60Co辐照血红细胞CR1分子数目的变化

目的研究不同剂量60Co γ射线辐照全血在保存期内红细胞CR1分子数目的变化.方法应用酶联法定量测定经15～35GY五个照射剂量辐照全血在保存期内红细胞CR1分子数目.结果照射后1d,15～25GY剂量组红细胞CR1分子数目相互间比较及分别与对照组比较无明显差异(P＞0.05);经30、35GY辐照红细胞CR1分子数目分别与其他剂量组和对照组比较有明显差异(P＜0.05～0.01).另外,随着保存期的延长,各剂量组和对照组红细胞CR1分子数目呈阶梯式下降,尤其在照射后3d,30和35GY剂量组红细胞CR1分子数目接近于照射后7d水平,二者相互比较无明显差异(P＞0.05).结论在一定范围内(15～25GY)60Co γ射线剂量辐照对红细胞CR1分子数目无明显影响.     

~(60)Co辐射血红细胞CR_1分子基因组密度多态性分布与分子数目的研究

目的　研究60 Co辐射对血红细胞CR1分子基因组密度多态性分布与分子数目的影响。方法　应用PCR和HindⅢ酶切技术测定红细胞CR1分子基因组密度多态性分布以及应用酶联法定量测定红细胞CR1分子数目。结果　经 30GY60 Coγ射线辐照血红细胞CR1分子基因组密度多态性分布和分子数目与未照射组比较无明显差异(P >0 .0 5 )。随着保存期延长红细胞CR1分子数目逐渐下降 ,直至 2 1d为最低。结论　应用 30GY60 Coγ射线辐照不会导致红细胞CR1分子基因组密度多态性分布与红细胞CR1分子数目的变化。     

^60Co输射血红细胞CR1分子基因组密度多态性分布与分子数目的研究

目的：研究^60Co辐射对血红细胞CR1分子基因组密度多态性分布与分子数目的影响。方法：应用PCR和HindⅢ酶切技术测定红细胞CR1分子基因组密度多态性分布以及应用酶联法定量测定红细胞CR1分子数目。结果：经30GY^60Coγ射线辐照血红细胞CR1分子基因组密度多态性分布和分子数目与未照射组比较无明显差异（P＞0．05）。随着保存期延长红细胞CR1分子数目逐渐下降，直至21d为最低。结论：应用30GY^60Coγ射线辐照不会导致红细胞CR1分子基因组密度多态性分布与红细胞CR1分子数目的变化。     

献血者红细胞CR1分子基因表达与献血后免疫状况相关性研究

目的研究无偿献血者红细胞CR1基因高中低表达者献血后免疫状况,为安全献血提供依据.方法随机选择176位无偿献血者血液,应用PCR和HindⅢ酶切技术测定CR1基因表达;应用酶联免疫吸附法测定红细胞CR1分子数量A405值,随机抽样调查33位高表达者及25位中低表达者,在献血后6个月时测定免疫球蛋白、C3、C4及淋巴细胞亚群,并详细询问献血后状况.结果献血者红细胞CR1高表达者与中低表达者在CR1 A405值分子数量上存在显著性差异(t=7.40,P<0.01),但是两者献血后机体一般状况与部分免疫指标检测均无显著性差异(P>0.05).结论红细胞CR1高中低表达的无偿献血者献血后机体的体液与细胞免疫状况无明显变化.     

输血相关的移植物抗宿主病研究进展

输血相关的移植物抗宿主病（TA－GVHD）是严重危及受者生命、与输血密切相关的一组疾病，至今尚无有效的诊断和治疗手段。本文就TA－GVHD的发病机制、易感因素、诊断及防治作一综述。     

献血者红细胞CR1分子基因表达与献血后免疫状况相关性研究

目的　研究无偿献血者红细胞CR1基因高中低表达者献血后免疫状况 ,为安全献血提供依据。方法　随机选择 176位无偿献血者血液 ,应用PCR和HindⅢ酶切技术测定CR1基因表达 ;应用酶联免疫吸附法测定红细胞CR1分子数量A40 5值 ,随机抽样调查 33位高表达者及 2 5位中低表达者 ,在献血后 6个月时测定免疫球蛋白、C3 、C4及淋巴细胞亚群 ,并详细询问献血后状况。结果　献血者红细胞CR1高表达者与中低表达者在CR1A40 5值分子数量上存在显著性差异 (t=7.4 0 ,P <0 .0 1) ,但是两者献血后机体一般状况与部分免疫指标检测均无显著性差异(P >0 .0 5 )。结论　红细胞CR1高中低表达的无偿献血者献血后机体的体液与细胞免疫状况无明显变化。     

γ射线辐照对保存血红细胞质量的影响

输血相关的移植物抗宿主病 ( TA- GVHD)的病死率高 ,且缺乏特异的治疗手段 ,目前以预防为主。 γ-射线辐照血液是预防 TA- GVHD的主要方法 ,γ-射线辐照对红细胞的损伤是照射瞬间产生的 ,长时间储存是否会加重其损伤 ,对辐照血的保存期等尚无统一标准 ,美国 FDA血制品建议委员会推荐照射红细胞保存期不超过 2 8d[1] ,而日本对辐射血液的保存期则定为采血后 2 1 d[2 ] ,国内目前尚无标准。笔者对经13 7铯 ( Cs)γ-射线 (照射剂量 2 5Gy)照射后的 ACD- B方、CPD方全血在不同保存时间的理化指标进行了测定 ,现报告如下。材料与方法1…     

比较经X射线和γ辐照的CPDA-1红细胞

背景和目的输血相关移植物抗宿主病(TA GVHD)是严重的疾病,血液经照射基本上可以预防这种潜在的输血并发症。目前一般应用γ辐照来处理血液,也可选用X射线,其优势在于X射线辐照器费用低,无放射源。但X射线对红细胞辐照的生物学效应还未被完全了解。本文的主要目的是比较X射线辐     

不同保存期全血辐照后红细胞保存损伤的研究

目的 观察全血在不同保存期辐照的红细胞的活性及功能的变化,确定不同保存时期的红细胞制品辐照后可保存的时间。方法 每袋CPDA-全血分成若干份,于采血后1、8、15、22d进行25Gy辐照,并设不辐照对照组。于辐照后即刻及辐照后7、14、21、28、35d取样测定各项红细胞活性、功能指标。结果 CPDA-全血于采血后1、8、15、22d不同保存期进行辐照,在继续保存至36d过程中,与对照组相比,均未引起其红细胞ATP含量、2,3-DPG含量的明显降低及血浆游离Hb的明显升高,表明不论是新鲜血或是库存血,25Gy辐照对红细胞活性、功能均无明显影响;各辐照组保存至36d时,其红细胞ATP含量仍保持在76.6％以上,表明仍有良好的细胞活性;但所有辐照组血浆K~+含量均于辐照后的一周内升高迅速,表明辐照对红细胞膜有一定的损伤,可引起红细胞内K~+的渗漏。结论 初步的体外研究表明,采集的血液无论何时进行辐照处理,与不辐照血比较,在35d有效期内,均未影响红细胞制品的活性和功能。建议25Gy辐照CPDA-全血保存期与不辐照CPDA-全血相同,也可保存35d;但由于血液在辐照后的一周内K~+升高迅速,因此对于不能耐受较高K~+的新生儿、早产儿、肾功能不全患者及快速大量输血的患者等,血液辐照后应立即输用。     

25～45Gyγ射线辐照对红细胞制品质量的影响

目的　研究不同剂量辐照对红细胞的活性及功能的即刻损伤及保存损伤 ,确定辐照血液的保存时间。方法　将CPDA 全血 4 0 0ml分成 4组 ,于采血后 1d进行 0 (为对照组 )、2 5、35、4 5Gyγ射线辐照。在辐照后 0、4、7、1 4、2 1、2 8、35d取样测定红细胞活性、功能指标。结果　 0～ 35d保存过程中 ,①红细胞功能 :各辐照组的 2 ,3 DPG含量与对照组比较均无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;②红细胞活性 (ATP含量 ) :2 5Gy辐照组在 35d保存过程中与对照组差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;35、4 5Gy组分别于 35d(84 .7% )及 2 8d(83.6 % )起低于对照组 (P <0 .0 5 ) ;③红细胞脆性 :红细胞最小抵抗力 ,2 5、35、4 5Gy组分别自 35、2 8、2 1d起低于对照组 (P <0 .0 5 ) ;红细胞最大抵抗力 ,保存过程中 2 5Gy组与对照组差异无显著性 (P >0 0 5 ,35、4 5Gy组分别自 35及 1 4d起低于对照组 (P <0 .0 5 ) ;④游离K+ :2 5Gy组自辐照后 1d ,35、4 5Gy组自辐照后 0d起即高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;K+ 含量与剂量呈正相关性 (r为 0 .96 6～ 0 .999) ;⑤游离血红蛋白 :在保存过程中显示出一定的剂量关系 ,但差异尚无统计学意义。结论　辐照对红细胞有一定的损伤 ,损伤程度与剂量有一定的相关性 ,但总体来说损伤不大 ,对红细胞活性     

异基因造血干细胞移植后外周血NK细胞S1PR5表达变化对移植物抗宿主病的影响

异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后,供者来源的自然杀伤细胞(NK)可在保留移植物抗白血病(GVL)效应的同时发挥控制移植物抗宿主病(GVHD)作用。NK细胞表面的1磷酸鞘氨醇受体5(S1PR5)通过与胞外的第一信使1磷酸鞘氨醇(S1P)相互作用,调节NK细胞的迁移和在外周血、脾、淋巴结等器官中的分布。本研究旨在探讨allo-HSCT后外周血NK细胞S1PR5表达变化及对GVHD的影响。分离纯化17例供者及相应受者移植后1个月外周血NK细胞,通过荧光探针实时定量PCR技术检测S1PR5 mRNA的表达情况,并结合患者临床资料和随访结果进行分析。结果表明,供者与allo-HSCT后患者外周血中NK细胞S1PR5表达变化(0.235±0.191 vs0.330±0.261,P>0.05)不具有统计学意义;急性GVHD(aGVHD)患者组移植后外周血NK细胞S1PR5表达水平较无aGVHD的患者组明显下降(0.973±0.834 vs 6.166±5.32,P<0.05);移植后患者与相应供者相比,外周血NK细胞S1PR5表达水平下降超过10%时易发生aGVHD;NK细胞S1PR5表达变化与慢性GVHD发生率无明显相关性(3.401±2.324 vs 2.762±1.972,P>0.05)。结论:NK细胞S1PR5表达水平下调与aGVHD发生有关,可能机制是由于S1PR5的低表达影响了NK细胞在体内的分布,从而影响到调控aGVHD的作用。     

异基因非清髓造血干细胞移植后WT1特异性T细胞亚群与移植物抗宿主病的关系

目的 探讨非清髓造血干细胞移植后WT1诱发的各T细胞亚群与移植物抗宿主病(GVHD)之间的关系.方法 分析19例表达WT1的白血病患者在全相合非清髓造血干细胞移植后GVHD的发生情况;WT1126-134体外刺激患者外周血单个核细胞,采用胞内因子染色法(ICCS)检测移植前后外周血中Tc1、Tc2、Th1及Th2细胞;对供受者表达HLA-A*0201的14例患者采用HLA-A*0201/WT1五聚体检测外周血中的WT1+CD8+细胞毒性T淋巴细胞(CTL).结果 ①19例患者中,17例并发GVHD,其中16例在GVHD发生时出现以Tc1及Th1细胞为主的高峰(P=0.039).②Ⅱ度以上急性GVHD(aGVHD)患者在GVHD发生时Tc1及Th1细胞峰值水平均高于Ⅰ度aGVHD者,但差异无统计学意义(P=0.900及P=0.140).③弥漫型慢性GVHD(cGVHD)患者Tc1及Th1细胞峰值水平明显高于局限型cGVHD者,但仅Th1细胞峰值水平差异具有统计学意义(P=0.004),而Tc1细胞峰值水平差异无统计学意义(P=0.060).④未并发GVHD者Tc1、Th1及WT1+CD8+CTL峰值水平接近于轻度aGVHD患者的平均水平,但低于中重度aGVHD患者的平均水平.结论 GVHD发生时WT1诱发的移植物抗白血病(GVL)效应增强,其强度与GVHD尤其是cGVHD发生的严重程度相关;相对于局限型cGVHD患者,弥漫型cGVHD患者WT1诱发GVL效应的增强可能与Th1细胞有关.

Abstract：

Objective To explore the relationship between WT1-induced T-cell subsets and graftversus-host disease(GVHD) after nonmyeloablative allogeneic hematopoietic stem cell transplantation(NST).Methods Peripheral blood mononucleated cells(PBMCs) from 19 patients who expressed WT1 and developed GVHD after NST were simulated by WT1126 - 134 peptide in vitro, and proportions of WT1-induced-T-cell subsets (Tc1 ,Tc2 ,Th1 ,Th2 cells) before and after transplant were detected by intracellular cytokine staining (ICCS) assay. WT1 -specific CD8 + CTLs of 14 patients with HLA-A * 0201 were detected by HLA-A *0201/WT1 pentamer. Results ①)17 of 19 patients developed GVHD, among whom proportions of Tc1 and Th1 cells, achieved peak value in 16 patients at occurrence of GVHD( P =0. 039) ;②The peak proportions of Tc1 and Th1 cells in patients with aGVHD above grade Ⅱ were higher than those with grade Ⅰ , but being no statistical difference ( P = 0. 900 and P = 0. 140, respectively ); ③The peak proportion of Th1 cells ( P =0.004), but not Tc1 cells( P =0.060)in patients with extensive cGVHD was significantly higher than that in patients with limited one;④)Proportions of Tc1, Th1 and WT1 + CD8+ CTL in patients without GVHD were similar to those in patients with Grade Ⅰ aGVHD, but lower than those in aGVHD above grade Ⅱ. Conclusion GVHD promotes the generation of WT1-induced GVL effect, and the intensity of the latter maybe correlated with the intensity of GVHD, especially cGVHD. Th1 cells play a more important role in the enhancement of WT1-induced GVL effect in extensive cGVHD patient than in limited cGVHD patients.