柴胡桂枝汤加减通过调节Wnt/β-catenin信号通路对骨质疏松大鼠的改善作用及机制研究

目的 探讨柴胡桂枝汤加减(CGD)调节Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对骨质疏松大鼠的改善作用。方法 将SD大鼠分组为Model组、CK组、高剂量CGD组(CGD-H组,20 g/kg)、低剂量CGD组(CGD-L组,5 g/kg)、戊酸雌二醇组(EV组,9 mg/kg)、DKK-1组(Wnt/β-catenin通路抑制剂,100 mg/kg)和CGD-H+DKK-1组(20 g/kg+100 mg/kg),每组12只。除CK组外,其他组大鼠均通过灌胃70 mg/kg维甲酸的方式构建骨质疏松症(OP)大鼠模型,CK组大鼠灌胃等量的生理盐水。造模4周开始给予相应的药物干预4周。ELISA法检测大鼠血清中Ⅰ型胶-原C端肽(CTX-Ⅰ)、骨钙素(BGP)水平;观察股骨微观结构相关指标骨体积分数、骨小梁厚度、骨密度、骨小梁数量的变化;HE染色检测大鼠股骨病理变化;碱性磷酸酶(ALP)钙-钴染色检测大鼠股骨中成骨细胞活性;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测大鼠股骨组织中破骨细胞活性;Western blot检测各组大鼠股骨组织中Wnt3a、β-catenin蛋白。结果 与C...     

形觉剥夺性近视模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达及Wnt/β-catenin信号通路的调控作用

目的：构建形觉剥夺性近视（FDM）大鼠模型,阐明FDM大鼠巩膜成纤维细胞中转化生长因子β1（TGF-β1）的表达及其与Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的关系。方法：40只大鼠随机分为对照组和FDM模型组,每组20只,FDM模型组大鼠建立FDM模型。测定大鼠眼轴长度;取大鼠眼球分离巩膜组织,采用Western blotting法和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定大鼠巩膜组织中TGF-β1蛋白和mNRA表达水平。分离培养对照组和FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞,对照组大鼠巩膜成纤维细胞作为对照组,FDM模型组大鼠巩膜成纤维细胞分为FDM组和FDM+Dickkopf相关蛋白1（DDK1）组（加入DDK1培养）,采用Western blotting法和RT-PCR法测定各组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、3型核糖核酸酶（DCL3）、结肠腺瘤样息肉蛋白（APC）、糖原合成酶激酶3β（GSK3β）、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平。结果：与对照组比较,FDM组大鼠眼轴长度均明显增加（P<0.05）,巩膜组织中TGF-β1蛋白和mRNA表达水平均明显降低（P<0.01）。对照组、FDM组和FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中GSK3β蛋白和mRNA表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）,TGF-β1、DCL3、APC、p21-GSK3β和β-catenin蛋白及mRNA表达水平比较差异有统计学意义（P<0.01）;与对照组比较,FDM组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平降低（P<0.05）,DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平升高（P<0.05）;与FDM组比较,FDM+DDK1组大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1、APC蛋白和mRNA表达水平升高（P<0.05）,DCL3、p21-GSK3β、β-catenin蛋白和mRNA表达水平降低（P<0.05）。结论：FDM模型大鼠巩膜成纤维细胞中TGF-β1表达水平降低,其水平受Wnt/β-catenin信号通路调控。     

6-姜酚通过调节Wnt/β-catenin信号通路对Aβ诱导的AD大鼠细胞凋亡、氧化应激和神经炎症的影响

目的 探究6-姜酚通过调节Wnt/β-catenin信号通路对β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠细胞凋亡、氧化应激和神经炎症的影响.方法 通过在大鼠双侧大脑的海马体注射Aβ构建AD大鼠模型.大鼠被随机分为6组:对照组、模型组、低剂量6-姜酚组(50 mg/kg)、中剂量6-姜酚组(75 mg/kg)、...     

LncRNA GASL1通过Wnt/β-catenin信号通路促进血管平滑肌细胞增殖

目的 探讨lncRNA GASL1能否通过激活Wnt/β-catenin信号通路,促进血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖.方法 构建lncRNA GASL1 相关的mRNAs共表达网络,并对其进行信号通路分析.将lncRNA GASL1(lncRNA GASL1组)或lncRNA NC(lncRNA NC组)分别转染人动脉VSMCs,采用CCK-8法检测lncRNA GASL1对VSMCs细胞活力的影响,免疫荧光检测增殖相关蛋白bcl-2的表达,Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白的变化,最后将lncRNA GASL1和Wnt/β-catenin通路抑制剂(ICG001)加入VSMCs细胞共培养,检测VSMCs细胞活力及bcl-2蛋白变化.结果 lncRNA GASL1 相关的mRNAs共374个,Pathway分析显示lncRNA GASL1 与Wnt/β-catenin通路相关性最高.CCK-8检测结果显示:lncRNA GASL1组细胞活力高于lncRNA NC组细胞;Western blot结果显示:lncRNA GASL1组细胞Wnt1、β-catenin蛋白含量高于lncRNA NC组;免疫荧光观察显示:lncRNA GASL1 组bcl-2蛋白含量高于lncRNA NC 组(P＜0.05).将lncRNA GASL1 与ICG001 共培养VSMCs细胞后,CCK-8检测显示:lncRNA GASL1+ICG001组细胞活力低于lncRNA GASL1+对照剂组;免疫荧光观察显示:lncRNA GASL1+ICG001组bcl-2蛋白含量低于lncRNA GASL1+对照剂组;差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 lncRNA GASL1可促进血管平滑肌细胞增殖,阻断Wnt/β-catenin信号通路后,lncRNA GASL1对血管平滑肌的促增殖作用下降.     

Wnt/β-catenin信号通路对问充质干细胞衰老的影响及其作用机制

目的:研究不同年龄血清对Wnt/β-catenin信号通路激活水平的影响,探讨Wnt/β-catenin信号通路对间充质干细胞(MSCs)衰老、增殖、存活能力的作用及其机制.方法:提取年轻(8 ～12周)及老年(64—72周)SD大鼠血清,实验分为4组,分别为年轻血清(Young rat serum,YRS)组,YRS+ Wnt 3a组、老年血清(Old rat serum,ORS)组和ORS+ DKK1组.免疫细胞化学染色和Western blotting检测胞浆、胞核β-catenin的表达.SA-β-半乳糖苷酶染色检测各组细胞衰老,MTT法检测细胞增殖,AO/EB染色法检测MSCs存活和凋亡.为研究Wnt/β-catenin信号通路导致MSCs衰老的作用机制,免疫细胞化学染色和Western blotting检测γ-H2A.X和p53蛋白表达,RT-PCR法检测p53、p21 mRNA表达.结果:ORS组β-catenin表达较YRS组明显增强,尤其是胞核,出现β -catenin聚集现象,而ORS+ DKK1组β-catenin表达减弱.与YRS组相比,YRS+ Wnt 3a组细胞SA-β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数显著增多(P＜0.01),细胞增殖和存活能力减弱.而ORS+ DKK1组与ORS组相比,SA-β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数显著减少(P＜0.01),细胞增殖和存活能力增强.免疫细胞化学染色、Western blotting和RT-PCR检测结果显示,ORS组内γ-H2A.X、p53、p21表达较YRS组明显增强,而在ORS内加入DKK1后,γ-H12A.X、p53、p21表达较ORS组明显减弱.结论:ORS培养可以激活MSCs内Wnt/β-catenin信号通路.Wnt/β-catenin信号通路对MSCs衰老发挥重要调控作用.DNA损伤反应和p53/p21途径是Wnt/β-catenin信号通路导致MSCs衰老的重要介导因素.     

王枣子总黄酮对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用及机制研究

目的 研究王枣子中总黄酮(TFIA)对佐剂性关节炎(AA)的治疗作用及机制。方法 采用注射完全弗氏佐剂制备AA模型大鼠后随机分为4组:AA组、AA+TFIA 50 mg/kg组、AA+TFIA 100 mg/kg组、AA+TFIA 150 mg/kg组,每组10只。另设空白对照组大鼠,不造模（n=10）。造模后4 d,TFIA各剂量组大鼠采用TFIA灌胃治疗,分别按上述3个剂量灌胃,每天1次,共24 d,空白对照组和AA组灌胃生理盐水。治疗第12天、16天、20天、24天采用大鼠关节炎评分法评价TFIA对AA大鼠的治疗作用。治疗第24天处死各组大鼠,分离大鼠滑膜组织,原代培养各组大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS),ELISA检测各组FLS中白细胞介素（IL-1）表达,MTT检测各组FLS增殖活力,real time qPCR检测各组FLS miR-152和经典Wnt信号通路关键基因〔β-catenin、细胞周期蛋白基因（ccnd1）〕表达。向AA大鼠FLS转染miR-152 mimics和对照NC mimics,向TFIA 100 mg/kg剂量组大鼠FLS转染miR-152 inhibitors和对照NC inhibitors,36 h后检测miR-152、β-catenin、ccnd1、IL-1表达和FLS的增殖。结果 TFIA各剂量灌胃治疗均能抑制AA大鼠关节炎评分,抑制β-catenin、ccnd1、IL-1表达和FLS增殖活力（P<0.05),各剂量组间比较差异无统计学意义（P>0.05),与空白对照组相比,各剂量组均未恢复至正常水平（P<0.05)。与空白对照组相比,AA组FLS中miR-152表达降低（P<0.05),向AA组FLS转染miR-152 mimics后,与对照组相比,过表达的miR-152抑制β-catenin、ccnd1、IL-1表达,抑制FLS增殖（P<0.05)。向TFIA 100 mg/kg剂量组FLS转染miR-152 inhibitors,与对照组相比,抑制了miR-152的表达,促进了β-catenin、ccnd1、IL-1表达,促进了FLS增殖（P<0.05)。结论 TFIA对AA大鼠有一定治疗作用,此作用可能通过上调miR-152的表达,影响经典Wnt信号通路实现。     

利拉鲁肽激活Wnt/β-catenin信号通路保护大鼠急性脊髓损伤后神经功能的分子机制研究

目的 探讨利拉鲁肽通过调控Wnt/β-catenin信号通路对急性脊髓损伤大鼠神经保护作用的机制。方法 60只SD大鼠随机选取15只作为假手术组(仅接受T9～T10椎板切除术),其余45只大鼠采用改进Allens技术建立急性脊髓损伤模型。脊髓损伤模型建立成功后,随机分为模型组、利拉鲁肽组和利拉鲁肽+XAV939组,各15只。在脊髓损伤后的14 d内,假手术组和模型组大鼠每天皮下注射50 mg/kg生理盐水,利拉鲁肽组大鼠每天皮下注射50μg/kg利拉鲁肽,利拉鲁肽+XAV939组大鼠每天皮下注射50μg/kg利拉鲁肽和0.4 mg/kg XAV939(一种Wnt/β-catenin信号通路的小分子抑制剂)。于术前、干预第7天、第14天时,采用BBB评分法对大鼠下肢运动功能进行评估。第14天采用蛋白质免疫印迹(Western blot)和免疫组化分析β-连环蛋白(β-catenin)、胱天蛋白酶3(caspase-3)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)蛋白表达水平。第14天采用HE和尼氏染色观察大鼠脊髓组织神经细胞变化。结果 术前各组间BBB评分无差异。干预第7天、第1...     

扶脾益肾汤调节Wnt/β-catenin信号通路对牙周炎大鼠牙周组织损伤的影响

目的 观察扶脾益肾汤通过调节Wnt/β-catenin信号通路减轻牙周炎大鼠牙周组织损伤的作用机制。方法 将72只SPF级SD大鼠随机分为对照组、模型组及扶脾益肾汤低(10g/kg)、中(20g/kg)、高(40g/kg)组、扶脾益肾汤高(40 g/kg)+通路抑制剂Wnt-C59(30 mg/kg)组(高+Wnt-C59组)。每组12只,用细菌感染建立牙周炎大鼠模型。给药结束后,检测牙周指标菌斑指数(PLI)、牙周探诊深度(PD)、龈沟出血指数(SBI);Micro-CT检测牙槽骨吸收;HE染色观察牙周组织病理学变化;TRAP染色分析破骨细胞数目;Western blot检测Wnt/β-catenin通路蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠牙槽骨吸收、牙周结构破坏严重,PLI、PD、SBI、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平、破骨细胞数目表达显著升高(P<0.05),Wnt、β-catenin蛋白表达显著下降(P<0.05)。与模型组比较,扶脾益肾汤各处理组牙周结构改善,PLI、PD、SBI、TNF-α、IL...     

Wnt/β-catenin信号通路对间充质干细胞衰老的影响及其作用机制

目的:研究不同年龄血清对Wnt/β-catenin信号通路激活水平的影响,探讨Wnt/β-catenin信号通路对间充质干细胞(MSCs)衰老、增殖、存活能力的作用及其机制。方法:提取年轻(8～12周)及老年(64～72周)SD大鼠血清,实验分为4组,分别为年轻血清(Young rat serum,YRS)组,YRS+Wnt 3a组、老年血清(Old rat serum,ORS)组和ORS+DKK1组。免疫细胞化学染色和Western blotting检测胞浆、胞核β-catenin的表达。SA-β-半乳糖苷酶染色检测各组细胞衰老,MTT法检测细胞增殖,AO/EB染色法检测MSCs存活和凋亡。为研究Wnt/β-catenin信号通路导致MSCs衰老的作用机制,免疫细胞化学染色和Western blotting检测γ-H2A.X和p53蛋白表达,RT-PCR法检测p53、p21 mRNA表达。结果:ORS组β-catenin表达较YRS组明显增强,尤其是胞核,出现β-catenin聚集现象,而ORS+DKK1组β-catenin表达减弱。与YRS组相比,YRS+Wnt 3a组细胞SA-β-半乳糖苷酶染色阳性细胞...     

黄芪甲苷对局灶性脑缺血后适应中Wnt/β-catenin信号通路关键因子表达的影响

目的 探讨黄芪甲苷对局灶性脑缺血后适应中Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路关键因子表达的影响.方法 将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注模型组(I/R组)、缺血后适应组(IPC)、黄芪甲苷(低、中、高)+缺血后适应组(IPC+AS-IV10组、IPC+AS-IV20组、IPC+A...     

吡非尼酮对UUO大鼠肾组织中GSK3β蛋白、WNT/β-catenin通路的影响

目的探讨吡非尼酮对UUO大鼠肾间质纤维化组织中GSK3-β蛋白、Wnt/β-catenin通路的影响及其对肾间质纤维化的作用。方法将Wistar雄性大鼠72只,随机分为3组:假手术组、UUO组以0.9%Nacl2mL/d灌胃,吡非尼酮组在UUO组的基础上以吡非尼酮250mg/kg溶解在0.9%Nacl2mL/d灌胃。各组大鼠于术后第3,7,14天分别处死8只。结果在各时间点,与假手术组相比较,UUO模型组肾小管间质损伤和纤维化程度明显,GSK3-β蛋白、β-catenin明显表达增多,差异具有统计学意义(P0.05);且随着梗阻时间延长(3、7、14天),UUO模型组大鼠的GSK3-β蛋白及β-catenin的表达逐渐增加。与UUO组相比吡非尼酮组大鼠肾间质组织中GSK3-β蛋白,β-catenin表达水平显著降低(P0.05)。结论吡非尼酮能够通过下调GSK3-β蛋白的表达进而调节Wnt/β-catenin信号通路抑制β-catenin的产生延缓肾间质纤维化的发生及发展,可能为肾纤维化的临床治疗及研究提供新的作用靶点及理论依据。     

低聚原花青素通过介导Wnt/β-catenin信号通路对糖尿病肾病大鼠肾功能的保护作用研究

目的 研究低聚原花青素通过介导Wnt/β-catenin信号通路对糖尿病肾病（DN）大鼠肾功能的保护作用。方法 选择60只SD雄性大鼠,随机分为正常对照组（NC组）、DN模型组（DN组）、DN模型+不同剂量低聚原花青素组（低、中、高剂量组）,采用单次腹腔注射链脲佐菌素复制DN模型,低、中、高剂量组分别给予50 mg/kg、100 mg/kg、150 mg/kg低聚原花青素灌胃,NC组和DN组给予等体积蒸馏水灌胃。分别于第4周、8周、12周、16周,检测各组大鼠24 h尿蛋白定量;16周末检测大鼠血糖、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）水平;处死大鼠,取肾脏组织行苏木精-伊红及过碘酸希夫染色,观察肾组织形态学变化;检测肾组织匀浆上清液中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量;实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting检测肾组织Wnt4、β-catenin mRNA和蛋白的表达。结果 DN组血糖、Scr、BUN水平较NC组升高（P <0.05）;低、中、高剂量组血糖、Scr、BUN水平较DN组降低（P <0.05）。各组大鼠灌胃4周、8周、12周、1...     

骨形态发生蛋白-7调节肾病鼠Wnt1/β-catenin信号通路

目的观察骨形态发生蛋白-7(BMP-7)对嘌呤霉素氨基核苷酸肾病(PAN)鼠肾小球Wnt/β-catenin表达的影响,探讨BMP-7的肾保护作用及可能机制。方法 20只嘌呤霉素氨基核苷酸诱导的大鼠随机分为PAN组和PAN+BMP-7组(BMP-7组),每组各10只。BMP-7组每周2次腹腔注射人重组BMP-7 30微克/(千克.次)。另设正常对照组(NC,n=10)。第12周检测尿液红细胞(UE)、24h尿蛋白(24h UP),血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cys C)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)。处死大鼠,反转录-聚合酶链反应检测Wnt1和β-catenin mRNA表达水平。Western blotting检测Wnt1和β-catenin蛋白表达水平。结果与NC组相比,PAN组UE、24h UP、Cys C、MIC、肾小球Wnt1和β-catenin mRNA和蛋白质的表达水平均显著升高,差异具有显著的统计学意义(P均<0.01)。BMP-6组UE、24h UP、Cys C、MIF、肾小球Wnt1和β-catenin mRNA和蛋白质的表达较PAN组降低,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 BMP-7减轻尿液红细胞及尿蛋白的排泄,降低血清CysC、MIC水平,下调肾小球Wnt1/β-catenin信号通路的表达,减轻肾损伤。     

龙血竭总黄酮对心肌缺血再灌注损伤大鼠Wnt/β-catenin 蛋白表达的影响及其临床意义

目的 探讨龙血竭总黄酮(SDF)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠Wnt/β-catenin蛋白表达的影响及其临床意义。方法 将50只雄性SD大鼠随机分为5组，每组10只，分别为假手术(sham)组、心肌缺血再灌注模型(MIRI)组、模型+Wnt/β-catenin抑制剂(IWR-1)组、模型+龙血竭总黄酮灌胃(SDF)组、模型+Wnt/β-catenin抑制剂+龙血竭总黄酮灌胃(IWR-1+SDF)组，采用冠状动脉前降支结扎法构建MIRI大鼠模型。TTC染色评价造模情况和SDF对模型的作用效果；蛋白质印迹法(Western blot)检测Wnt2、β-catenin表达水平；ELISA法检测血清血管内皮生长因子(VEGF)水平。结果 TTC染色结果显示动物造模成功；SDF组Wnt2相对表达量为(1.74±0.18),显著高于sham组的(1.05±0.24)和MIRI组的(0.99±0.12),差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。SDF组β-catenin相对表达量为(0.65±0.08),显著低于sham组的(1.10±0.07),差异有统计学意义(P<0.0...     

Wnt3a/β-catenin信号通路诱导人关节软骨间充质祖细胞增殖能力和向软骨分化的能力

目的研究Wnt3a/β-catenin信号通路对人关节软骨间充质祖细胞(mesenchymal progenitor cells,MPCs)老化的影响。方法 RT-PCR和Western blot检测正常人(对照组)和原发性骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者(OA组)MPCs中Wnt3a/β-catenin的表达。Western blot检测β-catenin在Wnt3a/β-catenin信号激活与阻断后细胞中的积累,MTT检测细胞的增殖情况,RT-PCR检测细胞向软骨细胞诱导后的分化情况。结果 OA组MPCs中Wnt3a和β-catenin蛋白表达明显高于对照组;在Wnt3a/β-catenin信号通路激活的对照组MPCs中β-catenin积累增加,阻断后β-catenin积累降低;Wnt3a/β-catenin信号通路激活的对照组MPCs增殖能力降低,阻断后增殖能力提高;Wnt3a/β-catenin信号通路激活的对照组MPCs向软骨细胞诱导分化后较对照组MPCs中Ⅱ型胶原、aggrecan、SOX9表达降低(P<0.01);Wnt3a/β-catenin信号通路激活的同时加入阻断剂,Ⅱ型胶原、aggrecan、SOX9表达有明显恢复(P<0.05);Wnt3a/β-catenin信号通路阻断组细胞与对照组MPCs组相比没有差异。结论 Wnt3a/β-catenin信号通路激活促进了MPCs老化,Wnt3a/β-catenin信号通路阻断能够抑制MPCs老化,Wnt3a/β-catenin在OA中可能发挥了重要作用。     

固本活血壮骨颗粒对糖尿病大鼠成骨细胞Wnt/β-catenin信号传导通路的影响

目的观察固本活血壮骨颗粒对糖尿病大鼠模型成骨细胞Wnt/β-catenin信号传导通路的影响。方法 6月龄SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药物对照组、固本活血壮骨颗粒大、中、小剂量组。除正常对照组外,其余各组均采用左下腹腔内注射新鲜配制1%链脲佐菌素STZ(柠檬酸缓冲液,p H值4.4)65 mg/kg体重造模。各组予相应药物及生理盐水灌胃12周。结果固本活血壮骨颗粒可提高糖尿病模型成骨细胞Wnt1、LRP-5以及β-catenin蛋白的表达。结论固本活血壮骨颗粒可以通过促进成骨细胞Wnt1、LRP-5以及β-catenin蛋白的表达,调节Wnt/β-catenin信号传导通路的失调状态,促进骨形成,减少骨吸收,提高骨质量,从而达到防治糖尿病性骨质疏松症的效果。     

白黎芦醇对小鼠卵巢早衰的干预作用及可能机制

目的 观察白藜芦醇对卵巢早衰小鼠的干预作用,并阐述其可能机制。方法 40只两月龄雌性小鼠随机分为4组,分别为对照组(Control)、模型组(Model group)、20 mg/kg RES组(20 mg/kg RES group)和40 mg/kg RES组(40 mg/kg RES group),每组10只。测量小鼠体重、卵巢重量和卵巢/小鼠相对重量比;采用HE染色观察小鼠卵巢组织中卵泡数量变化;RT-qPCR法检测卵巢组织中CyclinD1、Wnt1和β-catenin mRNA表达;免疫组化染色观察卵巢组织中β-caterin蛋白表达;Western blot法检测卵巢组织中Mvh、Oct4、SOD2、Nrf2、Bax和Bcl-2蛋白表达。结果 20 mg/kg RES组和40 mg/kg RES组小鼠体重、卵巢重量和卵巢/小鼠重量比均高于模型组;与模型组比较,20 mg/kg RES组和40 mg/kg RES组小鼠原始卵泡数量增加、闭锁卵泡数量下降(P<0.05),而卵巢组织中CyclinD1、Wnt1和β-catenin mRNA表达增加(P<0.05);与...     

豚鼠近视模型中屈光度眼轴长度及巩膜Ⅰ型胶原纤维变化的研究

目的 研究豚鼠近视模型中屈光度眼轴长度变化及后极部巩膜中Ⅰ型胶原纤维的变化.方法 取出生1周的豚鼠75只,利用6号半透明乳胶气球作为头套诱导形觉剥夺性近视(FDM)动物模型.随机分为空白对照组、形觉剥夺(FDM)组和自身对照组.分别测量记录实验豚鼠不同时空点的双眼屈光度及眼轴长度.形觉剥夺实验组分为遮盖2周、遮盖4周、遮盖4周去遮盖1周及遮盖6周4个亚组,左眼为遮盖眼(FDM组),采用半透明面罩遮盖诱导形觉剥夺性近视,右眼不予处理(自身对照组).对遮盖前后实验组和对照组双眼屈光度、眼轴长度进行测量,并对后极部巩膜中Ⅰ型胶原进行免疫组化分析.结果 FDM组由遮盖前远视(+2.09 ±0.31)D 逐渐变成遮盖6周时近视(-7.07 ±0.56)D,眼轴也由遮盖前(5.93 ±0.39)mm 到6周时(7.99 ± 0.32)mm,且后极部巩膜中Ⅰ型胶原含量也逐渐降低.结论 形觉剥夺法可成功制造豚鼠实验性近视模型,在豚鼠形觉剥夺性近视的形成过程中伴随着眼球近视度数逐渐增加和眼轴长度不断增长,且后极部巩膜中Ⅰ型胶原随着近视度数加深逐渐降低.     

盘龙七片调节Wnt/β-catenin通路对大鼠胫骨骨折愈合的影响

目的 探讨盘龙七片对大鼠胫骨骨折愈合的促进作用及可能作用机制。方法 选用58只8周龄、SPF级SD雄性大鼠为实验大鼠,分为造模大鼠（n=48）与Sham组大鼠（n=10）。建立胫骨骨折模型大鼠,并将模型大鼠分为 Model组、盘龙七片组（Treat组）、β-catenin抑制剂组（XAV-939）及盘龙七片+β-catenin抑制剂组（Treat+XAV 939组）4组,每组10只。X光片观察大鼠胫骨骨折愈合状况;骨密度测定仪检测胫骨骨矿物质密度值（BMD）;HE染色观察大鼠骨折部位结构变化;酶联免疫吸附法检测血清中ALP、bFGF、TNF α、IL 1β;免疫印迹法检测骨组织中p 糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）、Wnt3、β 链蛋白（β=Catenin）及淋巴增强因子1(LEF1)蛋白表达。结果 与Sham组相比,Model组骨组织影像学愈合评分、BMD、ALP、bFGF水平、Wnt3、β-Catenin、LEF1蛋白表达降低,TNF α、IL 1β水平升高;与Model组相比,Treat组骨组织影像学愈合评分、BMD、ALP、bFGF水平、Wnt3、β Catenin、LEF1蛋白表达升高,TNF α、IL 1β水平降低;Treat+XAV 939组骨组织影像学愈合评分、BMD、ALP、bFGF水平、Wnt3、β-Catenin、LEF1蛋白表达高于XAV 939组,TNF α、IL 1β水平低于XAV 939组,差异有统计学意义（均P＜0.05）。 结论 盘龙七片可促进大鼠胫骨骨折愈合,其机制与抑制Wnt/β-catenin通路、缓解骨折大鼠机体炎症反应有关。     

奥拉西坦通过Wnt/β-catenin减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的实验研究

目的研究奥拉西坦对大鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤的影响及分子机制。方法 2017年5月—2018年12月在上海市第六人民医院南院中心实验室进行实验,选择成年雄性SD大鼠并随机分为假手术组(n=10)、I/R组(n=10)、奥拉西坦组(n=10),后2组采用线栓法建立脑I/R模型,奥拉西坦组给予奥拉西坦200 mg/kg腹腔注射,连续7 d。比较3组间神经功能缺损评分、血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)及星形胶质原蛋白(S100B)含量、脑组织中细胞凋亡率及凋亡基因、Wnt/β-catenin通路基因表达的差异。结果 I/R组大鼠的神经功能缺损评分、血清NSE及S100B含量、脑组织的细胞凋亡率及Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(CytC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的表达水平均明显高于假手术组,脑组织中B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Wnt1、Wnt3、β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平均明显低于假手术组(P<0.05或0.01);奥拉西坦组大鼠的神经功能缺损评分、血清NSE及S100B含量、脑组织的细胞凋亡率及Bax、CytC、Caspase-3、GSK-3β的表达水平均明显低于I/R组,脑组织中Bcl-2、Wnt1、Wnt3、β-catenin的表达水平均明显高于I/R组(P<0.05或0.01)。结论奥拉西坦能够减轻大鼠脑I/R损伤的程度,且该作用与Wnt/β-catenin通路的激活有关。