RNAⅢ抑制肽/磷酸胆碱基细胞膜仿生药物涂层的血液相容性

背景：将葡萄球菌的全面抑制剂RNAⅢ抑制肽和稳定、无毒、具有良好血液相容性的磷酸胆碱结合，制备出磷酸胆碱基细胞膜仿生药物涂层，具有良好的药物传递性能，可减少生物材料表面细菌的黏附和生物被膜的形成，从而减少内置物的感染。目的：通过实验评价RNAⅢ抑制肽，磷酸胆碱基细胞膜仿生药物涂层的血液相容性。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2005—10／2007—10在解放军总医院临床药理研究所及医学动物实验中心完成。材料：采用有机化学固相合成Fmoc法合成RNAⅢ抑制肽，以甲基丙烯酸十八酯、甲基丙烯酸羟丙酯、甲基丙烯酸硅基丙酯和2-甲基丙烯酰氧基-2-三甲基氨基乙基磷酸酯为单体通过自由基溶液聚合合成可交联四元共聚物，将洁净的316L不锈钢片浸渍于5g／L的四元共聚物四氢呋喃和质量分数0．1的RNAⅢ抑制肽混合溶液中，制备聚合物涂层。方法：将聚合物涂层按1cm2/mL在37℃无菌条件下用生理盐水洗提72h，制得洗提液原液；加入同体积的无菌生理盐水制得50％洗提液。根据国家标准GB／T16886-1进行兔溶血实验、凝血实验、血小板聚集实验。主要观察指标：红细胞溶血率；凝血时间、凝血酶原时间、活化部分凝血酶时间；白细胞、红细胞和血小板数量；血小板聚集情况。结果：溶血实验结果显示RNAⅢ抑制肽，磷酸胆碱基细胞膜仿生药物涂层洗提液原液和50％洗提液的溶血率分别为4．88％和3．66％，两者的溶血率均〈5％，符合医用生物材料的溶血实验要求。RNAⅢ抑制肽／磷酸胆碱基细胞膜仿生药物涂层洗提液原液和50％洗提液对兔全血凝固时间、凝血酶原时间和活化部分凝血酶时间与生理盐水阴性对照组比较差异无显著性（P〉0．05）；RNAⅢ抑制肽／磷酸胆碱基细胞膜仿生药物涂层洗提液原液组白细胞、红细胞和血小板数量及血小板聚集时间与50％洗提液组比较差异无显著性（P〉0．05）。结论：RNAⅢ抑制肽／磷酸胆碱基细胞膜仿生药物涂层具有良好的血液相容性。     

聚乳酸乙醇酸/RNAⅢ抑制肽缓释微球的血液相容性

目的:评价聚乳酸乙醇酸/RNAⅢ抑制肽缓释微球的血液相容性.方法:①聚乳酸乙醇酸/RNA Ⅲ抑制肽微球制备:采用Fmoc法由C端至N端先合成粗品肽;采用反相液相色谱法对RNA Ⅲ抑制肽粗品进行纯化分析,按紫外吸收峰收集组分,冷冻干燥,得到RNAⅢ抑制肽纯品.再采用液相复乳法制备直径50～70 μm的聚乳酸乙醇酸/RNAⅢ抑制肽微球.②浸提液制备:聚乳酸乙醇酸/RNA Ⅲ抑制肽微球粉末按1 g/L在37℃无菌条件下用生理盐水浸提72 h,制得浸提液原液:加入同体积的无菌生理盐水制得0.5 g/L的浸提液.以溶血实验、凝血实验、血小板聚集实验,测定凝血酶原时间和活化部分凝血酶时间、观察对兔白细胞、红细胞和血小板的影响,对聚乳酸乙醇酸/RNAⅢ抑制肽微球血液相容性进行初步评价.结果:①浸提液原液和0.5 g/L浸提液的溶血率分别为3.24%和2.67%,两者的溶血率均<5%,符合医用生物材料的溶血实验要求.②浸提液原液和0.5 g/L浸提液对兔凝血时间,各时间点凝血酶原时间和活化部分凝血酶时间,白细胞、红细胞和血小板数量,对血小板聚集无明显影响.结论:聚乳酸乙醇酸/RNA Ⅲ抑制肽缓释微球具有良好的血液相容性.     

聚乳酸乙醇酸/RNAⅢ抑制肽缓释微球的血液相容性

目的:研究表明RNA Ⅲ抑制肽(RNA Ⅲ inhibiting peptide,RIP)是葡萄球菌一种有效的全面抑制剂,作用机制与传统抗菌素明显不同,有着良好的应用前景.通过实验评价聚乳酸乙醇酸(polyaiticglycolic acid,PLGA)/RIP缓释微球的血液相容性.方法: 实验于2005-10/2007-10在解放军总医院临床药理研究所及医学动物实验中心完成.选择成年健康新西兰大白兔30只,按随机数字表法分组,每组6只.药品及试剂: PLGA,二甲基亚砜、MTT,DMEM,二硝基氟苯.实验方法:①PLGA/RIP微球制备:采用Fmoc法由C端至N端先合成粗品肽;采用反相液相色谱法对RIP粗品进行纯化分析,按紫外吸收峰收集组分,冷冻干燥,得到RIP纯品.再采用液相复乳法制备直径50～70 mm的PLGA/RIP微球.②洗提液制备:PLGA/RIP微球粉末按1 g/L在37 ℃无菌条件下用生理盐水洗提72 h,制得洗提液原液;加入同体积的无菌生理盐水制得0.5 g/L的稀释液.③溶血实验:以蒸馏水和生理盐水分别为阳性、阴性对照,观察PLGA/RIP洗提液原液和0.5 g/L洗提液的溶血率.④凝血实验及PLGA/RIP对凝血酶原时间和活化部分凝血酶时间的影响实验:以生理盐水为阴性对照,观察PLGA/RIP洗提液原液和0.5 g/L洗提液对兔凝血时间的影响和凝血酶原时间和活化部分凝血酶时间的影响.⑤PLGA/RIP对兔白细胞、红细胞和血小板及血小板聚集的影响实验:观察PLGA/RIP洗提液原液和0.5 g/L洗提液对兔白细胞、红细胞和血小板及血小板聚集的影响.结果:纳入动物30只, 均进入结果分析.①溶血实验结果显示PLGA/RIP洗提液原液和0.5 g/L洗提液的溶血率分别为3.24%和2.67%,两者的溶血率均 < 5%,符合医用生物材料的溶血实验要求.②凝血实验结果表明PLGA/RIP洗提液原液和0.5 g/L洗提液对兔凝血时间无明显影响.③PLGA/RIP对各时间点兔凝血酶原时间和活化部分凝血酶时间均无明显作用.④PLGA/RIP对兔白细胞、红细胞和血小板无明显影响.⑤PLGA/RIP对兔血小板聚集无明显影响.结论: PLGA/RIP缓释微球具有良好的血液相容性.     

聚乳酸乙醇酸／RNAⅢ抑制肽缓释微球的血液相容性

目的：研究表明RNA Ⅲ抑制肽（RNA Ⅲ inhibiting peptide，RIP）是葡萄球菌一种有效的全面抑制剂，作用机制与传统抗菌素明显不同，有着良好的应用前景。通过实验评价聚乳酸乙醇酸（polyaitlcglycolic acid，PLGA）／RIP缓释微球的血液相容性。方法：实验于2005-10／2007-10在解放军总医院临床药理研究所及医学动物实验中心完成。选择成年健康新西兰大白兔30只，按随机数字表法分组，每组6只。药品及试剂：PLGA，二甲基亚砜、MTT，DMEM，二硝基氟苯。实验方法：①）PLGA／RIF微球制备：采用Fmoc法由C端至N端先合成粗品肽：采用反相液相色谱法对RIP粗品进行纯化分析，按紫外吸收峰收集组分，冷冻干燥，得到RIP纯品。再采用液相复乳法制备直径50-70mm的PLGA／RIP微球。②洗提液制备：PLGA／RIP微球粉末按1g／L在37℃无菌条件下用生理盐水洗提72h，制得洗提液原液；加入同体积的无菌生理盐水制得0．5g／L的稀释液。③溶血实验：以蒸馏水和生理盐水分别为阳性、阴性对照，观察PLGA／RIP洗提液原液和0．5g／L洗提液的溶血率。④凝血实验及PLGA／RIP对凝血酶原时间和活化部分凝血酶时间的影响实验：以生理盐水为阴性对照，观察PLGA／RIP洗提液原液和0．5g／L洗提液对兔凝血时间的影响和凝血酶原时间和活化部分凝血酶时间的影响。⑤PLGA／RIP对兔白细胞、红细胞和血小板及血小板聚集的影响实验：观察PLGA／RIP洗提液原液和0．5g／L洗提液对兔白细胞、红细胞和血小板及血小板聚集的影响。结果：纳入动物30只。均进入结果分析。①溶血实验结果显示PLGA／RIP洗提液原液和0．5g／L洗提液的溶血率分别为3．24％和2．67％，两者的溶血率均〈5％，符合医用生物材料的溶血实验要求。②凝血实验结果表明PLGA／RIP洗提液原液和0．5g／L洗提液对兔凝血时间无明显影响?     

大量输血患者血小板和出凝血功能变化分析

目的观察大量输注红细胞悬液患者输注前后血小板及凝血功能的变化,探讨预防凝血功能障碍的措施。方法对37例不同类型大量输注红细胞悬液患者24h输注红细胞悬液〉10U（2 000mL）,输注红细胞悬液前后血小板计数及凝血功能进行统计学比较。结果患者在大量输注红细胞悬液后,检测结果血小板、纤维蛋白原（FIB）均较输血前显著降低（P〈0.05）,而活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）及凝血酶时间（TT）均较输血前有显著延长（P〈0.05）,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论患者大量输注红细胞悬液后应及时检测血小板计数和凝血功能,减少因血小板及凝血因子稀释引起的出血,及时输注血小板和血浆,提高输血疗效。     

新型无机微粒栓塞材料BaFe12O19的血液相容性实验

目的:评价BaFe12O19微粒作为一种新开发的具有潜在应用前景的新型血管内栓塞材料的血液相容性,并观察其对机体的出血时间、凝血时间及凝血酶原时间、纤维蛋白原测定、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间的影响。方法:BaFe12O19微粒材料于2005-07/2006-05在武汉理工大学生物材料与工程研究中心实验室完成,血液相容性实验于2006-05/09在解放军广州军区武汉总医院中心实验室完成。①溶血实验:取人新鲜全血,分别加入生理盐水(阴性对照组)、蒸馏水(阳性对照组)、无机微粒浸提液(实验组),观察溶血情况,计算溶血率。②出血、凝血时间测定:健康NIH小鼠随机分为实验组和对照组,分别腹腔注射无机微粒混悬液或生理盐水1 mL,7 d后测定出血、凝血时间。③凝血功能实验:取健康Wistar大鼠静脉血,随机分为实验组及对照组,分别注入1 g/L微粒混悬液或生理盐水1 mL,30 min后测量凝血功能。结果:①溶血实验结果:实验组和阴性对照组均无溶血现象,阳性对照组全部溶血,实验组的溶血率为2.08%,符合ISO规定的不大于5%的标准。②出血、凝血时间测定结果:实验组和对照组小鼠的出血、凝血时间比较差异无显著性意义(P>0.05)。③凝血功能实验结果:实验组和对照组凝血酶原时间、纤维蛋白原、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间比较均无显著差别(P>0.05)。结论:BaFe12O19微粒符合血液相容性标准,具有良好的血液相容性能。     

羟基磷灰石涂层高分子人工骨溶血实验研究

目的检测研制的羟基磷灰石(HA)复合人工骨的血液相容性.方法采用将HA复合人工骨及其浸提液与抗凝稀释兔血直接接触,测定红细胞释放的血红蛋白量(OD值),将测得的OD值换算为溶血率,以判断其血液相容性.结果本人工骨材料浸提液组的溶血率为1.80%,材料与血液直接接触组溶血率为1.20%,阴性对照组和阳性对照组溶血率分别为0%、100%,实验组与阳性对照组相比有显著性差异.结论该材料无溶血作用,血液相容性良好.     

肝硬化患者血小板参数、血液流变学和凝血功能指标检测的临床意义

目的 探讨肝硬化患者血小板参数、血液流变学和凝血功能指标的临床价值.方法 对76例肝硬化患者和80名正常对照组的血浆凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原进行检测,测定两组人群血流变参数及血小板参数.结果 肝硬化患者组凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间均高于正常对照组,而纤维蛋白原低于正常对照组,两者之间差异有统计学意义(P＜0.05);血小板参数中血小板计数和血小板压积低于正常对照组,血小板分布宽度和平均血小板体积高于正常对照组,两者之间差异有统计学意义(P＜0.05);血流变参数中全血黏度、血浆黏度、红细胞压积均低于正常对照组.结论 常规检测血小板参数、血液流变学和凝血功能指标,有助于临床判定肝硬化损害程度及判断预后.     

316L不锈钢经丝素肽/壳聚糖聚合物涂层后的血液相容性

背景：选择组织相容性良好的聚合物材料作为心脏涂层支架的材料可以促进内皮细胞生长，抑制平滑肌细胞过度生长，减少局部炎症反应，有助于支架术后内皮损伤的早期修复，并减少支架局部血栓形成。 目的：实验拟观察316L不锈钢经丝素肽／壳聚糖聚合物涂层后的血液相容性。 设计、时间及地点：观察性实验，于2006—07／200707在中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所完成。 材料：医用316L不锈钢片为张家港先科医疗器械有限公司产品；丝素肽为中国科学院上海植物生态研究所产品；壳聚糖为浙江省玉环县海洋生物化学有限公司产品。 方法：通过静电自组装的方法，将丝素肽和壳聚糖涂在316L不锈钢表面形成聚合物膜。 主要观察指标：测定不锈钢涂层前后表面的动态凝血时间、扫描电镜观察涂层前后的不锈钢表面抗血小板作用、测定涂层不锈钢的溶血率。 结果：①不锈钢表面经过聚合物涂层后，凝血时间明显较未涂层的不锈钢时间延长。②裸316L不锈钢表面黏附的血小板数量较多，血小板变扁平，看不出明显的伪足状态，紧贴在材料的表面；丝素肽／壳聚糖聚合物不锈钢涂层表面也有一定数量的血小板黏附，血小板虽有伪足伸出，但是聚集密度和形态变化程度明显小于裸不锈钢表面黏附的血小板。③涂层不锈钢溶血率〈5％，提示丝素肽／壳聚糖聚合物涂层不锈钢无溶血作用. 结论：与裸316L不锈钢相比，丝素肽／壳聚糖聚合物涂层延长了动态凝血时间，减轻了血小板黏附和变形的程度，提高了316L不锈钢基体的血液相容性。     

大量输注悬浮红细胞后及时补充血浆和(或)血小板的必要性研究

目的:以患者凝血功能和血小板(Plt)的变化,分析患者大量输注悬浮红细胞后,及时补充血浆和(或)血小板的必要性.方法:选择一次性输注悬浮红细胞大于10 U的患者作为研究对象,将只输注悬浮红细胞未输注血浆和血小板的设为对照组,既输注悬浮红细胞又输注血浆和(或)血小板的设为实验组,每组患者输血前后均测定凝血功能和血小板计数的变化.结果:大量输注悬浮红细胞后,两组患者Plt、纤维蛋白原降低,凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间延长,但实验组临床渗血情况较对照组轻,两者统计学差异具有显著性(P＜0.01).结论:患者大量输注悬浮红细胞后应及时补充血浆和(或)血小板,改善患者的凝血功能,减少出血事件的再次发生.     

四种新型仿生骨组织工程支架材料生物安全性评价价

背景:制备仿生骨组织工程支架材料材料的原材料生物活性玻璃已被临床广泛应用于软骨、骨组织的修复、替代,已通过生物安全性评价.目的:利用生物活性玻璃和胶原蛋白、透明质酸、磷酸丝氨酸等天然大分子复合制备4种新型仿生骨组织工程支架材料,观察4种新型仿生骨组织工程支架材料的生物安全性.设计、时间及地点:随机分组设计、动物对照实验,于2006-03/08在南方医科大学珠江医院血液科实验室完成.材料:健康昆明系小鼠60只,健康成年家兔11只.采用冷冻干燥和仿生矿化技术,以改性生物活性玻璃粉体和胶原、透明质酸钠、磷酸丝氨酸等天然生物分子复合制备生物活性玻璃,胶原蛋白/透明质酸/磷酸丝氨酸、生物活性玻璃/胶原蛋白/磷酸丝氨酸、生物活性玻璃/胶原蛋白/透明质酸、生物活性玻璃/胶原蛋白4种仿生复合骨组织工程三维支架材料.方法:对4种新型仿牛骨组织工程支架材料进行生物安全性试验:全身急性毒性试验观察小鼠中毒症状.按50mL/kg尾静脉注射4种材料的浸提液.支架材料加入新鲜兔血进行溶血试验,离心后取上清液,测定吸光度值,计算溶血率.兔脊柱两侧皮内注射浸提液观察皮肤刺激反应.主要观察指标:注入浸提液后24,48,72h观察小鼠全身急性毒性反应和皮肤刺激反应,测定溶血率.结果:全身急性毒性试验结果表明,4组小鼠无死亡,无明显毒性表现、体质量下降等不良反应.溶血试验结果表明,4组支架材料的溶血率均<5%,满足医用生物材料的应用要求.皮内刺激反应试验结果表明,4组均未见任何刺激反应,无红斑、焦痂、水肿等皮肤反应现象.结论:仿生复合支架材料生物活性玻璃/胶原蛋白/透明质酸/磷酸丝氨酸、生物活性玻璃/胶原蛋白/磷酸丝氨酸、生物活性玻璃/胶原蛋白/透明质酸、生物活性玻璃/胶原蛋白无毒性,无刺激性,生物安全性能良好.     

内皮细胞在涂层心血管植入物表面的生长:模似仿生性构建具有生物活性的细胞外基质

冠状动脉内置入药物涂层支架显著解决了支架内再狭窄,但是,支架内晚期及超晚期血栓带来新的难题加快支架内皮化,预防血栓形成成为研究的关键.目的:观察内皮细胞在经刻蚀并构建仿生的生物活性表面,整合细胞外基质成分的金属钛表面的生长情况.设计、时间及地点:对比观察,于2007-08/2009-01在西南交通大学先进材料与技术教育部重点实验室完成.材料:成年杂交犬6只,体质量15-20kg,纯钛(99.997%)为西安宝鸡有色金属有限公司产品,切割成5mmx5mmx2mm圆片试样.方法:在已刻蚀的认表面通过自组装技术构建胶原-肝素-血管内皮生长因子一内皮祖细胞膜蛋白抗体为组分的多层膜作为涂层组:未涂层的钛为未涂层组.成年杂交犬6只,涂层组样品置入右侧股动脉,未涂层组置入左侧股动脉内,获得2h,15d,3个月的样品.主要观察指标:乳酸脱氢酶实验测定黏附血小板的数量:酶联免疫法测定GMP-140以检测黏附血小板激活程度;扫描电镜观察黏附血小板的形貌;采用Sysmex CA-600凝血仪测定活化部分凝血活酶时间及凝血酶原时间.扫描电镜观察植入物在不同时间点,内皮细胞在其表面的生长;免疫荧光法观察置入2h的试片表面分化成熟的内皮细胞,其血管内皮生长因子受体2的表达.结果:①乳酸脱氢酶实验显示涂层样片的乳酸脱氢酶值比未涂层显著减少,说明涂层钛可以减少血小板的黏附(P＜0.05).②附血小板激活程度的定量分析结果显示在涂层上黏附血小板P-选择素的表达显著小于未涂层上的表达(P<0.05).③扫描电镜可见涂层钛表面黏附血小板形貌的变形程度小于未涂层钛.④涂层的活化部分凝血活酶时间和凝血酶原时间分别是(134.2±13.3),(34.2±5.7)s;未涂层的活化部分凝血活酶时间和凝血酶原时间分别是(44.9±2.3),(17.3±2.4)s,可见涂层的凝血时间显著延长(P<0.05).⑤扫描电镜可见置入2h:对照样品被血凝块覆盖;涂层样品表面血凝块少而局限.置入15d:对照组大最纤维状物质沉积涂层样品表面均匀覆盖一层长梭形细胞.置入3个月:对照组表面增生特别明显,沿血流方向排列:实验组表面覆盖组织显示更加成熟,均匀覆盖一层细胞,细胞的形态也更加接近血管内膜的内皮细胞.⑥免疫荧光可见涂层样品表面黏附大量的血管内皮生长因子受体2阳性细胞,而对照组血管内皮生长因子受体2阳性细胞较少.结论:内皮细胞在仿生性的具有生物活性的细胞外基质中能迅速被捕获固定,内皮细胞生长必须以抗凝为前提.对于促进内皮细胞的生长和分化构建有生物活性的仿生底物是途径之一.     

壳聚糖球形多孔微载体的血液相容性评价

背景:文献报道的微载体大多为实心的、大孔的,虽然较二维微载体的比表面积有明显的增加,但距理想的三维微环境相差甚远。目的:构建壳聚糖球形多孔微载体,通过溶血实验、凝血实验、血小板计数及聚集实验评价其血液相容性。方法:利用液氮冷冻干燥技术成功构建浓度为1%,2%,3%的壳聚糖球形多孔微载体。选择健康成年新西兰兔为宿主,采用溶血实验、凝血实验、血小板计数及其聚集实验评价壳聚糖球形多孔微载体的血液相容性。结果与结论:浓度为1%,2%,3%的壳聚糖球形多孔微载体的溶血率分别为1.56%,2.07%,2.31%,均小于5%,均无致溶血性;3种浓度壳聚糖球形多孔微载体样本材料对兔血时间无明显影响,三者与生理盐水阴性对照组间也无明显差别(P>0.05);3种浓度壳聚糖球形多孔微载体样本材料对兔血小板计数无明显影响,注入浸提液前后比较和组间比较差异均无显著性意义(P>0.05)。证实壳聚糖球形多孔微载体无致溶血性、无凝血性和无血小板聚集性,表明壳聚糖球形多孔微载体具有良好的血液相容性。     

壳聚糖球形多孔微载体的血液相容性评价

背景：文献报道的微载体大多为实心的、大孔的,虽然较二维微载体的比表面积有明显的增加,但距理想的三维微环境相差甚远。目的：构建壳聚糖球形多孔微载体,通过溶血实验、凝血实验、血小板计数及聚集实验评价其血液相容性。方法：利用液氮冷冻干燥技术成功构建浓度为1%,2%,3%的壳聚糖球形多孔微载体。选择健康成年新西兰兔为宿主,采用溶血实验、凝血实验、血小板计数及其聚集实验评价壳聚糖球形多孔微载体的血液相容性。结果与结论：浓度为1%,2%,3%的壳聚糖球形多孔微载体的溶血率分别为1.56%,2.07%,2.31%,均小于5%,均无致溶血性;3种浓度壳聚糖球形多孔微载体样本材料对兔血时间无明显影响,三者与生理盐水阴性对照组间也无明显差别（P〉0.05）;3种浓度壳聚糖球形多孔微载体样本材料对兔血小板计数无明显影响,注入浸提液前后比较和组间比较差异均无显著性意义（P〉0.05）。证实壳聚糖球形多孔微载体无致溶血性、无凝血性和无血小板聚集性,表明壳聚糖球形多孔微载体具有良好的血液相容性。     

共价交联的肝素/海藻酸盐水凝胶表面修饰膨体聚四氟乙烯人工血管

背景:虽然膨体聚四氟乙烯人工血管植入体具有易于缝合、质地柔软和抗压迫等诸多优良性能,但由于血栓形成等原因,使这些材料的应用受限.为了解决前述问题,目前的工作主要集中在对现有人工血管材料表面修饰与改性上,最终使其达到血管植入的要求.目的:用共价交联的肝素-海藻酸钠水凝胶对小口径膨体聚四氟乙烯人工血管进行表面修饰和改性,考察其血液相容性和组织相容性.设计:观察性实验.单位:哈尔滨工业大学生物医学工程中心,纳米医药与生物传感器实验室.材料:实验所用直径4 mm的膨体聚四氟乙烯人工血管为W.L Gore & Associates,Inc.产品,海藻酸钠和1-乙基-3.3-二甲基氨丙基碳化二亚胺购自美国Sigma公司,肝素购于Calbiochem公司,全氟磺酸和壳聚糖购于美国Aldrich公司.人α-凝血酶和抗凝血酶Ⅲ购于Haematologic Technologies,S-2238购于Chromogenix.方法:实验于2006-05/2007-06在哈尔滨工业大学生物医学工程中心的纳米医药与生物传感器实验室完成.首先用全氟磺酸修饰膨体聚四氟乙烯表面,然后用肝素-海藻酸钠凝胶进行灌注修饰,以乙二胺为交联剂,1-乙基-3-3-二甲基氨丙基碳化二亚胺为引发剂,将多糖分子进行共价交联.用接触角表征了涂层前后人工血管表面亲水性能的变化,扫描电镜表征了材料表面形貌及血小板黏附,衰减全反射-傅立叶变换红外光谱表征了材料表面的化学结构,然后用活化部分凝血激酶时间、凝血酶原时间、溶血试验以及凝血酶失活试验表征了涂层后人工血管表面的血液相容性.主要观察指标:①接触角.②用扫描电镜表征材料表面形貌及血小板黏附情况.③衰减全反射-傅立叶变换红外光谱.④活化部分凝血激酶时间、凝血酶原时间.⑤溶血度.⑥凝血酶失活试验.结果:①修饰后的人工血管,衰减全反射-傅立叶变换红外光谱结果显示在1 626 cm-1处出现了-CO-NH-基团的峰位.②修饰后人工血管的接触角由(125±1)°降低为(84±2)°.③修饰后的人工血管,具有较长的活化部分凝血激酶时间和凝血酶原时间、较低的溶血度0.065%、较少数量的血小板黏附.④凝血酶失活实验结果显示,凝胶灌注修饰后的人工血管,对凝血酶的活性有较强的抑制作用,因此具有血栓形成的性能且稳定性好.结论:肝素-海藻酸钠凝胶修饰的膨体聚四氟乙烯具有良好血液相容性及组织相容性,可应用于小口径人工血管.     

纯镁及两种不同涂层纯镁的溶血现象

背景：尽管作为植入材料镁具有良好的生物相容性及可降解吸收等优点,但镁腐蚀过快,它的快速腐蚀将引起其机械性能在骨组织康复之前就显著下降。目的：检测纯镁及微弧氧化、二水磷酸氢钙涂层后的纯镁的血液相容性。方法：将纯镁及微弧氧化、二水磷酸氢钙两种涂层后的纯镁浸提液与抗凝稀释兔血接触,阴性对照组用为生理盐水,阳性对照为蒸馏水。混匀后离心,用分光光度计测定其上清液的A值,计算溶血率。结果与结论：未经处理的纯镁浸提液组溶血率为52.34%,微弧氧化涂层后的纯镁浸提液组溶血率为0.32%,二水磷酸氢钙涂层后的纯镁浸提液组溶血率为0.14%,阴性对照组溶血率为0,阳性对照组溶血率为100%。提示未经处理的纯镁出现了较严重的溶血现象,涂层后的纯镁血液相容性良好,溶血率小于5%,符合国家标准。     

纯镁及两种不同涂层纯镁的溶血现象

背景:尽管作为植入材料镁具有良好的生物相容性及可降解吸收等优点,但镁腐蚀过快,它的快速腐蚀将引起其机械性能在骨组织康复之前就显著下降。目的:检测纯镁及微弧氧化、二水磷酸氢钙涂层后的纯镁的血液相容性。方法:将纯镁及微弧氧化、二水磷酸氢钙两种涂层后的纯镁浸提液与抗凝稀释兔血接触,阴性对照组用为生理盐水,阳性对照为蒸馏水。混匀后离心,用分光光度计测定其上清液的A值,计算溶血率。结果与结论:未经处理的纯镁浸提液组溶血率为52.34%,微弧氧化涂层后的纯镁浸提液组溶血率为0.32%,二水磷酸氢钙涂层后的纯镁浸提液组溶血率为0.14%,阴性对照组溶血率为0,阳性对照组溶血率为100%。提示未经处理的纯镁出现了较严重的溶血现象,涂层后的纯镁血液相容性良好,溶血率小于5%,符合国家标准。     

聚乳酸乙醇酸/RNA Ⅲ抑制肽缓释微球的组织相容性(英文)

目的:通过实验评价聚乳酸乙醇酸/RNA Ⅲ抑制肽缓释微球的组织相容性.方法:采用Fmoc法由C端至N端先合成粗品肽;采用反相液相色谱法对RNA Ⅲ抑制肽粗品进行纯化分析,按紫外吸收峰收集组分,冷冻干燥,得到RNA Ⅲ抑制肽纯品.再采用液相复乳法制备直径50-70 μm的聚乳酸乙醇酸/RNA Ⅲ抑制肽微球.以急性全身毒性试验、MTT细胞毒性试验、肌肉内植入试验、过敏试验、热原试验对其组织相容性进行初步评价.结果:①急性全身毒性试验结果显示3组动物无中毒反应,无动物死亡,体质量无明显变化.②MTT细胞毒性试验结果显示两种浸提液的平均细胞增殖率均大于85%,细胞毒等级1级,不具有细胞毒性.③肌肉内植入试验结果显示RNA Ⅲ抑制肽粉末和聚乳酸乙醇酸/RNA Ⅲ抑制肽微球植入4周后,组织未见明显充血、变性或坏死.RNA Ⅲ抑制肽粉末完全降解,微球部分降解,主要细胞成分为纤维母细胞,未见中性粒细胞及多核巨细胞等炎症细胞浸润.④过敏试验结果显示3组动物的平均原发刺激指数分别为0.38、0.33和0.31,3组间无显著差别.⑤热原试验结果显示每种材料测试的3只新西兰大白兔中,体温升高均在0.5℃以下,并且体温升高总度数在1.3℃以下,符合热原实验的评价标准.结论:聚乳酸乙醇酸/RNA Ⅲ抑制肽微球具有良好的组织相容性.     

煅烧骨的安全性

背景：经高温处理的煅烧骨具有类似自然骨的连续微孔结构,良好的生物相容性和降解性. 目的：观察牛煅烧骨的生物相容性、细胞相容性及毒性. 方法：①细胞相容性实验：将牛煅烧骨与第3代已诱导的Wistar大鼠骨髓间充质干细胞复合培养.②溶血实验：将煅烧骨浸提液、生理盐水与双蒸水加入兔血中.③凝血实验：将煅烧骨加入兔血浆中.④急性毒性实验：在昆明种小鼠尾静脉分别注射煅烧骨浸提液、生理盐水.⑤微核实验：在小鼠腹腔分别注射煅烧骨浸提液、生理盐水与环磷酰胺.⑥局部刺激性实验：将煅烧骨浸提液、生理盐水分别注射于兔两侧脊柱皮下.⑦热源检测实验：在兔耳静脉注射煅烧骨浸提液.⑧皮下植入实验：将煅烧骨材料植入Wistar大鼠背部皮下. 结果与结论：煅烧骨材料无细胞毒性,具有良好的细胞及血液相容性;对皮肤、肌肉无刺激作用;对心、肝、肾重要器官无毒性作用;皮下植入后对周围组织无刺激作用,能够部分降解吸收并被机体组织替代;无致热作用,对凝血功能无影响,对小鼠骨髓细胞无抑制及毒性作用.     

糖尿病患者血小板参数、血液流变学和凝血功能指标检测的临床意义

目的:探讨糖尿病患者血小板参数、血液流变学和凝血功能指标的临床价值.方法:对46例糖尿病有微血管病变患者、46例糖尿病无微血管病变患者和90例正常对照组的血浆凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原进行检测,测定三组人群血流变参数及血小板参数.结果:糖尿病有微血管病变组凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间均低于糖尿病无微血管病变组,而纤维蛋白原高于糖尿病无微血管病变组,两者之间差异有统计学意义(P＜0.05);血小板参数中平均血小板体积高于糖尿病无微血管病变组(P＜0.05),而血小板分布宽度、血小板计数和血小板压积差异均无统计学意义(P＞0.05);血流变参数中全血黏度、血浆黏度、红细胞压积均高于糖尿病无微血管病变组.结论:常规检测血小板参数、血液流变学和凝血功能指标,对糖尿病微血管病变患者的病情预测和早期诊治有重要意义.