三物白散抗肿瘤过程中免疫正相调节机制研究

三物白散为著名的温下祛邪复方,出自《伤寒论》第141条“寒实结胸,无热证者,与三物小陷胸汤,白散亦可服”。主治寒实结胸证,由巴豆、桔梗、贝母3味药组成。前期实验和临床研究证实,三物白散具有显著的抗肿瘤作用。同时,我们在研究过程中发现,三物白散在抗肿瘤过程中尚具有一定的免疫调节作用,但具体作用机理有待进一步探讨。本实验运用体外培养技术,研究了三物白散对B16-BL6肿瘤细胞及其诱导的免疫细胞增殖能力低下的影响。     

三物白散抗肿瘤免疫正相调节机制的实验研究

目的：在整体水平与细胞分子水平上研究三物白散抗肿瘤过程中免疫正相调节的作用机制。方法：建立小鼠腋下移植性肿瘤模型，三物白散谩大、中、小3个剂量组，另设一个正常对照组（生理盐水组）和一个阳性药组（5-氟尿嘧啶组），用药8天后，摘取皮下瘤块、胸腺、脾脏，称其重量，计算抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数，另摘眼球采血取血清，用放射免疫检测法检测荷瘤小鼠血清中IL-2、IL-4表达；分离BALB／C小鼠的胸腺细胞，经三物白散作用后，检测其IL-2、IL-4表达。结果：与正常对照组相比，用药组的体内抑瘤率均有明显差异（P〈0．01）；三物白散各组的胸腺、脾脏重量与正常对照组无明显差异，5-Fu组胸腺、脾脏重量与正常对照组相比差异显著（P〈0．05）；与正常对照组相比，体内试验三物白散各剂量组IL-2水平升高（P〈0．01），IL-4水平下降（P〈0．01）；体外试验除Ⅳ组的IL-2参数外，与体内试验相似。结论：三物白散在整体水平上具有确切的抗肿瘤免疫正相调节作用，其机静可能是通过逆转Th1／Th2漂移来实现的。     

三物白散对Ana-1巨噬细胞免疫功能的影响

目的:探讨三物白散(SWB)对巨噬细胞免疫功能的影响。方法:选用小鼠Ana-1巨噬细胞株,观察SWB对Ana-1细胞增殖、吞噬、趋化能力的影响,用放射免疫检测法检测SWB作用后的Ana-1细胞上清中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达。结果:细胞增值实验,SWB中小剂量组与空白组相比差异显著(P<0.05);吞噬实验,SWB大剂量组与空白组相比差异显著(P<0.05),并呈现剂量依赖关系;趋化实验,SWB各剂量组与空白组相比差异显著,呈现剂量依赖关系;与空白对照组相比,SWB各剂量组IL-1β水平升高,大剂量组IL-1β表达差异显著(P<0.05);IL-6、TNF-α的表达无显著差异。结论:SWB体外可显著活化巨噬细胞,促进增殖、提高吞噬能力,上调Th1型细胞因子IL-1β的表达。     

三物白散对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响

目的通过体外实验观察三物白散大鼠含药血清对人胃癌SGC-7901细胞的增殖、凋亡抑制作用及其机制。方法选择雄性SPF级大鼠随机分成4组,分别予以0.035、0.07、0.14g/（kg.d）三物白散及生理盐水灌胃,按＂通法＂制备三物白散大鼠含药血清。体外实验选择SGC-7901细胞,以5-氟尿嘧啶为阳性对照,采用四甲基偶氮唑蓝比色及吖啶橙、EB染色法检测低、中、高3组三物白散大鼠含药血清对SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响。结果不同剂量组的三物白散含药血清处理细胞12~72h后,各组OD比值均有不同程度的下降。且随三物白散含药血清质量浓度的增大、作用时间的延长,OD比值及存活率逐渐下降,且抑制率以高剂量三物白散含药血清作用48h为最高,可达69.2%。三物白散含药血清处理48h后的细胞中,低、中、高剂量三物白散含药血清作用SGC-7901细胞48h后各组的凋亡率依次为25%、32%、54%,并随质量浓度的升高、时间的延长而增加。高质量浓度的三物白散作用后,细胞凋亡率随作用时间的延长而增加。结论三物白散在一定剂量、时间范围内,能够抑制SGC-7901细胞增殖,并呈一定的剂量、时间依赖性。三物白散可诱导细胞凋亡,该作用呈一定的剂量、时间依赖性。     

三物白散治疗结核性渗出性胸膜炎大量积液10例

一、临床资料本组病例均符合结核性胸膜炎的诊断标准，并选择经X线摄片明确有大量胸腔积液征的患者。10例中男性6例，女性4例；年龄最小22岁，最大58岁，平均42岁。积液在第二肋以上者2例，第三助以上者5例，第四肋以上者3例。本组10例在治疗期间均未采取脚穿抽液的措施。二、治疗方法采用中药三物白散泻水以治标，配合抗结核西药以治本之法。三物白散：巴豆霜、川贝末、桔梗求各等量装入胶囊，每粒0．3克。首次量0．6克，每日服2次，早晚温开水送眼。若泻下不多，可饮热开水以助药力；若无泻下，可视病情加大药量，最大用量为1．2克，或用…     

三物白散加味方癌化学预防作用实验研究

目的：观察三物白散加味方癌化学预防作用。方法：进行三物白散加味方抗变、影响rasP21基因表达、抗氧化三项研究。结果：三物白散加味方中、大剂量组有抗变和降低rasP21基因表达作用；小剂量组有抗氧化作用。结论：从初步研究认为，三物白散加味方具有癌化学预防作用。     

“三物白散”抢救急性肾功衰竭

急性肾功衰竭属于祖国医学的关格、癃闭、呕逆、昏谵、痉厥等病症。因病势危重、变化多端 ,常中西医结合治疗。尤以顽固性呕逆伴尿闭、惊厥 ,在治疗中非常棘手 ,往往采取了中西医很多措施(西药扩容、利尿、纠酸、抗感染及对症治疗 ,中医辨证施治、先后用导赤、宣白承气鼻饲和保留灌肠 )病情未能控制 ,在患者生命危在旦夕之时 ,笔者应用温下涤浊的“三物白散”导泻 ,收到了较为满意的效果。现将“三物白散”治疗急性肾衰的方法及疗效介绍如下。　　临床资料　我组共收治 5例急性肾功衰竭患者 ,男 3例 ,女 2例 ;年龄 1 8～ 45岁 ,平均 32岁。 …     

三物白散加味方诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的：观察三物白散加味方诱导肿瘤细胞凋亡情况.方法：以三物白散加味方体外直接用药及含药血清加入人胃癌SGC-7901细胞中,观察细胞凋亡;制作S180荷瘤鼠肿瘤模型,观察用药后肿瘤细胞凋亡情况.结果：三物白散加味方直接用药中、大剂量组及含药血清3个剂量组能明显诱导肿瘤细胞凋亡.3个剂量组均能明显诱导S180荷瘤鼠肿瘤细胞凋亡.结论：三物白散加味方体内、体外实验均能诱导肿瘤细胞凋亡.     

三物白散对胃癌SGC-7901细胞凋亡及survivin基因表达的影响

目的观察三物白散药物血清对人胃癌SGC-7901细胞凋亡及survivin mRNA表达的影响。方法选择人胃癌细胞株SGC-7901,分为空白对照组、阳性对照组及三物白散低、中、高剂量组。三物白散药物血清干预SGC-7901细胞后,采用荧光染色法检测胃癌细胞的凋亡率,RT-PCR检测survivin mRNA的表达。结果不同剂量组的三物白散药物血清干预SGC-7901细胞后,与空白对照组比较,各组细胞的凋亡率升高,且细胞凋亡率随药物血清浓度的增大、干预时间的延长逐渐升高;三物白散各剂量组survivin mRNA的表达均有不同程度的下降,与空白对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）,且survivin mRNA表达随三物白散含药血清浓度的增大、干预时间的延长逐渐下降。结论三物白散可诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡,抑制survivin mRNA的表达。     

基于网络药理学探究三物白散治疗胃癌的机制

目的基于网络药理学的方法,探讨三物白散治疗胃癌的作用机制。方法分别利用TCMSP、 BATMAN-TCM数据库结合文献筛选,获得三物白散的活性成分及相关靶点;利用Cytoscape构建成分-靶点网络图;利用GEO、Genecards、OMIM数据库获得胃癌相关靶点;在线分析工具制作韦恩图获得三物白散作用于胃癌的靶基因;利用String网站构建靶基因的PPI网络;利用R软件获得PPI网络中的关键基因。将三物白散中主要活性成分与PPI中的关键靶基因进行分子对接。利用Metascape在线工具对靶基因进行GO(基因本体论富集)、KEGG(通路富集)分析、蛋白互作网络构建及模块分析。结果筛选得到三物白散的活性成分46个,相关靶点387个,作用于胃癌的靶点289个,基因富集分析结果涉及激素水平调节、血液循环的正调节、脂质代谢调节等过程,涉及通路包括癌症通路、脂肪细胞因子信号通路、PPAR信号通路、cAMP信号通路、细胞凋亡、HIF-1信号通路、TNF信号通路等。结论三物白散可能通过调节缺氧、炎症与代谢相关因子、通路,改善肿瘤微环境,从而发挥治疗胃癌作用。     

山豆根对小鼠黑色素瘤细胞B16-BL6生长、增殖的影响

目的研究山豆根对小鼠黑色素瘤细胞B16-BL6生长、增殖的影响。方法培养小鼠黑色素瘤细胞B16-BL6并随机分为对照组和处理组,对照组用不含药物的RMPI1640培养基进行处理,处理组分别采用含有400μg/ml、500μg/ml、600μg/ml、700μg/ml、800μg/ml山豆根提取物的RMPI1640培养基进行处理。采用细胞增殖抑制实验、黏附实验、侵袭重组基底膜实验、趋化性运动实验观察山豆根提取物对黑色素瘤细胞B16-BL6增殖、黏附、侵袭和转移的影响。结果山豆根提取物终浓度为700、800μg/ml时,B16-BL6细胞增殖生长OD值明显低于对照组(t=2.526,4.371,P0.05);山豆根提取物终浓度为500、600、700、800μg/ml时,黏附能力OD值明显低于对照组(t=4.856,8.515,8.926,12.357,P0.05),侵袭细胞数明显低于对照组(t=4.661,9.824,12.460,16.300,P0.05),趋化性运动细胞数明显低于对照组(t=2.698,3.906,6.012,7.974,P0.05)。结论山豆根具有抑制小鼠黑色素瘤细胞B16-BL6增殖、黏附、侵袭和转移的能力,且与药物剂量呈依赖性关系。     

三白汤治疗小儿肺炎120例

我们门诊部 (1 994年 1月至 1 997年 1 2月 ) 4年来 ,根据小儿肺炎临床特点 ,经中医辨证 ,采用自拟三白汤治疗小儿痰热闭肺型 (以下简称Ａ组 )和喘息型 (以下简称Ｂ组 )肺炎共 1 2 0例 ,据临床观察 ,取得了较满意的疗效 ,现初步小结如下 :1　临床资料两组病人共计 1 2 0例 ,其中Ａ组 80例、Ｂ组 40例 ,均属门诊病人。Ａ组男 5 2例、女 2 8例 ;Ｂ组男 2 5例、女 1 5例。年龄在 6个月以内 ,Ａ组 1 5例、Ｂ组 8例 ;6 +～ 1岁 ,Ａ组 46例、Ｂ组 1 8例 ;1 +岁～ 2岁以上 ,Ａ组 1 9例、Ｂ组 1 4例。病程最短 2天 ,最长 1 0天 ,Ａ组平均 4 3天 ,Ｂ…     

加味三物白散诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡及对细胞周期影响的研究

目的 :观察加味三物白散对人胃腺癌SGC - 790 1细胞生长的抑制作用 ,影响细胞周期及诱导人胃腺癌SGC -790 1细胞凋亡。方法 :采用MTT法 ,观察抑制率 ;应用流式细胞仪检测加味三物白散诱导人胃腺癌SGC - 790 1细胞凋亡和对细胞周期的影响。结果 :加味三物白散对人胃腺癌SGC - 790 1细胞生长有抑制作用 ,大、中、小剂量抑制率分别是 5 5 .75 %、4 2 .6 7%和 38.6 3% ,进一步研究发现中、大剂量组诱导细胞凋亡百分率分别为 9.0 6 %、96 .32 % ,与阴性对照组相比有明显差异 (P <0 .0 1) ;此外与阴性对照组相比 ,中、大剂量组使G0 -G1期细胞明显减少 ,G2 -M期明显增高 ,S期明显减少 ;小剂量组使G0 -G1期细胞明显增高 ,G2 -M期明显减少 ,S期减少。结论 :加味三物白散能抑制人胃腺癌SGC - 790 1细胞生长 ;其中、大剂量组可以明显诱导人胃腺癌SGC - 790 1细胞凋亡 ;并且加味三物白散对人胃腺癌SGC - 790 1细胞的增殖周期有影响     

中医治法对K562细胞增殖抑制及定向红细胞分化的实验研究

目的：研究滋养肝肾、温补脾肾、补益心脾等不同中医治法对人红白血病细胞株（K562）增殖抑制及定向红细胞分化的影响。方法：以K562细胞为体外模型,用台盼蓝拒染法检测滋养肝肾、温补脾肾、补益心脾等不同中医治法对K562细胞增殖的影响,用联苯胺染色法、分光光度法检测滋养肝肾、温补脾肾、补益心脾等不同中医治法诱导后血红蛋白细胞阳性率、细胞平均血红蛋白含量和细胞溶液中血红蛋白含量的变化。结果：经不同中医治法在体外对K562细胞作用后,滋养肝肾、补益心脾组细胞生长明显受到抑制;经不同中医治法诱导后K562细胞的联苯胺染色阳性率增高,合成血红蛋白的量提高。结论：滋养肝肾、补益心脾法在体外对K562细胞均有明显的增殖抑制作用,其中滋养肝肾法明显优于阳性对照羟基脲组;三种疗法均有诱导其向红系细胞分化的作用,其中滋养肝肾法明显优于阳性对照羟基脲组。     

栝蒌根散对糖尿病模型大鼠血糖、血脂的影响

目的:探讨栝蒌根散对糖尿病大鼠血糖、血脂的影响,分析其降糖作用与剂量之间的关系。方法:SPF级雄性Wistar大鼠,给予36 mg.kg-1链脲佐菌素(STZ)ip建立2型糖尿病模型。将成模大鼠按随机表随机分为模型组、盐酸二甲双胍组、参芪降糖颗粒组和栝蒌根散低、中、高(2,4,6 g.kg-1)剂量组,每组10只,每天ig相应的药物。10只正常大鼠作为正常组,每天ig2 mL生理盐水。ig前和ig 8周后各测一次空腹血糖和体重,最后从腹主动脉采血,化验各组大鼠的甘油三脂和胆固醇。结果:栝蒌根散低、高剂量均能降低链脲佐菌素所致糖尿病大鼠血糖(P<0.01),低剂量作用最强,中剂量无效。栝蒌根散3个剂量均能降低2型糖尿病大鼠血脂(P<0.05),但不能控制大鼠体重的下降。结论:栝蒌根散能降低糖尿病模型大鼠的血糖,其作用与剂量之间不存在量效关系。其降脂作用明显,但不能改变糖尿病大鼠体重下降的趋势。     

滋阴解毒化瘀方对系统性红斑狼疮患者临床疗效及免疫功能的影响

目的:观察滋阴解毒化瘀方对系统性红斑狼疮患者临床疗效及免疫功能的影响。方法:选择2013年4月—2015年6月在本院治疗的确诊为系统性红斑狼疮的患者76例,随机分为对照组和观察组,每组38例。对照组给予泼尼松治疗,观察组在对照组治疗的基础上加用自拟滋阴解毒化瘀方治疗。结果:两组患者治疗后中医证候积分与治疗前比较,均有显著改善(P0.05),且观察组治疗后优于对照组(P0.05);两组起效时间和皮损消退时间比较,观察组均优于对照组(P0.05);观察组治疗后血清CD4、CD8及CD4/CD8水平优于对照组(P0.05);对照组有效率73.7%,观察组有效率94.7%,观察组优于对照组(P0.05)。结论:滋阴解毒化瘀法治疗系统性红斑狼疮,可有效改善患者的临床症状,改善免疫功能,效果显著。     

复方乙肝口服液对肝损伤的保护作用及其对免疫功能的影响

目的：研究复方乙肝口服液对实验性肝损伤的保护作用和对免疫功能的影响。方法：以CCl4、D－GlaN损伤小鼠肝细胞,以环磷酰胺抑制免疫功能测定血清中ALT、溶菌酶、溶血素抗体、腹腔巨噬细胞吞噬功能及红细胞SOD的含量等。结果：乙肝口服液5．0、10．0g/kgig能明显抑制CCl4、D-GlaN小鼠ALT的升高,明显提高环磷酰胺引起免疫功能低下小鼠的溶菌酶含量,提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率,显增加红细胞中SOD含量。结论：复方乙肝口服液有显的保肝降酶和提高免疫功能的作用。     

人参总皂苷增强小鼠黑色素瘤B16细胞缝隙连接功能的实验研究

目的探讨人参总皂苷(total ginsenosides,TGs)对小鼠黑色素瘤B16细胞缝隙连接(Gap junction,GJ)功能的影响及其作用机制。方法 MTT法测TGs对B16细胞生长的影响,荧光显微镜结合荧光示踪法分析GJ功能变化,以各试验组受体细胞均数与对照组的比值作为评价GJ功能的指标,流式细胞仪检测对照组和实验组的绿色荧光供体细胞(G4)与双阴性受体细胞(G3)比值(G4/G3)变化分析GJ功能改变,Western blot分析连接蛋白(Connexin,Cx)表达。结果 1~8μmol·L-1TGs处理B16细胞48 h对其生长状态无明显影响;用1,2,4,8μmol·L-1TGs处理细胞48 h后,荧光显微镜下观察,TGs能明显提高B16细胞荧光染料Calcein传递,对照组和实验组G4/G3比值分别是0.06±0.01,0.09±0.02,0.10±0.01,0.12±0.03和0.13±0.02,各实验组G4/G3值明显高于对照组(P0.01);Western blot分析结果显示,用1,2,4,8μmol·L-1TGs处理B16细胞48h对其连接蛋白Cx32表达有明显的增强作用,但对Cx43和Cx26表达无影响。结论体外较低浓度TGs能够有效促进B16细胞GJ功能,并具有一定的剂量-效应关系。1~8μmol·L-1TGs虽能显著促进B16细胞Cx32蛋白的表达,但在本试验浓度范围内并无明显的量效关系,且对Cx43和Cx26表达无明显影响。     

茯苓多糖对B16黑色素瘤人工肺转移模型的影响

[目的]探讨茯苓多糖对B16黑色素瘤小鼠人工肺转移的影响,并对其作用机制进行初步研究。[方法]C57BL/6小鼠接种B16黑色素瘤,分为茯苓多糖高、低剂量组、顺铂组、模型组,茯苓多糖高、低剂量组分别给予每只小鼠茯苓多糖0.5 mg、0.33 mg,顺铂组给予顺铂0.04 mg,模型组给予生理盐水,接种瘤细胞后第2天开始尾静脉注射给药,隔天给药1次。观察小鼠一般状态,造模后21 d取肺,计数肺表面转移灶个数、HE染色检测肺微小转移灶个数,并检测外周血白细胞数量及脾质量、脾指数。[结果]顺铂能够抑制肺转移,同时降低小鼠体质量、外周血白细胞数量、脾质量和脾指数。而茯苓多糖高、低剂量组对B16荷瘤鼠的体质量无明显影响,茯苓多糖高剂量可明显降低肺表面转移灶个数,茯苓多糖高、低剂量可减少肺微小转移灶个数,高剂量组外周血白细胞数量明显降低,低剂量组与模型组无统计学差异,低剂量可增加B16荷瘤鼠的脾质量和脾指数,高剂量对B16荷瘤鼠的脾质量和脾指数无明显影响。茯苓多糖高、低剂量组脾质量和脾指数均高于顺铂组。[结论]茯苓多糖能够抑制尾静脉注射B16荷瘤小鼠肺转移,增加其脾质量和脾指数,无明显增加其外周血白细胞数量的作用,推测活化外周血白细胞,增强免疫功能可能参与茯苓多糖抑制肿瘤转移的机制。