丹参复合有效部位抗HIV-1活性的实验研究

目的 研究和评价云南丹参复合有效部位(DS MEF)的抗艾滋病病毒1型（human immunodeficiency virus type 1,HIV-1）活性。方法 采用放射性核素3H掺入法、荧光方法和酶联免疫吸附实验分别测定其对HIV-1逆转录酶、蛋白酶和整合酶的抑制作用;采用传代人T淋巴细胞MT- 4细胞、慢性HIV-1 ⅢB感染传代人T淋巴细胞H 9细胞和健康人新鲜外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),用HIV-1实验室传代的ⅢB病毒株和临床分离的齐多夫定(zidovudine,AZT)敏感株018a及AZT耐药株018c感染细胞测定其对细胞的毒性和在细胞培养内对HIV-1 P 24的抑制作用;灌胃或腹腔注射1次不同剂量DS MEF后测定其对昆明种小鼠的急性毒性。结果 DS-MEF抑制HIV-1整合酶、逆转录酶和蛋白酶的半数抑制浓度（50% inhibiting concentration,IC50）分别为(2.59±0.50)mg/L、(27.39±11.18)mg/L和(9.38±2.45)mg/L;对MT 4细胞毒性的半数有毒浓度（50% toxic concentration,TC50）为(1319±607)mg/L,抗HIV-1活性的IC50为(0.224±0.163)mg/L,选择指数(selected index, SI)为58.7;在HIV-1ⅢB慢性感染的H 9细胞培养内对细胞毒性的TC50为(18.11±9.84)mg/L,抑制HIV 1 P 24抗原的IC50为(17.230±21.114)mg/L,SI为1.1。对PBMC细胞毒性的TC50为(288.70±0.08)mg/L,抑制AZT敏感株HIV-1 018a的IC50为(26.42±11.16)mg/L,SI为10.9,抑制AZT耐药株HIV-1 018c的IC50为(27.87±5.35)mg/L,SI为10.4;与AZT和奈韦拉平均有协同抗HIV-1的作用,联合指数分别为0.78和0.67。灌胃20 g/kg DS-MEF对小鼠无明显毒性,无毒剂量>20 g/kg,腹腔注射后对小鼠的半数致死剂量为1.18 g/kg。结论 DS- MEF毒性小,具有多环节多功能地抑制HIV-1的作用。     

叶下珠有效部位抗鸭乙肝炎病毒及体外抗HBV活性的研究

本观察了叶下珠有效部位总提取物对鸭乙型肝炎病毒感染模型的影响。结果150、300、600mg/kg ig2周和1个月均可使血清DHBV－DNA滴度总体水平明显降低,停药后回升不明显。用药1个月还可使ALT明显降低,肝组织病理改变减轻。体外试验70、100μg/ml能抑制2．2．15细胞培养上清液中的HBeAg、HBV－DNA。     

朝鲜白头翁抗炎有效部位活性成分研究

目的：对朝鲜白头翁抗炎有效部位进行化学成分分离,以进一步明确朝鲜白头翁抗炎有效部位的药效物质。方法：采用正相硅胶、反相ODS柱色谱及高效制备液相色谱分离纯化朝鲜白头翁抗炎有效部位中的化合物,并根据理化特征结合NMR波谱学数据分析鉴定化合物的结构。结果：对朝鲜白头翁抗炎有效部位进行系统的化学成分分离,共分离得到11个化合物,分别鉴定为落叶松脂醇（1）、落叶松脂醇-4-O-B-D-葡萄糖苷（2）、（1S,2R,3S）-dimethyl-1,2,3,4-tetrahydro-3,6,7-trihy-droxy-1-（3’,4’-dihydroxyphenyl）naphthalene-2,3-dicarboxylate（3）、23-Hydroxy-3B-[（O-α-L-arabinopyranosyl）oxy]lup-20（29）-en-28-oicacid28-O-13-D-glucopyranosylester（4）、23-Hydroxy-3B-[（0-α-L-rhamnopyranosyl-（1→2）-α-L-arabinopyranosyl）oxy]lup-20（29）-en-oicacid28-O-D-D-glucopyranosylester（5）、impressicacid（6）、3α,11α,23-trihydroxy-lup-20（29）-en-28-oicacid（7）、3-O-B-D-glucopyranosy13α,11α-dihy-droxy-lup-20（29）-en-28-oicacid（8）、3-O-β-D-glucopyranosyl-（1→2）-p-D-glucopyranosyl-27-oxo-betulinicacid-28-0-β-D-glucopyranoside（9）、Kalopanax-saponinB（10）和AcanthopanaxsaponinCP3（11）。结论：朝鲜白头翁抗炎有效部位的主要成分为木脂素和三萜类化合物,其中化合物1、2、6、7、8和9为该属植物中首次分离得到。     

板蓝根抗流感病毒有效部位的筛选

利用系统溶剂分离法和阳离子对树脂吸附交换,对板蓝根的化学成分进行了分离,再利用鸡胚羊膜腔半体内法进行抗流感病毒活性实验,最后证明活性部位为亲水性的,被阳离子吸附部分。     

东北红豆杉抗肿瘤有效部位的活性研究

东北红豆杉 (Ｔ .ｃｕｓｐｉｄａｔａＳｉｅｂ＆Ｚｕｃｃ)系红豆科红豆杉属植物 ,主产于我国东北地区 ,药用其植物枝叶 ,有抑菌、抗癌、通经利尿之功效 ,临床上将其应用于恶性肿瘤的治疗[1、2 ] 。经不同的提取工艺及分离方法对该植物的抗肿瘤有效部位进行了筛选 ,初步确定了东北红豆杉抗肿瘤作用有效部位 ,本文对其抗肿瘤作用及其作用机理进行了系统研究 ,以阐明其有效性。1　实验材料1 .1　实验动物　　昆明种小白鼠 ,雄性 ,体重 2 0± 2ｇ,由黑龙江中医药大学实验动物中心提供 ;Ｌ615小鼠 ,由天津血液病研究所提供。1 .2　瘤株　　小鼠肉…     

紫萁贯众抗炎有效部位的研究

目的:确定紫萁贯众抗炎作用有效部位,为进一步研究紫萁贯众抗炎作用的活性成份奠定基础。方法:通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验研究紫萁贯众各极性部位的抗炎活性。结果:紫萁贯众各极性部位对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响均具抑制作用,乙酸乙酯低剂量及正丁醇高剂量与地塞米松的抗炎效果相近。结论:中药紫萁贯众的乙酸乙酯部位和正丁醇部位为抗炎有效部位。     

金钱草抗炎利胆有效部位研究

目的：手找金钱草抗炎利胆有效部位。方法：采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验和醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高实验对金钱草各提取部位进行了抗炎活性筛选，用小鼠及大鼠胆汁分泌实验进行利胆活性筛选。结果：金钱草醇提物和乙酸乙酯提取物能显著抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀和醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性亢进，明显促进小鼠和大鼠胆汁的分泌。结论：乙酸乙酯提取部分可能是金钱草抗炎利胆的有效部位。     

救必应抑菌抗炎有效部位筛选

目的:提取分离救必应,得到各不同的极性部位,进行抑菌和抗炎实验筛选.方法:以不同极性的有机溶剂提取分离救必应,各部位用试管稀释法抑菌筛选,效果显著部位先进行二甲苯诱导小鼠耳肿胀和棉球诱导大鼠肉芽肿的抗炎实验筛选,再以硅胶柱层析洗脱分离,进一步抑菌实验筛选.结果:救必应乙醇提取部位具有较强的抑菌和抗炎作用,蒸馏水提取部位有较强抑菌作用,但无抗炎作用.柱层析分离筛选之后,抑菌部位主要发生在乙醇提取部位以甲醇:氯仿(1:1)洗脱部分,水提取部位90%乙醇和70%乙醇洗脱部分.     

延胡索抗心肌缺血有效部位化学成分研究

目的:研究延胡索抗心肌缺血有效部位的化学成分。方法:用各种现代色谱分离方法分离延胡索有效部位中的化学成分;用波谱技术(IR、UV、MS、D和D-NMR)鉴定结构。结果:分离并鉴定了9个生物碱类化合物,分别为四氢非洲防己碱(1)、降氧化北美黄连次碱(2)、corunine(3)、脱氢延胡索碱(4)、dehydrocorybulbine(5)、非洲防己碱(6)、黄连碱(7)、巴马汀(8)和小檗碱(9)。结论:化合物2、3、5为首次从该植物中分出。本文还对化合物(3)的NMR谱数据进行了归属。     

茅莓抗脑缺血有效部位的药理活性筛选

目的:筛选茅莓提取物抗脑缺血的有效部位。方法:使用不同极性的溶剂分别提取茅莓得到不同的部位。采用不同的动物模型,分别观察茅莓各提取物对断尾小鼠出血时间的影响;对肝素化小鼠出血时间和出血量的影响;对小鼠常压耐缺氧生存时间的影响;对断头小鼠喘气时间的影响;对结扎小鼠双侧总动脉6h存活率的影响。结果:小鼠灌胃给予茅莓各提取物3d后,正丁醇萃取物能非常显著的延长断尾小鼠出血时间;对肝素化小鼠出血量明显增加;延长小鼠常压缺氧生存时间;延长断头小鼠喘气时间;降低结扎双侧总动脉小鼠死亡率。结论:正丁醇萃取物对脑缺血缺氧有明显的保护作用。经过化学成分确认,正丁醇萃取物——茅莓总皂苷是茅莓抗脑缺血的有效部位。     

五倍子乙醇提取物对140株肠球菌体外抗菌活性观察

目的观察五倍子乙醇提取物对肠球菌的体外抗菌活性.方法采用新的中药抑菌实验方法对五倍子乙醇提取物进行140株肠球菌的最低抑菌浓度测定.结果五倍子乙醇提取物对93株粪肠球菌、40株屎肠球菌和7株其它肠球菌的MIC90分别为0.315、0.63、0.63mg/mL.结论五倍子乙醇提取物对140株肠球菌具有较强的抑菌力,说明五倍子是极具开发前景的抗感染中药.     

五倍子提取物对224株肠球菌的体外抗菌活性观察

目的观察五倍子提取物对肠球菌的体外抗菌活性.方法采用新的中药抑菌实验方法对五倍子提取物进行224株肠球菌的最低抑菌浓度测定.结果五倍子提取物对169株耐粪肠球菌(enterococcus faecalis)和51株屎肠球菌(enterococcus faecium)的MIC50、MIC90分别为0.072、0.072 mg/mL和0.288、0.575 mg/mL.结论五倍子提取物对224株肠球菌具有较强的抑菌力,说明五倍子是极具开发前景的抗感染中药.     

五倍子乙醇提取物对金葡菌的体外抗菌研究

目的观察五倍子乙醇提取物对金黄色葡萄球菌(MRSA和MSSA)的体外抗菌活性.方法采用中药抑菌实验方法对五倍子乙醇提取物进行了112株金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度测定.结果五倍子乙醇提取物对84株耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)和28株甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(methicillin-sensitive staphylococcus aureus,MSSA)的MIC50、MIC90分别为0.315、0.315和0.63、0.315 mg/mL.结论五倍子乙醇提取物对金黄色葡萄球菌(84株MRSA和28株MSSA)具有较强的抑菌活性.     

五倍子提取物喷雾膜剂体外释放评价

目的:建立五倍子提取物喷雾膜剂的体外释放度测定方法,并考察其体外释药特性.方法:以没食子酸为考察指标,采用改良Franz扩散池装置,以半透膜为体外渗透屏障,HPLC测定接收液中没食子酸的含量,计算体外释放度.结果:促渗剂对五倍子提取物喷雾膜剂的释药效果影响不明显,方程拟合以一级动力学方程拟合效果最好.结论:五倍子提取物喷雾膜剂体外释放良好,具有一级动力学特征,不使用促渗剂即可达到较好的释放效果.     

五倍子乙醇提取物对124株表皮葡萄球菌体外抗菌活性的观察

目的观察五倍子乙醇提取物对表皮葡萄球菌的体外抗菌活性.方法采用新的中药抑菌实验方法对五倍子乙醇提取物进行124株表皮葡萄球菌的最低抑菌浓度测定.结果五倍子乙醇提取物对43株耐甲氧西林表皮葡萄球菌(methi cillin-resi stant staphylococcus epidermidi s,MRSE)和81株甲氧西林敏感的表皮葡萄球菌(methicillin-sensitive staphylococcus epidermidi s,MSSE)的MIC50、MIC90分别为0.072、0.072、0.288、0.144 mg/mL.结论五倍子乙醇提取物对124株表皮葡萄球菌具有较强的抑菌力,说明五倍子是极具开发前景的抗感染中药.     

五倍子提取物对表皮葡萄球菌的抗菌作用及其扫描和透射电镜观察

目的观察五倍子乙醇提取物对表皮葡萄球菌的体外抗菌活性及其在电镜下菌细胞形态超微结构的变化.方法采用新的中药抑菌实验方法对五倍子乙醇提取物进行236株表皮葡萄球菌的最低抑菌浓度测定,同时用电镜观察用药后细菌细胞的形态改变.结果五倍子乙醇提取物对127株耐甲氧西林的表皮葡萄球菌(methicillin-resi stant staphylococcus epidermidi s,MRSE)和109株甲氧西林敏感的表皮葡萄球菌(methicillin-sensitive staphylococcus epidermidis,MSSE)的MIC90分别为0.575、0.288 mg/mL;在电镜下观察经五倍子处理的表皮葡萄球菌菌细胞的超微结构,扫描电镜显示菌细胞形态大小不等,排列不整齐,大多数菌细胞的细胞壁破裂;在透射电镜下,菌细胞细胞壁结构、层次不请,胞浆膜层次不分明,细胞质内含物大多消失,细胞浆内包含体和染色体模糊不清.结论五倍子乙醇提取物对236株表皮葡萄球菌具有较强的抗菌作用.     

五倍子醇提液对假单胞铜绿杆菌生物膜的影响

目的研究五倍子醇提液对假单胞铜绿杆菌生物膜的影响。方法采用试管对倍稀释法测定五倍子醇提液对假单胞铜绿杆菌的最小抑菌浓度（Minimal Inhibitory Concentration，MIC）。采用平板改良体外复制假单胞铜绿杆菌生物膜模型，并检测五倍子醇提液的不同MIC浓度对假单胞铜绿杆菌生物膜的影响作用。结果五倍子醇提液对假单胞铜绿杆菌的MIC为31．25mg／ml，1．5倍的MIC（46．8mg／ml）能使生物膜活菌数明显减少，但不能完全清除生物膜上的细菌，2倍的MIC（62．5mg／ml）对细菌生物膜有完全清除作用。结论五倍子对铜绿假单胞菌生物膜有清除效应，但还需要进行临床用药研究。     

五倍子提取物对海洋污损菌的抑制作用

目的：体外试验观察五倍子不同极性部分提取物对海洋污损菌的抑制活性。方法：平皿孔穴法。结果：五倍子乙酸乙酯、乙醇、水提取物对海洋中假单孢菌属、气单孢菌属、产碱菌属、黄杆菌属、弧菌属、发光杆菌属、莫拉氏菌属、色杆菌属、肠杆菌属等9个菌属均表现出较强的抑制活性，五倍子的石油醚与氯伪部分排除误差没有活性。结论：五倍子乙酸乙酯、乙醇、水提取物对上述9个菌属呈较高的体外广谱抗菌活性，为寻找新型的生物环保型防污材料以及进一步研究提供了理论依据，开拓了中药研究的新领域。     

五倍子水煎剂对100株溶血葡萄球菌等CNS的体外抗菌活性观察

【目的】采用新的中药抑菌实验方法对五倍子水煎剂进行了100株溶血葡萄球菌等凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)体外抗菌活性检测。【方法】将五倍子水煎剂采用醇脂稀释法，用M—H琼脂对五倍子等进行定量抗菌实验。【结果】五倍子水煎剂对溶血葡萄球菌(staphylococcus heamolyticus)等凝固酶阴性葡萄球菌的抗菌活性均较好，其MICl如均为0．051mg／mL(1：10240)，对溶血葡萄球菌和里昂葡萄球菌(S．lugdunensis)的MICm均为0．203mg／mL(1：2560)，对44株人葡萄球菌(S．hominis)等的MIG90为0．203mg／mL(1：2560)。【结论】此项研究为临床治疗由凝固酶阴性葡萄球菌引起的感染，提供了实验依据。     

五倍子抑制流感病毒神经氨酸酶活性及活性部位的UPLC-Q-TOF-MS分析

目的:研究五倍子的流感病毒神经氨酸酶抑制活性,并采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOF-MS)对其活性部位化学成分进行分析。方法:采用神经氨酸酶抑制剂筛选试剂盒检测五倍子乙酸乙酯、乙醇、石油醚及水提取物对流感病毒神经氨酸酶的抑制作用。采用Acquity UPLC BEH C_(18)色谱柱,以0.1%甲酸水-甲醇溶液为流动相,梯度洗脱,电喷雾离子源(ESI)负离子模式,扫描抗神经氨酸酶活性较强的乙酸乙酯及乙醇部位并采集数据。结果:质量浓度为75 mg·L~(-1)时,五倍子4个提取物均显示了一定的神经氨酸酶抑制活性。五倍子的乙酸乙酯、乙醇提取物活性较强,抑制率分别为69.64%,78.24%。从2个提取物中分析鉴定出18个化合物。其中五没食子酸酰基葡萄糖、鞣花酸、没食子酸显示不同程度的神经氨酸酶抑制活性,半数抑制浓度(IC50)分别为46.15,143.42,249.51μmol·L~(-1)。结论:该研究表明五倍子具有较强的抑制神经氨酸酶活性,通过UPLC-Q-TOF-MS明确了五倍子提取物中18个主要成分,为五倍子抗病毒活性研究及其作用机制提供了依据。