胆囊腺癌CD24和CD44v6表达阳性率(52.8%,55.6%)及其评分(2.43±1.65,2.52±1.61)明显高于癌旁黏膜组织(CD24:17.4%,x2=16.56,P＜0.01;0.78±0.82,t=5.89,P＜0.01.CD44v6:19.6%,X2=16.90,P＜0.01;0.82 ±1.39,t=6.07,P＜0.01)和慢性胆囊炎(CD24:11.4%,x2=18.48,P＜0.01,0.54±1.44;t=6.10,P＜0.01.CD44v6:17.1%,x2=15.69,P＜0.01;0.58±1.46,t=6.26,P＜0.01).腺瘤癌变或高分化腺癌、肿块最大径＜2 cm、无淋巴结转移和未侵犯周围组织病例CD24和CD44v6表达阳性率及其评分明显低于低分化腺癌、肿块最大径≥2 cm、淋巴结转移和侵犯周围组织病例(P＜0.05或P＜0.01);胆囊腺癌中CD24与CD44v6表达具有高度一致性(x2=48.21,P＜0.01),其评分值之间呈高度密切正相关(r=0.48,P＜0.01).结论 CD24和CD44v6是反映胆囊腺癌发生、进展及生物学行为的重要的癌干细胞标记物,阳性或高水平表达者临床预后不良.     

胆囊良恶性疾病中p53和k-ras的表达和意义分析

目的 研究p53和k-ras蛋白在胆囊良性病变和胆囊癌组织中的表达及其差异,探讨其阳性表达的临床意义.方法 收集并应用免疫组织化学ABC法检测经手术治疗、病理证实的患者标本,按病种不同分为4组:A组:101例胆囊结石、慢性胆囊炎;B组:20例胆固醇息肉;C组:22例胆囊腺瘤;D组:25例胆囊癌(含5例重度非典型增生及原位癌);对4组的p53和k-ras蛋白的表达进行比较和分析.结果 各组标本中均存在p53和k-ras蛋白阳性表达者,其中D组阳性率明显高于A组、B组和C组(p53在A组和B组的阳性率为62.8%,而D组则为92.0%,x2=8.16,P=0.004;k-ras在A组和B组的阳性率为66.4%,而D组则为92%,x2=6.65,P=0.01);C组p53的阳性率明显高于A组和B组(X2分别为6.90和6.02,P值分别为0.009和0.014).胆囊结石病史大于10年者p53阳性表达较多(80.0%),病史少于10年者的较低(52.9%),两者相比.差异具有统计学意义(x2=8.28,P=0.004);年龄小于60岁者k-ras的表达较大于60岁者高(70.4%和46.8%,x2=5.79,P=0.016).结论 胆囊良性病变的黏膜组织中亦存在p53和k-ras的异常表达,p53和k-ras改变在胆囊癌的发生上可能起协同性作用;胆囊结石、慢性胆囊炎患者的病史长短与p53的变异呈正相关,而k-ras的变异与年龄因素呈负相关.     

胆囊良、恶性病变组织中泛素和cul-1的表达及其意义

目的探讨胆囊良恶性病变组织中泛素和cul-1(cullin-1)的表达水平及其临床病理意义。方法将108例胆囊腺癌,46例癌旁组织,15例腺瘤性息肉和35例慢性胆囊炎手术切除标本常规制作石蜡包埋切片;泛素和cul-1染色方法采用EnVsionTM免疫组化法。结果胆囊腺癌泛素和cul-1表达阳性率分别为51.9%和48.1%,明显高于癌旁组织的21.7%和15.2%,腺瘤性息肉的13.3%和6.7%,以及慢性胆囊炎胆囊上皮的2.9%和0.0%(均P0.01)。泛素和cul-1阳性的胆囊良性病变胆囊上皮均呈不典型增生;高分化腺癌和无淋巴结转移病例泛素表达阳性率明显低于中、低分化腺癌和淋巴结转移者(P0.05);高分化腺癌、肿块最大径2cm者、无淋巴结转移和未侵犯周围组织者的cul-1表达阳性率明显低于低分化腺癌、肿块最大径≥2cm者、淋巴结转移及侵犯周围组织者(P0.05或P0.01)。胆囊腺癌中泛素与cul-1表达水平存在高度一致性(P0.01)。结论泛素及cul-1表达与胆囊腺癌发生、进展、临床生物学行为和预后存在密切的关系。     

胆囊良恶性病变组织中EphA7和MTDH表达及临床意义

目的 研究胆囊良恶性病变组织中Eph基因家族A7(EphA7)和异黏蛋白(MTDH)表达水平及其临床病理意义.方法 收集1996年6月至2006年6月收治的108例胆囊腺癌、46例癌旁组织、15例腺瘤性息肉和35例慢性胆囊炎患者手术切除标本常规制作石蜡包埋切片.应用EnVision免疫组化法检测其中EphA7和MTDH水平并分析其临床意义.结果 胆囊腺癌EphA7和MTDH表达阳性率明显高于癌旁组织(χ2EphA7=12.65,χ2MTDH=13.00;P＜0.01)、腺瘤性息肉组织(χ2EphA7=8.21,χ2MTDH=9.39;P＜0.01)和慢性胆囊炎组织(χ2EphA7=21.21,χ2MTDH=23.68;P＜0.01);EphA7和(或)MTDH表达阳性的良性病例的胆囊上皮均呈中至重度不典型增生.高分化、肿块最大径＜2 cm、无淋巴结转移、未侵犯周围组织的病例EphA7和MTDH表达阳性率明显低于低分化、肿块最大径≥2 cm(χ2EphA7=5.22,χ2MTDH=5.00;P＜0.05)、淋巴结转移(χ2EphA7=5.15,χ2MTDH=5.86;P＜0.05)和侵犯周围组织(χ2EphA7=7.06,P＜0.01;χ2MTDH=4.13,P＜0.05)的病例;EphA7和MTDH在胆囊腺癌中表达水平呈高度一致性(χ2=13.11,P＜0.01).经Kaplan-Meier生存分析发现EphA7和MTDH表达阳性病例术后生存期明显低于阴性表达病例(PEphA2=0.023,PMTDH=0.034);Cox多变量回归分析显示EphA7和(或)MTDH阳性表达(PEphA2=0.023,PMTDH=0.034)是反映胆囊腺癌预后不良的一个重要指标.结论 EphA7和MTDH表达与胆囊腺癌发生、进展、临床生物学行为及预后有密切关系,EphA7和MTDH阳性表达者预后不良.

Abstract：

Objective To study the expression of ephrin-A7(EphA7)and metadherin(MTDH)and their clinicopathological significances in the benign and malignant lesions of gallbladder. Methods EnVisiom immunohistochemical methods was used for determining the expressions of EphA7 and MTDH in routinely paraffin-embedded sections of surgically-resected specimens from 108 cases with gallbladder adenocarcinoma, 15 cases with adenomatous polyp and 35 cases with chronic cholecystitis treated from June 1996 to June 2006. And 46 cases of peritumoral tissues were also harvested as controls(n = 35). Results The positive expression rates of EphA7 and MTDH were significantly higher in gallbladder adenocarcinoma than those in peritumoral tissues(χ2EphA7 = 12. 65 ,χ2MTDH = 13.00; P ＜0. 01), adenomatous polyp(χ2EphA7 =8. 21 ,χ2MTDH = 9. 39; P ＜ 0. 01)and chronic cholecystitis(χ2EphA7 =21.21 χ2MTDH =23.68 P＜0. 01);Moderately-or severely-atypical hyperplasia of gallbladder epitheli was found in the benign lesions with positive expression of EphA7 and/or MTDH. The positive rates of EphA7 and MTDH were significanctly lower in the cases of well-differentiated adenocarcinoma, maximal diameter of tumor ＜ 2 cm, no-metastasis of lymph node, and tumor with no-invasiveness of regional tissues than those in the poorly-differentiated adenocaarcinoma(χ2EphA7 =12.34,χ2MTDH =12.80; P＜0. 01)maximal diameter of tumor ≥2 cm(χ2EphA7=5.22,χ2MTDH =5.00; P＜0. 05)cases with metastasis of lymph node(χ2EphA7 =5.15 x2MTDH =5.86;P＜0. 05)and cases with invasiveness of regional tissues(χ2EphA72 =7.06, P＜0.01; χ2MTDH =4.13; P＜0.05)in gallbladder adenocarcinoma(P ＜ 0. 05). The high consistence was found between the expressive levels of EphA7 and MTDH in gallbladder adenocarcinoma(χ2 = 13.11, P ＜0. 01). The univariate KaplanMeier analysis showed that the increased expression of EphA7(P = 0. 023)and MTDH(P = 0. 034)was negatively associated with the overall survival. The multivariate Cox regression analysis showed that increased expression of EphA7 and/or MTDH(PEphA2 = 0. 023, PMTDH = 0. 034)was an independent poor-prognostic predictor for gallbladder adenocarcinoma. Conclusions The expression of EphA7 and/or MTDH might be closely related to the carcinogenesis, progression, clinical biological behaviors and prognosis of gallbladder adenocarcinoma. The positive expression of EphA7 and/or MTDH may predict bad-prognosis in gallbladder adenocarcinoma.     

胆囊癌P53蛋白表达及临床意义

目的 :探讨P5 3蛋白在胆囊癌中的表达及临床意义。方法 :采用SP免疫组织化学方法测定胆囊癌和胆囊炎组织中P5 3蛋白的表达。结果 :胆囊癌组织中P5 3蛋白阳性表达率为 71.7% (38/5 3) ,显著高于胆囊炎组织中P5 3蛋白表达率 0 (0 /12 ) (P <0 .0 1)。P5 3蛋白与胆囊癌的Nevin分期及肿瘤分化程度相关 (P <0 .0 5 )。结论 :P5 3蛋白表达在胆囊癌的发生、发展中起作用 ,可作为胆囊癌预后的一个重要生物学指标     

结肠癌组织中Ku70和Sp1的表达变化及其意义

目的探讨Ku70和Sp1在结肠癌组织中的表达变化及其意义。方法选取2013年8月至2015年7月经病理检查确诊为结肠癌的患者79例,比较高、中、低分化结肠癌中Ku70蛋白和Sp1蛋白阳性表达率以及Ku70mRNA和Sp1mRNA相对表达量与癌旁组织的差异;统计分析用SPSS13.0软件进行,Ku70mRNA与Sp1mRNA相对表达量用均数±标准差表示,t检验进行两组比较;Ku70蛋白和Sp1蛋白阳性表达率用百分率(%)表示,χ2检验进行比较;Spearman相关和Pearson直线相关分别用于Ku70mRNA与Sp1mRNA相对表达量和Ku70蛋白和Sp1蛋白阳性表达率相关性分析;P0.05表示差异具有统计学意义。结果高、中、低分化结肠癌组织中Ku70阳性表达率分别为47.37%、61.54%、79.41%;Sp1蛋白阳性表达率分别为52.63%、76.92%、85.29%;结肠癌组织中Ku70、Sp1蛋白阳性表达率及mRNA水平均高于癌旁组织(χ2=29.792、50.009;P0.001);低分化结肠癌的Ku70、Sp1蛋白阳性表达率及mRNA水平显著的高于高分化结肠癌(F=29.084、39.167;P0.001)差异均有统计学意义;经过Spearman相关分析发现,Ku70蛋白与Sp1蛋白阳性表达率呈正相关,且差异具有统计学意义(r=0.307,P=0.006)。经过Pearson相关分析发现,Ku70mRNA相对表达量与Sp1mRNA相对表达量呈正相关,且差异具有统计学意义(r=0.458,P0.001)。结论结肠癌组织中Ku70和Sp1蛋白阳性表达率高于正常组织,且Ku70蛋白与Sp1蛋白阳性表达率以及Ku70mRNA与Sp1mRNA相对表达量呈正相关。     

miR-362-3p的表达及其靶基因与胆囊癌恶性特征的关系

目的:探讨miR-362-3p在胆囊癌中的表达及功能。方法:用qRT-PCR检测手术切除的44例胆囊癌患者手术标本中miR-362-3p的表达,并分析其表达与胆囊癌临床病理特征及预后的关系。miR-362-3p模拟物转染胆囊癌细胞后,分别用MTT法、细胞划痕试验及Transwell侵袭试验观察细胞增殖、迁移及侵袭的改变。通过生物信息学方法及双荧光素酶报告基因试验分析miR-362-3p的靶基因,并采用补救试验验证。结果:miR-362-3p在胆囊癌组织的表达明显低于相应癌旁组织(P0.05)。miR-362-3p的低表达与肿瘤TNM分期、淋巴结转移及远处转移明显有关(均P0.05)。低表达miR-362-3p患者总体生存率较高表达miR-362-3p患者明显降低(P0.05)。转染miR-362-3p模拟物后,胆囊癌细胞的增殖,迁移及侵袭能力明显减弱(均P0.05)。Nemo样激酶(NLK)被确定为miR-362-3p的潜在靶基因,转染NLK过表达载体后,miR-362-3p模拟物对胆囊癌细胞的上述作用被明显逆转(均P0.05)。结论:miR-362-3p在胆囊癌中表达下调,下调的miR-362-3p减少了对靶基因NLK的抑制,从而促进了胆囊癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

组织芯片技术研究胆囊癌MMP-2和TIMP-2的表达及意义

目的 研究胆囊癌中MMP-2和TIMP-2的表达及其临床意义。方法 利用组织芯片技术,通过免疫组化的方法检测52例胆囊癌标本和11例正常胆囊组织标本中的MMP-2、TIMP-2的表达情况。结果 MMP-2在胆囊癌组织中的表达明显高于正常胆囊组织,TIMP-2在胆囊癌组织中的表达低于正常组织,MMP-2与TIMP-2的改变与肿瘤的病理分型、病理分级无关。结论 TIMP-2和MMP-2参与胆囊癌的发生发展过程。     

Ki-67抗原在胆囊良恶性肿瘤中的表达

目的 观察Ｋｉ－６７抗原在胆囊良恶性肿瘤中的表达强度与肿瘤的分级分期、治疗效果和预后的关系。方法 采用免疫组织化学（ＡＰＡＡＰ）方法,用抗人Ｋｉ－６７抗原的等８效抗体ＭＩＢ－１比较研究Ｋｉ６７蛋白在良恶性胆囊肿瘤和正常胆囊组织中的表达情况,对比较不同胆囊组织中细胞增殖的情况。结果 Ｋｉ－６７蛋白在胆囊癌组织中表达的阳性指数率显著高于胆囊良性肿瘤及正常胆囊组织（Ｐ〈０．０５）。但Ｋｉ－６７蛋白的表达