酶联免疫吸附试验法检测乙型肝炎病毒表面抗原的影响因素分析

乙型肝炎（下称乙肝）病毒用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测具有操作简便、特异性强、敏感性高、试剂成本低、快速等优点,目前在困内被广泛使用,但在操作中影响检验结果的因素也很多。为提高乙肝病毒的检测质量,本文通过对乙肝病毒表面抗原（HBsAg）的测定探讨其重要影响因素及解决方法,现报道如下。     

酶联免疫吸附试验法检测乙型肝炎病毒表面抗原的质量保证

酶联免疫吸附试验（ELISA）法是医学检验的免疫学检验方法之一,已经广泛应用到对病原微生物的免疫学检查试验中。本文对ELISA法检测乙型肝炎（下称乙肝）病毒表面抗原（HBsAg）的质量保证进行分析,报道如下。     

幼儿入托前乙型肝炎病毒表面抗原检测结果分析

目的 探讨闽清县幼儿入托入园前乙型肝炎(下称乙肝)病毒表面抗原携带情况.方法 8 111名儿童为1995～2006年新入托入园的幼儿,应用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测乙肝病毒表面抗原(HBsAg).结果 通过对8 111名幼儿的检测,共发现HBsAg阳性者184例,总阳性率为1.82%.结论 本区幼儿HBsAg阳性率呈逐年下降的趋势.     

酶免疫一步法检测乙型肝炎表面抗原影响因素探讨

乙型肝炎（下称乙肝）是一种严重危害人类健康的世界性传染病。我国是乙肝高发区，乙肝表面抗原（HBsAg）携带者高达10％～15％。HBsAg在乙肝病毒（HBV）感染的检测中一直是最为重要的标志物，是乙肝的早期诊断指标之一。因此，准确地检测HBsAg对于HBV感染的临床诊断、治疗以及避免医患纠纷的发生有着重要意义。目前国内最常用的HB—sAg测定方法为酶联免疫吸附试验（ELISA）中的双抗体夹心双位点一步法，该法简单、方便、快速，灵敏度较高，特异性较好。     

酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒表面抗原的影响因素

酶联免疫吸附试验（ELISA）法在免疫学检测中应用最广、最普遍,因其灵敏度高,准确性好,操作简单,无需特殊仪器,试验时问短,深受广大医学检验者喜爱。乙型肝炎（下称乙肝）表面抗原（HBsAg）的检测对诊断、治疗、预防及流行病学调查均有重要意义。目前,国内实验室多采用ELISA法进行检测,为提高HBsAg的检测质量,本文就其重要影响因素及解决方法报道如下。     

国产乙型肝炎病毒表面抗原酶联免疫吸附试验试剂盒的检测效果评价

目的:评价6种国产乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒的检测效果。方法:应用AXSYM全自动微粒子酶免疫化学发光分析仪检测测定后余留标本,对相关样品进行稀释,然后选取6种国产HBsAgELISA试剂盒进行检测,评价6种国产试剂盒的灵敏度、精密度、特异度、检测范围和钩状效应(Hook效应),确立临界值(cut-off)对应的浓度范围以及不同孵育时间对检测灵敏度的影响等。结果:6种试剂盒的灵敏度有一定差异,范围在0.40～0.60ng/mL之间。对低浓度标本,6种试剂盒的批内精密度变异系数(CV)分别为6.21%、9.45%、9.42%、13.04%、10.49%和4.84%;批间精密度CV分别为15.76%、19.12%、19.54%、23.89%、24.22%和14.99%。HBsAg质量浓度与临界值指数(COI)呈S型曲线关系。在本实验所分析的HBsAg浓度范围内未发现高剂量Hook效应。6种试剂盒临界值对应的质量浓度在0.3～0.5ng/mL之间。结论:国产HBsAgELISA试剂盒的灵敏度有待进一步提高。     

酶联免疫法检测乙型肝炎病毒表面抗原假阳性原因分析和解决办法

目的分析乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)检测时出现假阳性结果的原因及解决办法。方法用酶联法检测HBsAg。结果不同厂家及同厂家不同批号的试剂,标本处理,血样是否出现溶血,洗板、显色及检验者的操作等因素都影响HBsAg的检测结果。结论酶联法检测HBsAg需要合格的试剂盒,标本处理得当,加样时间合适,严格每一步操作。     

硫酸和盐酸作为检测乙型肝炎病毒表面抗原终止剂的比较

目的 比较酶联免疫吸附试验两种终止液的特点,寻找一种简单、有效、稳定的酶联免疫反应检测乙型肝炎两对半试验终止反应的终止液.方法 通过试剂盒提供的终止液H2SO4(1 mol/L)和自配的HCl(0.2 mol/L)作为酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎表面抗原的终止剂进行比较.结果 HCl(0.2 mol/L)和H2SO4(1 mol/L)差异有统计学意义.结论 HCl(0.2 mol/L)优于并可代替试剂盒提供的终止液H2SO4(1 mol/L).     

酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎表面抗原临界值标本复检分析

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的过程中影响因素较多,为确保检测质量,我们对初检HBsAg吸光度(A)值0.075～0.135(临界值设置为Cutoff±30%)的421例标本进行了复检.     

酶联免疫吸附试验法检测乙型肝炎病毒表面抗原阳性结果复检确认方法

目的 利用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBSAg),对阳性标本进行复检确认.方法 按试剂说明书测定HBsAg,对强阳性标本(S/CO≥4.0)用金标法进行确认,对弱阳性标本(S/CO＜4.0)留作双孔复检.结果 在强阳性标本中有18例,弱阳性标本中有87例为假阳性,假阳性率为0.17%.结论 对乙型肝炎病毒表面抗原阳性的标本,分别用金标法和双孔复检的方法进行确认实验,可以降低假阳性率,减少医疗纠纷,临床应用满意.     

血液保养液与肝素抗凝剂对HBsAg ELISA检测结果的影响

目的对无偿献血者血标本进行HBsAg检测时,分析血液保养液（CPD）与肝素抗凝剂对结果的影响。方法取4IU/mlHBsAg质控品,分别制备成不同的待检样本,即肝素抗凝剂组（对照组）和CPD保养液组（实验组）;应用ELISA试剂盒检测两组样本HBsAg,将所得S/CO值进行配对t检验。结果对照组S/CO值为8.81,实验组S/CO值为7.60,差异有统计学意义（t=5.67,P〈0.05）。结论采用ELISA法检测HBsAg时,含CPD保养液的样本比肝素抗凝剂样本结果的S/CO值低,应引起采供血机构的重视。     

ELISA法检测HBsAg灰区设置的探讨

目前国内对献血者血液HBsAg的检测多采用酶联免疫吸附试验即ELISA法。该试验以临界值(cut off值,简称CO值)作为判断阴阳性的界定标准。理想的实验结果是只有阳性或阴性两种情况。但实际检测工作中常会遇到一些献血者血液标本的OD值接近临界值,其结果难以判断,即灰区标本。在HBsAg感染人群中,部分血清(浆)HBsAg呈     

ECLIA和ELISA检测血清HBsAg的结果比较

目的 比较电化学发光免疫分析(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HBsAg结果。方法 采用ECLIA一步法和KLISA一步法、二步法测定定值血清中的HBsAg:用ELISA一步法和二步法检测经ECLlA筛选的190例HBsAg模式如下的临床标本：①HBsAg光放射强度(COI)在1-20，20例；②HBsAg COI在21-4000、160例；③HBsAg COI大于4000、6例；④HBsAg阴性(其COI值小于1)，HBeAg和HBcAb阳性4例；结果 ELISA一步法灵敏度为1ng／ml．二步法灵敏度为0．2ng／ml、ECLIA灵敏度为0．05ng／m1；在190例临床标本中。ELISA一步法阳性检出率为84．2％，二步法阳性检出率为92．6％．ECLIA阳性检出率为97，4％：结论 ELISA一步法受钩状效应(hook effect)影响明显，敏感度低。HBsAg漏检明显：ELISA二步法能较好地避免钓状效应，敏感度较高，HBsAg漏检率较低，但费时：而ECLIA灵敏度高．受HOOK效应影响较小、HBsAg漏检率低，且自动化程度高，检测时间短。     

ELISA法HBsAg检测试剂盒质量评价

目的比较国产ELISA法HBsAg检测试剂盒的质量差异,优选适宜于献血者HBsAg检测的试剂盒。方法应用HBsAg国家参考品对所购进的试剂盒进行质量评价。结果5个厂家试剂的阴性符合率、阳性符合率、总符合率、灵敏度和精密度存有一定差别,2个厂家试剂有假阳性出现,2个厂家的试剂有最低检出限量参考品未检出。结论不同厂家的试剂质量存在明显差异,因此试剂使用前必须进行质量抽检,综合评价其质量。选择灵敏度高、特异性强的试剂,以提高献血者HBsAg的检测质量。     

酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒表面抗原的全面质量控制前后对比分析

目的探讨建立全面质量控制体系对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果的影响。方法对未开展全面质量控制的2008年1～10月份2120例患者和全面开展质量控制后的2009年1～10月份2310例患者的HBsAg阳性率进行对比分析。结果 2008年前10个月阳性率为8.11%,而2009年前10个月阳性率为11.00%。两者比较,差异有统计学意义(χ2=10.239,P0.001)。结论全面开展质量控制后,用ELISA法检测HBsAg其阳性率有了明显提高。     

HBsAb阳性对酶标法HBsAg检测的影响

目的探讨乙型肝炎表面抗原(HBsAg)假阴性的产生及预防方法。方法应用全自动加样仪(ML-AT plus-Sampler),使加样针在不同的清洗次数下,同时加样12份含不同浓度HBsAb标本和12份含不同浓度HBsAg不同OD值标本,分别应用ELISA二步法检测HBsAg,观察其吸光度的变化。结果 12份含HBsAg标本在清洗次数逐渐减少的情况下,OD值都有不同程度的下降。HBsAb强阳性标本对OD值影响很大,在只清洗3次的情况下,HBsAg弱阳性标本开始出现假阴性;在不洗涤也不擦拭的情况下,4份HBsAg弱阳性出现假阴性。结论高浓度的乙型肝炎表面抗体会引起HBsAg检测结果假阴性;使用一次性加样枪头,可避免假阴性。     

ELISA检测592例乙肝表面抗原复检结果的分析

目的总结分析592例ELISA手工检测乙肝表面抗原的复检结果特点,进一步提高ELISA手工检测的质量。方法以0．7≤S／CO〈10作为复检范围,从67070例ELISA手工检测HBsAg的结果中筛选出592例进行复检,两次结果一致则报告结果;如不一致则再次ELISA复检或采用MEIA进行复检,以两次一致的ELISA或MEIA结果报告。分析初检时造成假阳性或假阴性结果的原因。结果按照2007年上海市临床检验中心复检要求,以0．7≤S／CO〈2为复检范围,复检率为0．48％（325／67070）;本实验室扩大复检范围,以0．7≤S／CO〈10为复检范围,复检率为0．88％（592／67070）,初复检结果符合率为65．88％（390／592）,初检假阴性率为1．35％（8／592）,初检假阳性率为32．77％（194／592）。结论严格遵守操作规程,根据实验室实际情况扩大复检范围,确保实验结果准确性。     

两种酶联免疫吸附法检测乙肝表面抗原的结果比较

目的 比较乙肝表面抗原-酶联免疫吸附试验一步法(简称一步法)和乙肝表面抗原-酶联免疫吸附试验二步法(简称二步法)检测乙肝表面抗原(HBsAg)的结果,研究钩状效应对一步法检测HBsAg结果的影响,评价二步法检测HBsAg的应用价值.方法 分别用一步法和二步法检测1200份无偿献血者初检标本,并用一步法(稀释法)检测怀疑存在钩状效应的标本6份.结果 一步法检测出29份HBsAg阳性,二步法检测出35份HBsAg阳性,6份一步法检测结果阴性怀疑存在钩状效应的标本进行1∶5、1∶10、1∶30、1∶60倍稀释后,再采用一步法进行检测,分别有6份、6份、4份、3份结果转为阳性.结论 采用二步法或一步法同时对标本进行一定倍数稀释后检测,可以克服钩状效应,提高检测的敏感度.     

金免疫层析试验检测HBsAg等项目结果分析

目的 比较金免疫层析试验(GICA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的结果符合率,以了解GICA的特异性与敏感度.方法 用GICA和ELISA平行检测受检者血清标本HBsAg.结果 通过1 205份血清样本的分析,发现GICA和ELISA检测HBsAg的结果符合率为99.09%,GICA检测HBsAg存在漏检(即假阴性).结论 GICA较ELISA敏感度低,用GICA检测HBsAg等项目存在一定程度的漏检率,GICA只能筛查HBsAg,检测HBsAg低含量的血清标本不宜使用.GICA快速诊断法可用来大规模普查人群HBsAg的感染情况,也适用于临床急症标本等快速检测的需要.     

ELISA法检测HBsAg影响结果的重要因素的分析

目的确定温育温度、时间和条件对定性酶联免疫吸附试验（ELISA）测定结果的影响，为临床检验提供最佳方案。方法温育温度分别设为37℃组和室温组。37℃组温育时间分别为45分钟、60分钟、75分钟、90分钟和120分钟。其中室温组温育中又分别采用振荡和静置两种条件，温育时间分别为45分钟、1小时、2小时和4小时。检测阴性血清和0．2、0．5、1、2、5ng／ml HBsAg系列定值血清，观察这些条件下标本测定S／CO比值的差异。结果在同一温育温度下，所有被检血清的S／CO比值均随着测定温育时间的延长而增大，浓度越低表现越为明显，以0．2ng／ml的样本，温育2小时的S／CO比值与温育1小时相比，均有明显的增加，0．2ng／ml的样本由按CUT-OFF值判断为阴性而转为阳性。对照组阴性血清的S／CO比值在温育各时间则变化不大。室温组在振动状态下反应较之静止状态下的反应，S／CO比值均有明显增加。结论温育条件对ELISA测定结果有很大影响，尤其是弱阳性标本，由于温育条件不当会造成假阴性，增加传染机率。