人白细胞介素24真核表达载体的构建及其在HepG2细胞中的表达

目的 构建人白细胞介素24(human interleukin-24,hIL-24)真核表达载体,并在HepG2细胞中稳定表达,为进一步研究其抗肿瘤作用奠定基础.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),从植物血凝素活化的人外周血单个核细胞中克隆得到hIL-24基因目的 片段.应用DNA重组技术将IL-24PCR产物双酶切后定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),转化大肠杆菌DHSα获得重组载体,进行PCR、酶切及测序鉴定.应用脂质体将鉴定正确的重组质粒转染至HepG2细胞,用G418筛选稳定转染细胞株.采用RT-PCR检测稳定转染细胞HepG2中IL-24 mRNA的表达.结果 通过RT-PCR获得与预期大小一致约600 bp的IL-24基因片段;重组载体pcDNA3.1(+)-IL-24经PCR、双酶切及测序证实,IL-24 eDNA片段已正确插入真核表达载体中;在稳定转染的HepG2细胞株中可见到IL-24 mRNA表达.结论 成功构建了hIL-24真核表达载体pcDNA3.1(+)-IL-24,并获得了稳定转染该重组质粒的HepG2细胞株.     

阿托伐他汀对急性心肌梗死白细胞介素-6水平的影响

目的 探讨阿托伐他汀对急性心肌梗死白细胞介素-6(IL-6)水平的影响.方法 2014年2月到2016年7月选择在我院诊治的急性心肌梗死患者190例,根据随机信封抽签原则分为观察组与对照组各95例,对照组给予急诊PCI治疗,观察组在对照组治疗的基础上口服阿托伐他汀治疗,两组都治疗观察4周.结果 观察组与对照组治疗的有效率分别为98.0％与88.4％,差异具有统计学意义(P＜0.05).治疗后观察组与对照组的血清IL-6值分别为12.45±3.95μg·L-1和19.58±3.03μg·L-1,都明显低于治疗前的34.11 ±4.58μg·L-1和34.58±4.09μg·L-1 (P ＜0.05),且观察组治疗后的血清IL-6值明显低于对照组(P＜0.05).结论 阿托伐他汀辅助治疗急性心肌梗死能抑制IL-6的表达,提高治疗效果,有很好的应用价值.     

匹伐他汀和阿托伐他汀诱发HepG2细胞发生胰岛素抵抗

目的研究匹伐他汀和阿托伐他汀诱发Hep G2细胞发生胰岛素抵抗的作用。方法 Hep G2细胞分别给予胰岛素0.5μmol·L-1,匹伐他汀1,10和100μmol·L-1,阿托伐他汀1,10和100μmol·L-1,以及阿托伐他汀100μmol·L-1+MK886 100μmol·L-1。48,72和96 h后检测细胞残余[125I]胰岛素结合率,[3H]D-葡萄糖摄取率,糖原和三酰甘油(TG)含量;作用48 h时细胞载脂蛋白A5(Apo A5)mRNA、Apo A5蛋白和Akt信号通路。结果与阴性对照组相比,匹伐他汀和阿托伐他汀对残余[125I]胰岛素结合率和糖原含量无明显作用。阿托伐他汀100μmol·L-1增加TG含量(mg·g蛋白:0.71±0.04 vs 1.51±0.05,P<0.05),降低[3H]D-葡萄糖摄取率〔37.2±3.2 vs(26.7±1.9)μmol·g-1·h-1,P<0.05),减少磷酸化Akt表达水平(0.92±0.09 vs 0.32±0.02,P<0.05),升高Apo A5 mRNA(0.30±0.02 vs 0.69±0.06,P<0.05)和蛋白表达水平(0.30±0.04 vs0.91±0.03,P<0.05),与胰岛素0.5μmol·L-1组类似。阿托伐他汀100μmol·L-1上述作用与作用时间呈正相关(r=0.729,P<0.05),而MK886可拮抗这些作用。结论阿托伐他汀100μmol·L-1时间依赖性地增强Apo A5表达,导致细胞糖脂代谢异常,诱发Hep G2细胞胰岛素抵抗。     

脑内注射白细胞介素－1β对淋巴结细胞应激免疫抑制因子生成的影响

脑内注射白细胞介素－１β对淋巴结细胞应激免疫抑制因子生成的影响李怡凡，左永昌，邵黎，宋德懋，丁桂凤，范少光（北京医科大学生理学系，北京医科大学免疫学系北京１０００８３）我室以前的工作发现束缚应激后，动物血清内出现一类能抑制淋巴细胞转化的因子，进一步的...     

氟伐他汀对高糖大鼠肾小球系膜细胞转化生长因子β1的影响

目的观察高糖大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)转化生长因子β1(TGF-β1)的变化以及氟伐他汀对其影响。方法体外培养HBZY-1细胞,将其分成以下几组:正常组、高糖组、甘露醇对照组、3个浓度氟伐他汀组。24 h后进行细胞形态观察,MTT法测定并计算细胞存活率和抑制率。RT-PCR法测定各组TGF-β1 mRNA的表达。Western blot法、免疫细胞化学法测定各组TGF-β1蛋白表达及分布。结果与正常组相比,HBZY-1细胞在高糖刺激下,TGF-β1 mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.05)。与高糖组相比,氟伐他汀组TGF-β1 mRNA及蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论高糖环境可促使HBZY-1细胞TGF-β1异常表达;而氟伐他汀可阻抑高糖对HBZY-1细胞TGF-β1的活化而发挥肾脏保护作用。     

脑内注射白细胞介素-1β对淋巴结细胞应激免疫抑制因子生成的影响

our previous work showed that a suppressive factor( a protein with largemolecular weight in serum was induced by restraint stress in mice and rats,which suppressed Con Ainduced lymphocyte proliferation.It was also found that the generation of serum suppressive factorwas under control of the central nervous system.Our further study showed thatintracerebroventricular(icv )injection of interleukin 1 receptor antagonist(IL-1Ra)antagonised thegeneration of serum suppressive factor induced by restraint stress and icv injection of interleukin-1β(IL-1β)increased the generation of the suppressive factor.Our experiment also showed that the serumsuppressive factor induced by restraint stress was first made in lymph tissue and then released intoblood.The present work was designed to investigate the role of IL-1 in the brain in generation of thesuppressive factor in lymph node in mice.Icv injection of IL-1β( 1 pg/mouse) was shown tosignificantly increase the generation of the suppressive factor in lymph node.Icv injection of IL-1Ra,however ,antagonised generation of the suppressive factor.In mice without restraint stress,both thesuppressive factor in serum and in lymph node were found to be induced in dose-dependent manner byicv injection of IL-1β.Taken together,these results suggest that IL-1β in brain played a veryimportant role in generation of the suppressive factor in lymph node.The positive correlation betweenthe suppressive action of lymph node and of serum added to the evidence that lymph tissue is probablythe source of the serum suppressive factor.     

白细胞介素1β转化酶抑制剂对胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡的诱导

目的 探讨白细胞介索(IL)1β转化酶(ICE)抑制剂诱导急性胰腺炎腺泡细胞凋亡的作用.方法 120只SD大鼠随机分为假手术对照组(S)、胰腺炎组(P)和ICE抑制剂干预组(Ⅰ),每组40只.各组造模后在2、6、12和24 h 4个时间点分别检测10只大鼠.Ⅰ组于制模前48 h开始腹腔注射ICE抑制剂0.25 mg/100 mg体质量,间隔12 h注射一次.P组仪同时注射等量生理盐水.应用ELISA方法、细胞凋亡原位标记(TUNEL)染色等检测血清中淀粉酶、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1β和胰腺细胞凋亡.结果 HE染色见胰腺组织中典型的细胞核固缩及凋亡小体形成.Ⅰ组各个时间点病理学评分和血淀粉酶、TNF-α、IL-1βp浓度均明显低于P组,胰腺细胞凋亡指数显著高于P组(P<0.01).结论 ICE抑制剂能减轻急性胰腺炎严重程度,其机制可能与其对炎症介质的抑制和诱导胰腺腺泡细胞的凋亡有关.     

白细胞介素1β对人胃粘膜正常上皮细胞增殖的影响

目的研究白细胞介素1β（IL-1β）对人胃粘膜正常上皮细胞（GES-1）株增殖的影响。方法用IL广1β与GES-1细胞培养，用3^H-Tdr掺入法测定及MTT比色法分析检测总活细胞数来估计GES-1细胞DNA合成及细胞生成情况。结果IL-1β以剂量依赖性增加GES-1细胞DNA合成及细胞数量。IL-1β对GES-1细胞的增殖作用可被IL-1ra阻断，IL-1β抗体对此无抑制作用。结论IL-1β刺激可引起GES-1细胞的增殖。IL-1β是GES-1细胞的生长因子，在调节GES-1细胞增殖中有重要作用。IL-1β涉及幽门螺杆菌感染胃粘膜细胞的高增殖反应和胃癌的致癌过程。     

白藜芦醇对兔实验性骨关节炎白细胞介素-1β表达的影响

目的:研究白藜芦醇干预兔实验性骨关节炎模型动物后关节软骨、滑膜细胞白细胞介素-1β合成的变化,探讨其治疗骨关节炎的效果和作用机制。方法:36只新西兰大白兔,随机抽取6只,作为正常对照组(A组),其余30只参考文献方法,制备兔OA模型,术后4周,经X线和病理改变证实造模成功后,将造模动物随机分为:模型组(B组)、阳性药物对照组(C组)(双醋瑞因1 mg·kg-1·d-1)、受试药物高剂量组(D1组)(白藜芦醇120 mg·kg-1·d-1)、中剂量组(D2组)(白藜芦醇60 mg·kg-1·d-1)、低剂量组(D3组)(白藜芦醇30 mg·kg-1·d-1),每组6只。并按设定剂量每日灌胃给药,连续给药6周后,处死动物,切取股骨内髁软骨标本,脱水石蜡包埋后切片,用免疫组化法检测软骨细胞中IL-1β水平。结果:受试药物组(D1组、D2组、D3组)软骨细胞中IL-1β阳性细胞分别为(21.8±3.8)%,(26.1±13.3)%,(30.4±4.9)%,明显低于模型组(B组)(49.1±5.5)%和阳性药物对照组(C组)(36.0±4.0)%,(P<0.01)。结论:高、中剂量的白藜芦醇能抑制模型组动物软骨细胞合成IL-1β,其能力优于阳性对照药物。     

阿托伐他汀对急性冠脉综合征患者白细胞介素6和肿瘤坏死因子的影响

目的 探讨阿托伐他汀对急性冠脉综合征（ACS）患者血清白细胞介素6（IL-6）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平变化的影响。方法将ACS患者48例随机分为阿托伐他汀组25例和常规治疗组23例,分别于治疗前及治疗4周后采用放射免疫分析方法行血清IL-6及TNF—α检测。结果ACS患者治疗前血清IL-6、TNF-α水平均明显高于对照组（均P〈0．01）。阿托伐他汀组治疗后血清IL-6（0．67±0．05）μg/L、TNF-μ（65．1±13．2）μg／L水平均明显低于治疗前,但仍高于对照组（均P〈0．05）。常规治疗组患者治疗后血清IL-6（0．74±0．08）μg／L、TNF—±（73．6±12．0）μg／L降低不明显（P〉0．05）。结论IL-6、TNF-α水平升高与ACS发病密切相关,阿托伐他汀可降低ACS患者血IL-6、TNF—α水平,具有减轻病变部位炎性反应和保护内皮细胞的作用。     

阿托伐他汀对不稳定性心绞痛患者生长分化因子15、白细胞介素6的影响

不稳定性心绞痛（UA）是临床常见病、多发病,易出现心肌梗死等心血管事件。目前研究表明,UA患者尽早应用他汀类药物能够有效预防心血管事件发生。2009年1月至2011年1月,我们观察了阿托伐他汀对UA患者血清生长分化因子15（GDF-15）、白细胞介素6（IL-6）及预后的影响,以探讨其作用机制,现报告如下。1资料与方法1.1一般资料120例患者均来自我院,符合UA诊断标准[1],排除严重心、肝、肾功能不全者。患者随机分为治疗1组60例,男45例,女15例,平均年龄（58.45±9.28）岁,平均     

氟伐他汀对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1表达的影响

目的探讨氟伐他汀对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1表达的影响。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组、糖尿病氟伐他汀治疗组,经氟伐他汀治疗糖尿病大鼠2,4,8周后,分别观察其对大鼠血胆固醇、血肌酐及24 h尿蛋白定量和肾组织TGF-β1表达的变化。结果与正常对照组相比糖尿病大鼠的24 h尿蛋白以及肾组织TGF-β1表达显著增加,经氟伐他汀治疗后8周,糖尿病大鼠的24 h尿蛋白明显下降,肾组织TGF-β1在蛋白和基因水平表达明显减少。结论糖尿病大鼠肾组织TGF-β1表达增加,氟伐他汀可能通过抑制糖尿病大鼠肾组织TGF-β1表达而达到延缓糖尿病肾病的进展。     

β淀粉样蛋白、白细胞介素-1β在脑梗死患者血清中的含量和临床意义

目的 探讨β淀粉样蛋白(Aβ)、白细胞介素-1β(IL-1β)在脑梗死发生、发展中的作用。方法 用放射免疫分析法检测30例脑梗死患发病后3～5d、10～14d和30例正常对照血清Aβ、IL-1β水平。结果 脑梗死组发病后3～5d血清Aβ、IL-1β水平明显高于10～14d,后明显高于对照;脑梗死组发病后3～5d血清Aβ与IL-1β水平呈正相关,两均与梗死灶体积、神经功能缺损程度呈正相关。结论 Aβ、IL-1β参与脑梗死发生、发展,干扰两产生和作用途径可减轻脑缺血损伤。     

阿托伐他汀对急性脑梗死患者血清白细胞介素-6、内皮素及单核细胞趋化因子-1水平的影响

目的 探讨阿托伐他汀对急性脑梗死( ACI)患者血清白细胞介素-6(IL-6)、内皮素(ET)和单核细胞趋化因子(MCP-1)水平以及神经功能的影响.方法 将100例ACI患者随机分为阿托伐他汀组(50例)和常规治疗组(50例),阿托伐他汀组在常规治疗基础上加用阿托伐他汀20mg,每天1次,连续服用4周.观察比较治疗前后血清IL-6、ET、MCP-1水平及神经功能缺损程度评分(NDS)评定,并以30例健康体检正常者作为对照组.结果 常规治疗组和阿托伐他汀组血清IL-6、ET及MCP-1水平较对照组明显升高(t=26.38、49.10、34.51、25.77、32.23、34.68,均P＜0.05);治疗后,阿托伐他汀组较常规治疗组血清IL-6、ET及MCP-1水平下降更明显(t=10.10、13.18、23.85,均P＜0.05);两组NDS评分较治疗前明显下降(t=18.38、6.98,均P＜0.05),且阿托伐他汀组较常规治疗组下降更明显(t=12.00,P＜0.05).结论 阿托伐他汀能明显降低ACI患者血清IL-6、ET及MCP-1水平,有助于ACI患者的神经功能恢复.     

不同剂量氟伐他汀对冠心病患者内皮素、白细胞介素-6和脂联素水平的影响

目的探讨不同剂量氟伐他汀对冠心病患者内皮素（ET-1）、白细胞介素-6（IL-6）和脂联素（APN）水平的影响。方法选择80例冠心病患者并按数字表法随机平分为两组各40例：分别为氟伐他汀40mg和80mg治疗组;另外选择∞例健康体检者作为对照组。测定治疗前后ET-1、IL-6和APN浓度。结果治疗前40mg和80mg治疗组患者血清ET-1、IL-6水平高于对照组（t=4．755、4．342、4．567,4．696,均P〈0．05）,血清APN水平低于对照组（t=4．133、4．278,P〈0．05）;两组治疗后血清ET．1、IL-6水平均有明显下降,血清APN水平明显升高（t=4．012、4．213、4．332、4．576、4．969、4．578,均P〈0．05）,但80mg治疗组更为显著（t=3．558、3．332、3．911,均P〈0．05）。结论冠心病患者的血清ET-1、IL．6水平升高,APN降低,氟伐他汀可能通过降低ET-1、IL-6,升高APN水平而发挥抗炎作用,其作用与药物剂量有关。     

抑肽酶对大鼠局灶性脑缺血再灌注后白细胞介素-1β、白细胞介素-6和自细胞介素-8的影响

目的观察抑肽酶对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑损伤的保护作用。方法复制大鼠大脑中动脉栓塞模型（MCAO／R）,采用ELISA法测定大鼠脑组织内IL-1β、IL-6和IL-8的含量,并进行神经功能评分。结果模型组IL-1β、IL-6和IL-8蛋白含量在3h即有增加,12h达高峰,而抑肽酶组相应各时间点的蛋白含量表达明显减少;模型组与抑肽酶组在3h的神经评分差异无统计学意义,其余各时间点均差异有统计学意义。结论抑肽酶对大鼠脑缺血再灌注损伤有一定保护作用,其作用机制可能与降低脑组织中IL-1β、IL-6和IL-8含量有关。     

不同剂量阿托伐他汀对早期糖尿病肾病TGF-β_1的影响

目的观察不同剂量阿托伐他汀治疗早期DN的不同时期血清TGF-β1的水平变化情况,探讨其对肾脏的保护作用。方法 40例早期DN患者随机分为A组和B组各20例,分别给予阿托伐他汀20mg/d和40mg/d,睡前一次口服,观察随访6个月。结果无论何种给药剂量治疗后血清TGF-β1水平均明显降低,且随治疗时间延长逐渐下降;B组与A组比较TGF-β1下降更显著,差异有统计学意义。结论阿托伐他汀具有调脂作用之外的肾脏保护作用,且具有剂量依赖性和时间依赖性。     

白细胞介素1a对鼠甲状腺细胞增殖的影响

采用四氮唑蓝比色法检测ＴＳＨ存在和缺乏时白细胞介素１ａ（ＩＬ－１ａ）对鼠ＦＲＴＬ－５细胞增殖的影响。结果提示，在无ＴＳＨ条件下ＩＬ－１ａ ２０￣２０００ｋＵ／Ｌ对ＦＲＴＬ－５细胞无明显促增殖作用；在ＴＳＨ存在时ＩＬ－１ａ２０和２００ｋＵ／Ｌ对ＦＲＴＬ－５细胞增殖无明显抑制作用，ＩＬ－１ａ２０００ｋＵ／Ｌ则可显著抑制ＴＳ地的ＦＲＴＬ－５细胞增殖。     

阿托伐他汀对金黄地鼠糖尿病模型巨噬细胞胆固醇外流的影响

目的：研究不同剂量阿托伐他汀对糖尿病动物模型体内巨噬细胞胆固醇含量的影响，进一步探讨他汀类药物抑制动脉粥样硬化斑块进展的机制。方法：建立糖尿病金黄地鼠动物模型，体外培养腹腔巨噬细胞，在体外与不同剂量阿托伐他汀孵育，利用酶法结合高效液相色谱法测定细胞内胆固醇及胆固醇脂含量。RT—PCR方法检测细胞ABCA1 mRNA表达量的不同。结果：在apoA1存在时，阿托伐他汀可以显著促进巨噬细胞内胆固醇外流，可能与药物增强细胞内胆固醇酯水解酶活性、促进巨噬细胞AB—CA1的表达有关。结论：阿托伐他汀促进ABCA1介导的细胞内胆固醇外流。