高肺血流量对大鼠动脉压及肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的：建立左向右分流所致肺动脉高压的大鼠模型，探讨高肺血流量对肺血流动力学及肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法：采用腹主动脉－下腔静脉分流术建立左向右分流的大鼠模型，观察术后6周和11周肺血流动力学，右心室肥厚和肺动脉舒张反应的改变。采用免疫组织化学和原位缺口末端标记方法对11周组大鼠肺血管平滑肌细胞进行增殖和凋亡状态的研究。结果：术后6周与11周大鼠肺动脉了收缩压，肺动脉平均压，右心室（RV）与左心室加室间隔（LV＋S）的比值较同龄对照组明显增加，而且11周分流组肺动脉收缩压较6周分流组进一步增高，在11周分流组大鼠中，乙酰胆碱（ACh)产生的肺动脉环舒张反应较对照组明显减弱，而硝普钠（SNP）产生的肺动脉环舒张百分比无明显变化，11周分流组大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖指数（PI），凋亡指数（AI），PI／AI比值明显高于11周对照组大鼠肺动脉平滑肌细胞。结论：腹主动脉－下腔静脉分流术可导致肺动脉高压形成，高肺血流量引起的内皮依赖性肺血管舒张功能失调对肺动脉高压的形成有重要的影响，肺动脉平滑肌细胞的增殖的增加和凋亡的相对减少在肺动脉高压的发生中起到重要作用。该模型简单，可靠，重复性好。     

左向右分流肺动脉高压大鼠骨形态生成蛋白受体Ⅱ与肺动脉平滑肌细胞凋亡的关系

目的 建立左向右分流所致肺动脉高压的大鼠模型,探讨模型大鼠肺组织中骨形态生成蛋白受体Ⅱ(BMPRⅡ) 变化与肺动脉平滑肌细胞凋亡的关系.方法 40 只 SD 大鼠随机分为 4 组:分流 6 周组、对照 6 周组、分流 11 周组及对照 11 周组.采用腹主动脉-下腔静脉分流术建立左向右分流的肺动脉高压大鼠模型,用原位缺口末端标记(TUNEL)方法对大鼠肺血管平滑肌细胞凋亡状态进行观察,用 Western blot 法检测肺组织平滑肌细胞中 BMPRⅡ的表达变化.结果 随着分流时间的延长,大鼠肺组织中 BMPRⅡ 的表达减少,而此时肺组织血管平滑肌细胞凋亡也明显减少.结论 左向右分流肺动脉高压大鼠肺血管平滑肌细胞凋亡减少,可能与 BMPRⅡ表达下调有一定关系.     

大鼠分流叠加炎症肺高压模型的建立

目的建立大鼠分流叠加炎症所致肺动脉高压模型，探讨分流叠加炎症肺高压模型可行性。方法对分流组及分流叠加炎症组大鼠行腹主动脉-下腔静脉分流术，分流叠加炎症组于每周第3、6天予温水擦洗尾部并常规消毒，经尾静脉缓慢注射0．6％FeCl3（0．2mL／100g体重）。术后6周和11周，分别测定肺动脉平均压（PAMP）、右心室（RV）／左心室＋室间隔（LV＋S）比值，观察肺血管结构的变化。结果6周和11周分流叠加三氯化铁组大鼠肺动脉平均压、右心室肥厚度及肺血管平滑肌细胞增生程度均比分流组重，差别具有显著性（P〈0．05）。结论本模型更好反映肺动脉高压发病过程分流和炎症因素的相互作用。     

瑞舒伐他汀对肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡影响的实验研究

目的观察瑞舒伐他汀对左向右分流肺动脉高压大鼠肺血管重构、肺动脉平滑肌细胞凋亡以及bcl-2蛋白表达的影响,研究瑞舒伐他汀拮抗肺高血流性肺动脉高压的可能机制。方法 36只SD大鼠随机分为分流给药组、分流组、对照组,观察各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右室肥厚指数(RVI)、肺小动脉中膜厚度百分比(WT)、肺小动脉管壁面积百分比(WA)的变化,TUNEL法检测大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡情况,Western Blot法检测大鼠肺组织中凋亡抑制蛋白bcl-2的表达情况。结果分流给药组较分流组大鼠mPAP、RVI、WT、WA值均有所下降,分流给药组大鼠凋亡的肺动脉平滑肌细胞明显增多,而bcl-2蛋白的表达减弱。结论瑞舒伐他汀能明显抑制肺高血流性模型大鼠肺动脉压力升高及肺血管重构,而抑制大鼠肺组织中bcl-2蛋白的表达,促进肺动脉平滑肌细胞凋亡是其可能的机制。     

套管连接法建立高血流大鼠肺动脉高压模型

目的 建立高血流肺动脉高压大鼠动物模型,为深入研究肺血流动力学改变和肺血管结构重构提供实验平台.方法 用套管连接大鼠左侧颈总动脉和颈外静脉.介入测量血流动力学改变.分析右心室和肺动脉结构病理改变.检测肺小动脉增生和凋亡改变.结果 套管连接颈总动脉和颈外静脉,动物死亡率低,可以导致肺循环血流量明显增加、肺动脉收缩压升高和以平滑肌细胞增殖增强和凋亡减弱为特征的肺血管重塑.结论 这是一个简单可靠的建立高血流肺动脉高压大鼠动物模型的方法.     

大鼠高肺血流性肺动脉高压形成中肺血管结构的变化

目的探讨大鼠高肺血流性肺动脉高压形成中肺血管结构的动态变化规律.方法80只雄性SD大鼠,随机分为分流组和对照组,每组40只.分流组大鼠经腹主动脉-下腔静脉穿刺术建立高肺血流动物模型,对照组大鼠除不作穿刺术外,其余手术过程同分流组.两组分别在术后1、3 d及1、4、8周经右心插管法测量肺动脉收缩压(SPAP)、肺动脉平均压(MPAP);取心脏组织,称量右心室与左心室 室间隔重量之比[RV/(LV SP)];取肺组织制作光学显微镜及电子显微镜标本,在光镜下观察肺小动脉中肌型动脉(MA)、部分肌型动脉(PMA)及非肌型动脉(NMA)构成比例及MA的相对中膜厚度(RMT)和相对中膜面积(RMA)的变化,电镜下观察肺小动脉超微结构的变化.结果与对照组比较,SPAP和MPAP在分流组术后1、3 d及4周时差异无显著性,分流术后1、8周时,SPAP、MPAP均显著高于对照组(P＜0.01);分流术后8周,RV/(LV SP)显著升高(P＜0.05);与对照组比较,分流术后1、3 d及1周时MA、PMA、NMA占肺小血管总数的百分比在两组之间差异无显著性,分流术后4、8周时大鼠MA、PMA占肺小血管总数的百分比明显增高(均P＜0.01),而NMA百分比明显降低(均P＜0.01);RMT、RMA在分流术后1、3 d及1、4周与对照组比较差异无显著性;分流术后8周时明显增高(P＜0.05).肺小动脉超微结构在分流术后3 d时仅为内皮细胞肿胀、体积增大;分流术后1周时,除内皮细胞结构改变外平滑肌细胞增大、内弹力层厚薄不均;分流术后4周时平滑肌细胞与内弹力层呈垂直生长,由收缩表型向合成表型转化;分流术后8周时细胞间见胶原纤维堆积.结论肺血管结构重建呈现明显的时间依赖性,内皮细胞肿胀出现最早,平滑肌结构改变次之,最后出现细胞外基质异常堆积.     

NOX4在高肺血流肺动脉高压大鼠中表达的意义

目的 观察NADPH氧化酶4(NOX4)在高肺血流肺动脉高压大鼠肺组织中表达的变化,探讨NOX4在高肺血流性肺动脉高压发病机制中的意义.方法 40只雄性SD大鼠随机分为对照组、分流4周组、分流8周组、分流11周组,通过腹主动脉-下腔静脉分流法建立高肺血流肺动脉高压大鼠模型,检测模型大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右室肥厚指数(RVI),RT-PCR检测大鼠肺组织中NOX4 mRNA的表达情况.结果 随着分流时间的延长,各分流组大鼠逐步出现了右室肥厚、平均肺动脉压升高等肺高压的表现,肺组织中NOX4 mRNA表达亦逐步增强.结论 高肺血流肺动脉高压大鼠肺组织中存在着NOX4的显著表达,NOX4参与了高肺血流大鼠肺动脉高压的形成.     

L-精氨酸调节左向右分流所致肺动脉高压大鼠胶原代谢的研究

目的　探讨L 精氨酸 (L Arg)对高肺血流量所致肺动脉高压大鼠肺动脉胶原代谢的干预作用及其机制。方法　在大鼠行腹主动脉 下腔静脉分流造成的肺动脉高压模型基础上 ,给予L Arg灌胃 (1g·kg-1·d-1,11周 )。 11周后 ,观察肺血流动力学 ,采用免疫组织化学法检测大鼠肺动脉Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达 ,以原位杂交法检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原蛋白α1(Ⅰ )mRNA、α1(Ⅲ )mRNA、基质金属蛋白酶 1(MMP 1)mRNA、抑制胶原降解作用的中性蛋白酶组织抑制剂 1(TIMP 1)mRNA的表达。结果　分流 11周后 ,肺动脉高压形成。分流组大鼠肺中、小型肺动脉中Ⅰ、Ⅲ型胶原、α1(Ⅰ )、α1(Ⅲ )前胶原mRNA表达与对照组比较明显增加 ,同时TIMP 1mRNA、MMP 1mRNA表达、TIMP 1/MMP 1比值明显高于对照组 (P <0 .0 1)。然而 ,L Arg明显缓解了分流组大鼠肺动脉高压。分流 +L Arg组大鼠肺中、小型肺动脉中Ⅰ、Ⅲ型胶原、α1(Ⅰ )、α1(Ⅲ )前胶原mRNA表达较分流组明显降低 ,且TIMP 1mRNA、MMP 1mRNA表达、TIMP 1/MMP 1比值较分流组显著降低 (P值均 <0 .0 5 )。结论　L Arg通过减少细胞外基质 胶原的堆积 ,增加其降解 ,从而对高肺血流量所致肺动脉高压及肺动脉血管结构重建的形成有重要的调节作用。     

缺氧性肺动脉高压发病中肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡变化

目的：研究缺氧性肺动脉高压发病中肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡变化。方法：用压缺氧法复制大鼠缺氧性肺动脉高压模型,用右心导管法测量平均肺动脉压,称量法计算右心室肥大指数,HE染色结合形态计量分析进行缺氧性肺血管重塑观察,Tunel法行肺动脉平滑肌细胞凋亡检测。结果：缺氧7d大鼠平均肺动脉压开始升高,肺动脉出现缺氧性肺血管重塑;缺氧14d及21d平均肺动脉压进一步升高,缺氧性肺血管重塑更明显,右心室肥大指数增加。对照组及缺氧3d、7d、14d、21d组肺动脉平滑肌细胞凋亡指数差异无显著意义。平均肺动脉压与WA％（血管壁横断面积与血管横断面积比值）及右心室肥大指数呈正相关,WA％与肺动脉平滑肌细胞凋亡指数之间无直线相关关系。结论：缺氧性肺动脉高压发病中肺动脉平滑肌细胞增殖同时不伴有凋亡水平的显著变化。     

套管连接法建立大鼠左向右分流肺动脉高压模型

目的:制作大鼠颈部肺动脉高压动物模型。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为实验组(n=15)熏对照组(n=10)。实验组大鼠右颈总动脉和颈外静脉用套管连接法连接。术后满16周测大鼠右心室及肺动脉压力,对肺组织行形态学观察。结果:实验组大鼠肺动脉和右心室收缩压与对照组比较差异有统计学意义(P<0.001);实验组大鼠右心室/体重及右心室/(左心室 室间隔)与对照组比较差异有统计学意义(P<0.001);组织切片见实验组大鼠肺动脉内膜层及肌层增厚,管腔狭窄。结论:套管连接法可成功制作大鼠左向右分流肺动脉高压模型。     

心脏超声评估肺动脉高压患者肺血管压力及右心功能的临床价值

目的: 探究心脏超声在评估肺动脉高压（pulmonary arterial hypertension, PAH）患者肺血管压力及右心功能中的临床价值。方法: 回顾性分析疑似右心功能障碍的PAH患者97例（研究组）的临床资料,另选取同期健康体检者32例作为对照组; PAH患者根据肺动脉收缩压（PASP）分为轻度组（n=45）、中度组（n=32）与重度组（n=20）,所有研究对象均心脏超声检查。对比研究组与对照组肺动脉直径指标主肺动脉直径（DPA）、右肺动脉直径（RPAD）,肺动脉血压指标PASP、肺动脉舒张压（PADP）、肺动脉压平均值（PAPM）,右心功能指标右心室射血分数（RVEF）、右心室面积变化率（RVFAC）、三尖瓣环收缩期移位（TAPSE）、三尖瓣环侧壁收缩期运动速度（s）、三尖瓣舒张期血流E峰和A峰比值（E/A值）、右室心肌做功指数（RMPI）,并分析右心功能各指标与PASP的相关性。结果： 研究组PAH患者DPA、RPAD、PASP、PADP、PAPM、E/A值、RMPI明显高于对照组,RVEF、RVFAC、TAPSE、s明显低于对照组（P<0.05）;轻度组、中度组和重度组的DPA、RPAD、PASP、PADP、PAPM、E/A值、RMPI等指标逐渐升高,RVEF、RVFAC、TAPSE、s等逐渐降低,差异均有统计学意义（P<0.05）;RVEF、RVFAC、TAPSE、s与PASP均呈明显负相关（P<0.001）,E/A值、RMPI与PASP均呈明显正相关（P<0.001）。结论： 心脏超声检查可准确、客观地对PAH患者的肺血管压力及右心室功能作出评估,为临床诊疗提供可靠参考。     

应用心电图估测先天性心脏病合并肺动脉高压的分析

目的：探讨利用心电图（ECG）Ⅰ导联R波的高度＋S波的深度估测肺动脉收缩压（PASP）的价值。方法：选择60例先天性左向右分流型心脏病合并肺动脉高压（PAH）患者,行右心导管测量前3天内按常规方法完成十二导联心电图,由同一名医生进行心电图分析并测量,按照Ⅰ导联R波的高度＋S波的深=x mV,心电图x mV相当于x×10 mm Hg肺动脉收缩压的计算方法,将结果与用右心导管所测得的PASP比较。结果：用ECG检测法测定的PASP与术中右心导管测得的PASP的相关性r=0.817。结论：ECG是一种简便有效地诊断先天性心脏病合并PAH的检查方法,可为内科介入封堵术及外科手术时机提供判断,并对治疗的可行性做出初步预测。     

卡托普利对大鼠左向右分流模型肺小动脉重构的影响

目的观察血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）对肺循环容量负荷过重导致的肺血管重构的影响。方法采用腹主动脉一下腔静脉瘘制造大鼠容量负荷性肺动脉高压（PH）模型,并应用卡托普利进行干预,6周后观察各组肺动脉收缩压（PASP）、舒张压（PADP）、右室收缩压（RVSP）变化;心室重量变化;采用免疫组化染色比较肺血管平滑肌细胞（VSMC）α-平滑肌肌动蛋白（α-actin）及增殖细胞核抗原（PCNA）的阳性表达,比较15-50μm无肌性动脉肌性化程度以及肺小动脉50～100μm和101150μm血管厚度与血管外径之比（％WT）。结果手术组动物RVSP、PASP、PADP较对照组显著升高（P〈0．05）,手术＋卡托普利组RVSP、PASP、PADP均低于手术组（P〈0．05）;手术组RV／（LV＋S）、RV／BW、（LV＋S）／BW较对照组显著增加（P〈0．001）,而手术＋卡托普利组则较手术组明显降低（p〈0．01）,同对照组比较,手术组α-actin染色IOD值显著降低（P〈0．01）,而手术＋卡托普利组IOD值则高于手术组（P〈0．05）,手术组细胞PCNA阳性率显著升高（P〈0．01）,而手术＋卡托普利组低于手术组（P〈0．05）;手术组同其他两组比较,50～100μm、101～150μm血管％WT及15～50μm血管肌性化百分比显著增加（P〈0．01,）。结论卡托普利能有效地抑制肺动脉VSMC由收缩表型向合成表型转化,抑制VSMC的增生和肥厚,防止无肌性肺小动脉的肌性化,减缓PH肺血管重构进程,提示ACEI对左向右分流型先心病肺动脉高压有治疗前景。     

超声心动图对新生儿肺动脉高压的诊断价值

目的 探讨超声心动图对新生儿肺动脉高压的诊断价值。方法 收集2011年6月至2014年12月接收的80例新生儿,其中经过超声心动图证实患有新生儿持续肺动脉高压(PPHN)的新生儿38例,根据肺动脉压力分为轻度组(20例)、中度组(12例)、重度组(6例),其余42例新生儿为对照组。通过超声心动图测量比较各组患儿心脏各腔室大小,并对比分析测量结果。结果 患儿心脏右房内径、右室内径及主肺动脉内径随着肺动脉收缩压(PASP)的增高均有增大趋势。对照组与轻度组、轻度组与中度组、中度组与重度组间右心房内径(RA)、右心室内径(RV)、主肺动脉内径(MPA)分别作两组样本t检验,结果差异均有统计学意义(P<0.05);随着PASP的增高,新生儿低氧血症(PO₂)逐渐加重,各组样本间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 超声心动图可对新生儿肺动脉高压进行准确诊断,对判定患儿预后、临床诊疗均有重要价值。     

ADM和PAMP在高肺血流肺动脉高压形成中的变化及作用途径研究

目的 探讨来自同一前体的肾上腺髓质素(ADM)及肾上腺髓质素N末端20肽(PAMP)在高肺血流肺动脉高压形成中的变化及作用途径.方法 健康雄性Wistar大鼠21只,随机分为2组.将实验组(n=9)大鼠的左侧颈总动脉与颈外静脉用套管进行连接,对照组大鼠仅切开颈部皮肤分别分离颈总动脉和颈外静脉后缝合皮肤,不进行血管连接术.术后12周,经右心导管测取大鼠肺动脉平均压(mPAP)、右心室/(室间隔+左心室)(RV/(LV+SP))重量比、中等肺动脉壁厚度所占管径百分比(MT%).免疫组化法和Western blotting测定ADM、PAMP在大鼠肺组织中的分布及其相对含量变化.RT-PCR法检测大鼠肺组织中ADM、应力活化蛋白激酶(SAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK1)基因表达量.结果 实验组大鼠术后mPAP与对照组比较明显升高(P<0.001);RV/(LV+SP)和MT%比例明显增加(P<0.001和P<0.01).免疫组化结果显示ADM和PAMP棕色颗粒主要分布于血管平滑肌层;累积光密度(OD)及Western blotting结果显示实验组大鼠肺内ADM及PAMP蛋白表达量增加.RT-PCR结果显示实验组大鼠肺组织ADM、SAPK、ERK1 mRNA与对照组比较表达增强(P<0.01,P<0.001).结论 高肺血流肺动脉高压形成中存在来自同一前体的ADM与PAMP之间的分子内调控现象;丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路可能参与了高肺血流肺动脉高压形成过程.     

超声心动图评价房间隔缺损合并肺动脉高压者封堵术后心脏形态学变化

目的：探讨超声心动图评价房间隔缺损（ASD）,尤其是合并肺动脉高压者介入封堵术后心脏结构及功能改变的价值。方法经超声心动图确诊为ASD并成功施行封堵术的患者109例,肺动脉压力正常者55例,轻度肺动脉高压者（PASP,35～50 mmHg）25例,中度肺动脉高压者（PASP,50～70 mmHg）17例,重度肺动脉高压（PASP〉70 mmHg）者12例。分别于封堵术前3 d,术后3 d、1个月、3个月、6个月行超声心动图检查,测量心脏结构及心功能。结果肺动脉压力正常者及轻度肺动脉高压者,与术前相比,术后3d右心房、右心室和肺动脉内径减小（P〈0.05）,肺动脉瓣口血流速度降低,左心室内径增大,左心房和主动脉内径在术后1个月增大（P〈0.05）,在后期随访中上述变化逐渐趋于稳定;中度肺动脉高压者与术前相比,右心房和右心室内径在术后3个月时变化差异有统计学意义（P〈0.05）,左心室和左心房分别在术后3个月、6个月时变化差异有统计学意义（P〈0.05）;重度肺动脉高压者与术前相比,左心房和左心室内径在6个月时变化差异有统计学意义（P〈0.05）,但右心房、右心室、主动脉及肺动脉内径变化差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论中重度肺动脉高压ASD患者,通过封堵术可增加患者手术机会,但其心脏结构恢复时间长且效果差。     

eNOS基因转染治疗兔肺动脉高压及肺动脉高压危象

目的 探讨复制缺陷型重组腺病毒载体（AdCMVeNOS）介导内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因转染对左向右分流所致的肺动脉高压及肺动脉高压危象兔的影响。方法 18只肺动脉高压模型兔分成实验组（n=9）和对照组（n=9）,实验组气管内滴入AdCMVeNOS病毒转染液（5×109PFU/mL）2mL,对照组滴入生理盐水2mL。4d后结扎左向右分流,同时气管插管吸入10％氧气,检测两组肺动脉收缩压(SPAP)、肺动脉平均压（MPAP）和平均动脉压（MAP）的变化;同时采用硝酸还原酶法测定肺组织一氧化氮（NO）浓度,检测外源性eNOS基因mRNA的表达。结果 实验组肺动脉压较转染前明显下降（P<0.01）,而对照组肺动脉压无明显改变,与实验组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。缺氧60min后,实验组仅4只兔出现肺动脉高压危象,而对照组全部出现肺动脉高压危象。两组缺氧后均出现氧分压（PaO2）降低,二氧化碳分压（PaCO2）升高, SPAP、MPAP升高,MAP降低。恢复供氧后,实验组各测得值恢复至正常水平,对照组SPAP和MPAP高于基础值,MAP低于基础值(P<0.01),实验组SPAP、 MPAP和PaCO2的升高幅度以及MAP和PaO2的降低幅度均低于对照组（P<0.01）。免疫组化染色显示实验组肺泡内皮细胞、肺中小血管的平滑肌细胞和内皮细胞的eNOS表达均较对照组明显增加,而且肺组织的NO浓度也明显高于对照组(P<0.001)。琼脂糖凝胶电泳显示,实验组在3.77kb处扩增出特异条带,而对照组在3.77kb处未扩增出特异条带。结论 AdCMVeNOS转染左向右分流所致的兔肺动脉高压动物模型,可有效降低肺动脉压和肺动脉高压危象的发生率。