胰岛淀粉样多肽、葡萄糖转运蛋白2在海洛因戒断、脱毒和复吸大鼠胰岛β细胞中的表达

目的探讨在大鼠海洛因戒断、脱毒治疗和复吸期间,胰岛淀粉样多肽(IAPP)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)在胰岛β细胞内表达的变化。方法正常雄性SD大鼠32只,随机分为实验组(n=24)和正常对照组(n=8),实验组又分为海洛因依赖戒断组、美沙酮脱毒治疗组和海洛因复吸组。各组大鼠取胰腺组织,采用免疫组织化学SABC法及图像分析方法进行研究。结果海洛因戒断时IAPP和GLUT2阳性细胞免疫染色较正常对照组变深,平均灰度值均低于正常组(P0.05),IAPP面数密度增大(P0.05);美沙酮脱毒期间,IAPP和GLUT2免疫阳性细胞染色变浅,平均灰度值较戒断时升高,与正常组差异无统计学意义,IAPP面数密度于正常组比较差异不显著(P0.05);海洛因复吸期间,IAPP和GLUT2阳性细胞免疫染色又加深,平均灰度值降低(P0.05),IAPP面数密度再次增大(P0.05)。结论在海洛因戒断和复吸期间,表达于大鼠胰岛β细胞的IAPP和GLUT2合成增加,美沙酮脱毒期间合成减少,两者变化规律一致,提示在海洛因戒断,脱毒和复吸过程中,两者的合成同步,可能参与调节海洛因戒断,美沙酮脱毒治疗及复吸大鼠机体能量代谢过程,与调节大鼠摄食、体重及保护胰岛细胞功能有关。     

海洛因依赖对大鼠胰岛A细胞胰高血糖素表达和功能的影响

目的探讨海洛因依赖对大鼠胰岛A细胞胰高血糖素免疫反应（Glu-IR）的影响.方法应用免疫组织化学SABC单染法、形态计量及放射免疫测定法,研究大鼠海洛因依赖期间,A细胞面数密度（NA）及血浆胰高血糖素水平的变化.结果与正常组及盐水组比较,A细胞免疫组织化学显色在海洛因依赖组均增强,阳性细胞增多;A细胞的NA在海洛因依赖第38 d组明显增加,P〈0.01;血浆胰高血糖素水平在海洛因依赖第10 d、24 d、38d组均高于正常组和盐水组,P〈0.01.结论A细胞通过增加细胞数和增强合成分泌胰高血糖素的功能,参与海洛因依赖期间大鼠糖代谢的调节过程.     

大鼠海洛因依赖期间胰岛B细胞形态学和功能变化的研究

目的探讨胰岛B细胞在海洛因依赖期间的可能作用.方法应用免疫组织化学SABC法、图像分析法和放射免疫测定法,观察大鼠海洛因依赖期间胰岛B细胞免疫组织化学反应、光密度及血清胰岛素水平的变化.结果与正常组和盐水组比较,海洛因依赖组大鼠B细胞免疫反应明显增强,染色加深,且以24d时最为显著.图像分析结果表明,海洛因依赖组B细胞的平均光密度较正常和盐水组显著降低（P＜0.05）,以24 d时间组最低.放射免疫测定结果显示,海洛因依赖组大鼠血清胰岛素（Ins）浓度始终高于正常组和盐水组（P＜0.05）.结论胰岛B细胞的变化表明,在海洛因依赖期间,大鼠胰岛B细胞胰岛素的合成增多,分泌增强,参与了机体在海洛因依赖期间的调节过程.     

海洛因对大鼠胰岛β-内啡肽免疫反应细胞表达与功能的影响

目的:探讨海洛因依赖对大鼠胰岛β-内啡肽(β-endorphine immunoreactive,β-EP-IR)免疫反应(IR)细胞分泌功能的影响及β-EP-IR细胞与胰高血糖素(Glu)-IR细胞的相互关系。方法:用免疫组织化学SABC单染法、邻片单染双标法、图像分析及形态计量法,研究海洛因依赖大鼠胰岛β-EP-IR细胞形态学及功能变化。结果:与正常组和盐水对照组比较,海洛因依赖期间胰岛β-EP-IR细胞免疫染色减弱;平均灰度和面数密度(NA)增加非常显著。胰岛中多数β-EP-IR细胞与Glu-IR细胞位置相同,定位于A细胞。结论:机体通过减少胰岛β- EP分泌,参与了海洛因依赖过程,同时促进了机体损伤。     

海洛因依赖对大鼠睾丸表皮生长因子、β-内啡肽阳性细胞及血清卵泡刺激素的影响

目的 探讨海洛因依赖对大鼠睾丸表皮生长因子(EGF)、β-内啡肽(β-EP)阳性细胞的影响和血清卵泡刺激素(FSH)的变化. 方法 成年雄性SD大鼠55只,随机分为正常对照组、盐水对照组及海洛因依赖组.皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于模型建立的第10、17、24、31、38天取睾丸组织.采用免疫组织化学SABC法、细胞计数、图像分析方法及放射免疫测定技术进行研究. 结果 1. 与正常及盐水对照组比较,海洛因依赖组大鼠睾丸EGF阳性细胞免疫染色强度有所增强,平均灰度值明显低于正常及盐水对照组,但细胞数量有所减少(P<0.05).2. 海洛因依赖组大鼠睾丸β-EP阳性细胞数量有所减少(P<0.05),免疫染色强度较正常对照组和盐水对照组有所减弱,平均灰度值逐渐增高(P<0.05).3.放射免疫测定结果表明,血清FSH在第10天水平较低,第17天有所增高. 结论 海洛因依赖期间,大鼠睾丸EGF阳性细胞的分泌功能增强,β-EP阳性细胞的分泌功能减弱,两者细胞数量均有所减少,血清FSH分泌量有所改变.提示,睾丸内分泌细胞在海洛因依赖期间可能参与了机体神经内分泌的调节过程.     

海洛因依赖对大鼠垂体促肾上腺皮质激素阳性细胞和血清皮质醇的影响

目的探讨海洛因依赖对大鼠垂体远侧部促肾上腺皮质激素细胞表达促肾上腺皮质激素(ACTH)的影响以及血清皮质醇(COR)的改变,并探讨引起变化的可能机制。方法成年雄性SD大鼠55只,随机分为正常对照组、盐水对照组及海洛因依赖组。皮下注射海洛因,建立海洛因依赖大鼠模型,分别于模型建立的第10、17、24、31、38天取垂体组织。应用免疫组织化学SABC法、图像分析法及放射免疫方法进行研究。结果与正常对照组和盐水对照组比较,海洛因依赖组大鼠垂体远侧部ACTH阳性细胞免疫反应明显减弱,与正常及盐水对照组比较有显著性差异;图像分析显示,海洛因依赖组ACTH阳性细胞的平均灰度值增高(P0.05〉。放射免疫法测定结果显示,海洛因依赖组血清COR含量较正常对照组明显降低,经统计处理,差异有统计学意义(P0.05)。结论在海洛因依赖期间,垂体远侧部ACTH阳性细胞表达减少,血清COR含量降低,提示在大鼠海洛因依赖期间,垂体-肾上腺轴功能受到抑制。     

海洛因依赖对大鼠直肠神经肽Y表达的影响

目的探讨海洛因依赖期间大鼠直肠内神经肽Y（NPY）免疫反应阳性细胞的形态学改变。方法选取成年SD大鼠,分为海洛因依赖组、盐水对照组和正常对照组,皮下注射海洛因建立大鼠海洛因依赖模型,取直肠组织用免疫组织化学SABC法及图像分析法进行研究。结果与正常及盐水对照组比较,海洛因依赖组大鼠直肠NPY阳性细胞的细胞数均增多。图像分析显示海洛因依赖期间大鼠直肠内NPY阳性细胞的平均灰度值均低于正常及盐水对照组（P〈0.05）;以17 d时间组最低（P〈0.05）。结论海洛因依赖期间直肠NPY阳性细胞的平均灰度值发生变化,提示NPY合成和分泌增多。     

海洛因依赖大鼠中脑腹侧被盖区和伏隔核内L-ENK和生长抑素表达的变化

目的:探讨海洛因依赖大鼠中脑腹侧被盖区(VTA)和伏隔核(NAc)内亮氨酸脑啡肽(L-ENK)和生长抑素(SS)表达的变化及其可能的机制。方法:成年雄性SD大鼠55只,随机分为正常对照组、盐水对照组及海洛因依赖组。皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于模型建立的第10、17、24、31、38 d取脑组织,应用免疫组织化学SABC法、图像分析法检测VTA和NAc内L-ENK和SS的表达。结果:海洛因依赖组大鼠VTA和NAc中L-ENK和SS阳性细胞免疫反应明显减弱,与正常及盐水对照组比较有显著性差异(P<0.05);图像分析显示海洛因依赖组L-ENK和SS阳性细胞的平均灰度值增高(P<0.05)。结论:在海洛因依赖期间,大鼠VTA和NAc内L-ENK和SS免疫阳性物质的表达均明显减少,提示海洛因依赖对神经元的神经内分泌功能造成了损伤。     

5-HT、生长抑素及 P物质在海洛因依赖大鼠直肠的定位和表达

目的 探讨海洛因依赖期间大鼠直肠内5-HT、生长抑素(SS)和P物质(SP)免疫反应(IR)细胞的形态学改变.方法 选取成年SD大鼠,分为海洛因依赖组(30只)、盐水对照组(30只)和正常对照组(6只),皮下注射海洛因建立大鼠海洛因依赖模型.取直肠组织用免疫组织化学SABC法及图像分析法进行研究.结果 与正常组及盐水对照组比较,海洛因依赖组大鼠直肠5-HT、SS及SP免疫反应细胞的细胞数均增多(P<0.05). 5-HT、SS、 SP-IR细胞免疫染色增强,图像分析显示,海洛因依赖期间大鼠直肠内5-HT、SS及SP 免疫反应细胞的平均灰度值均低于正常组及盐水对照组(P<0.05);其中5-HT、SS-IR细胞以31d时间组最低(P<0.05),SP-IR细胞以38d时间组最低(P<0.01).结论 海洛因依赖期间直肠5-HT、SS和SP-IR细胞的细胞数及平均灰度值均发生变化,提示5-HT、SS和SP合成和分泌增多.     

海洛因依赖期间大鼠下颌下腺EGF及IL-2阳性细胞的免疫组织化学研究

目的 观察海洛因依赖对大鼠下颌下腺表皮生长因子(EGF)及白细胞介素2(IL-2)阳性细胞形态及功能的影响.方法 正常SD大鼠,随机分为空白对照组、盐水对照组及海洛因依赖组.皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于第10、17、24、31、38d取下颌下腺组织.用免疫组织化学SABC法、图像分析及细胞计数方法进行研究.结果 1.与空白对照组相比,盐水对照组大鼠下颌下腺EGF、IL-2阳性细胞的数量及强度均无明显改变.2.海洛因依赖期间,大鼠下颌下腺EGF、IL-2阳性细胞的免疫反应增强,细胞数量明显增加(P<0.05).图像分析结果显示,在整个海洛因依赖期间,EGF、IL-2 阳性细胞的平均灰度值始终低于空白组及盐水对照组(P<0.05).3.EGF与IL-2在大鼠下颌下腺内分泌细胞中有共存现象.结论 在海洛因依赖期间,大鼠下颌下腺EGF、IL-2阳性细胞的数量及反应强度均发生了规律性改变,提示大鼠下颌下腺分泌的EGF及IL-2参与了机体对海洛因依赖的调节过程.     

Effect of heroin dependence on 5-hydroxytryptamine, somatostatin and substance P immunoreactive cells in the rat ileum

目的:探讨海洛因依赖对大鼠回肠5-羟色胺(5-HT)、生长抑素(SS)和P物质(SP)免疫反应(IR)细胞的影响.方法:选取成年SD大鼠,分为正常对照组、盐水对照组和海洛因依赖组,建立大鼠海洛因依赖模型,取回肠组织用免疫组织化学SABC法及图像分析法进行研究.结果:与正常及盐水对照组比较,海洛因依赖组大鼠回肠5-HT免疫反应细胞增多,SS及SP免疫反应细胞数无明显变化.5-HT、SS-、SP-IR细胞免疫显色增强,图像分析显示海洛因依赖期间大鼠回肠内5-HT、SS及SP-IR细胞的平均灰度值均低于正常及盐水对照组.结论:海洛因依赖期间,回肠5-HT、SS和SP-IR细胞的5-HT、SS和SP表达增加.     

海洛因依赖大鼠十二指肠胃泌素和生长抑素免疫反应阳性细胞免疫组织化学和形态计量

目的:探讨海洛因依赖对大鼠十二指肠胃泌素(Gas)、生长抑素(SS)免疫反应(IR)细胞形态学和功能改变的影响.方法:应用免疫组织化学SABC法.结果:与正常对照组及盐水对照组比较,Gas-IR、 SS-IR细胞免疫组织化学显色在海洛因依赖组均增强,阳性细胞数增多;图像分析结果表明,海洛因依赖组Gas-IR、 SS-IR细胞的平均灰度值较正常和盐水对照组显著降低,以24d组最低.结论:大鼠十二指肠中的Gas-IR、 SS-IR细胞通过细胞数的增加以及增强合成、分泌Gas、 SS的方式,参与海洛因依赖期间大鼠机体内的调节过程.     

海洛因依赖对大鼠胃窦胃泌素、生长抑素阳性细胞的影响

目的 探讨海洛因依赖对大鼠胃窦胃泌素(Gas)、生长抑素(SS)阳性细胞的影响,以及Gas、SS在海洛因依赖时的可能作用.方法 应用免疫组织化学SABC法和图像分析技术.结果 1.与正常组和盐水对照组相比,海洛因依赖大鼠胃窦内的Gas阳性细胞数量增加(P＜0.05),染色强度随依赖时间逐渐增强,平均灰度值明显低于空白及盐水对照组(P＜0.05),且随依赖时间的延长呈下降的趋势,38d时最低.2.海洛因依赖组大鼠胃窦SS阳性细胞染色强度增强,细胞数量显著高于空白和盐水对照组(P＜0.05),平均灰度值低于空白及盐水对照组(P＜0.05).结论 大鼠胃窦Gas、SS阳性细胞可能通过增加细胞数量和增加Gas、SS的合成来参与大鼠海洛因依赖的调节过程.     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛PP细胞的免疫组织化学研究

目的 探讨胰多肽在大鼠胃溃疡自愈期间的可能作用及意义.方法 应用免疫组织化学PAP法、形态计量和图像分析法,研究大鼠胃溃疡自愈期间胰岛PP细胞的形态学、细胞的面数密度(NA)及平均灰度变化.结果 与正常组和盐水组比较,胃溃疡组大鼠胰岛PP细胞NA于溃疡第6d明显下降,平均灰度值升高(P＜0.05);溃疡第10～28d,PP细胞NA升高、平均灰度值下降(P＜0.05);尤以第10d最明显.胰岛PP细胞免疫组织化学的形态观察结果与同期图像分析结果基本一致.结论 胰岛PP细胞在实验性胃溃疡自愈期间,其细胞NA和平均灰度均发生改变.提示PP细胞参与了胃溃疡自愈的调节过程.     

海洛因依赖对大鼠甲状腺降钙素阳性细胞及血清FT_3、FT_4、促甲状腺素的影响

目的探讨海洛因依赖对大鼠甲状腺C细胞表达降钙素(CT)及血清FT3、FT4、促甲状腺素(TSH)的影响。方法成年雄性SD大鼠55只,随机分为正常对照组、盐水对照组及海洛因依赖组。皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于模型建立的第10、17、24、31、38天取甲状腺组织。采用免疫组织化学SABC法、细胞计数、图像分析方法及化学发光法技术进行研究。结果与正常对照组及生理盐水对照组比较,海洛因依赖组大鼠甲状腺内CT阳性细胞免疫染色强度减弱,细胞数量减少(P0.05);平均灰度值显著升高(P0.05),且呈逐渐增高趋势。海洛因依赖期间,血清TSH浓度与正常对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。海洛因依赖10、17d,血清FT3浓度较正常对照组降低(P0.05)。海洛因依赖期间,血清FT4浓度较正常对照组有所升高,在24d和38d增高明显(P0.05)。结论海洛因依赖期间,大鼠甲状腺CT阳性细胞数量减少,分泌功能减退。血清FT3浓度有所降低,FT4浓度有所升高,TSH浓度无明显变化,提示海洛因依赖可能使甲状腺功能受到影响。     

海洛因依赖对大鼠胃窦生长抑素和白细胞介素2阳性细胞表达的影响

目的:探讨海洛因依赖对大鼠胃窦生长抑素(SS)、白细胞介素2(IL-2)阳性细胞表达的影响。方法:应用免疫组织化学SABC法及图像分析技术。结果:海洛因依赖组大鼠胃窦SS阳性细胞染色强度增强,细胞数量显著高于空白和盐水对照组,平均灰度值低于正常及盐水对照组;IL-2阳性细胞的数量及染色强度显著降低,平均灰度值升高。结论:大鼠胃窦中SS、IL-2阳性细胞通过形态数量及细胞内的SS、IL-2的含量改变参与了在海洛因依赖期间机体的调节过程。     

采用去β细胞技术建立胰岛α细胞大鼠模型

目的 建立一种去除胰岛β细胞的α细胞大鼠模型.方法 12周龄SD大鼠分为3组(n=8):正常对照组(NC)、模型1组(M1)和模型2组(M2),M1和M2组大鼠分别腹腔注射1次链脲佐菌素(STZ)100和150 mg/kg,5 d后处死大鼠,胰腺组织匀浆检测胰岛素(Ins)和胰高糖素(Glc)的含量;胰腺组织HE染色,Ins、Glc经免疫组织化学染色并图像定量分析.结果 去β细胞大鼠(M1和M2组)胰岛丽积约为正常大鼠的1/7,β细胞面积占胰岛面积比例由正常状态的74.3%分别下降到5.4%和5.2%,胰腺匀浆液Ins的含量不到正常的3%,而Glc的含量略有上升.NC组Glc阳性细胞位于胰岛周边,数量较少,M1和M2组Glc阳性的α细胞由周边向中央聚集,α细胞面积占胰岛面积比例由16.4%分别上升到76.5%和74.4%.结论 STZ一次大剂量腹腔注射可获得完全去除胰岛β细胞的大鼠模型,且不影响α细胞的形态和功能,建立胰岛α细胞大鼠模型.     

1型糖尿病小鼠胰岛胰岛淀粉样多肽和生长抑素阳性细胞表达的改变

目的探讨1型糖尿病(T1DM)小鼠胰岛表达胰岛淀粉样多肽(IAPP)、生长抑素(SS)的改变及可能的机制。方法取正常C57BL/6J小鼠,小剂量多次注射链脲菌素(STZ)建立1型糖尿病小鼠模型,分别于第3、7、10、14、21、28天取胰尾组织,通过免疫组织化学SABC法、激光扫描共焦显微镜免疫荧光检测法及图像分析、形态计量法进行研究。结果 1.IAPP阳性细胞面数密度(NA)自第3天开始减少(P0.05),平均吸光度自第7天开始增高,与正常及生理盐水对照组比较差异具有显著性(P0.05);2.1型糖尿病组小鼠胰岛SS阳性细胞NA自第3天开始增加(P0.05),平均吸光度自第7天开始增高(P0.05);3.免疫荧光双染法显示,小鼠胰岛IAPP和SS在部分细胞有共表达。结论 1型糖尿病小鼠胰岛IAPP阳性细胞数目减少,表达增强;SS阳性细胞数量及表达均上调;IAPP和SS在部分细胞有共表达。提示IAPP阳性细胞和SS阳性细胞均参与了1型糖尿病的病变过程。     

海洛因依赖对大鼠中脑腹侧被盖区和伏隔核内DβH和CCK表达的影响

目的:探讨海洛因依赖对大鼠中脑腹侧被盖区(VTA)和伏隔核(NAc)神经元,DβH(dopamine-beta-hydroxylase)和CCK(cholecystokinin)表达的影响,旨在探讨大脑在海洛因依赖过程中的自我调节多巴胺的释放和保护机制。方法:成年雄性SD大鼠55只,随机分为正常对照组(NCG)5只,实验性海洛因依赖组(HDG)及生理盐水对照组(SCG)各25只。建立海洛因依赖模型,并分别于第10、17、24、31、38 d取脑组织,用免疫组织化学SABC法检测VTA、NAc区内表达DβH和CCK的阳性细胞,并用图像分析法测定其平均光密度值。结果:VTA、NAc区内DβH和CCK阳性细胞免疫反应产物呈棕黄色颗粒状,定位于胞质内。与NCG组和SCG组比较,HDG组在不同时间点VTA、NAc区内的DβH阳性细胞免疫反应强度减弱,染色变浅,而CCK阳性细胞免疫反应强度明显增强,染色变深。结论:在海洛因依赖期间,CCK表达增强、DβH的活性被抑制可能是VTA、NAc区多巴胺升高的原因之一,同时CCK的分泌增加可能是脑的自我保护机制。     

海洛因依赖大鼠空、回肠嗜银细胞定位和表达

目的探讨海洛因依赖对大鼠空、回肠嗜银细胞的影响。方法成年SD大鼠66只,按配对原则随机分为空白组,盐水组和海洛因组,建立海洛因依赖动物模型。分别于10、17、24、31、38 d取空、回肠组织,应用镀银染色法及图像分析法观察空、回肠嗜银细胞的数量及染色强度变化。结果与空白组及盐水组比较,海洛因组大鼠空、回肠嗜银细胞的数量增加,染色明显加深。图像分析结果表明海洛因组大鼠空、回肠嗜银细胞平均灰度值显著降低(P<0.01);空肠各时间点、回肠第17天和第24天时间点嗜银细胞数量明显增多(P<0.05)。结论海洛因依赖期间,大鼠空、回肠嗜银细胞数量和表达明显增加。