血管活性肠肽对大鼠贮脂细胞I型胶原分泌的影响

我们研究发现在传代培养的大鼠贮脂细胞中，不同浓度的血管活性肠肽（Ｖａｓｏａｃｆｉｖｅｉｎｆｅｓｆｉｎａｌｐｅｔａｉｄｅ，ＶＩＰ）能显著抑制Ｉ型胶原分泌呈量效关系，ＶＩＰ受体拮抗剂能减弱ＶＩＰ这一作用，从而更加肯定ＶＩＰ抑制胶原分泌的作用，本研究提示，大鼠贮脂细胞膜上存在ＶＩＰ受体，ＶＩＰ在肝纤维化和肝硬化时浓度升高可能调节肝脏胶原代谢。     

血管活性肠肽受体在大鼠肝脏贮脂细胞的表达及其在肝纤维化中的意义

在特异引物引导下，用反转录ＰＣＲ方法扩增出预期长度的大鼠血管活性肠肽受体（ｖａｓｏａｃｔｉｖｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｐｅｐｔｉｄｅｒｅｃｅｐｔｏｒＶＩＰ－Ｒ）的ｃＤＮＡ片断（７５０ｂｐ），随后该ｃＤＮＡ片段与３２Ｐ－标记的ＶＩＰ－Ｒ探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，结果证实大鼠肝脏贮脂细胞有ＶＩＰ－Ｒ的ｍＲＮＡ表达。放射受体交联试验表明贮脂细胞上存在ＶＩＰ－Ｒ的蛋白，分子量约４０ＫＤ。不同浓度的ＶＩＰ（０．１５ｎｍ－１５０ｎｍ）作用于培养的大鼠贮脂细胞，能显著抑制细胞Ⅰ型胶原的分泌并呈量效关系（ｒ＝－０．９８９，ｎ＝６，Ｐ＜０．００１）。ＶＩＰ受体拮抗剂［Ｄ－Ｐ－ｃｌ－Ｐｈｅ６，Ｌｅｕ１７］－ＶＩＰ能减弱ＶＩＰ这一作用。这些结果表明：大鼠贮脂细胞上存在ＶＩＰ－Ｒ；ＶＩＰ通过ＶＩＰ－Ｒ影响贮脂细胞的胶原分泌并可能在肝纤维化的发病过程中起一定的调节作用。     

维甲酸类对贮脂细胞增殖及胶原合成的影响

位于肝窦周隙的贮脂细胞，（又称Ｉｔｏ细胞或ＶｉｔＡ贮备细胞）具有贮存，代谢ＶｉｔＡ的功能，给予大鼠一定量的ＶｉｔＡ可抑制或减轻ＣＣｌ４诱发的大鼠肝纤维的病变，用Ｍｅｔｒｉｚａｍｉｄｅ成功地分离大鼠贮脂细胞，用原代培养的贮脂细胞研究维甲酸类对同脂细胞增殖，胶原合成的影响，结果显示在全反式维甲酸（ＲＡ），视黄酸棕榈酯（ＲＰ）可抑制贮脂细胞增殖，胶原的合成，提示维持贮脂细胞ＶｉｔＡ含量可抑制贮脂细胞向肌     

扶正化瘀方对贮脂细胞胶原生成的影响

目的:观察扶正化瘀方对贮脂细胞胶原生成的影响。方法:①用扶正化瘀方药物血清加入正常传代贮脂细胞中,以正常血清作对照。用~3H—pro掺入、胶原酶消化法计算细胞内、外胶原生成率与胶原生成抑制率。并以PAP法测定细胞内胶原与LN;②DMN造模后用扶正化瘀方体内给药,生理盐水作对照,连续7天后处死.分离细胞,以同样方法计算纤维肝原代贮脂细胞细胞内、外胶原生成率与胶原生成抑制率。结果:①药物血清能明显减少正常传代贮脂细胞细胞外胶原生成率,抑制细胞Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原与LN的表达;②体内给药后DMN纤维肝原代贮脂细胞细胞内、外胶原生成率均明显抑制。结论:扶正化瘀方能抑制贮脂细胞的胶原合成。     

氧化苦参碱对大鼠贮脂细胞增殖和胶原合成的抑制作用

目的 研究氧化苦参碱对大鼠贮脂细胞增殖和胶原合成的影响。为应用氧化苦参碱防治肝纤维化提供理论依据。方法 分离、培养大鼠贮脂细胞，采用甲基噻唑基四唑蓝（ＭＴＴ）法和＾３Ｈ－脯氨酸掺入法分别测定细胞增殖和交原合成。结果 氧化苦参碱在５ｕｇ～５００ｕｇ／ｍｌ浓度范围内能呈剂量依赖性抑制贮脂细胞的增殖和胶原合成，提高药物浓度则形成作用平台。结论 氧化苦参碱在体外具有抑制大鼠贮脂细胞增殖和胶原合成的作用。这对防治肝纤维化可能有一定的临床应用价值。     

维生素A类对大鼠肝贮脂细胞3T3细胞增殖及前胶原Ⅲ表达的影响

目的 研究维生素类物质对离体培养的肝纤维化相关细胞增殖活性及前胶原ⅢmRNA表达的影响。 方法 不连续密度梯度离心法分离纯化大鼠肝贮脂细胞。~3H-TdR掺入法检测细胞增殖活性,细胞原位杂交,检测细胞前胶原ⅢmRNA表达水平。 结果 10~(-5)mol/L及10~(-4)mol/L的视黄酸分别抑制3T3细胞及贮脂细胞增殖活性(P<0.05及P<0.01),10~(-5)mol/L视黄酸单细胞水平抑制3T3细胞前胶原ⅢmRNA表达。视黄酸棕榈酯对细胞增殖活性无明确作用。 结论 维生素A(视黄酸)对离体肝纤维化相关细胞具有一定抗纤维化效应。     

软肝片对贮脂细胞增殖及Ⅰ,Ⅱ型胶原mRNA表达的影响

利用四氧化碳损伤性肝纤维化模型，观察莪术、鳖甲、三七、黄芪等中药组成的软肝并对贮脂细胞增殖及Ⅰ、Ⅱ型胶原ｍＲＮＡ高效表达与胶原蛋白合成的影响。结果示５０ｍｇ、１００ｍｇ阻断组对贮脂细胞的增殖有明显的抑制，分别降低了８７．５％和８８．４％（Ｐ〈０．０１），ａ２（Ⅰ）ｍＲＮＡ表达水平降低了５．４５２和５．０６１倍；胶原蛋白合成能力降低了２．２３５和２．１８９倍（Ｐ〈０．０１）；而１００ｍｇ治疗组分别为     

贮脂细胞影响因素研究进展

贮脂细胞在肝纤维化的形成中起关键作用，干预贮脂细胞增殖、胶原等细胞外基质的合成，已成为肝纤维化基础研究的热点问题，有关研究相当活跃，并已取得了很大进展，现综述如下。一、细胞团子细胞因子又称免疫介质，是一类单核巨噬细胞、淋巴细胞等分泌的多肽物质，这些多肽物质调节着淋巴细胞的免疫应答反应，并对其他细胞有重要影响，近年来，细胞因子对贮脂细胞影响的报道较多。转化生长因子p（TGF—p）TGF—p是研究得最深入的细胞因子，Weiner等用Northenblot技术研究表明，TGF一B能使鼠贮脂细胞1型胶原mRNA增加。Castilla等发现…     

软肝片对贮脂细胞增殖及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

利用四氯化碳损伤性肝纤维化模型,观察莪术、鳖甲、三七、黄芪等中药组成的软肝片对贮脂细胞增殖及Ⅰ、Ⅱ型胶原mRNA高效表达与胶原蛋白合成的影响。结果示50mg、100mg阻断组对贮脂细胞的增殖有明显的抑制,分别降低了87.5％和88.4％(P<0.01),α_2(Ⅰ)mRNA表达水平降低了5.452和5.061倍;胶原蛋白合成能力降低了2.235和2.189倍(P<0.01),而100mg治疗组分别为54.2％及2.091和1.928倍(P<0.05)。表明软肝片能抑制贮脂细胞增殖及α_2(Ⅰ)mRNA高效表达,减少胶原蛋白的合成,降低胶原蛋白在Disse腔隙过量沉积。     

中药861合剂对体外培养贮脂细胞Ⅳ型胶原mRNA的影响

目的观察８６１合剂对体外培养贮脂细胞Ⅳ型胶原ｍＲＮＡ的影响。方法与结向传一代的雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠肝脏贮脂细胞培养液中加入终浓度为１０ｍｇ／ｍｌ的中药８６１合剂（０．４５μｍ过滤）或０．６２５ｍｍｏｌ／Ｌ的秋水仙素，另设空白对照组，继续培养４８小时，收获贮脂细胞提取总ＲＮＡ，以地高辛配基标记的小鼠Ⅳ型胶原ｃＤＮＡ探针与之做斑点杂交，以β－ａｃｔｉｎ作内对照，结果显示８６１合剂组及秋水仙素组贮脂细胞Ⅳ胶原ｍＲＮＡ水平较空白对照组明显降低，而且８６１组比秋水仙素组降低更明显。结论认为８６１合剂的抗纤维化机理之一是调控贮脂细胞的Ⅳ型胶原表达。     

急性胰腺炎中血管活性肠肽和生长抑素检测分析

用放射免疫法检测２８例急性胰腺炎的血浆ＶＩＰ、ＳＳ，发现胰腺炎患者ＶＩＰ和ＳＳ水平均显著高于正常对照。胰腺炎中有腹胀者较之无腹胀者ＶＩＰ水平较高，低钙者较之无低钙者ＶＩＰ水平较高。ＶＩＰ和ＳＳ与病情轻重，疼痛严重程度，血尿淀粉酶水平均无明显联系。提示ＶＩＰ和ＳＳ在急性胰腺炎中升高可能是一种继发现象，在病情的发生发展中作用有限。     

实验性纤维化肝内胶原生成细胞的研究

目的 探讨大鼠肝纤维化胶原生成细胞的来源。方法 利用免疫组织化学及原位分子杂交技术，对不同阶段（２０周）ＣＣｌ４诱导ＳＤ大鼠纤维肝内匀朱生成细胞Ｉ，Ⅲ，Ⅳ型前胶原ｍＲＮＡ及其相应胶原蛋白的表达状况进行观察。结果 实验早期（２－６周），于中央静脉周围坏死区或其附近聚集的结蛋白（ｄｅｓｍｉｎ，Ｄｍ）和α－平滑肌肌动蛋白（α－ｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅａｃｔｉｎ，α－ＳＭＡ）阳性的Ｉｔｏ细胞及肌成纤维细胞     

EVIDENCE FOR SECRETION OF VASOACTIVE INTESTINAL PEPTIDE BY TUMOURS OF PANCREAS, ADRENAL MEDULLA, THYROID AND LUNG: SUPPORT FOR THE UNIFYING APUD CONCEPT

Levels of vasoactive intestinal polypeptide (VIP) were measured by radioimmunoassay in plasma or tissue from thirty-five patients with watery diarrhoea, and in plasma of twenty-five normal controls. Plasma levels were between 0.6 and 11.0 ng/ml in thirty-one of the thirty-three patients in whom it was measured and too low to measure (<200 pg/ml) in the other two. Peptide levels were <200 pg/ml in twenty-three of the controls, but higher in the remaining two. All tissues from patients were 'rich'in VIP (10 ng to 35 μg per g). The aetiologic diagnoses included pancreatic islet-cell adenoma or adenocarcinoma, islet-cell hyperplasia, bronchogenic carcinoma, pheochromocytoma, ganglioneuroblastoma, medullary thyroid carcinoma, and retroperitoneal histocytoma. The findings support the conclusions that: (1) VIP is a likely mediator of the watery-diarrhoea syndrome; (2) the syndrome may result from a variety of tumours; (3) this or a related peptide hormone may be secreted by these tumours; and (4) these tumours may have a common embryonic origin.     

THE EFFECT OF TWO DIFFERENT GASTRONES ON ACID SECRETION BY THE RAT IN VIVO AND BY ISOLATED RAT GASTRIC MUCOSA

A number of substances (“gastrones”) found in gastro-intestinal mucous secretions inhibit gastric acid secretion when given by intravenous injection in vivo. The mode of this action is unknown. The present experiments have defined the effect of two potent gastrones on acid secretion by isolated rat gastric mucosa. In each instance the addition of the gastrone preparation to the solution bathing the in-vitro mucosal preparation resulted in significant extra secretion of acid, although the same gastrone preparations had inhibited acid secretion in the intact animal. This paradoxical stimulant effect of gastrone on isolated gastric mucosa has not previously been described. Its demonstration is evidence that the inhibitory action of these substances in the intact animal is exerted at a more proximal site than the parietal cell.     

肝硬化患者血浆及胃粘膜内血管活性肠肽和生长抑素含量的变化及意义

采用放射免疫测定法研究了肝硬化（ＨＣ）患者血浆及胃粘膜内血管活性肠肽（ＶＩＰ）和生长抑素（ＳＳ）含量变化及其意义。结果表明：肝硬化患者血浆和胃粘膜内的ＶＩＰ含量和ＳＳ含量均显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）；ＨＣ伴溃疡病患者血浆及胃粘膜中ＳＳ含量显著高于无溃疡的ＨＣ患者（Ｐ＜０．０５）；血浆及胃粘膜中ＶＩＰ的含量随着胃、十二指肠粘膜充血程度的加剧而升高；并且血浆及胃粘膜内ＶＩＰ和ＳＳ含量与肝功能密切相关。提示：在ＨＣ时存在着严重的胃肠激素代谢率乱，并且它在ＨＣ的病理生理机制和ＨＣ时胃肠功能改变和病理变化中起着重要作用。     

EPITOPES ON THE CB-11 PEPTIDE OF TYPE II COLLAGEN RECOGNIZED BY ANTIBODIES FROM PATIENTS WITH RHEUMATOID ARTHRITIS

Using the technique of epitope scanning, the binding sites ofantibodies to the CB-1 1 peptide of type 11 collagen, whichis known to induce an inflammatory arthritis in animal models,have been investigated. Sera from seven patients have been testedagainst 272 peptides representing the CB-1 I sequence, eachpatient produced a different profile of antibody binding anda number of epitopes have been identified. The specific natureof this binding has been established by the reduction in bindingby absorption with type II collagen. The reactivity of serafrom a further 13 patients, to peptides representing the twomost frequently recognized epitopes, has been assessed. KEY WORDS: Epitope scanning, Auto-antibodies, Auto-antigens     

四氢呋喃对大鼠贮脂细胞增殖及胶原合成的影响

目的 研究药物溶剂四氢呋喃对体外培养的贮脂细胞增殖及胶原合成的影响。方法 分离培养大鼠肝脏贮脂细胞,以不同浓度的四氢呋喃、二甲基亚砜、乙醇处理、检测[~3H]胸腺核苷酸及[~3H]脯氨酸的掺入值,了解四氢呋喃对贮脂细胞增殖及胶原合成的影响。结果 四氢呋喃与常用药物溶剂二甲基亚砜、乙醇相比,在浓度为0.1％时,对贮脂细胞的增殖及胶原合成无影响。结论 四氢呋喃可作为胡萝卜素等药物溶剂用于贮脂细胞增殖及胶原合成的体外实验研究。     

清肝饮对人成纤维细胞DNA和胶原合成的影响

目的 研究中药清肝饮对人成纤维细胞(HLF)的DNA和胶原合成的影响,从细胞水平评价清肝饮防治器官纤维化提供实验依据。方法 采用~3H-TdR和~3H-脯氨酸掺入法测定DNA和胶原合成。结果 清肝饮在1～5mg/ml浓度范围内均以浓度依赖方式抑制HLF胶原和DNA合成(P<0.05～0.01)。结论 清肝饮具有抗纤维化的作用。