缺氧肺微血管内皮细胞培养液对平滑肌细胞的作用观察

缺氧肺微血管内皮细胞培养液对平滑肌细胞的作用观察第三军医大学新桥医院呼吸内科研究所（重庆６３００３７）王关嵩杨晓静胡义德钱桂生黄绒目的：观察缺氧肺微血管内皮细胞（ＰＶＭＥＣ）和平滑肌细胞（ＳＭＣ）间的相互作用。方法：缺氧ＰＶＭＥＣ的上清液加入无血清培...     

红细胞生成素3‘—增强子片段对内皮细胞缺氧时环加氧酶—2？…

目的和方法：体外合成红细胞生成素（Ｅｐｏ）３‘－增强子野生型及突变型片段，借助脂质全，转入内皮细胞用半定量ＲＴ－ＰＣＲ方法测定分离细胞在常氧或缺氧条件下培养４ｈ的环加氧酶２（ＣＯＸ－２）ｍＲＮＡ。结果：（１）大鼠主主动脉内皮细胞、肺微血管内皮细胞在常氧下培养，有ＣＯＸ－２基因表达；（２）缺氧能诱导这两种细胞ＣＯＸ－２基因表达增加；（３）野生型Ｅｐｏ３’－增强子片段能阻断缺氧地内皮细胞ＣＯＸ－２基因     

红细胞生成素3'-增强子片段对内皮细胞缺氧时环加氧酶-2基因表达的影响

目的和方法：体外合成红细胞生成素（Ｅｐｏ）３′－增强子野生型及突变型片段，借助脂质体，转入内皮细胞，用半定量ＲＴ－ＰＣＲ方法测定分离细胞在常氧或缺氧条件下培养４ｈ的环加氧酶２（ＣＯＸ－２）ｍＲＮＡ。结果：（１）大鼠主动脉内皮细胞、肺微血管内皮细胞在常氧下培养，有ＣＯＸ－２基因表达；（２）缺氧能诱导这两种细胞ＣＯＸ－２基因表达增加；（３）野生型Ｅｐｏ３′－增强子片段能阻断缺氧对内皮细胞ＣＯＸ－２基因表达的诱导作用，而突变片段则无此作用。结论：在ＣＯＸ－２基因序列中，可能存在Ｅｐｏ３′－端增强子片段，它参与了内皮细胞的缺氧反应     

缺氧性肺动脉高压时内皮素的变化及其意义

目的：探讨内皮素－１（ＥＴ－１）与缺氧性肺动脉高压（ＨＰＨ）的相互关系。方法：对缺氧组（Ｈ组）及正常对照组（Ｃ组）大鼠,用免疫组织化学方法观察ＥＴ－１在肺组织内的表达及分布,并采用放射免疫方法测定大鼠血浆中ＥＴ－１的含量。结果：Ｃ组大鼠肺组织仅大血管及支气管有少量ＥＴ－１阳性物质表达,Ｈ组ＥＴ－１阳性表达不仅可见于大血管内皮,平滑肌,而且存在小血管内皮,平滑肌及支气管平滑肌中;     

缺氧培养的心内膜内皮细胞内皮素自分泌调节的探讨

缺氧培养的心内膜内皮细胞内皮素自分泌调节的探讨第三军医大学新桥医院心内科（重庆６３００３７）刘健何作云曾强１许蜀闽２王俊元２孙秉庸２心内膜内皮细胞（ＥＥＣ）是心脏功能重要的调节者。本实验观察缺氧对其ＥＴ－１分泌的影响。传代培养的新生小牛右心室ＥＥＣ的...     

慢性缺氧影响肺脏内皮素和一氧化氮合成酶mRNA的表达

以逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了慢性缺氧大鼠肺组织内内皮素－１（ＥＴ－１）ｍＲＮＡ．内皮素受体－Ａ（ＥＴＲ－Ａ）ｍＲＮＡ和一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）ｍＲＮＡ的表达水平。结果显示：缺氧１，２．３周时，肺内ＥＴ－１ｍＲＮＡ分别较正常对照上升６３．８％，１０５．５％和４０．９％（Ｐ均＜０．０５）。ＥＴＲ－ＡｍＲＮＡ分别上升５０．６％．５７．４％和５６．３％（Ｐ均＜０．０５），而ＮＯＳｍＮＲＡＲ则分别较正常对照下降３４．２％．４９．６％和３３．５％（Ｐ均＜０．０５）。提示缺氧时肺内ＥＴ水平上升和ＮＯ减少与缺氧刺激肺内ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达增加和ＮＯＳｍＲＮＡ表达减少有关。     

慢性缺氧影响肺脏内皮素和一氧经氮合成酶mRNA的表达

以逆转录多聚酶链反庆（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了慢性缺氧大鼠肺组织内皮素－１（ＥＴ－１）ｍＲＮＡ内皮素受体－Ａ（ＥＴＲ－Ａ）ｍＲＮＡ和一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）ｍＲＮＡ的表达水平，结果显示：缺氧１、２、３周时，肺内ＥＴ－１ｍＲＮＡ分别较正常对照上升６３．８％，１０５．５％，和４０．９％（Ｐ均〈０．０５），ＥＴＲ－ＡｍＲＮＡ分别上升５０．６％，５７．４％和５６．３％（Ｐ均〈０．０５）而ＮＯＳｍＲＮＡ则分别较     

香烟烟雾抽提物对肺动脉内皮细胞环氧合酶，血栓素合成酶mRNA水平及PGI_2，TXA_2生成的影响

本实验应用放免测定及分子杂交技术观察了香烟烟雾抽提物（ＣＳＥ）对培养的猪肺动脉内皮细胞环氧合酶，血栓素合成酶基因表达和ＰＧＩ＿２，ＴＸＡ＿２生成的影响，进一步从分子水平探讨由内皮细胞产生的前列腺素在ＣＳＥ影响肺血管张力和ＨＰＶ中的作用。结果发现：在常氧或缺氧下，ＣＳＥ可促使内皮细胞环氧合酶—１ｍＲＮＡ水平升高于对照组的１．５倍，而环氧合酶—２ｍＲＮＡ则分别比对照组高２倍和１倍。同时在常氧或缺氧时，ＣＳＥ使内皮细胞条件培养基中６—ｋｅｔｏ—ｐＧＦｌａ．明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。然而，不论常氧或缺氧时，ＣＳＥ不影响血栓素合成酶基因表达和ＴＸＡ２的生成。提示在常氧和缺氧时，ＣＳＥ所致的环氧合酶ｍＲＮＡ水平升高及ＰＧＩ２增加介导了猪吸烟时肺血管张力和ＨＰＶ的降低。     

L-精氨酸对缺氧性肺动脉高压大鼠内皮素释放的影响

目的：探讨Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）对缺氧性肺动脉高压（ＨＰＨ）大鼠血浆内皮素－１（ＥＴ－１）释放的影响。方法：将Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只分为：对照组,缺氧组,缺氧＋Ｎ＾ω－硝基－Ｌ－精氨酸甲脂（Ｌ－ＮＡＭＥ）组和缺氧Ｌ－Ａｒｇ组。结果：缺氧组的肺动脉平均压（ｍＰＡＰ）显著高于对照组（Ｐ〈０．０５）,缺氧组＋Ｌ－Ａｒｇ组的ｍＰＡＰ显著低于缺氧组（Ｐ〈０．０５）及缺氧＋Ｌ－ＮＡＭＥ组（Ｐ〈０．０１）,缺     

内皮素与外伤后迟发性缺血性脑损害

内皮素是一种由２１个氨基酸组成的血管活性多肽，包括ＥＴ－１、ＥＴ－２和ＥＴ－３三种类型，其中ＥＴ－１由血管内皮细胞产生。多种化学或物理因素对ＥＴ的合成和分泌起调节作用，血管平滑肌中有ＥＴ－Ａ和ＥＴ－Ｂ两种受体，ＥＴ－１选择性作用于ＥＴ－Ａ受体引起血管收缩。在蛛网膜下腔出血（ＳＡＨ）后的脑血管痉挛中，ＥＴ－Ａ受体介导的血管收缩起了重要作用。ＥＴ－１和ＥＴ－Ａ受体结合后通过激活平滑肌细胞膜上的ＰＩＰ２系统、Ｌ型Ｃａ２＋通道和Ｎａ＋／Ｈ＋交换等一系列信号系统而发挥作用。脑外伤后，机体的应激反应、血管内皮细胞损伤、出血、缺血、缺氧均可使ＥＴ的合成和释放增加，进而导致脑血管痉挛，发生迟发性缺血性脑损害。     

吸入地塞米松对哮喘豚鼠内皮素-1的影响

建立豚鼠哮喘模型,检测肺活组织、支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）、血浆内皮素－１（ＥＴ－１）水平有地塞米松干预后的变化以探讨ＥＴ－１在支气管的作用。结果显示哮喘组肺活组织、ＢＡＬＦ、血浆ＥＴ－１显著升高：吸入地塞米松后ＥＴ－１均显著下降。提示：ＥＴ－１可能参与支气管哮喘的发生和 ,吸入糖皮质激素可以抑制体内ＥＴ－１的生成和释放,这可能是糖皮质激素治疗支气管哮喘的重要机制之一。     

高速枪弹压力波调控内皮细胞ET—1的信号通路

目的和方法：以高速枪弹压力波致伤培养细胞为实验模型，以特异的Ｇ蛋白和肌醇磷脂代谢抑制剂作用培养内皮细胞，力图从分子创伤学角度探讨压力波调控ＥＴ－１的信号通路。结果：磷脂酶Ｃ抑制剂ｎｅｏｍｙｃｉｎ作用内皮细胞，明显消除压力波对ＥＴ－１释放及表达的刺激作用。Ｇ蛋白抑制剂ＧＤＰ－β－Ｓ则无明显作用。蛋白激酶Ｃ抑制剂ｓｌａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ对压力波作用后ＥＴ－１基因表达增强有较强的抑制作用。结论：高速枪弹压力波对内皮细胞ＥＴ－１的调控可能通过某种直接途径（而非Ｇ蛋白介导）激活肌醇磷脂代谢，从而生成ＩＰ３和二酰基甘油。ＩＰ３可能参与早期ＥＴ－１释放，二酰基甘油对ＰＫＣ的激活参与了ＥＴ－１基因表达的调控。     

牛磺酸对大鼠慢性缺氧性肺动脉高压的预防作用

目的：进一步研究牛磺酸对慢性缺氧性肺动脉高压的防治作用。方法：复制大鼠间断缺氧４周模型,采用透射电镜、放射免疫和生化技术研究牛磺酸对肺动脉高压的治疗效果。结果：缺氧４周大鼠肺动脉压力升高,右心肥大,血中ＥＴ－１、ＡＣＥ水平升高,ＮＯ－２／ＮＯ－３和ＳＯＤ水平降低;ＭＰＡＰ与ＥＴ－１呈正相关,与ＮＯ－２／ＮＯ－３呈负相关;牛磺酸可抑制缺氧大鼠ＥＴ－１和ＡＣＥ分泌,增加ＮＯ和ＳＯＤ水平,降低肺动脉压力;透射电镜观察表明牛磺酸能对抗缺氧大鼠的心肺组织损伤。结论：牛磺酸通过减轻缺氧所致细胞损伤,调节血管舒缩物质的平衡,对缺氧性肺高压有一定防治作用。     

血管活性肠肽对内皮细胞分泌ET－1含量的研究

血管活性肠肽对内皮细胞分泌ＥＴ－１含量的研究第三军医大学大坪医院（重庆６３００４２）１训练部徐有奇田玉静姚忠祥１蔡文琴１内皮素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ，ＥＴ）是从培养的猪主动脉内皮细胞上清中分离纯化出来的２１肽生物活性物质，是迄今所知最强的收缩血管多肽...     

妊高征患者血浆一氧化氮和内皮素变化以及对胎儿的影响

目的：探讨一氧化氮（ＮＯ）和内皮素（ＥＴ－１）在妊高征发病中的作用及其对胎儿生长发育的影响。方法：采用比色法和放射免疫法对正常妊娠妇女２７例,正常未孕组２０例９对照组）,妊高征患者５２例（妊高征组）的血浆、新生儿脐血（２３例）中ＮＯ和ＥＴ－１水平进行检测。结果：妊高征组ＥＴ－１水平较对照组高,以中重度妊高征组增高显著（Ｐ〈０．０１）。ＮＯ水平较对照组低,差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。在中重度妊高征者中,合并胎儿生长发育迟缓组（ＩＵＧＲ）母血和新生儿脐血ＥＴ－１水平明显高于 且。ＮＯ水平则明显低于未合并ＩＵＧＲ组。结论：ＮＯ的合成、释放减少与内皮细胞损伤ＥＴ－１释放增加,在妊高征发病中超重要作用。并且影响胎儿的生长发育。     

缺氧对肺动脉内皮细胞和肺动脉平滑肌细胞5-羟色胺转载体基因表达的影响

缺氧对肺动脉内皮细胞和肺动脉平滑肌细胞５－羟色胺转载体基因表达的影响第三军医大学新桥医院心内科（重庆６３００３７）；１第三军医大学病理生理教研室刘健王培勇１何作云目的：观察肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）在无氧（０％Ｏ２＋９...     

缺氧对肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞5-羟色胺转载体基因表达的影响

目的：探讨无氧（Ｏ％Ｏ２＋９５％Ｎ２＋５％ＣＯ２）和低氧（２５～３％Ｏ２＋９２％Ｎ２＋５％ＣＯ２）对新生小牛肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和肺动肺平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）５－羟色胺转载体基因表达的影响。方法：应用细胞培养，核酸分子杂交技术。结果：无氧组和低氧组（１５ｈ、３ｈ、６ｈ）ＰＡＥＣ５－羟色胺转载体ｍＲＮＡ表达显著高于常氧组（Ｐ＜００５），而无氧和低氧１２ｈ至４８ｈ对ＰＡＥＣ５－羟色胺转载体ｍＲＮＡ表达无明显影响。无氧和低氧（３ｈ、６ｈ、１２ｈ、２４ｈ）组ＰＡＳＭ５－羟色胺ｍＲＮＡ表达均显著高于常氧组（Ｐ＜００１），结论：推测缺氧早期通过促进ＰＡＥＣ５－羟色胺转载体基因表达，加强ＰＡＥＣ对５－羟色胺的摄取和降解，随缺氧时间的延长，ＰＡＥＣ的此功能受损。缺氧ＰＡＳＭ５－羟色胺转载体基因表达的持续增加，则可能参与缺氧肺动脉高压的形成。     

常压缺氧大鼠血浆和肺组织TXB_2和6－keto－PGF_（1α）的动态变化

本文观察常压缺氧２４ｈ及１，２，４ｗ（６ｈ／ｄ，６ｄ／ｗ）后大鼠血小板数及聚集率和血浆及肺ＴＸＢ＿２和６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１α）的动态变化。结果表明（１）缺氧大鼠血小板数呈先增加、后恢复、再下降，血小板聚集率呈先减少、后增加再减少的动态变化。（２）血浆ＴＸＢ＿２和６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１α）均明显升高，（３）肺组织６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１α）升高早于ＴＸＢ＿２，提示ＰＧＩ＿２参干旱期缺氧肺血管张力调节。（４）缺氧大鼠２周时肺动脉高压达到高峰，右心室明显肥厚，而肺组织ＴＸＢ＿２至缺氧４周后才见增加，表明ＴＸＢ＿２不是缺氧早期肺血管收缩的主要因素。     

TNFα对血管内皮细胞的损伤作用及其分子机制

ＴＮＦα是一种重要的炎症介质。血管内皮细胞是ＴＮＦα作用的靶细胞之一。由ＴＮＦα引起的血管内皮细胞损伤在很多炎症性疾病的发病中具有重要意义。本工作主要研究不同浓度的ｒｈＴＮＦα（简称ＴＮＦ）引起大血管内皮细胞（人脐静脉内皮细胞）和微血管内皮细胞（大鼠肺微血管内皮细胞）形态、功能、代谢的损伤以及其与内皮细胞中原癌基因表达的关系,试图从中说明ＴＮＦ引起血管内皮细胞早期损伤的部分分子机制。１－细胞增殖动力学：在体外培养的大血管内皮细胞（ＨＶＥＣ,第３～４代）中发现,加入ＴＮＦ（２０～４０ｎｇｍＬ）后…     

TNF-α、IL-1β 、LPS对人多核白细胞、脐静脉内皮细胞血小板内皮细胞粘附分子-1表达的影响

目的：初探炎性刺激对人多核白细胞（ＰＭＮ）和脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）的血小板内皮细胞粘附分子－１（ＰＥＣＡＭ－１）表达的影响和ＰＥＣＡＭ－１的可能作用。方法：使用流式细胞仪和免疫组化法,观察脂多糖（ＬＰＳ）、白介素（ＩＬ）－１β和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）－ａ对ＰＭＮ和ＨＵＶＥＣ ＰＥＣＡＭ－１表达的变化。结果：ＬＰＳ、１Ｌ－１β和ＴＮＦ－ａ可引起ＰＭＮ表达ＰＥＣＡＭ－１蛋白减少,而对ＨＵＶＥＣ　ＰＥＣＡＭ－１的表达无显著影响,但组化显著在ＨＵ－ＶＥＣ连接部的ＰＥＣＡＭ－１染色变淡。结论：上述炎性刺激物不仅可引起ＰＭＮ表达ＰＥＣＡＭ－１减少、激活ＰＭＮ,而且可改变内皮细胞ＰＥＣＡＭ－１的分布,因此ＰＥＣＡＭ－１在炎症中可能起重要作用。