柱前衍生化HPLC分析白花蛇舌草多糖中单糖组成

目的:采用微波提取法提取不同产地白花蛇舌草水溶性多糖,并对多糖的含量及组成进行研究.方法:以苯酚-硫酸法测定总糖含量,柱前衍生化高效液相色谱法鉴别和测定其多糖的单糖组成.结果:不同产地药材中多糖含量以广东最高,白花蛇舌草多糖是由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖及甘露糖组成的杂多糖.结论:柱前衍生化高效液相色谱法分析白花蛇舌草多糖中单糖组成方法简便,快速,准确.     

芡茎多糖单糖组成及抗炎活性

目的研究芡茎多糖单糖组成及抗炎活性。方法水提取总多糖,层析法分离纯化多糖组分,高效凝胶渗透色谱(HPGPC)测定各组分分子量;高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)测定多糖组分的单糖组成;通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型,考察芡茎多糖(EFPP)抗炎作用。结果从中纯化出EFPP1、EFPP2、EFPP3 3个组分多糖,其中EFPP1、EFPP2含有量较高;EFPP1组分由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖4种单糖组成,其物质的量之比为12.06∶9.544∶3.967∶9.131;EFPP2组分由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖4种单糖组成,其物质的量之比13.69∶11.64∶18.14∶6.616;芡茎多糖(EFPP)能降低小鼠耳廓肿胀度、降低致炎小鼠血清中TNF-α,IL-1?和IL-6含有量。结论芡茎多糖是为非均一多糖,具有抗炎作用。     

白茅根多糖IC1的分离及其相对分子质量和单糖组成的测定

目的:分离纯化白茅根多糖,建立白茅根多糖相对分子质量的测定方法,并通过高效液相色谱法测定其单糖组成和摩尔比.方法:通过多次醇沉的方法对白茅根多糖进行分离纯化,得到白茅根多糖IC1;采用高效液相色谱法,以右旋糖酐为标样,绘制多糖分子量的标准曲线,测定白茅根多糖IC1的相对分子质量;通过酸水解,使IC1水解成单糖,分析这些单糖的组成及其摩尔比.结果:经测定,白茅根多糖IC1的相对分子质量为8 292.2;白茅根多糖IC1由鼠李糖,木糖,果糖,甘露糖,葡萄糖5种单糖组成,其摩尔比为1∶11.45∶1.26∶1.02∶59.23.结论:多次醇沉的方法对白茅根多糖进行分离,效果良好,操作简便.高效液相法测定白茅根多糖分子质量及单糖组成灵敏度高,重复性好.     

白花蛇舌草多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用研究

目的:探讨白花蛇舌草多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用。方法:健康昆明小鼠80只,随机分为正常对照(灌胃生理盐水)、免疫抑制模型组(灌胃生理盐水)及白花蛇舌草多糖低、中、高(分别灌胃白花蛇舌草多糖50、100、200 mg/kg)剂量组5组。除正常对照组外,模型组和白花蛇舌草多糖组连续腹腔注射环磷酰胺(CTX 100mg/kg)3 d,建立免疫抑制模型。造模后各组小鼠分别灌胃相应药物,1次/d,连续15 d后,测定免疫器官系数、血清溶血素、脾淋巴细胞增殖、脾脏NK细胞活性及小鼠血清细胞因子IL-2、IL-6、TNF-α含量等免疫指标。结果:与正常对照组比较,模型组脾脏系数、胸腺系数、血清溶血素、脾淋巴细胞增殖能力、脾脏NK细胞及血清IL-2、IL-6、TNF-α水平均显著降低(P0.05或P0.01);与模型组比较,白花蛇舌草多糖中、高剂量组能显著提高小鼠的免疫器官系数和血清溶血素(P0.05或P0.01),白花蛇舌草多糖各剂量组对Con A诱导的脾淋巴细胞转化有显著的促进作用(P0.05或P0.01),白花蛇舌草多糖中、高剂量组对LPS诱导的脾淋巴细胞增殖和NK细胞活性具有显著的促进作用(P0.01),白花蛇舌草多糖各剂量组能显著提高免疫抑制小鼠血清IL-2、IL-6、TNF-α含量(P0.01)。结论:白花蛇舌草多糖能提高免疫抑制小鼠的免疫功能。     

北沙参多糖的分离、纯化及其体外免疫活性考察

目的:分离、纯化北沙参多糖(Glehniae Radix polysaccharides,GRP)并对各纯化组分(GRP-1,GRP-2,GRP-3)进行结构表征及体外免疫活性研究。方法:采用水提醇沉法获得GRP,Sevage法除蛋白,活性炭脱色素,DEAE纤维素DE-52柱色谱法及葡聚糖凝胶G-75(Sephadex G-75)柱色谱法分离与纯化。采用紫外分光光度法(UV)及1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化-HPLC对北沙参多糖的含量及其单糖组成进行分析,采用傅里叶红外光谱仪(IR)及多角度激光散射仪对GRP-1进行结构表征及相对分子质量测定,并考察北沙参多糖体外对小鼠脾淋巴细胞增殖活性的影响。结果:GRP经柱色谱分离可获得GRP-1,GRP-2,GRP-3共3种多糖组分,UV测得三者的多糖质量分数分别为96.16%,48.64%和89.73%。其中,GRP-1为具有相对均一分子质量的多糖组分,相对分子质量23.01 k Da,由甘露糖-葡萄糖醛酸-鼠李糖-葡萄糖-半乳糖-阿拉伯糖组成,摩尔比为81.86∶0.12∶0.17∶1 259.7∶0.54∶0.33,红外光谱表明其结构中存在α型糖苷键。体外免疫活性结果表明GRP-1组分对体外脾脏淋巴细胞的增殖具有较好的促进作用,此外GRP-2及GRP-3对脾脏淋巴细胞的增殖也具有一定的推动作用。结论:GRP-1是由多种单糖组成的相对均一的多糖组分,并具有较好的体外免疫活性。     

石见穿多糖对环磷酰胺诱导小鼠免疫低下的调节作用

目的:观察石见穿多糖对环磷酰胺诱导免疫低下小鼠的免疫增强作用。方法:小鼠腹腔注射环磷酰胺制备免疫低下模型。采用流式细胞术检测小鼠脾脏和胸腺细胞的周期分布;MTT比色法评价脾脏和胸腺细胞的体外增殖能力;中性红摄取试验评价小鼠巨噬细胞的吞噬能力;生化及酶联免疫试剂盒检测巨噬细胞分泌炎症因子的能力。结果:石见穿多糖可提高免疫低下小鼠的脾脏与胸腺指数,上调其脾脏和胸腺内处于分裂期的细胞比例,增强刀豆蛋白A刺激下脾脏与胸腺细胞体外增殖能力及增强免疫低下小鼠巨噬细胞的吞噬功能和分泌IL-1β和NO的能力,并能提高巨噬细胞内IL-1β含量和Caspase-1活性。结论:石见穿多糖能显著缓解环磷酰胺诱导的小鼠免疫低下。     

丹参多糖对免疫抑制小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响

目的 研究丹参多糖Salvia miltiorrhiza polysaccharides(SMPS)对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠免疫功能的调节作用.方法 将KM小鼠随机分为空白对照组、模型组、香菇多糖片(10 mg·kg-1)阳性组,丹参多糖高剂量组(300 mg·kg-1)、丹参多糖中剂量组(200 mg·kg-1)和丹参多糖低剂量组(100 mg·kg-1),在经腹腔注射环磷酰胺(CY)建立免疫功能抑制模型后,进行碳粒廓清实验,并计算脏器指数、吞噬指数和吞噬系数,观察丹参多糖对CY诱导的免疫低下小鼠相关免疫脏器及网状内皮系统吞噬功能的影响.结果 丹参多糖能显著上调CY诱导的免疫低下小鼠的脾指数、胸腺指数、碳粒廓清指数K及吞噬指数α.结论 丹参多糖能提高环磷酰胺诱导免疫低下小鼠巨噬细胞的吞噬功能.     

铁皮石斛中性多糖分离纯化及其体内免疫调节作用研究

目的分离鉴定铁皮石斛中的中性多糖,探讨铁皮石斛中性多糖(DOP-1)对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠免疫功能的影响。方法水提醇沉法提取铁皮石斛粗多糖、酶-Sevage法脱蛋白;DEAE-纤维素52离子交换层析法分离纯化粗多糖;红外扫描和柱前衍生化HPLC法分析多糖组分及构型;选用BALB/c雄性小鼠,采用环磷酰胺建立免疫抑制小鼠动物模型,实验设正常组,模型组,左旋咪唑阳性组,DOP-1高、低剂量组,铁皮石斛全茎高、低剂量组。观察比较各小鼠脾脏和胸腺指数、血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和干扰素-γ(IFN-γ)含量及血清溶血素水平。结果铁皮石斛粗多糖经柱层析分离纯化后得到中性多糖(DOP-1),DOP-1主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖组成,其摩尔比分别为3.8∶0.25∶1.5∶3.8∶2.1∶1.3。动物实验表明:与模型组比较,DOP-1及全茎可显著增加胸腺指数,显著下调血清中IL-6(P0.05)和IL-10(P0.05)的含量,DOP-1调节作用优于全茎和阳性组;DOP-1高剂量组的IFN-γ水平也有显著性降低(P0.01),并能增强免疫抑制小鼠血清溶血素水平(P0.01)。结论铁皮石斛中性多糖可缓解环磷酰胺对小鼠的免疫抑制作用。     

复合多糖对CTX致免疫低下小鼠的免疫增强作用

目的:比较由香菇多糖、银耳多糖、茯苓多糖、虫草多糖、竹荪多糖按10∶7∶1∶3∶18比例组成的复合多糖对免疫抑制小鼠免疫的影响。方法:复合多糖和各单一多糖均以215 mg/kg通过连续灌胃给予BALB/c小鼠31 d,观察其对环磷酰胺所致免疫低下的影响。结果:复合多糖对于环磷酰胺所致免疫低下的保护和恢复作用多项考察指标均优于各单一多糖,能更好的促进动物血清Ig G、Ig A、Ig M、s Ig A等免疫球蛋白的分泌,提高体液免疫功能,促进模型动物T淋巴细胞及B淋巴细胞的分化成熟,增强环磷酰胺模型动物脾脏T淋巴细胞增殖能力。结论:复合多糖与其组成的各单一多糖比较具有更好的免疫增强作用。     

杜仲总多糖对环磷酰胺致免疫低下小鼠的影响

目的研究杜仲总多糖对环磷酰胺致免疫低下小鼠的影响。方法应用环磷酰胺建立免疫低下小鼠模型,给予不同剂量杜仲总多糖后,测定小鼠体重、胸腺指数、脾指数、腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数等指标。结果300g杜仲原药材经提取分离得9.3g多糖干品。应用环磷酰胺后,小鼠体重、胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数均降低。杜仲总多糖能减轻环磷酰胺致小鼠体重的下降,升高免疫低下小鼠胸腺指数,明显增加小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数(P<0.01)。与空白组比较,杜仲总多糖还能提高正常小鼠的脾指数(P<0.05)。结论杜仲总多糖能够较好地增强小鼠免疫功能。     

鸡矢藤多糖的分离纯化及体内抗菌活性

目的：对鸡矢藤多糖进行分离纯化,寻找具有体内抗菌活性的多糖组分。方法：采用柱色谱技术对鸡矢藤粗多糖（PSP）进行分离纯化,对纯化多糖组分采用凝胶柱和聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定,借助气相色谱法和红外光谱判断其部分结构信息,采用体内抗菌模型对所得多糖的活性进行研究。结果：从鸡矢藤中分离2个单一多糖组分PSP2a和PSP2b。PSP2a由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖和阿拉伯糖组成,其摩尔比为4.92：3.23：1.00：1.73：3.50,PSP2b由阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖组成,其摩尔比为：1.00：0.73：1.80。PSP2a和PSP2b中单糖主要以呋喃糖形式存在。体内抗菌模型表明,PSP,PSP2和PSP2a对感染小鼠均有不同程度保护作用,其中以PSP2a的效果最好。结论：鸡矢藤多糖中具有体内抗菌活性的成分主要为PSP2a。     

女贞子多糖相对分子质量与组成分析

目的透析进一步纯化女贞子多糖,通过对女贞子多糖相对分子质量及组成分析,为探究多糖生物活性与其组成之间的关系提供理论数据。方法实验以女贞子为研究对象,采用水提醇沉法提取女贞子多糖,通过Sevage法、过氧化氢、透析等方法纯化多糖,凝胶渗透色谱分析多糖相对分子质量,三氟乙酸水解后采用高效液相色谱-示差检测器分析多糖组成。结果女贞子多糖重均相对分子质量为10721,数均相对分子质量为10673,女贞子多糖由葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖3种单糖所组成,其物质的量比为9.14∶8.10∶5.18。结论此种方法纯化后的女贞子多糖组成较为均一,纯度较高,采用高效液相色谱-示差检测器无需柱前衍生化即可分析多糖中单糖组成。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定地稔多糖中单糖组成

目的:从地稔中提取分离地稔多糖,并对单糖组成进行研究。方法:采用水提醇沉法提取地稔粗多糖,再用DEAE纤维素柱色谱进行分离纯化,获得一种水溶性较好的中性多糖和一种酸性多糖,然后采用高效液相柱前衍生法对其单糖组成进行测定。结果:地稔中性多糖主要是由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、鼠李糖等5种单糖组成,摩尔比为123∶84∶27∶19∶5,另有极少量木糖。地稔酸性多糖单糖组成主要是半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、鼠李糖7种单糖组成,摩尔比为14∶10∶7∶6∶4∶1∶1,另外还有少量的木糖。结论:本研究建立了分离及测定地稔多糖组成成分的分析方法,该方法操作简单,方便可行。     

外源一氧化氮对干旱胁迫下白花蛇舌草种子萌发的影响

目的 探索外源一氧化氮（NO）对干旱胁迫下白花蛇舌草Oldenlandia diffusa种子萌发的影响,并确定缓解干旱胁迫的硝普钠（SNP,NO外源供体）最适浓度。方法 用15% PEG 6000模拟干旱胁迫,测定不同浓度梯度SNP处理后干旱胁迫下白花蛇舌草种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数。结果 干旱胁迫显著抑制了白花蛇舌草种子的萌发过程。SNP能显著促进干旱胁迫下白花蛇舌草种子的萌发,0.3 mmol/L SNP处理可提高发芽率和活力指数2.78倍和7.77倍;从发芽势和发芽指数来看,0.1 mmol/L和0.3 mmol/L SNP处理效果最佳且二者差异不显著。结论 SNP可显著缓解干旱胁迫对白花蛇舌草种子萌发的不利影响,提高白花蛇舌草种子的抗旱能力,其中以0.3 mmol/L SNP效果最佳。     

枸杞多糖联合趋化因子对肝癌小鼠T辅助淋巴细胞分化的影响

目的: 探讨枸杞多糖(LBP)及枸杞多糖联合趋化因子(CXCL10)对实验性肝癌荷瘤小鼠辅助性T细胞分化的影响。 方法: 建立H22肝癌小鼠皮下移植瘤模型,分为模型组、LBP高剂量组(ig 100 mg·kg^-1)、LBP低剂量组(ig 50 mg·kg^-1)、LBP+CXCL10组(ig 100 mg·kg^-1+15 μg·kg^-1)、CTX组(ip 20 mg·kg^-1),另设正常对照组。连续给药2周后小鼠眼球取血,颈椎脱臼处死。分离小鼠肿瘤、脾脏、胸腺,计算肿瘤抑制率、胸腺指数、脾指数,流式细胞术检测小鼠外周血T辅助细胞1/T辅助细胞2(Th1/Th2)分化情况。 结果: 与模型组相比,LBP低、高剂量组、LBP+CXCL10组对肿瘤抑制率分别为37.83%,12.50%,14.14%; Th1/Th2分别4.44±3.05,2.48±2.93,4.36±1.96,其中LBP低剂量组及LBP+CXCL10组P<0.05。 结论: 低剂量LBP及LBP+XCL10能显著提高H22肝癌荷瘤小鼠Th1/Th2比率。     

党参多糖分离纯化及抗氧化活性研究

目的分离纯化党参多糖(CPP)并对其结构及抗氧化活性进行研究。方法加热回流法提取制备党参粗多糖,经中空纤维超滤实验装置分离获得多糖分级,采用体内、外方法考察多糖的抗氧化活性。结果 CPP经分离后获得3个级分CPP1、CPP2、CPP3,体外抗氧化实验表明CPP3对DPPH、羟自由基和超氧阴离子的清除能力最强;体内实验显示,高剂量CPP3(400 mg/kg)对D-半乳糖所致衰老小鼠具有明显的保护作用。结论 CPP具有明显的抗氧化功能,本研究为党参多糖功能性食品的开发提供了理论依据。     

白花蛇舌草中环烯醚萜苷类成分的提取工艺优选

目的:优选白花蛇舌草中总环烯醚萜苷的提取工艺,为该药材的资源开发与利用提供参考。方法:以车叶草苷为指标成分,采用紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷的含量,检测波长548 nm。以浸膏得率和总环烯醚萜苷含量的综合评分为指标,通过正交试验考察乙醇体积分数、料液比、提取时间和提取次数对白花蛇舌草中总环烯醚萜苷提取工艺的影响。结果:总环烯醚萜苷最佳提取工艺为乙醇体积分数90%,料液比1∶8,提取时间2 h,提取数2次。总环烯醚萜苷质量分数22.85%。结论:优选的提取工艺稳定合理,为白花蛇舌草中总环烯醚萜苷提取的工业化生产提供实验依据。     

半枝莲多糖对S180荷瘤小鼠红细胞功能的影响

目的: 探讨半枝莲多糖增强荷瘤小鼠红细胞膜流动性及其红细胞免疫调节机制。 方法: 健康雄性小鼠48只,按体重随机分为正常对照组、模型对照组、黄芪多糖对照组(100 mg·kg^-1)、半枝莲多糖低、中、高剂量组(50,100,200 mg·kg^-1)。用荧光分光光度计检测荷瘤小鼠红细胞膜流动性;用紫外分光光度计检测红细胞膜Ca²⁺,Mg²⁺-ATP酶活力、唾液酸(SA)含量、抗氧化酶系的活力。 结果: 与模型对照组比较,半枝莲多糖各剂量组可明显提高S180荷瘤小鼠红细胞膜流动性(P<0.01,P<0.05),可明显提高红细胞膜Ca²⁺,Mg²⁺-ATP酶活力(P<0.01,P<0.05)、及抗氧化酶系的活力(P<0.01,P<0.05);低、中剂量组可增加红细胞膜表面唾液酸含量(P<0.01)。 结论: 半枝莲多糖可能通过改善S180荷瘤小鼠红细胞膜的功能状态,提高膜的流动性,增强红细胞的免疫功能,从而发挥其抗肿瘤作用。     

三七药渣中主要多糖成分的分离纯化及其抗氧化活性研究

目的 分离纯化三七药渣中主要多糖组分,分析其单糖组成,并对比研究各组分多糖的抗氧化活性。方法 采用水提醇沉法提取三七药渣粗多糖;经DEAE Fast Flow阴离子交换柱、Sephadex G-50柱色谱法进行分离纯化。采用高效凝胶渗透色谱（HPGPC）法测定其相对分子质量及纯度,通过扫描电子显微镜（ScanningElectronMicroscope,SEM）、傅里叶变换红外光谱仪（Fourier TransformInfraredspectroscopy,FT-IR）、HPLC-衍生化等方法对各组分多糖的单糖组成和初级结构进行分析。分析其抗氧化能力以及对RAW 264.7细胞氧化损伤的保护作用。结果 分离得到3个多糖组分（PNPS-0、PNPS-0.2、PNPS-0.3）,3者的单糖组成和比例存在差异：PNPS-0主要由D-葡萄糖（52.28%）和D-半乳糖（34.14%）组成;PNPS-0.2主要由D-半乳糖（40.89%）、D-阿拉伯糖（19.38%）和D-葡萄糖（12.25%）组成;PNPS-0.3主要由D-葡萄糖醛酸（40.43%）、D-半乳糖（22.61%）和D-葡萄糖（...     

关黄柏总多糖的分离纯化及其对小鼠脾细胞增殖的影响

目的:分离纯化关黄柏总多糖,研究纯化组分对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。方法:采用DEAE Cellulose 52,DEAE-Sepharose F.F,Sephacryl S-400等载体对关黄柏总多糖进行分离纯化,高效凝胶过滤色谱法鉴定纯度并测定分子量,PMP柱前衍生化测定单糖组成;采用MTT法测定各多糖组分对Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖的作用。结果:关黄柏总多糖占药材的4.3%,从关黄柏总多糖中分离纯化得到3种多糖组分G1,G2,G3,分别占总多糖的6%,9%,10%,经HPLC鉴定证明为均一多糖,均主要含阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖和半乳糖醛酸,其摩尔比分别是G1(1∶1.06∶1.04∶1.14),G2(1∶1.27∶1.10∶1.09),G3(1∶1.23∶0.99∶1.55),3种均一多糖对Con A诱导的T淋巴细胞增殖有显著的抑制作用。结论:3种均一关黄柏总多糖主要由阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖和半乳糖醛酸组成,具有一定显著的抑制细胞免疫的作用,为进一步研究提供了实验基础。