流式细胞术检测IgG类血型抗体研究进展

流式细胞术(flow cytometry,FCM)应用于血液免疫学的研究始于19世纪80年代初期。由于FAM是以激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,所以可以进行定性或定量检测,是一种现代细胞分析和分选技术。它既可测量细胞大小、内部结构,又可检测细胞表面抗原抗体、细胞内部DNA、     

凝聚胺法测定血清中免疫性血型抗体的方法学研究

目的 探索凝聚胺在检测免疫性血型抗体的应用,建立一种测定血清中免疫性血型抗体的新方法.方法 通过实验研究建立测定血清中免疫性血型抗体的凝聚胺法,并将建立的聚胺法与抗人球蛋白法、微柱凝胶法进行对比试验.结果 凝聚胺法对抗A、抗BIgG抗体的检出率为25.8%,三种方法对免疫血性抗体的检测结果无显著性差异,对阴性、阳性标本的检测结果完全符合,结果重复性好.结论 凝聚胺法操作简便,敏感性高,结果重复性好,干扰因素少,可用于临床血清免疫性血型抗体的测定.     

检测IgG红细胞血型抗体常用方法的比较

目的比较日常检测常用的酶法、抗球蛋白试验、聚凝胺法和微柱凝胶法,对IgG红细胞血型抗体方法的特异性、敏感性及所需反应时间进行探讨.方法 用抗-D、抗-E、抗-C、抗-c、抗-e、抗-JKa、抗-JKb、抗-Fya、抗-Fyb、抗-K、抗-k、抗-S、抗-s 13种IgG抗体的标准品,采用酶法、抗球蛋白试验、聚凝胺法和微...     

不同方法检测红细胞血型IgG抗体的探讨

目的比较3种方法检测红细胞血型IgG抗体,为确定选用检测该抗体的方法及确定检测该抗体的最佳方案提供依据。方法采用聚凝胺法、抗球蛋白法及蛋白酶法等3种方法,分别检测116人份预处理过的O型血清（其中不含IgM抗-A及IgM抗-B）中的IgG抗A及IgG抗B,分别检测1批IgG抗D及1批IgG抗E效价的积分。结果在116人份预处理过的O型血清中,聚凝胺法、抗球蛋白法及蛋白酶法分别检出74人份、71人份及73人份血清中有IgG抗A,检出率分别为63.79%、61.21%及62.93%,三者比较差异无统计学意义（χ^2=0.172,P〉0.05）,分别检出83人份、81人份及82人份血清中有IgG抗B,检出率分别为71.55%、69.83%及70.69%,三者比较差异无统计学意义（χ^2=0.083,P〉0.05）;聚凝胺法、抗球蛋白法及蛋白酶法分别检出1批IgG抗D效价的积分为46、42、46,分别检出1批IgG抗E效价的积分为32、30、32。结论 3种方法均可用于检测红细胞血型IgG抗体,但采用单一方法检测该抗体,个别样本中的该抗体可被漏检,若采用3种方法联合应用来检测该抗体,则可防止个别样本中的该抗体被漏检,因此,采用3种方法联合应用来检测该抗体,是检测该抗体的最佳方案。     

小儿包虫病IgG及IgG亚类抗体检测诊断的研究

目的：研究小儿包虫病的免疫诊断方法，探索其抗体应答假阴性反应原因。方法：采用间接ELISA和单克隆双抗体夹心ELISA方法，对55例小儿包虫病患者血清的IgG亚类(IgGl、IgG2、IgG3和IgG4)、IgA、IgM、IgE类抗体、抗原和循环免疫复合物进行检测。结果：8种抗体检查方法中IgGl亚型抗体的敏感性和特异性最好，IgGl分别与其它种抗体的1种或2种联合检测，以IgGl IgA IgM检出率最高，为64．3％；15例IgG抗体阴性小儿患者中，有12例分别检测出IgG亚类和／或IgM、IgA、IgE，3例病人血清各种抗体均呈阴性反应，其中IgGl、IgG4及IgA、IgM、IgE的特异性抗体检出率明显高于正常人，分别为42．9％、ll.9％、28．6％、26．2％和21．6％；小儿的IgM水平高于成人，肝包虫病患者的IgG亚类高于肺包虫病患者；IgG阴性小儿患者血清的CAg和CIC阳性率分别为40％及26．67％。结论：抗包虫总IgG抗体表达水平低下，抗体表达各类不同及循环免疫复合物的形成，是造成包虫病患者IgG抗体反应阴性的主要原因。而寄生包虫囊的退行变性也可影响抗体的免疫应答水平。IgGl IgA IgM抗体联合检测可提高包虫病人免疫诊断的敏感性。     

IgG不规则抗体快速试剂法在临床鉴定Rh血型中的应用

目的：预防母婴Rh血型不合所致的Rh系HDN,避免由Rh血型不合引起的输血反应，确保临床用血安全。方法：使用IgG不规则抗体快速试剂替代菠萝酶，能简便、快速、准确地确定Rh血型。结果：用该法检测1000例23-55岁妇女的Rh血型，与菠萝酶法比较，结果更为灵敏准确。结论：与传统的酶法，抗人球法相比，IgG不规则抗体快速试剂法的优点在于操作简单易行，结果准确可靠、灵敏度高、重复性好，实验用时短、成本低、容易被患者接受，特别适合于急诊病例。     

微柱凝胶法和凝聚胺法检测IgG抗体效价的比较

目的探寻检测IgG抗体效价的较佳方法。方法所有血清标本均经2-巯基乙醇（2-Me）处理后分别用微柱凝胶和凝聚胺两种方法检测IgG抗A/B抗体效价,比较检测结果的差异性。结果微柱凝胶法检测抗体效价IgG抗A/B结果较凝聚胺法更灵敏,两者差异有高度统计学意义（P〈0.01）。结论微柱凝胶法较凝聚胺法更适于孕妇血清IgG抗体效价检测的临床应用,且该法操作简便快速,结果易于观察,易于标准化。     

凝聚胺检测Kidd血型系统抗原抗体效果评价

目的 对凝聚胺试剂检测红细胞Kidd系统抗原抗体效果进行综合评价.方法 随机选取40名献血者的血液,同时采用凝聚胺法、抗球蛋白法、盐水法进行红细胞Kidd系统抗原检测,比较3种方法的检测结果及凝集强度.结果 40名献血者中,Jk(a b-)9例,占22.5%,Jk(a-b )14例,占35%,Jk(a b )16例,占42.5%.抗球蛋白与试管法的结果一致率100%,凝聚胺法共漏检了16例,其中Jk(a b-)4例,Jk(a-b )2例,Jk(a b )10例.结论 凝聚胺法检出Kidd系统的抗原抗体能力有限,难以避免Kidd系统不规则抗体导致的输血不良反应.     

凝聚胺法与微柱凝集法检测孕妇 IgG 血型抗体效价应用比较

目的 比较凝聚胺法与微柱凝集法检测孕妇IgG血型抗体效价的效果.方法 选择2012年1月～2013年1月杭州市第一人民医院就诊的ABO血型不合的O型孕妇380例为研究对象,分别采用凝聚胺法与微柱凝集法检测IgG抗A（B）效价,比较两种检测方法的效率;分析ABO血型不合孕妇IgG抗A（B）效价与妊娠次数及年龄的关系.结果 ①在380例ABO血型不合孕妇中,＞1次妊娠孕妇检出IgG抗A（B）效价≥1∶64者所占比例[77.5％（110/142）]多于1次妊娠者[39.5％ （94/238）],差异有高度统计学意义（P＜0.01）;年龄31～40岁孕妇IgG抗A（B）效价≥1∶64者[61.4％（156/254）]多于21～30岁孕妇[38.1％（48/126）],差异有高度统计学意义（P＜0.01）.②380例血型不合孕妇中,微柱凝集法检测IgG抗A（B）效价≥1∶64者共352例,IgG抗A（B）效价＜1∶64者28例,凝聚胺法检测IgG抗A（B）效价≥1∶64者共302例,＜1∶64者78例,两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 微柱凝集法有操作简便、结果准确、敏感性高、易标准化等诸多优点,更具临床应用价值.     

三种方法检测孕妇IgG抗体效价的比较

目的:比较传统法、聚凝胺法和微柱凝胶卡法检测孕妇血清中IgG抗体效价的差异性。方法:分别运用传统法、聚凝胺法和微柱凝胶卡法检测272例孕妇血清中IgG抗体的效价,计算检测阳性率,以传统法为标准,比较聚凝胺法和微柱凝胺卡法的检测特异度、敏感度。结果:孕妇血清IgG抗A效价阳性率的检测结果分别为:传统法22.8%,聚凝胺法25.0%,微柱凝胶卡法33.8%;IgG抗B效价阳性率的检测结果分别为:传统法19.1%,聚凝胺法20.5%,微柱凝胶卡法31.6%,传统法和聚凝胺法的阳性率差异无统计学意义(P>0.05),微柱凝胶卡法阳性率明显高于传统法和聚凝胺法(P<0.01)。以传统法为标准,检测孕妇血清IgG抗A效价,聚凝胺法的特异度为96.3%,敏感度为98.1%;微柱凝胶卡法的特异度为63.4%,敏感度为100.0%。结论:检测孕妇血清IgG抗体效价,传统法和聚凝胺法具有一致性,微柱凝胶卡法检测阳性率明显高于传统法和聚凝胺法,在临床检测中应予以特别重视。     

ABO血型基因分型诊断方法的建立

目的 在北京地区建立一套稳定的ABO血型系统基因分型的诊断方法,为临床疑难血型定型工作提供技术保证和输血安全保障.方法 通过Multiplex-PCR-RFLP技术和PCR-SSP技术建立起ABO血型基因分型方法.结果 所建立的分型方法具有良好的重复性和稳定性,在各种分型检测中均取得了理想的试验结果.结论 建立一套较为完善和实用的基因分型方法,为进一步研究中国人ABO亚型的分子基础提供参考依据.     

4种检测IgG红细胞抗体方法的比较

目的比较木瓜蛋白酶、抗球蛋白实验、聚凝胺和微柱凝胶4种检测IgG红细胞抗体方法的特异性、敏感性、效价及所需时间.方法将12种IgG抗体:抗-D、抗-E、抗-C、抗-c、抗-e、抗-Jka、抗-Jkb、抗-Fya、抗-Fyb、抗-k抗-S、抗-s分别采用上述4种方法检测.结果木瓜蛋白酶检出了抗-D、抗-E、抗-C、抗-c、抗-e、抗-Jka、抗-JKb7种抗体(7/12);抗球蛋白试验检出了所有12种抗体(12/12);聚凝胺法检出了除抗-k以外的抗体(11/12);而微柱凝胶也检出了所有12种抗体(12/12).木瓜蛋白酶检测Rh及Kidd血型系统的抗体效价低于其它3种方法,而微柱凝胶检测这12种抗体效价较其它3种方法更为敏感.4种方法检测IgG抗体所需时间分别为:木瓜蛋白酶45min,抗球蛋白实验60min,聚凝胺5 min,微柱凝胶30 min.结论木瓜蛋白酶检测IgG抗体具有一定的局限性;抗球蛋白实验因需要反复洗涤红细胞费工费时;聚凝胺是目前最快速简便检测IgG抗体的方法;而微柱凝胶是检测IgG抗体最为敏感的方法.     

汉族患者(30 800例)及孕妇(4200例)红细胞血型不规则抗体分布的调查

目的:调查中国汉族患者人群中红细胞血型不规则抗体的检出率及各种特异性不规则抗体的分布特点.方法:选取在我院就诊的来自中国不同行政区域汉族患者30 800(男16 563,女14 237)例及孕妇4200例.采用微柱凝胶抗球蛋白技术筛查红细胞血型不规则抗体,对不规则抗体阳性者鉴定其抗体特异性、Ig类型,并检测其37℃的反应性.结果:检出红细胞血型不规则抗体者共199例,占被调查人群的0.57%,其中男64例,占被调查男性的0.39%、女135例,占被调查女性的0.73%、孕妇44例占被调查孕妇的1.05%;IgM类抗体97例、IgG类抗体45例、IgM IgG类抗体57例;37℃反应的温抗体89例,占被调查人群的0.25%;检出较多的特异性抗体依次为抗-M、抗-Lea、Rh系统抗体、抗-P1、抗-Leb、抗-JKa、抗-Fyb等.结论:中国不同行政区域汉族患者红细胞血型不规则抗体检出率无统计学差异(χ2=12.20, P＞0.05),但女性高于男性(χ2=18.46, P＜0.0001),孕妇高于非孕女性患者(χ2=7.44, P＜0.01);汉族患者人群红细胞血型不规则抗体检出率低于白种人;抗体特异性具有与白种人不同的分布特点,白种人中常见的抗-K在被检测的汉族患者中尚未发现,白种人中较常见的抗-Fya在汉族人中偶见;抗-D的检出率也明显低于白种人,并呈逐渐减少趋势.     

检测人血型抗A和抗B单克隆抗体的制备

用人Ａ型及Ｂ型红细胞分别免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取免疫脾细胞与同系ＳＰ２／０骨 髓瘤细胞融合，经克隆筛选出８株抗Ａ和５株抗Ｂ杂交瘤细胞株，用小鼠腹水单克隆抗体分 别做凝集试验。亲和力测定、标本检测及ＣＰＶ、ＰＨＡ、ＣｏｎＡ对单克隆抗体效价的影响。结果表 明除Ａ４和Ｂ４株外，其余各株凝集效价均在１：１２８０以上；亲合力与抗Ａ、抗Ｂ血清相似；标本 检测符合率为１００％。结果提示：用含ＰＨＡ、ＣｏｎＡ、ＣＰＶ的杂交瘤细胞注射小鼠，所产生的单 克隆抗体效价比单独用杂交瘤细胞产生的单克隆抗体均高出２倍。     

孕妇血型抗体效价检测的方法学探讨

目的比较分析抗人球蛋白微柱凝胶法与传统试管法测定O型孕妇血清中IgG抗A（B）效价的方法学差异.方法采用微柱凝胶抗人球方法和经典抗人球蛋白试验平行检测137例与丈夫ABO血型不合的O型孕妇血清IgG抗A（B）水平,并作方法学评价.结果 137例分析样本中,微柱凝胶法检测结果阳性率高于经典抗人球蛋白法,两种方法的差异有统计学意义（P〈0.01）.结论凝胶微柱法比传统试管法具有更高的灵敏度,判读更为准确,但高灵敏度并不意味着更高的HDN诊断效率,连续检测孕妇血清IgG抗A（B）水平和多种临床指征的综合分析是十分必要的.     

衡阳市临床用血ABO、Rh血型分布调查

目的了解衡阳市临床用血ABO、Rh血型分布情况,以便更好的解决临床用血的供需平衡,提高无偿献血的组织效率。方法对用于临床的16050例无偿献血者的悬浮少白红细胞进行检测,汇总分析血型结果。结果血型分布中A型占34．70％,B型占21．74％,O型占35．58％,AB型占7．98％;Rh阴性占总数0．15％。结论通过了解本市用7：11~床的无偿献血血液ABO、Rh血型分布的特征,为制定血液的采集和供应方案以及稀有血型的调配方案提供理论参考,从而提高血液的临床利用率,减少血液浪费。     

海南地区潜在输血患者ABO及RhD血型分布调查

目的了解海南地区潜在输血患者ABO血型和RhD血型分布,引导采供血机构合理组织采集血液,满足临床用血需要。方法采用西班牙Diana全自动血型分析系统,对我院49 412例住院患者进行ABO血型和RhD血型分析。结果 O型血占42.79%,B型血占26.90%,A型血占24.63%,AB型血占5.68%,RhD阴性为0.31%。结论通过对我院具有潜在输血需求的部分住院患者进行ABO血型和RhD血型分析,对于我省血液中心合理组织血液,避免血液浪费,最大程度利用血液资源治病救人具有积极意义。