金属蛋白酶抑制剂BB-94抑制Lewis肺癌生长和转移的实验研究

在肿瘤侵袭和转移过程中,癌细胞要多次穿越基底膜侵入周围组织。因此,对包括基底膜在内的细胞外基质的降解是肿瘤侵袭和转移的关键步骤之一。在这一复杂的过程中,绝非只是靠形态结构的改变所能完成,有多种蛋白水解酶参与降解基底膜及细胞外基质。其中基质金属蛋白酶(ＭＭＰ)发挥了极其重要的作用,促进了肿瘤的侵袭和转移。ＢＢ94(ｂａｔｉｍａｓｔａｔ)是新近研制的一种人工合成基质金属蛋白酶抑制剂,其化学结构与ＭＭＰ胶原底物酶切点附近3个氨基酸的基本结构相似,可对ＭＭＰ起到竞争抑制作用。文献[1～3]报道,ＢＢ94能够抑制癌细胞生长和…     

HAb18G/CD147拮抗肽对体内血管生成的影响

肿瘤的侵袭、转移过程是多因素、多步骤的过程 ,一般涉及肿瘤细胞黏附、运动 ,细胞外基质降解 ,肿瘤新生血管生成等多个环节[1] 。抗肿瘤血管生成是目前抗肿瘤转移药物研究的重要靶环节之一[2 ] 。ＣＤ14 7是新近命名的ＣＤ分子[3 ] ,又称为Ｅｍｍｐｒｉｎ ,其主要功能是诱导基质金属蛋白酶 (ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＭＭＰｓ)的产生 ,促进肿瘤的侵袭和转移[4] 。ＨＡｂ18Ｇ是本研究中心利用ＨＡｂ18单克隆抗体筛选获得的相关抗原分子 ,与ＣＤ14 7分子高度同源[5] ,具有促进肿瘤转移的作用[6,7] 。ＨＡｂ18Ｇ/Ｃ…     

金属蛋白酶抑制剂：临床失败中的希望之光

对于生物技术投资者来说 ,抑制基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)的药物就像是一座海市蜃楼 :令人向往却无法触及。ＭＭＰｓ是许多病理、生理过程中所需的重要酶 ,从理论上讲 ,是抗癌和抗炎新药研究最具有前景的靶标 ,然而大量涌现的临床失败使药物开发商变得谨慎起来。ＭＭＰｓ是可降解大部分细胞外基质成分 (胶原蛋白、弹性蛋白、层粘连蛋白、连接蛋白及蛋白多糖的蛋白核心 )的酶 ,已鉴定出的人类ＭＭＰｓ有 2 4种以上。目前为止 ,临床研究集中在将ＭＭＰｓ抑制剂用于阻断肿瘤中的血管生成 ,同时ＭＭＰｓ的活性也是肿瘤转移的检验印记。此外 ,Ｍ…     

食物成分影响肿瘤转移的研究进展

肿瘤转移是一个复杂的过程(ｍｅｔａｓｔａｔｉｃｃａｓｃａｄｅ),包括:肿瘤细胞增殖(ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ)与基底膜(ｂａｓｅｍｅｎｔｍｅｍｂｒａｎｅ,ＢＭ)及ＥＣＭ中的一些大分子蛋白质成分粘附(ａｄｈｅｓｉｏｎｓ),向细胞外基质(ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ,ＥＣＭ)浸润(ｉｎｖａｓｉｏｎｓ)、移动(ｍｉｇｒａｔｉｏｎ)、蛋白水解作用(ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ)和次级生长(ｓｅｃｏｎｄａｒｙｇｒｏｗｔｈ)。1　多不饱和脂肪酸(ＰＵＦＡｓ)对肿瘤转移的影响ＰＵＦＡｓ主要包括:ｎ6ＰＵＦＡｓ(ｐｏｌｙｕｎｓａｔｕ…     

原发性食管小细胞癌

原发性食管小细胞癌 (ｐｒｉｍａｒｙｅｓｏｐｈａｇｅａｌｓｍａｌｌ ｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏ ｍａｓ ,ＰＥＳＣ)是一种少见的食管恶性肿瘤 ,其生物学行为及治疗等均有别于食管鳞癌及腺癌 ,不但恶性程度高 ,易发生转移 ,而且治疗效果不佳。 195 2年Ｍｃｋｅｏｗｎ[1 ] 首先报道 2例。其后国内外报道日益增多。本文就ＰＥＳＣ的研究进展做一综述。1　流行病学ＰＥＳＣ国外自 195 2年至 2 0 0 1年仅报道不足 2 0 0例 ,约占同期食管癌的 0 .5 %～ 2 .4%。男女比例为 2∶1[2 ] 。在所有有关文献中 ,以日本学者报道的ＰＥＳＣ发生率最高 ,占全部…     

三氧化二砷对慢性髓细胞性白血病VEGF表达的影响

目的 研究慢性髓细胞性白血病(ＣＭＬ)患者血管内皮生长因子(ＶＥＧＦ)的表达及三氧化二砷(Ａｓ２Ｏ３)对其表达的影响。方法 采用酶联免疫吸附法(ＥＬＩＳＡ)检测正常人和初治ＣＭＬ患者骨髓细胞及ＣＭＬ细胞系Ｋ５６２细胞培养上清液中ＶＥＧＦ的含量。结果ＣＭＬ患者(ｎ＝２０)骨髓细胞培养上清液ＶＥＧＦ浓度为 ６４９．１６ｐｇ/ｍｌ,明显高于正常对照组的 １５２．１６ｐｇ/ｍｌ(Ｐ＜０．００１),而 ５×１０－６ｍｏｌ/ＬＡｓ２Ｏ３可明显降低ＶＥＧＦ的表达水平(Ｐ＜０．０５);细胞系Ｋ５６２有ＶＥＧＦ的过高表达,Ｋ５６２经２．５×１０－６ｍｏｌ/Ｌ及５×１０－６ｍｏl/Ｌ浓度Ａｓ２Ｏ３处理７２小时后ＶＥＧＦ浓度分别下降６６．４%和 ７８．０%。结论 ＶＥＧＦ在 ＣＭＬ患者骨髓细胞存在高表达;Ａｓ２Ｏ３可能通过抑制 ＶＥＧＦ的表达而阻断血管形成。     

高效毛细管电泳在临床体液中药物分析的应用

高效毛细管电泳 (ＨＰＣＥ)是以高电场为驱动力 ,在细内径毛细管内带电荷粒子按其淌度或分配系数的不同而进行分离的一种电泳新技术。由于其分离效能高、分析速度快、样品用量少 ,在中药成分[1] 、抗生素[2 ] 、生物大分子[3 ] 等分析方面应用较广 ,近来在体内药物分析中的应用逐渐增多。1　基本原理ＨＰＣＥ主要的分离模式[4 ] 分为毛细管区带电泳(ＣＺＥ)、胶束电动毛细管电泳 (ＭＥＣＣ)、毛细管凝胶电泳 (ＣＧＥ)、毛细管等电聚焦电泳 (ＣＩＥＦ)、毛细管等速电泳 (ＣＩＴＰ) ,而ＣＺＥ和ＭＥＣＣ是体内的药物分析中最常用的 2种模式。…     

抗癌新领域——基质金属蛋白酶抑制剂

肿瘤细胞的侵袭和转移是恶性肿瘤的主要特征也是导致癌症患者死亡的主要原因。肿瘤细胞的侵袭和转移是一个非常复杂的过程 ,它涉及到细胞外基质和基底膜的降解 ,以及新生血管的形成。在这一过程中 ,基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)扮演了重要角色。基质金属蛋白酶是一类维持机体组织细胞外基质正常的生理结构和功能所必需的蛋白水解酶 ,由于他们的活性部位都含有金属锌离子 ,因此被称为基质金属蛋白酶。它负责细胞外基质的正常更新代谢和重组 ,影响发育过程 ,并和许多疾病如肿瘤、关节炎有关。基质金属蛋白酶的发现源于对青蛙发育中形体变化原因…     

聚乙二醇修饰核糖核酸酶对癌细胞的毒性作用

牛胰核糖核酸酶Ａ (ｂｏｖｉｎｅｐａｎｃｒｅａｔｉｃｒｉｂｏｎｕｃｌｅａｓｅＡ ,ＲＮａｓｅ)的主要生理功能是控制细胞内ＲＮＡ的种类与数量分布 ;其药用价值受体内蛋白酶解 ,抗原抗体反应和Ｔ12 较短的限制[1,2 ] 。用生物相容、无抗原性的单甲氧基聚乙二醇(ｍｅｔｈｏｘｙｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ,ＭＰＥＧ)分子共价修饰ＲＮａｓｅ可以解决这些问题[3] 。本文发现ＭＰＥＧ修饰的ＲＮａｓｅ(ＭＰＥＧ ＲＮａｓｅ)对Ｋ5 6 2细胞有细胞毒性作用 ,这是天然ＲＮａｓｅ不具备的性质。1　材料与方法1.1　实验材料　Ｋ5 6 2细胞 …     

氨基胍抑制糖基化终产物促进大鼠胰星状细胞增殖和基质合成的作用

目的：探讨抗糖基化药物氨基胍（ＡＧ） 对高级糖基化终产物（ＡＧＥｓ） 促进大鼠胰星状细胞（ＰＳＣ）增殖和基质合成的干预作用。方法：用非同位素的溴脱氧尿苷（ＢｒｄＵ） 掺入法和时间分辨免疫荧光法测定ＰＳＣ 的增殖过程,以时间分辨免疫荧光法和免疫细胞化学法观察了ＡＧＥｓ 对大鼠ＰＳＣ 纤连蛋白合成的作用,并观察了氨基胍对上述效应的干预作用。结果：ＡＧＥｓ 能以浓度相关的方式明显增强ＰＳＣ的增殖和纤连蛋白的合成, ＡＧ 处理的ＡＧＥｓ上述效应明显减弱。结论：ＡＧ 对ＡＧＥｓ 促进ＰＳＣ增殖和基质合成有明显的抑制作用。     

人巨细胞病毒蛋白酶及其抑制剂的研究进展

人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）属于β家族疱疹病毒,ＨＣＭＶ蛋白酶在装配蛋白产生和病毒壳体成熟中具有重要作用,抑制ＨＣＭＶ蛋白酶可产生抗疱疹病毒药物,ＨＣＭＶ蛋白酶属丝氨酸蛋白酶类,以均二聚体为其唯一活性形式,其活性位点催化三联体的构成与典型的已知丝氨酸蛋白酶有明显不同。晶体结构数据显示ＨＣＭＶ蛋白酶单体只有一个结构域,由一个丝氨酸（Ｓｅｒ１３２）和两个组氨酸（Ｈｉｓ６３和Ｈｉｓ１５７）构成催化三联体,ＨＣＭＶ蛋白酶对序列Ｐ５－Ｐ５′肽段（ＧＶＶＮＡ／ＳＣＲＬＡ）水解活性最级;仍维持显著活性的最小肽段为Ｐ４－Ｐ４′。目前有关ＨＣＭＶ蛋白酶抑制剂的研究报道还比较少,其中以底物抑制剂较引人注目。     

cAMP反应元析结合蛋白在药物依赖形成中的作用

反复应用成瘾性药物引起中枢神经系统特定部位ｃＡＭＰ信号系统出现适应性改变,ｃＡＭＰ反应元件结合蛋白（ｃｙｃｌｉｃ ＡＭＰ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｅｌｅｍｅｎｔ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ,ＣＲＥＢ）是受ｃＡＭＰ调节的主要转录因子,在动物产生药物依赖时脑内ＣＲＥＢ含量及磷酸化程度发生变化,与动物躯体依赖和精神依赖有关。确定ＣＥＲＢ在药物依赖中的作用有益于阐明药物依赖分子机制及采取相应的防治措施。     

两种方法联合应用设计新类型的胶原酶抑制剂

杜邦默克制药公司的研究者采用组合化学和基于结构的配体设计方法，设计了一种新类型的化合物，它们能够抑制引起癌转移和关节炎的胶原酶。这项工作有利于获得更有效的抑制癌细胞转移和治疗关节炎的新药物。研究人员发现新的抑制剂可以诱导它们所抑制的胶原蛋白酶在活性位点产生意想不到的构象变化。这种破坏性的胶原酶属于称为基质金属蛋白酶（ＭＭＰ）家族，在其活性位点含有Ｚｎ２＋。其中一种酶ｓｔｒｏｍｅｌｙｓｉｎ（ＭＭＰ－３）可以为跨越细胞外基质的癌细胞开辟道路，而另一种酶，人嗜中性胶原酶（ＭＭＰ－８）在软骨胶原的保护性…     

肝纤维化的治疗现状与进展

肝纤维化（ｈｅｐａｔｉｃ　 ｆｉｂｒｏｓｉｓ）是各种慢性肝病发展为肝硬化的必经阶段,乙肝病毒变异型感染“小三阳”者２５％～４０％发展为肝硬化。肝纤维化的主要特点为细胞外基质（ＥＣＭ）增加,是 ＥＣＭ合成与降解失衡的结果［１］。有效的抑制 ＥＣＭ生成,加速其降解,能减缓、阻止乃至逆转肝纤维化的病理进程,控制肝硬化的形成与发展。直接作用于肝纤维化过程本身的药物,称为抗肝纤维化药（ａｎｔｉｆｉｂｒｏｔｉｃ ａｇｅｎｔｓ）［２］。随着对肝纤维化机制认识的不断深入,抗肝纤维化药物的研究也日趋深入,但迄今为止,…     

高剂量EEP方案治疗晚期胃癌39例报告

以鬼臼乙叉甙 (Ｅｔｏｐｓｉｄｅ ,Ｖｐ 1 6 )、阿霉素 (Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ ,ＡＤＭ)和顺铂 (Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ ,ＰＤＤ)组成的ＥＡＰ方案是迄今为止治疗晚期胃癌疗效最高的方案 ,但由于该方案骨髓抑制严重 ,限制了其应用。我院自 1 994年 1月至 1 998年 1 2月应用高剂量ＥＥＰ(Ｖｐ 1 6 ,ＥＰＩ,ＰＤＤ)方案 ,Ｇ ＣＳＦ支持治疗晚期胃癌 ,现报告如下。一、材料与方法1 .病例选择 :病例入选标准为年龄 1 8～ 75岁 ,病理学诊断为胃癌 ,ＴＮＭ分期为Ⅲｂ和Ⅳ ,未行手术或仅行姑息性减瘤手术 ,且有可测量病灶 ,ＫＰＳ≥ 5 0’ ,心肺肝…     

肿瘤基质金属蛋白酶的表达及其抑制剂的研究进展

基质金属蛋白酶 (matrixmetallproteinases ,MMP)广泛分布于动植物中 ,是细胞外基质 (ECM )降解过程中必不可少的酶 ,在正常稳定状态组织中MMP表达量极少 ,而在炎性细胞因子、激素、生长因子刺激下和细胞转化过程中其表达量上升 ,此过程涉及多种生理和病理过程。实验证明 ,瘤细胞侵袭转移能力与其产生蛋白酶降解ECM、基底膜的能力密切相关 ,MMP在肿瘤的浸润与转移中起重要作用 ,基质金属蛋白酶抑制剂 (TIMP)是MMP的天然抑制剂 ,二者的平衡在调节ECM的稳态中有重要作用。1　MMP在人类肿瘤组织中的表达大量的观察和实验资料表明MM…     

蝎毒活性肽对内皮细胞释放t-PA和PAI的影响

血管内皮细胞 (ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＶＥＣ)能合成和分泌组织型纤溶酶原激活物 (ｔｉｓｓｕｅｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒ ,ｔ ＰＡ) ,使纤溶酶原激活为纤溶酶 ,促进局部血栓溶解 ,ＶＥＣ还可分泌纤溶酶原激活物抑制剂 ( ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｉｎ ｈｉｂｉｔｏｒ,ＰＡＩ) ,当机体处于正常情况下ｔ ＰＡ与ＰＡＩ保持动态平衡 ,这对于维持血液纤溶和凝血系统的稳定至关重要 ,因此 ,血管内皮细胞在调节血栓的形成和溶解方面具有十分重要的作用。全蝎是名贵中药材 ,有祛风、…     

褪黑素对大鼠松果腺细胞产生前列腺素E_2的影响

采用松果腺细胞培养、前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）放射免疫测定等方法，研究了松果除分泌的褪黑素（ＭＴ）对松果腺细胞产生ＰＧＥ２的影响。结果表明：ＭＴ０．１～１０μｍｏｌ·Ｌ－１抑制松果腺细胞产生ＰＧＥ２，０．０１～１０μｍｏｌ·Ｌ－１对抗去甲肾上腺素刺激松果腺细胞产生ＰＧＥ２，且以１μｍｏｌ·Ｌ－１的作用最为明显。提示ＭＴ对松果腺细胞功能有负性调节作用。Ｐ＜０．０１图２ＭＴ对去甲肾上腺素刺激松果腺细胞（１０５ｃｅｌｌｓ）转引产生ＰＧＥ２的影响●－●：ＮＥ；○－○：ＮＥ＋ＭＴ；ｎ＝４与对照组比较，Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１；与对应的去甲肾上腺素比较，△Ｐ＜０．０５，△△Ｐ＜０．０１３讨论支配松果腺细胞的交感神经纤维在暗相时产生与释放大量去甲肾上腺素，作用于松果腺细胞膜上的β１、α１受体，双重受体激动后通过Ｇ蛋白使蛋白激酶Ｃ激活，Ｃａ２＋、Ｋ＋、花生四烯酸增多，继而使ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ产生明显增加，松果腺细胞内特有的合成ＭＴ的限速酶Ｎ－乙酰转移酶和羟基吲哚－０－甲基转移酶被激活，从血液中摄取的色氨酸迅速转化为ＭＴ。在ＭＴ合成过程中，ＰＧ起很重要作用，因α１受体激动可使ＰＧ产生增多，ＰＧ进而促进ｃＧＭＰ生成和ＭＴ的合成?     

金属蛋白酶及其组织抑制物在大肠癌侵袭和转移中的作用

癌细胞侵袭与转移是根治癌症的最大障碍,其发生机制还不完全清楚,但目前认为蛋白溶解酶对细胞外基质(ECM)的降解起关键作用。基质金属蛋白酶(Matrixmetallopro-tinases熏MMPs)是主要负责ECM降解的蛋白溶解酶,与细胞迁移和组织塑型有关。因此,这些MMPs在癌症扩散的病理生理学过程是目前关注的焦点。MMPs是一类需要锌、铜等金属离子作辅基的蛋白酶,目前已发现至少16种。它们几乎能降解ECM所有成分。依据其发现先后顺序可分为MMP1～19,根据作用底物,可分为间质胶原酶、IV型胶原酶、基质溶解素等。各种正常组织塑型,如胚胎发育、伤口…     

β-内酰胺酶抑制剂抑酶效应的研究

我们利用 3种由革兰阴性菌产生的标准ＴＥＭ型β 内酰胺酶 (ＴＥＭ 1、ＴＥＭ 2、ＴＥＭ 5 )研究 3种 β 内酰胺酶抑制剂(头孢噻肟、舒巴坦和克拉维酸 )的抑酶方式 ,目的是对临床合理使用抗菌素、寻找新的耐酶抗生素和新的酶抑制剂提供实验依据。1　材料与方法1.1　药品与试剂　头孢噻啶 (ｃｅｐｈａｌｏｒｉｄｉｎｅ,ＣＥＲ ,Ｓｉｇｍａ) ;头孢噻肟 (ｃｅｆｏｔａｘｉｍｅ ,ＣＴＸ ,北京第三制药厂生产 ) ;舒巴坦(ｓｕｌｂａｃｔａｍ ,Ｓｕｌ,Ｐｆｉｚｅｒ) ;克拉维酸 (ｃｌａｖｕｌａｎｉｃａｃｉｄ ,ＣＬＡ ,中国药品生物制品检定所 )。…