镰形棘豆抑制人肝癌细胞增殖和侵袭作用及机制研究

目的:研究镰形棘豆总黄酮对人肝癌细胞系SMMC-7721增殖和侵袭的影响。方法:利用MTT检测100、250、350、500μg/m L作用细胞48 h后,镰形棘豆总黄酮对SMMC-7721细胞增殖和侵袭的影响。Transwell侵袭实验检测350μg/m L总黄酮处理SMMC-7721细胞48 h对其侵袭能力的影响。实时定量PCR,Western blot检测镰形棘豆总黄酮处理SMMC-7721细胞后MMP-9 mRNA和蛋白质表达水平的变化。结果:MTT结果表明镰形棘豆总黄酮能够显著抑制SMMC-7721细胞的增殖,并表现出一定的浓度依赖性。350μg/m L镰形棘豆总黄酮处理细胞48 h后,SMMC-7721细胞侵袭能力降低,且MMP-9 mRNA和蛋白质表达水平均有所下降。结论:镰形棘豆总黄酮对SMMC-7721细胞增殖和侵袭具有抑制作用,并下调了MMP-9分子的表达水平,该分子可能参与了细胞的增殖和侵袭等生物学行为。     

苦参碱和氧化苦参碱对肝癌细胞增殖凋亡及JAK-STAT信号通路的影响

目的：观察苦参碱和氧化苦参碱对肝癌细胞SMMC-7721增殖凋亡及JAK-STAT通路的影响。方法：苦参碱和氧化苦参碱干预肝癌细胞SMMC-7721，MW法检测对肝癌细胞增殖的影响，双荧光染色观察细胞凋亡率，RT-PCR法检测其对SMMC-7721细胞Stat3、Star5 mRNA的影响。结果：苦参碱和氧化苦参碱能显著抑制肝癌细胞增殖，促进其凋亡，并呈时间与剂量依赖性；二者均能下调Star3、Star5 mRNA表达水平。相同浓度苦参碱和氧化苦参碱比较，苦参碱对肝癌细胞Stag、Star5 mRNA下调作用更显著。结论：苦参碱和氧化苦参碱能显著抑制SMMC-7721细胞增殖、促进其凋亡，其机制可能与下调stat3、stat5的基因表达，抑制细胞信号转导通路有关。     

苦参碱体外诱导人肝癌细胞系Bel-7404分化及机制

目的:研究苦参碱对人肝癌细胞系体外诱导分化作用,并探讨其作用机制。方法:不同浓度苦参碱体外作用于Bel-7404细胞,噻唑蓝比色法(MTT法)绘制生长曲线,光镜下观察细胞形态变化,分别以软琼脂集落形成试验、细胞黏附试验、运动试验、侵袭试验检测细胞生物学特性变化,以流式细胞仪分析细胞周期变化。结果:0.5-1.0g/L苦参碱作用于Bel-7404细胞后,明显抑制细胞增殖,细胞形态向正常转化,克隆形成率显著降低,细胞黏附力明显上升,运动力和侵袭力则显著下降。细胞周期分析G1期细胞堆积,G2和S期细胞显著降低。结论:一定浓度的苦参碱具有抑制Bel-7404细胞生长增殖和诱导分化作用,其作用机制可能与细胞周期调节有关。     

鬼臼酰肼哌啶腙氮氧自由基对人肝癌细胞凋亡及端粒酶影响

目的：观察鬼臼酰肼哌啶腙氮氧自由基(GP1)对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞凋亡及端粒酶活性的影响。方法：将GP1与体外培养的人肝癌细胞共同孵育4天后光镜及电镜观察细胞形态改变，细胞计数测定细胞生长及增殖情况，DNA凝胶电泳分析DNA改变，流式细胞仪分析细胞周期分布，应用TRAP—ELISA法测定端粒酶活性。结果：GP1能明显抑制SMMC-7721细胞生长与增殖，2．5ug／ml GP1诱导细胞出现凋亡特征性形态改变，DNA电泳呈现“梯形带”，细胞周期被阻滞在G2／M期，并使端粒酶活性下降。结论：GP1可抑制人肝癌细胞的生长，其抗癌机制与诱导细胞凋亡和降低端粒酶活性有关。     

秦艽总苷对人肝癌细胞SMMC-7721体外作用的研究

目的 观察秦艽总苷对肝癌细胞增殖及凋亡的影响.方法 MTT法检测秦艽总苷对人肝癌SMMC-7721细胞生长的影响,流式细胞仪分析细胞凋亡率,瑞-姬氏染色观察细胞形态变化.结果 秦艽总苷浓度为125,250,500,1 000 μg/ml时,SMMC-7721细胞的生长受到不同程度的抑制,且有时间和浓度依赖性;流式细胞术检测显示一定浓度的秦艽总苷可诱导SMMC-7721细胞凋亡;倒置显微镜下SMMC-7721细胞出现细胞凋亡的形态学改变.结论 一定浓度的秦艽总苷对人肝癌细胞SMMC-7721有抑制增殖和诱导凋亡的作用.     

苦参碱对人卵巢癌细胞株HO-8910PM增殖及侵袭运动能力的影响

目的 研究苦参碱对人高转移卵巢癌细胞系HO-8910PM增殖及转移相关能力的影响及其作用机制.方法 以MTT法和台盼蓝拒染法检测苦参碱对人高转移卵巢癌HO-8910PM细胞增殖的影响;Transwell小室法检测其对HO-8910PM细胞侵袭运动能力的影响;考马斯亮蓝染色法检测不同质量浓度苦参碱对H0-8910PM细胞细胞骨架的改变及免疫细胞化学方法检测药物作用前后HO-8910PM细胞Ezrin蛋白的表达.结果 苦参碱对HO-8910PM细胞增殖抑制呈明显剂量和时间效应;1.5 g/L苦参碱能明显抑制细胞的增殖,作用6 h后能抑制HO-8910PM细胞体外侵袭人工基底膜和运动能力,抑制率分别为(41.52±10.76)%和(39.73±10.67)%;1.0、1.5g/L苦参碱作用HO-8910PM细胞24 h后使细胞骨架明显改变,并上调Ezrin蛋白的表达.结论 苦参碱能抑制高转移性人卵巢癌细胞HO-8910PM的增殖能力和侵袭运动能力,其抗肿瘤侵袭运动的机制与细胞骨架和Ezrin蛋白表达的改变有关.     

黄芩苷对人肝癌SMMC-7721细胞系生物学行为的影响

目的:探讨黄芩苷对人肝癌SMMC-7721细胞系侵袭和转移的影响及其机制。方法:应用细胞培养技术培养SMMC-7721细胞,不同浓度黄芩苷处理肝癌细胞,通过Boyden小室模型测定其侵袭力、黏附力,细胞迁移实验测定细胞运动能力,同时观察细胞形态,流式细胞术测定肝癌细胞MMP2、TIMP2i、ntegrin1β、E-cd表达的改变。结果:黄芩苷能明显抑制肝癌细胞的侵袭力、黏附力及运动能力(P<0.05),并随浓度提高作用增强。形态学观察发现,黄芩苷处理组细胞形态较圆,伪足数目较少。黄芩苷处理组MMP2阳性表达细胞减少,TIMP2阳性表达细胞增多,MMP2/TIMP2比值下降;integrin1β表达增加,E-cd的表达则减低(P<0.05)。结论:黄芩苷能抑制肝癌细胞SMMC-7721侵袭与转移,其机制可能与直接抑制细胞迁移运动,抑制细胞基质溶解相关基因蛋白MMP2表达,促进TIMP2表达及抑制黏附分子E-cd的表达,促进integrin1β表达有关。     

苦参碱抗肝癌细胞增殖的~1H-NMR代谢组学研究

目的采用~1H-NMR代谢组学方法,研究苦参碱抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖的作用。方法应用CCK8法检测苦参碱抑制SMMC-7721细胞增殖的作用,并对细胞裂解液及细胞培养上清液进行~1H-NMR检测,结合多元统计分析和代谢通路分析探讨其作用机制。结果 1、2、4 mg/m L苦参碱能显著抑制SMMC-7721细胞的增殖。与对照组相比,苦参碱作用于SMMC-7721细胞后,细胞内外共发现21种差异代谢物。苦参碱能显著调节细胞内外亮氨酸、缬氨酸、甘氨酸等差异代谢物的量,对SMMC-7721细胞的氨基酸代谢起到一定的调控作用。结论苦参碱可能通过调控氨基酸代谢、能量代谢等途径发挥抗肝癌作用。本研究从代谢组学角度为阐释苦参碱抗肝癌的作用机制提供了科学依据。     

氧化白藜芦醇对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和自噬的研究

目的:探讨氧化白藜芦醇对人肝癌细胞的抑制作用。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和CCK-8法检测氧化白藜芦醇对人肝癌Hep G2、SMMC-7721细胞增殖的影响;划痕实验、Transwell侵袭实验观察氧化白藜芦醇对肝癌细胞迁移、侵袭能力的影响; Western Blot检测氧化白藜芦醇处理肝癌细胞后p62和LC3蛋白的表达。结果:氧化白藜芦醇对人肝癌Hep G2、SMMC-7721细胞的IC50值分别为38. 5μg/m L、20. 6μg/m L,且增殖抑制效果呈剂量依赖性。氧化白藜芦醇12. 5μg/m L以上剂量能够显著抑制肝癌细胞的迁移、侵袭和自噬。结论:氧化白藜芦醇能够显著抑制体外人肝癌Hep G2、SMMC-7721细胞增殖、迁移、侵袭,抗癌作用与自噬无关。     

苦参碱和氧化苦参碱对SMMC-7721细胞增殖及Stat3,Stat5基因表达的影响

目的：观察苦参碱和氧化苦参碱对肝癌细胞SMMC-7721增殖及Stat3, Stat5基因表达的影响。方法：苦参碱和氧化苦参碱干预肝癌细胞SMMC-7721，MTT法检测其对肝癌细胞增殖的影响，双荧光染色观察细胞凋亡率，RT-PCR法检测其对SMMC-7721细胞Stat3, Stat5 mRNA的影响。结果：苦参碱和氧化苦参碱作用于肝癌细胞后，能显著抑制肝癌细胞增殖，促进其凋亡，并呈时间剂量依赖性；二者均能下调Stat3, Stat5 mRNA表达水平。以相同浓度苦参碱和氧化苦参碱比较，苦参碱对肝癌细胞Stat3, Stat5 mRNA下调作用更显著(P<0.05或P<0.01)。结论：苦参碱和氧化苦参碱能显著抑制SMMC-7721细胞增殖，其机制可能与下调Stat3, Stat5的基因表达，抑制细胞信号传导通路有关。     

丹参对肝癌转移复发防治作用的研究

目的：观察丹参对ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞株（７７２１细胞）侵袭粘附能力和对裸鼠人肝癌切除术后转移复发的影响。方法：以流式细胞仪测量丹参对７７２１细胞表面细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ）－１）的表达的影响。经细胞侵袭实验观察央参地ＳＭＶＣ－７７２１细胞侵袭运动能力及对己与纤维连接蛋白（ＦＮ）粘附的７７２１细胞脱落的影响。以ＭＴＴ法测量丹参对７７２１细胞与ＦＮ粘附的影响。以细胞粘附实验观察丹在对７７２     

苦参碱对白血病细胞株Jurkat侵袭转移的影响

目的 研究不同浓度苦参碱对人急性淋巴细胞白血病细胞株Jurkat侵袭转移的抑制作用。     

复方苦参注射液对胃癌SGC-7901细胞侵袭转移能力的影响

目的:研究复方苦参注射液对胃癌SGC-7901细胞侵袭转移能力的影响。方法:体外培养胃癌细胞系SGC-7901,MTT法测定药物对细胞增殖的抑制作用,应用粘附试验、Transwell趋化运动和Matrigel侵袭实验,研究复方苦参注射液及其不同浓度下对SGC-7901细胞的粘附、运动以及侵袭能力的影响。结果:复方苦参注射液浓度在0.25、0.5、1.0、1.5 mg/ml时均有一定的抑制胃癌SGC-7901细胞增殖的作用,且呈明显的量效和时效关系。复方苦参注射液不同浓度处理SGC-7901细胞后,体外粘附、侵袭和运动能力呈剂量依赖性下降。经复方苦参注射液(1.5 mg/ml)作用后SGC-7901细胞CD44V6蛋白表达减弱,胞浆棕黄色颗粒减少。结论:复方苦参注射液可以抑制胃癌细胞生长,降低细胞粘附、侵袭和运动能力,其机制可能与抑制CD44V6蛋白表达有关。     

三氧化二砷对人肝癌细胞黏附和侵袭影响的实验研究

目的探讨三氧化二砷(亚砷酸,As2O3)注射液是否具有抗肝癌细胞黏附和侵袭的作用及其相关机制。方法选用人类肝癌细胞株SMMC-7721细胞及裸鼠人类肝癌转移模型为研究对象,通过细胞运动迁移实验、细胞黏附实验和免疫组化方法观察As2O3对SMMC-7721细胞的运动迁移、与纤维粘连蛋白(FN)、内皮细胞黏附以及裸鼠人肝癌转移模型肝移植瘤表达CD44和MMP-2基因蛋白的影响。结果As2O3注射液可显著抑制SMMC-772l细胞在FN上的迁移运动和SMMC-7721细胞与FN、内皮细胞的黏附,并能降低裸鼠肝移植瘤CD44、MMP-2的表达。结论As2O3具有抗肝癌细胞黏附和侵袭的作用,其机制可能与As2O3能降低肝癌细胞表达CD44和MMP-2有关。     

波罗蜜属药用植物单体化合物ACR-2 ACR-3抗肿瘤作用的实验研究

目的:采用Alamar blue法及MTT法观察波罗蜜属药用植物单体化合物(ACR-2、ACR-3)对人肝癌细胞(SMMC-7721)和胃腺癌细胞(SGC-7901)增殖的影响。方法:用Alamar blue法和传统MTT法检测ACR-2、ACR-3对细胞SMMC-7721、SGC-7901的增殖抑制作用。结果:ACR-2作用于细胞SMMC-7721和细胞SGC-7901的IC50(mmol/L)分别为0.013和0.059;ACR-3作用于细胞SMMC-7721和细胞SGC-7901的IC50(mmol/L)分别为0.029和0.169。其中ACR-2、ACR-3对细胞SMMC-7721的增殖抑制作用最强,对细胞SGC-7901也表现出较强的增殖抑制作用。时量曲线检测结果显示:ACR-2、ACR-3对细胞SMMC-7721、SGC-7901的增殖抑制作用具有时间和剂量依赖性,其增殖抑制作用以48h时最强。结论:波罗蜜属药用植物单体化合物ACR-2、ACR-3对人肝癌细胞SMMC-7721、胃腺癌细胞SGC-7901有明显的增殖抑制作用,且有时间和剂量依赖性。     

参麦注射液对血管生成影响的研究

目的：探讨参麦注射液（简称参麦）对血管生成的影响。方法：采用MTT法检测参麦对牛血清促进的牛内皮细胞，人肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响；琼脂糖刮除法检测参麦对牛血清促进的牛内皮细胞迁移的影响。利用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）模型。观察参麦对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。结果：参麦能明显抑制牛内皮细胞增殖，与SMMC-7721比较，差异有显著性；参麦能抑制牛内皮细胞迁移；并可抑制鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成。结论：参麦能抑制血管生成；抑制内皮细胞增殖和迁移可能是参麦抗血管生成的机理之一。同时也说明参麦是一种特异性血管生成抑制剂。     

大蒜素对人子宫内膜癌Ishikawa细胞侵袭和迁移抑制作用的研究

目的:探索大蒜素对人子宫内膜癌Ishikawa细胞侵袭和迁移的抑制作用及其调控机制。方法:取对数生长期人子宫内膜癌Ishikawa细胞为受试细胞,设空白对照组(DMSO),大蒜素低、中、高剂量组(12.5、25、50 μg/ml)和顺铂组(40 μg/ml)。药物干预48 h后,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,PI染色流式细胞术分析细胞周期分布,Transwell小室法、划痕实验检测细胞侵袭能力和迁移能力,Western blot法检测MMP-2、MMP-9、E-cadherin、PI3K、p-Akt蛋白表达。结果:经大蒜素中、高剂量或顺铂干预能够明显提高Ishikawa细胞增殖抑制率,提高处于G₀/G₁期Ishikawa细胞比例,降低Ishikawa细胞侵袭能力和迁移能力,下调MMP-2、MMP-9、E-cadherin、PI3K、p-Akt蛋白表达量,较空白对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:大蒜素对人子宫内膜癌Ishikawa细胞侵袭和迁移具有明显抑制作用,其机制可能与阻滞细胞周期进程而抑制细胞增殖,降低MMP-2、MMP-9、E-cadherin蛋白表达以及抑制PI3K/Akt通路活性有关。     

蜂毒素对肝癌细胞系SMMC7721增殖的影响

目的 了解蜂毒素对肝癌细胞生长，增殖的影响。方法 采用台盼蓝排染法测定细胞的生长曲线，MTT法测定细胞增殖的抑制率，流式细胞仪检测细胞周期和细胞PCNA的表达。结果 蜂毒素可明显抑制肝癌细胞SMMC7721的生长，增殖，PCNA阳性细胞表达率随着蜂毒素剂量的增加而降低。对细胞周期的影响表现为S期细胞增加，G2/M期细胞减少。结论 蜂毒素可抑制肝癌细胞的生长。增殖，并且减少PCNA阳性细胞的表达。影响细胞周期的比率。     

苦参素通过sHH信号通路抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭能力研究

目的:研究苦参素对胰腺癌增殖和侵袭能力的影响及机制。方法:在体外培养胰腺癌细胞株,不同浓度的苦参素在不同时间点干预胰腺癌细胞,在现象层面,应用MTT法检测胰腺癌细胞的增殖能力; 应用Transwell小室检测细胞的侵袭能力。在机制层面,应用Real time PCR和Western blot在转录水平和蛋白水平检测程度,并通过基因转染技术构建高表达sHH的胰腺癌细胞株,进一步验证苦参素对胰腺癌增殖和侵袭能力的影响及sHH通路的作用。结果:高浓度组(40 μmol/L)苦参素与低浓度组(20 μmol/L)相比,明显抑制胰腺癌细胞的增殖和侵袭能力。在mRNA和蛋白水平,苦参素可明显抑制肿瘤细胞sHH信号通路,降低sHH(P<0.05)和 GLI-1的表达水平(P<0.05)。构建高表达sHH的胰腺癌细胞株Panc-1-sh-sHH,苦参素对胰腺癌细胞增殖和侵袭能力的抑制程度明显强于高表达sHH的胰腺癌细胞Panc-1-sh-sHH。结论:苦参素通过抑制sHH信号通路,减弱胰腺癌细胞增殖和侵袭能力。     

清疡宁抗实验性胃溃疡作用的研究

清疡宁是含有党参、黄芪、白术等成分的新的中药复方制剂 ,具有健脾益气、理气止痛的功效 ,临床上主要用于胃及十二指肠溃疡的治疗。为了验证该制剂的药理作用并探讨其作用机制 ,本实验对该方的抗实验性胃溃疡作用进行了研究。1　材料1 .1　药物 :清疡宁 ( Qingyangning,QYN) ,浅棕色干粉 ,批号 2 0 0 1 0 32。每克干粉含有 4.65 g生药 ,由天津市现代医药开发研究所提供。临用前用蒸馏水配制成不同浓度的溶液 ,备用。西米替丁片 ,批号990 5 0 1 ,天津太平洋制药有限公司生产。1 .2　动物 :昆明种小鼠 ,购自中国医学科学院实验动物研究所繁…