前列腺素E1药理性预适应对缺血-再灌注豚鼠心室肌细胞ATP敏感性钾通道的影响

目的：研究前列腺素E1（PGE1）药理性预适应对缺血再灌注豚鼠心室肌细胞ATP敏感性钾通道（KArv）电流的影响,以探讨PGE,对缺血再灌注心肌的药理性预适应的作用机制。方法：用Langendorff法制作离体豚鼠心脏缺血再灌注损伤模型,并进行不同浓度PGE1的预处理,随后采用酶解消化的方法分离单个豚鼠心室肌细胞,利用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞的KATP电流的变化。结果：单纯缺血再灌注时KATp通道电流为1．41±0．58pA／pF（11=8）,不同浓度PGE1（14μg／L、42μg／L、126μg／L）预处理后,KAXp通道电流分别增加为2．14±0．30pA／pF（n=12,P（0．05）、2．51±0．25pA／pF（n=8,P〈0．05）和4．04±0．97pA／pF（n=9。P（0．05）。结论：PGE1药理性预适应可激活缺血再灌注心肌细胞KATP通道,并呈浓度依赖性促进缺血再灌注豚鼠心室肌细胞KATP通道的开放,提示PGE1药理性预适应对抗缺血一再灌注心肌细胞损伤的作用机制与促进缺血再灌注心肌细胞KATP通道的开放有关。     

葡萄糖对豚鼠心室肌细胞跨膜离子电流的影响

目的观察葡萄糖对豚鼠心室肌细胞膜APD,IK1,IK,ICa-L的影响.方法采用全细胞膜片技术记录单个豚鼠心室肌细胞膜的动作电位时程和离子电流.比较0、10和20mmol·L-1葡萄糖对心室肌细胞跨膜离子电流的作用.结果(1)与10 mmol·L-1葡萄糖相比,0和20mmol·L-1均可使豚鼠心室肌细胞的APD缩短(P＜0.05);(2)在细胞外葡萄糖浓度为10 mmol·L-1时,内向整流钾电流IK1的电流密度最大,标准化I-V曲线显示0和20mmol·L-1葡萄糖均可抑制IK1,并使I-V曲线左移,其翻转电位从-72.4移至-64.6 mV;(3)与mmol·L-1葡萄糖相比,0和20mmol·L-1葡萄糖均可增加ICa-L的电流幅度和电流密度.当钳制电位为10 mV,细胞外葡萄糖浓度为0 mmol·L-1时,ICa-L的电流密度为(-8.03±0.82)pA/pF(n=8),而10mmol·L-1和20mmol·L-1葡萄糖分别使电流密度增加为(-5.45±0.67)pA/pF和(-6.50±0.56)pA/pF;(4)当钳制电压为 70mV,细胞外葡萄糖浓度为0、10和20 mmol·L-1时,IK的电流密度分别为(18.96±2.86)pA/pF,(8.66±1.87)pA/pF,(15.32±3.12)pA/pF.结论细胞外不同浓度的葡萄糖可使豚鼠心室肌细胞APD,IK1,IK,ICa-L发生改变.细胞外葡萄糖浓度为0和20mmol·L-1对细胞膜离子电流产生相似的影响.     

陈旧性心肌梗死时兔心室肌细胞瞬间外向钾电流的变化

目的观察陈旧性心肌梗死时心室肌细胞瞬间外向钾电流(Ito)的变化,探讨心律失常发生的离子机制.方法采用结扎兔冠状动脉左前降支的方法建立急性心肌梗死动物模型,2个月后处死动物并分离心室肌细胞,应用膜片钳全细胞记录方法,观察心肌梗死后2个月心外膜梗死区(MI)、远离梗死区(REM)与正常对照组(CON)心室肌细胞Ito的变化.结果①心肌梗死后2个月REM组心肌细胞电容为(155.7±5.8)pF,明显大于CON组的(120.3±6.2)pF和MI组的(130.4±7.8)pF(P＜0.05),MI组与CON组相比无统计学差异(P＞0.05).②Ito电流密度(+60mV时)的对比显示,CON组为(17.4±5.2)pA/pF(n=16),MI组为(10.6±4.1)pA/pF(n=18),明显低于CON组(P＜0.01);REM组为(13.2±4.1)pA/pF(n=23),明显低于CON组(P＜0.01),但明显高于MI组(P＜0.05).结论心肌梗死后心室肌细胞Ito电流密度的变化,可能是导致折返性室性心律失常的离子基础.     

环维黄杨星D延长大鼠心室肌细胞APD作用的分子机制研究

目的　研究环维黄杨星D对分离的大鼠心室肌细胞内向整流钾电流 (IK1 )、瞬时外向钾电流 (Ito)、L 型钙电流(ICa L)和动作电位时程 (APD)的影响。方法　采用全细胞膜片钳技术记录大鼠心室肌细胞IK1 、Ito、ICa L 和APD。结果　 1和10 μmol·L- 1 环维黄杨星D明显延长分离大鼠心室肌细胞APD50 和APD90 ,10 μmol·L- 1 可明显降低静息膜电位 (RP)。环维黄杨星D对IK1 内向电流和外向电流均有明显抑制作用 ,当指令电压为 - 10 0mV时 ,1和 10 μmol·L- 1 环维黄杨星D分别使IK1 电流密度从给药前的 ( - 8.0± 1.1)pA pF降至 ( - 4 .1± 0 .7)pA pF和 ( - 3.4± 0 .8)pA pF ;当指令电压 - 30mV时 ,分别使IK1 电流密度从 ( 1.10± 0 .2 4 )pA pF降至 ( 0 .6 1± 0 .18)pA pF和 ( 0 .36± 0 .11)pA pF ;在钳制电位从 0到 + 6 0mV之间 ,环维黄杨星D明显抑制Ito,当指令电压 4 0mV时 ,1和 10 μmol·L- 1 环维黄杨星D分别使Ito电流密度从给药前的 ( 8.9± 2 .0 )pA pF降至 ( 5 .5± 1.2 )pA pF和 ( 4 .9± 0 .9)pA pF。环维黄杨星D浓度依赖性抑制ICa L,在指令电压为 10mV时 ,1和 10 μmol·L- 1 分别使ICa L电流密度从给药前的 ( - 9.9± 1.8)pA pF降至 ( - 6 .4± 1.4 )pA pF和 ( - 4 .2± 0 .6 )pA pF。结论　环     

陈旧性心肌梗死时兔心室肌细胞瞬间外向钾电流的变化

目的　观察陈旧性心肌梗死时心室肌细胞瞬间外向钾电流 (Ito)的变化 ,探讨心律失常发生的离子机制。方法　采用结扎兔冠状动脉左前降支的方法建立急性心肌梗死动物模型 ,2个月后处死动物并分离心室肌细胞 ,应用膜片钳全细胞记录方法 ,观察心肌梗死后 2个月心外膜梗死区 (MI)、远离梗死区 (REM )与正常对照组 (CON)心室肌细胞Ito的变化。结果　①心肌梗死后 2个月REM组心肌细胞电容为 ( 15 5 .7± 5 .8)pF ,明显大于CON组的 ( 12 0 .3± 6.2 ) pF和MI组的( 13 0 .4± 7.8) pF(P <0 0 5 ) ,MI组与CON组相比无统计学差异 (P >0 0 5 )。②Ito电流密度 ( +60mV时 )的对比显示 ,CON组为 ( 17.4± 5 .2 ) pA pF (n =16) ,MI组为 ( 10 6± 4 1) pA pF (n =18) ,明显低于CON组 (P <0 0 1) ;REM组为 ( 13 .2± 4 1)pA pF(n =2 3 ) ,明显低于CON组 (P <0 0 1) ,但明显高于MI组 (P <0 0 5 )。 结论　心肌梗死后心室肌细胞Ito电流密度的变化 ,可能是导致折返性室性心律失常的离子基础     

冬虫夏草水提液对单个心室肌细胞钾通道的影响

目的　观察冬虫夏草水提液对豚鼠及大鼠心室肌细胞钾通道的作用 ,探讨冬虫夏草的抗心律失常作用机制。方法　应用全细胞膜片钳技术记录冬虫夏草水提物对豚鼠单个心室肌细胞内向整流钾电流 (IK1)、延迟整流钾电流 (IK)及大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流 (Ito)的影响。结果　应用 0 1g·L-1(生药浓度 )冬虫夏草水提液使豚鼠单个心室肌细胞内向整流钾电流在实验电压 - 12 0mV时从给药前(- 36 37± 5 15 ) pA/pF减少到 (- 2 9 70± 5 90 ) pA/ pF(n=5 ,P <0 0 5 ) ;延迟整流钾电流在实验电压 +70mV时 ,从给药前 (9 2 1± 2 4 2 ) pA/ pF增加至 (11 5 4± 2 98)pA/ pF(n =6 ,P <0 0 1) ;使大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流 (Ito)在实验电压 +5 0mV时 ,从给药前 (13 36± 0 88) pA/ pF增加至 (16 4 8± 1 0 9) (n =4 ,P <0 0 1)。结论　冬虫夏草抗心律失常作用与它对心肌细胞钾通道的作用有关。它增加IK,Ito的同时抑制IK1,将会使动作电位时程缩短而不至于发生早后除极和迟后除极     

瞬时外向钾电流在糖尿病心肌病电重构中的作用

目的：探讨糖尿病心肌病（DCM）大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流（Ito）的变化,了解其在电重构中的作用。方法选用20只健康成年SD大鼠,随机分为对照组（n=10）和DCM组（n=10）,并通过病理组织学证实为DCM心肌病理学改变。分别对两组大鼠采用改进的耐钙成年大鼠急性酶分离方法分离心肌细胞,运用膜片钳技术以全细胞模式分别记录两组大鼠心室肌单细胞的Ito和膜电容,并分析比较两组大鼠心室肌Ito的变化。结果与对照组比较,DCM组大鼠左心室心肌细胞的Ito电流密度显著低于对照组[＋70 mV时,（16.80±9.10） pA/pF v s（36.25±5.20）pA/pF]（P〈0.05）,DCM组的Ito的I-V曲线明显较对照组下移。结论 DCM的Ito数量明显减少,在DCM心肌电重构中起着重要作用。 Ito的减少及Ito通道的分布密度不同,可导致动作电位时程与有效不应期发生变化,可能与临床严重心律失常的发生有关。     

药物相关性尖端扭转型室性心动过速性别差异的离子通道研究

目的　探讨药物相关性尖端扭转型室性心动过速 (TdP)发生率性别差异的离子流基础。方法　♀、♂兔各 2 0只 ,酶解法分得左室心尖部单个细胞 ,应用全细胞膜片钳技术记录APD、Ito、IK、IK1和ICa ,L。结果　♀、♂兔心肌细胞膜电容差异无显著性 (P >0 0 5 )。♀兔APD90 (5 6 0 4± 2 6 5ms,n =15 )比♂兔APD90 (489 0± 2 0 7)ms ,n =14长 (P <0 0 5 )。IK ,tail、Ito、IK1和ICa,L在♀兔分别为 (0 71± 0 0 5 )pA/ pF、n =17,(8 2 8± 1 0 3) pA/pF、n =18,(2 4 5± 3 6 ) pA/ pF、n =12 ,(9 0± 2 3)pA/ pF、n =15 ,在♂兔分别为 (0 84± 0 0 7) pA/pF、n =18,(8 6 0± 1 2 0 ) pA/pF、n =18,(2 5 9± 4 5 ) pA/pF、n =14 ,(9 3± 2 6 )pA/ pF、n =16。♀兔IK ,tail明显低于♂兔 (P <0 0 5 ) ,而Ito、IK1和ICa,L在♀、♂兔差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　♀兔IK ,tail较低可能是♀兔APD90 较♂兔长及更易发生药物相关性TdP的原因。     

雷米普利对兔心肌梗死后心室肌短暂外向钾电流变化的影响

目的探讨血管紧张素转化酶抑制剂雷米普利对兔心肌梗死后室性心律失常发生的影响及其可能机制。方法将24只家兔完全随机分为假手术组、心肌梗死组和雷米普利组,每组8只。3组均在无菌条件下开胸,其中心肌梗死组和雷米普利组分别结扎左冠状动脉前降支。雷米普利组术后第2天给予雷米普利1mg／（kg·d）灌胃,3组均喂养12周。3组家兔分别在心肌梗死前、心肌梗死后12周记录程序刺激诱发的室性心动过速／心室颤动（VT／VF）发生次数,并采用全细胞膜片钳技术记录短暂外向钾电流（Ito）的变化。结果心肌梗死后12周,雷米普利组VT／VF的发生次数明显低于心肌梗死组[（3．0±0．6）比（12．7±1．5）,P〈0．05];假手术组、心肌梗死组和雷米普利组Ito电流密度分别为（8．69±0．57）pA／pF、（4．71±0．43）pA／pF和（7．32±0．68）pA／pF,心肌梗死组显著高于假手术组及雷米普利组（P〈0．05）;雷米普利组与假手术组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论长期服用雷米普利可明显降低家兔心肌梗死后VT／VF的发生,其机制可能与抑制家兔心肌梗死后It0有关。     

苦参碱对缺血性心室肌细胞快速延迟整流钾电流的作用

目的观察苦参碱对病理条件下(缺血、酸中毒)单个心室肌细胞快速延迟整流钾电流(rapid component of delayed rectifier potassium current,IKr)的作用,初步探讨苦参碱治疗缺血性心律失常的作用机制。方法冠状动脉左前降支结扎建立家兔心肌梗死模型,应用全细胞膜片钳技术记录酶解法分离的心肌梗死模型家兔苦参碱灌胃1mon后右心室心肌细胞IKr的变化。在pH=7·4和pH=6·5的条件下,应用全细胞膜片钳技术记录苦参碱对酶解法分离的豚鼠心室肌细胞IKr的作用。结果在正常细胞外液(pH=7·4)的条件下苦参碱(50μmol·L-1)降低IKr,在刺激电压为+60mV时,IKr电流密度由(12·15±0·70)pA/pF降低至(9·22±0·65)pA/pF(n=8,P<0·05)。在细胞外液酸化(pH=6·5)的条件下苦参碱(50μmol·L-1)仍表现抑制IKr电流的作用,在刺激电压为+60mV时,IKr电流密度由(7·05±0·41)pA/pF降低至(5·76±0·28)pA/pF(n=8,P<0·05)。家兔冠状动脉结扎1mon后,在刺激电压为+60mV时,心肌梗死组家兔心室肌细胞IKr电流密度为(1·17±0·12)pA/pF较正常组(1·70±0·11)pA/pF降低(n=12,P<0·05)。苦参碱组(8mg·kg-1·d-1)家兔心室肌细胞IKr电流密度为(0·86±0·25)pA/pF较心梗组降低(n=12,P<0·05)。结论苦参碱阻断心室肌细胞IKr,可能是其延长有效不应期,降低异位节律的发生率,治疗心律失常的机制之一。苦参碱对酸化条件及长期心肌缺血后心室肌细胞IKr仍表现出明显的抑制作用,表明其对心肌梗死后心律失常有效。     

3,5,4＇-三甲基白藜芦醇对豚鼠心室肌细胞钠电流和钾电流的影响

目的研究3,5,4＇-三甲基白藜芦醇（trans-resveratrol derivative3,5,4＇-trimethoxystilbene,TMS）对豚鼠心室肌细胞钠电流（INa）和钾电流（IK1）的直接作用,探讨其心肌保护作用。方法用全细胞膜片钳技术记录TMS对单个心室肌细胞INa和IK1的作用。结果TMS（10μmol·L^-1）可快速抑制豚鼠心室肌细胞INa,用药后3min左右即开始起效,10min时抑制率为（36.8±5.6）%（P〈0.005）,洗脱后可完全恢复;1,3μmol·L^-1TMS未影响INa大小。TMS不改变INa的最大激活电压,也不影响IK1的大小。10μmol·L-1使半数最大失活电压（V1/2）由（-87.0±3.3）mV变化到（-96.7±3.5）mV（P〈0.001）,使失活曲线斜率（S）由（4.9±0.3）mV变化到（5.4±0.3）mV（P〈0.01）;使半数最大激活电压（V1/2）（-38.9±1.4）mV变化到（-47.3±1.3）mV（P〈0.001）,未改变激活S。结论TMS可直接作用于豚鼠心室肌细胞,快速抑制INa,且此作用快速、可逆。     

Heterogeneity of the properties of INa in epicardial and endocardial cells of rat ventricle

1. Ventricular I(Na) heterogeneity was investigated in adult rat hearts. Differences in transient outward potassium current (Ito) were used to confirm isolation of subepicardial and subendocardial cells. Mean peak Ito was 6.0 +/- 0.7 and 1.6 +/- 0.45 pA/pF in epicardial and endocardial cells, respectively (P < < 0.01). 2. Maximum sodium conductance was smaller in subendocardial cells compared with subepicardial cells (2.39 +/- 0.11 vs 2.78 +/- 0.12 nS/pF, respectively; n=17 for both; 0.01 < P < 0.05) and 50% activation occurred at a slightly more negative potential (-47.6 +/- 0.8 vs -44.9 +/- 0.9 mV, respectively; n=10 for both; 0.01 < P < 0.05). 3. The potential for 50% inactivation was not significantly different in subepicardial compared with subendocardial cells (72.2 +/- 1.0 vs 72.8 +/- 2.2 mV, respectively; n=17 for both; NS). 4. Persistent sodium current density appeared smaller in subendocardial (n =19) compared with subepicardial (n=11) cells (at a test potential of -25 mV current, density was 0.118 +/- 0.041 vs 0.144 +/- 0.085 pA/pF, respectively), although this was not statistically significant due to large variability between cells. 5. Mathematical modelling of the cardiac action potential indicated that the combined effects of differences in current density and voltage dependence of sodium currents are unlikely to contribute to ventricular action potential heterogeneity between epicardial and endocardial cells.     

尾加压素Ⅱ对大鼠心室肌细胞L-型钙电流的影响

目的 研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)对大鼠心室肌细胞L-型钙电流(Ica-L)的影响。方法 利用全细胞膜片钳技术,观察给予不同浓度的UⅡ灌流后,大鼠心室肌细胞Ica-L的变化。结果 运用全细胞膜片钳技术,在单个心室肌细胞上给予不同浓度的UⅡ(10-9～10-5mol/L)灌流5min后,Ica-L峰值下降分别为(6.7±1.8)pA/pF,(5.9±2.0)pA/pF,(5.4±2.2)pA/pF,(4.5±2.0)pA/pF,(3.8±1.8)pA/pF,与对照组(8.0±1.2)pA/pF相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 UⅡ呈浓度依赖性地抑制大鼠心室肌细胞Ica-L强度;UⅡ可能通过抑制心室肌细胞Ica-L而发挥其心功能抑制作用。     

Decreases of voltage-dependent K^＋ currents densities in ventricular myocytes of guinea pigs by chronic oxidant stress

INTRODUCTION Intracellular K concentration plays an importantrole in the regulation of apoptosis process[1]. ExcessiveK efflux and intracellular K depletion may be respon-sible for the cell shrinkage and apoptotic death[2,3]. Cel-lular K homeostasis is maintained by K efflux and K uptake mechanism. Voltage-dependent K currents arethe major pathways for the K efflux, which indicatesthat voltage-dependent K currents are involved in theapoptosis. Several studies reported th…     

红霉素对小鼠海马神经元电压依赖性钾电流的影响

目的:研究红霉素对小鼠海马神经元电压依赖性钾电流的影响。方法:采用分离新生小鼠海马细胞和全细胞膜片钳技术的方法,观察给予红霉素前后海马神经元细胞电压依赖性钾电流的变化和电流-电压曲线的改变。结果:红霉素可抑制小鼠海马细胞电压依赖性钾电流,使电流峰值由(810.67±250.86)pA下降至(529.96±171.83)pA(P<0.05);给予系列去极化脉冲刺激海马神经元,随着刺激电压强度的增强,钾外向电流增加,电压-电流曲线右移,但不改变曲线的形态。结论:红霉素可抑制小鼠海马神经元电压依赖性钾电流,并可能通过中枢机制来影响其调节胃肠运动的效应。     

当归补血颗粒对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护机制研究

目的 研究当归补血颗粒对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用,探究可能的保护机制。方法 采用无创动脉夹阻断肾蒂血管构建大鼠肾缺血再灌注损伤模型,肾微透析技术结合HPLC测定腺苷及其代谢产物含量;免疫组化法测定肾组织Bax、Bcl-2、iNOS蛋白表达。结果 假手术组腺苷、次黄嘌呤和肌苷的含量分别为（0.57±0.11）,（3.14±0.20）,（0.16±0.03）μmol·L^-1,保持稳定并作为各实验组基准值,肾缺血再灌注损伤后90 min,模型组升高至（8.61±0.62）,（10.92±1.14）,（0.85±0.05）μmol·L^-1,而当归补血颗粒组升高至（6.91±0.67）,（6.04±0.67）,（0.61±0.13）μmol·L^-1,明显低于模型组（P〈0.05）。免疫组化显示,与假手术组比较,肾缺血再灌注损伤后各组大鼠肾组织细胞中Bcl-2、Bax、iNOS蛋白表达显著增强（P〈0.01）。再灌注后,当归补血颗粒组与模型组同时间点比较Bcl-2蛋白表达明显增强（P〈0.05）,而Bax和iNOS蛋白表达明显减弱（P〈0.05）。结论 当归补血颗粒对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护机制可能与抑制ATP降解,上调Bcl-2基因表达,下调Bax、iNOS基因表达有关。     

N-甲基小檗胺对人心房肌细胞瞬时外向钾电流和延迟整流钾电流的作用(英文)

目的　动物实验表明N 甲基小檗胺 (NMB)通过抑制豚鼠心室肌细胞ATP敏感性钾电流和钙电流来发挥抗心律失常和抗心肌缺血作用 ,故进一步研究NMB对人心肌细胞电流的作用。方法　膜片钳制技术全细胞记录模式研究NMB对人心房肌细胞瞬时外向钾电流 (Ito)和延迟整流钾电流 (IK)的作用。结果　指令电位为 +60mV时 ,NMB 0 .1 ,1 ,1 0 μmol·L-1 分别使Ito幅值下降 (1 6± 4) % ,(2 5±4) %和 (49± 3) % ,使IK 幅值下降 (42± 6) % ,(47±7) %和(65± 3) %。结论　NMB对人心房肌细胞Ito和IK 均有抑制作用。