Mettl14介导的m6A修饰对改善心肌梗死的分子机制

目的 探索甲基转移酶样14(METTL14)介导的N6-甲基腺苷（m6A）修饰在心肌梗死（MI）中的生物学作用。方法 将小鼠随机分为4组，每组10只：Sham+AAV9-NC组、Sham+AAV9-METTL14组、MI+AAV9-NC组和MI+AAV9-METTL14组。各组小鼠分别在MI诱导前1周将AAV9-METTL14或AAV9-NC通过尾静脉注射到小鼠体内。通过经胸超声心动图无创测量心脏功能，并采用免疫荧光测定小鼠微血管损伤和内皮线粒体功能障碍。从小鼠心肌组织中分离CMECs，对细胞进行去氧葡萄糖（OGD）处理。结果 METTL14在MI小鼠心脏组织以及OGD处理的CMECs中下调。与Sham+AAV9-NC组小鼠相比，MI+AAV9-NC组小鼠中VE-cadherin表达显著下调（P<0.05），线粒体ROS水平显著增加（P<0.05）。MI+AAV9-METTL14抑制了这些变化，并增强了小鼠的心脏功能。与NC组相比，在OGD组CMECs细胞中观察到线粒体ROS水平显著增加（P <0.05）。CMECs细胞中METTL14敲低加剧了ROS水平（P <...     

胶原蛋白三螺旋重复序列1调控表皮生长因子受体信号通路促进高血压心肌重构形成及其机制

目的 探讨胶原蛋白三螺旋重复序列1(CTHRC1)调控表皮生长因子受体(EGFR)信号通路在高血压心肌重构形成中的作用及其机制。方法 将SD大鼠随机分为以下3组：野生型对照(WTC)组、AngⅡ+Stuffer组和AngⅡ+CTHRC1组，每组10只。AngⅡ+Stuffer组和AngⅡ+CTHRC1组大鼠分别以1×10¹¹v.g.的剂量通过尾静脉注射Stuffer或CTHRC1进行预处理；注射4周后，大鼠接受渗透微型泵给药AngⅡ[1.5 mg/(kg·d)]持续4周以发展高血压，通过经胸超声心动图无创测量心脏功能，并采用Masson三色染相比，AngⅡ+stuffer组高血压大鼠心脏组织纤维化显著增加(P <0.05)。CTHRC1给药进一步加剧了高血压大鼠这些病理变化(P <0.05)。心脏超声显示，AngⅡ+CTHRC1组大鼠左心室射血分数降低和分数缩短程度较AngⅡ+stuffer组更大(P <0.05)。与对照组相比，AngⅡ色评估心脏纤维化。从2至3日龄SD大鼠的心脏中分离出心脏成纤维细胞(CF)，分为：Con组、AngⅡ组、Ang...     

低温缺氧/复氧后大鼠心肌成纤维细胞对心肌H9c2细胞间通讯的影响

目的 观察低温缺氧/复氧（hypothermia hypoxia/reoxygen,H/R）后大鼠心肌成纤维细胞（rat cardiac fibroblasts,RCFs）对心肌H9c2细胞间通讯的影响并探讨其可能机制。方法 将RCFs细胞与H9c2细胞以2:1数量比Transwell共培养后随机分为6组。其中T+AngⅡ组及H/R-T+AngⅡ组加入1.5 nmol/L AngⅡ，T+ARB组及H/R-T+ARB组加入1 nmol/L缬沙坦。T组、T+AngⅡ组及T+ARB组进行正常培养，H/R-T组、H/R-T+AngⅡ及H/R-T+ARB组进行H/R处理。检测各组培养液中AngⅡ含量；H9c2细胞Cx43、ERK1/2表达量及磷酸化及细胞间通讯情况。结果 与T组相比，H/R-T组及T+AngⅡ组H9c2细胞ERK1/2、Cx43表达及磷酸化水平降低（P <0.05），细胞间通讯减弱（P <0.05）;T+ARB组H9c2细胞ERK1/2、Cx43表达及磷酸化水平增高（P <0.05），细胞间通讯增强（P <0.05）。与H/R-T组相比，H/R-T+Ang...     

Eupatilin通过Sesn2-Nrf2保护线粒体功能在脓毒症脑损伤中的作用

目的 探讨Sestrin2(Sesn2)的保护线粒体功能在减轻脓毒症脑损伤（SAE）小鼠的认知功能障碍中的作用研究。方法 120只6周大的雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组,每组40只：假手术（Sham）组、CLP组、CLP+Eupatilin组。建立由盲肠结扎和穿孔（CLP）手术诱导脓毒症模型。CLP+Eupatilin组小鼠采用Eupatilin治疗。通过神经行为测试、Morris水迷宫（MWM）来确定小鼠神经行为、空间学习和记忆功能。通过尼氏染色法计数海马CA1区的神经元数目。将HT22细胞随机分为对照组（Con）、脂多糖组（LPS）、LPS+Eupatilin组、LPS+Eupatilin+si-Nrf2组。通过TUNEL染色分析细胞凋亡,和线粒体膜电位（MMP）分析线粒体损伤。结果 在CLP手术后7 d,与Sham小鼠相比,CLP小鼠的海马和皮质中Sesn2显著下调（P <0.01）。与CLP组相比,CLP+Eupatilin组的存活率显著增加（P <0.05）。与Sham组相比,CLP组小鼠表现出相对较高的神经损伤评分（P <0.05）,和具有更少的平台...     

血管紧张素Ⅱ诱导TR3+/+和TR3-/-小鼠心肌肥大的超声对比实验研究

目的 应用超声技术对比研究血管紧张素Ⅱ( AngⅡ)诱导的TR3敲除C57BL/6小鼠(TR3-/-小鼠)和野生型C57BL/6小鼠(TR3+/+小鼠)心肌肥大后心肌厚度的变化,初步探讨TR3是否参与心肌肥大的过程.方法 将26只TR3 -/-小鼠及33只TR3+/+小鼠根据是否给予AngⅡ按随机原则分为TR3+/+ + AngⅡ组(27只)、TR3+/+ +PBS组(6只)、TR3-/- +AngⅡ组(20只)、TR3-/- +PBS组(6只)共4组.将注有AngⅡ或PBS的皮下渗透微泵埋入小鼠皮下释放4周,构建小鼠高血压模型,分别于埋泵前2d、埋泵后第1、2、3、4周共5次超声测量小鼠舒张末期室间隔厚度(IVSd)及右室后壁厚度(LVPWd).之后处死小鼠,取心肌组织进行HE染色、Western Blotting检测,对比各组差异.结果 ①超声心动图:TR3+/+ +组及TR3-/-组小鼠在埋泵前,IVSd及LVPWd未见明显差异(P＞0.05);埋泵后第1～2周,TR3-/- + AngⅡ组和TR3+/+ + AngⅡ组小鼠IVSd及LVPWd达到峰值;埋泵后第2周,TR3+/+ +AngⅡ组小鼠IVSd及LVPWd明显高于TR3+/+ +PBS组(P＜0.05);TR3-/- +AngⅡ组小鼠IVSd及LVPWd略高于TR3-/- +PBS组(P ＜0.05);TR3+/+ + AngⅡ组小鼠IVSd及LVPWd较TR3-/- +AngⅡ组小鼠明显增高(P＜0.05);给药至第4周,IVSd及LVPWd与第2周比较差异无统计学意义(P＞0.05).②心肌组织HE染色:注射AngⅡ的TR3+/+小鼠心肌细胞出现了明显增大,而TR3-/-小鼠心肌细胞增大不明显.③Western blotting:注射AngⅡ的TR3+/+小鼠心肌细胞TR3表达明显增高(P＜0.05).结论 TR3参与了AgⅡ诱导的小鼠心肌肥大过程,TR3是小鼠受到AngⅡ刺激后引起心肌肥大的关键因素.     

特异性敲除Apelin基因对单侧输尿管梗阻小鼠肾间质纤维化的影响

目的观察多肽Apelin基因缺失对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾间质纤维化的影响,探讨在梗阻性肾病肾纤维化形成中Apelin的作用和可能机制。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Apelin基因敲除小鼠(KO)共20只,同时选取野生型小鼠(WT)20只,均为8周龄雄性C57BL/6J种系,采用随机数字表法分为:KO+Sham组、KO+UUO组、WT+Sham组、WT+UUO组,每组各10只。分别对小鼠行单侧输尿管结扎(UUO)或假手术(Sham)。术后2周将小鼠处死,取血浆和手术侧肾脏进行检测。采用Masson染色观察肾脏纤维化程度,免疫组织化学染色检测肾脏基质成分纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原(Col-I)的分布和表达情况。采用Western blotting法检测肾小管上皮标志物E-钙黏素(E-cadherin)、间充质标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),以及致纤维化细胞因子--转化生长因子-β1(TGF-β1)及其受体TGFβ-R1的蛋白表达量。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血浆肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平。结果KO+UUO组小鼠肾脏可见明显的肾小管萎缩和肾间质纤维化,基质成分FN和Col-I表达量显著升高。WT+UUO组小鼠肾脏的纤维化程度和基质的表达量均低于KO+UUO组,差异具有统计学意义(P<0.05)。KO+Sham组和WT+Sham组肾脏无明显的纤维化改变和基质的沉积。KO+UUO组小鼠,可见显著的肾小管上皮-间充质转分化(EMT)表现,E-cadherin减少,α-SMA增多,TGF-β1和TGFβ-R1受体的表达量也明显升高。与KO+UUO组相比,WT+UUO组肾小管上皮E-cadherin的表达较多,α-SMA、TGF-β1和TGFβ-R1受体的表达均较低,差异具有统计学意义(P<0.05)。而WT+Sham组和KO+Sham组小鼠上述标志物的表达趋于正常水平。KO+UUO组小鼠血浆Cr、BUN的水平最高,WT+UUO组小鼠上述标志物的水平均低于KO+UUO组,差异具有统计学意义(P<0.05)。KO+Sham组小鼠血浆Cr、BUN与WT+Sham组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Apelin在正常状态下对肾功能无明显影响,但在输尿管梗阻状态下其基因缺失可能是引起肾间质纤维化加重的因素。     

心房肌细胞外泌体miR-130在房颤发病中的作用机制

目的 探讨小鼠心房肌细胞外泌体miR-130在房颤（AF）发病中的作用机制。方法 用miR-130 shRNA慢病毒（sh-miR-130）或对照（sh-Crtl）转染小鼠心房肌细胞,然后进行AngⅡ处理。从处理过的心房肌细胞中分离出外泌体,与THP-1巨噬细胞共培养。进行流式细胞术以检查CD86和CD163阳性巨噬细胞的百分比。此外,通过构建横向主动脉弓缩窄术（TAC）小鼠模型,将sh-miR-130注射到小鼠体内以敲低miR-130表达,进一步研究miR-130在体内心脏纤维化过程和巨噬细胞极化中的作用。结果 AngⅡ处理的心房肌细胞衍生的外泌体（AngⅡ-Exo）中miR-130表达上调。AngⅡ-Exo通过转移miR-130诱导巨噬细胞向M1极化。在有或没有sh-Ctrl对照处理的TAC小鼠中miR-130的水平显著升高,并且注射sh-miR-130的TAC小鼠的miR-130水平显著降低。sh-miR-130明显改善了TAC小鼠心脏的结构并减小了心肌大小、纤维化水平。此外,sh-miR-130处理后TAC小鼠左心房组织中iNOS+/CD68+巨噬细胞显著降低,和CD163+/...     

川芎嗪通过调控组蛋白乙酰化修饰上调SERCA2a对心力衰竭小鼠模型的防治机制研究

目的　研究川芎嗪（ligustrazine, LGSZ）是否通过调控组蛋白乙酰化修饰上调心肌肌浆网Ca2+-ATPase 2a（SERCA2a）在预防心力衰竭中发挥作用。方法　通过微创性横向主动脉缩窄（TAC）手术构建心力衰竭的小鼠模型,超声心动图评价LGSZ干预后心脏功能变化,实时定量聚合酶链式反应（qPCR）,western blot及ChIp检测SERCA2a相关蛋白和基因表达,并通过试剂盒检测组蛋白去乙酰化酶1（HDAC1）活性。结果　TAC+LGSZ组手术前后左心室前壁舒张末期厚度（LVAWd）、舒张末期左室后壁厚度（LVPWd）、射血分数（EF）及缩短分数（FS）比较,差异均无统计学意义（t=0.245~1.054,均P>0.05）。TAC+LGSZ组SERCA2a mRNA和SERCA2a蛋白表达显著高于TAC组,差异有统计学意义（t=4.817,3.913,均P<0.001）。TAC+LGSZ组中总AcH3和AcH3K9与SHAM组比较,差异无统计学意义（t=0.624,1.249, 均P>0.05）。TAC组HDAC1酶活性和HDAC1水平均高于SHAM组和TAC+LGSZ组,差异均有统计学意义（t=2.361~4.309,均P<0.05）。TAC组心脏组织中,Atp2a2启动子区域附近GATA4和Mef2c水平低于TAC+LGSZ组,差异有统计学意义（t=4.816,5.007,均P<0.001）。结论　LGSZ通过调控组蛋白乙酰化修饰上调SERCA2a在压力超负荷引起的心力衰竭中起预防作用。     

调控骨桥蛋白介导的中性粒细胞浸润减轻脓毒症小鼠肺损伤的研究

目的探讨骨桥蛋白（OPN）中和抗体处理对脓毒症小鼠生存情况的影响及其加剧急性肺损伤的机制。 方法将80只雄性小鼠分成假手术组（Sham组）、脓毒症组[盲肠结扎穿孔术（CLP）组]、阴性对照组[CLP+免疫球蛋白G（IgG）组]及OPN中和抗体组（CLP+ OPN Ab组）,每组各20只。采用CLP制备脓毒症小鼠模型,Sham组除不结扎和穿刺盲肠外,其余手术步骤相同。建模成功即刻,CLP+ IgG组及CLP+ OPN Ab组小鼠分别经颈内静脉注射IgG和OPN单抗,Sham组和CLP组注射等量磷酸盐缓冲液。每组10只用于观察小鼠活动状态及术后7 d存活情况;另外10只分别于术后24 h采集眼眶血及收集肺组织用于OPN及髓过氧化物酶（MPO）检测。比较4组小鼠血清、肺组织OPN信使RNA（mRNA）水平和肺组织中OPN蛋白水平,外周血丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、白细胞介素6（IL-6）、趋化因子配体2（CXCL-2）和MPO活性。 结果术后第7天,Sham组小鼠10只均存活;CLP组及CLP+ IgG组分别有2只存活,而CLP+ OPN Ab组仍有4只小鼠存活。4组小鼠7 d存活情况比较,差异有统计学意义（χ² = 17.374,P = 0.001）。且与Sham组相比,CLP组、CLP+ IgG组和CLP+ OPN Ab组小鼠存活情况均显著降低（P均< 0.05）;而CLP组、CLP+ IgG组和CLP+ OPN Ab组小鼠存活情况比较,差异均无统计学意义（P均> 0.05）。CLP术后24 h,4组小鼠血清、肺组织OPN mRNA水平和肺组织中OPN蛋白水平,外周血中ALT、AST、LDH、IL-6、CXCL-2、MPO活性比较,差异均有统计学意义（F = 84.227、51.929、41.563、19.558、55.416、75.968、32.824、176.945、119.046,P均< 0.05）。进一步两两比较发现,CLP组、CLP+ IgG组和CLP+ OPN Ab组小鼠血清、肺组织OPN mRNA水平和肺组织中OPN蛋白水平,外周血中ALT、AST、LDH、IL-6、CXCL-2、MPO活性均较Sham组显著增高,且CLP组和CLP+ IgG组更高（P均< 0.05）。 结论OPN单抗中和OPN可调控脓毒症小鼠肺内中性粒细胞浸润,减轻急性损伤,提示OPN可作为脓毒症急性肺损伤的治疗靶点。     

RhoF介导的Th17极化在急性胰腺炎发生中的作用及机制

目的 探讨Rho相关GTP结合蛋白F(RhoF)介导的Th17极化在重度急性胰腺炎（SAP）发生中的作用及机制研究。方法 将RhoF转基因小鼠随机分为3组：对照组（n=10）、SAP组（n=10）和SAP+Y-27632组（n=10）。另将WT小鼠随机分为3组：对照组（n=10）、SAP组（n=10）和SAP+Y-27632组（n=10）。除对照组外,其他组建立SAP模型。SAP+Y-27632组在模型建立后,通过尾静脉输注Y-27632。分离小鼠血液样本中的T细胞,用于RhoF、p-MYPT1蛋白检测和ROCK活性测定,并采用流式细胞仪分析产生IL-17的淋巴CD4+T细胞的百分比。结果 与对照组相比,SAP组小鼠T细胞中RhoF、p-MYPT1表达量增加（P <0.01）,并且RhoF的水平与p-MYPT1的水平密切相关（P <0.05）。与WT组相比,RhoF组小鼠T细胞的RhoF蛋白水平的表达增加约30%,并且CD4+T细胞自发产生IL-17的水平显著增加（P <0.01）。与WT小鼠相比,RhoF转基因小鼠胰腺损伤的组织学评分,T细胞的RhoF、p-MYPT...     

丹酚酸B对小鼠脑出血的神经保护作用研究

目的：探讨丹酚酸B(SalB)对小鼠脑出血（ICH）的神经保护作用及机制。方法：C57BL/6J雄性小鼠108只随机分为Sham组，ICH+Vehicle组，ICH+SalB组，每组36只。Ⅶ型胶原酶制备ICH模型，ICH+SalB组术后2 h尾静脉注射SalB 30 mg/kg,Sham组和ICH+Vehicle组尾静脉注射等量生理盐水，连续3 d。术后第3天，采用mNSS和转角实验观察行为学指标；HE染色观察脑组织损伤情况；脑含水量检测评估脑组织水肿；伊文思蓝（EB）外渗试验评估血脑屏障渗透性；Western blot检测ZO-1和Occludin蛋白表达水平评估血脑屏障完整性，检测MMP-9和IL-1β蛋白表达水平评估炎症因子水平；TUNEL染色评估凋亡细胞数量；Iba1和MPO免疫荧光染色评估小胶质细胞活化和中性粒细胞渗出情况。结果：mNSS评分结果显示ICH+SalB组神经功能缺损低于ICH+Vehicle组（P<0.05）；转角实验结果显示ICH+SalB组右转次数低于ICH+Vehicle组（P<0.05）;HE染色结果显示ICH+SalB组脑组织损伤、血肿面...     

骨痛灵方通过抑制整合素αvβ3通路缓解肺癌骨转移癌性疼痛

目的：探讨骨痛灵(Gutongling, GTL)方治疗肺癌骨转移疼痛的潜在作用机制。方法：将50只C57BL/6雄性小鼠随机分为5组(n=10)：假手术组（Sham组）、模型组（Model组）、唑来膦酸组（ZA组）、骨痛灵组（GTL组）、骨痛灵+唑来膦酸组（GTL+ZA组）。除Sham组给予接种PBS溶液外,其余各组均予鼠源肺腺癌细胞Lewis-LUC悬液造模。采用von Frey纤维丝测痛仪检测小鼠足底的机械痛阈值,共聚焦显微镜观察破骨细胞伪足小体F-actin环,实时荧光定量PCR法与免疫组化法检测各组小鼠左后肢胫骨骨组织中整合素αvβ3、富含脯氨酸的酪氨酸激酶2 (PyK2)、酪氨酸激酶Src、Casitas B细胞淋巴瘤家族蛋白(Cb1) mRNA及蛋白表达水平。结果：与Sham组比较,Model组小鼠造模后机械痛阈值下降(P <0.05)。造模后第14天：各给药干预组机械痛阈值较Model组升高(P <0.05);ZA组与GTL组机械痛阈值相当;造模后第21天：GTL+ZA组机械痛阈值较各给药组明显升高(P <0.05)。与Sham组比较,Model组F-...     

阿托伐他汀对大鼠心肌梗死后AngⅡ、TNF-α及心功能的影响

目的：探讨阿托伐他汀对大鼠心肌梗死后血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及心功能的影响。方法：急性心肌梗死雄性大鼠30只，随机分为心肌梗死对照组（AMI）和阿托伐他汀治疗组各15只，另设15只为假手术组，阿托伐他汀治疗组于手术后第2d起灌胃给药，假手术组及对照组只给予等量清水灌胃，6周后检测心肌AngⅡ、TNF-α及超声心动图，以了解心功能，最终获得完整资料大鼠于上述各组分别为10，11，14只。结果：与假手术组相比，心肌梗死对照组及阿托伐他汀治疗组心）lrt,AngⅡ、TNF-α和左室舒张末期内径（LVEDd）均明显升高（P均〈0．05），左室射血分数（LVEF）、短轴缩短率（FS）明显降低（P均〈0.05）。与心肌梗死对照组相比，阿托伐他汀治疗组心肌AngⅡ、TNF-α和LVEDd明显下降（P均〈0．05），LVEF、FS明显增高（P均〈0．05），左室功能改善明显。结论：阿托伐他汀能降低心肌AngⅡ，TNF-α水平，减轻心室重塑，保护心功能。     

超声造影特征及定量参数联合血生化指标对肝硬化肝癌的早期诊断价值研究

目的 探讨超声造影（CEUS）定量参数联合血清甲胎蛋白（AFP）、异常凝血酶原（PIVKA-Ⅱ）、α-L-岩藻糖苷酶（AFU)对于肝硬化肝癌早期诊断的价值。方法 选取从2018年7月至2021年3月期间，在我院确诊为肝硬化肝癌患者156例作为肝癌组，及同期在我院体检的健康志愿者共70人作为正常对照组。对比两组的CEUS定量参数[增强时间（ET）、达峰时间（TTP）、廓清时间（WT）、峰值强度（PI）]水平，以及血清标志物AFP、PIVKA-Ⅱ、AFU的水平差异。用ROC曲线评估CEUS定量参数ET、TTP、WT和PI及血清标志物AFP、PIVKA-Ⅱ、AFU单独和联合检测用于肝硬化肝癌的诊断效能。结果 肝癌组患者的ET、TTP及WT值短于正常对照组，PI值高于正常对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。肝癌组AFP、PIVKA- Ⅱ和AFU水平高于正常对照组，两组间差异具有统计学意义（P＜0.05）。各指标单独检测用于诊断肝硬化肝癌时，PIVKA-Ⅱ的敏感性、阳性检测率及AUC值最高，联合诊断时ET+TTP+WT+PI+AFP+PIVKA-Ⅱ+AFU7者联合检测的敏感性、特异性、阳性预测率和阴性预测率均为最高，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论 CEUS定量参数与血清AFP、PIVKA-Ⅱ、AFU联合检测对于肝硬化肝癌早期诊断具有重要价值。     

肿瘤内皮标记物1通过丝裂原活化蛋白激酶途径介导内皮细胞对血管新生及对心力衰竭心肌重塑

目的 基于肿瘤内皮标记物1(TEM1)介导的丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）途径,探讨内皮细胞对血管新生及对心力衰竭心肌重塑的作用。方法 将小鼠随机分成4组,包括假手术组、MI组、MI+sh-NC组和MI+sh-TEM1组。在心肌梗死（MI）后第7天通过免疫荧光染色检测梗死边缘区EndMT的变化,第28天通过超声心动图评估小鼠的心脏功能。小鼠主动脉内皮细胞（MAECs）分为3组：对照组、Vector组和rTEM1组。此外,用MAPK抑制剂SB203580预处理MAECs,用rTEM1处理细胞48 h。通过Western blot评估内皮细胞中EndMT和MAPKs信号通路的变化。结果 在梗死边缘区的心肌中,TEM1水平在MI后第1天轻微增加,在第7天显著达到峰值,然后在第28天降低。与Vector组相比,rTEM1组MAECs中VE-Cadherin蛋白表达显著下降（P <0.05）,和α-SMA、波形蛋白蛋白水平、相对迁移距离、侵袭细胞数和形成分支数量显著增加（P <0.05）。SB203580逆转了由rTEM1诱导MAECs的这些变化。与MI组相比,MI+sh-TEM1...     

神经干细胞联合神经生长因子纳米粒海马移植对APP/PS1转基因小鼠行为学及海马突触素的影响

目的 观察神经干细胞（NSCs）联合神经生长因子（NGF）纳米粒海马移植对APP/PS1双转基因小鼠行为学及海马突触素（SYP）的影响。 方法 体外分离培养增强型绿色荧光蛋白（EGFP）转基因小鼠胎脑来源NSCs,24只12月龄雄性APP/PS1双转基因AD小鼠随机分入NSCs联合NGF纳米粒移植组（NSCs+NGF-NP组）、NSCs移植组（NSCs组）和AD对照组（AD组）,每组8只,另选8只同月龄雄性野生型小鼠作为健康对照组（WT组）。NSCs+NGF-NP组和NSCs组分别行NSCs联合NGF纳米粒移植和NSCs移植,其余两组均行等量磷酸盐缓冲液（PBS）注射,移植部位为双侧海马区。移植4周后,采用Morris水迷宫检测4组小鼠学习记忆功能,用免疫荧光组化法检测移植细胞的迁移与分化,Western blot检测SYP蛋白水平。 结果 体外悬浮培养的神经球表达EGFP阳性,免疫荧光显示NSCs特异性标志物Nestin阳性。移植4周后,可见EGFP示踪的NSCs在海马注射移植部位存活并向胼胝体,海马深部和齿状回迁移,可分化为双皮质素（DCX）阳性神经元及胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性胶质细胞,并可见NSCs+NGF-NP组存活细胞数量较多,突起较长,穿越海马颗粒层。海马突触相关蛋白SYP检测显示, WT组、NSCs组和NSCs+NGF-NP组海马SYP蛋白水平较AD组明显增高（P＜0.05）,NSCs+NGF-NP组SYP蛋白水平明显高于NSCs组（P＜0.05）,且与WT组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。水迷宫检测显示,与AD组比较,WT组、NSCs组和NSCs+NGF-NP组在平台象限停留时间及穿越平台次数均增加（P＜0.05）,NSCs+NGF-NP组穿越平台的次数大于NSCs组（P＜0.05）,且与WT组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论 NSCs联合NGF纳米粒海马移植治疗可能促进移植细胞在体内存活及成熟,增加海马突触,从而改善AD小鼠学习记忆功能。     

内皮细胞中血管紧张肽Ⅱ对内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨在内皮细胞中血管情张肽Ⅱ（AngⅡ）对内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）表达的影响以及AT1、AT2和核因子-κB（NF—κB）在其中的作用。方法体外培齐人脐静脉内皮细胞，用AngⅡ单独和与缬沙坦（AT1的抑制剂）、PD123319（AT2的抑制剂）、PDTC（NF—κ的抑制剂）联合干预细胞后，用RT—PCR检测eNOS mRNA表迭，Western blot检测eNOS蛋白表达，EMSA检测NF—κB的活性。结果在AngⅡ干预2h后NF—κB活性增强（P〈0．05），PDTC和缬沙坦可以抑制活性的增强，而PD123319则无此作用；5h后eNOS的mRNA和蛋白表达下调（P〈0．05），缬沙坦能抑制这种下调（P〈0．05），PDTC无此作用，PD123319作用后eNOS的表达进一步下调，但与AngⅡ组无显著差别。结论在内皮细胞中AngⅡ与AT1结合后，可以导致NF—κB的激活和eNOS表达的下调，而NF—κB通路并没参与到AngⅡ对eNOS的调控中。     

糖尿病合并糖尿病足患者血浆肾上腺髓质素的变化

目的：探讨血浆肾上腺髓质索（ADM）的改变及血浆内皮素（ET）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及一氧化氮（NO）的变化与糖尿病合并糖尿病足的关系。方法：糖尿病合并糖尿病足和单纯糖尿病患者各40例（A、B组）与健康对照者30例（对照组）均采用放射免疫分析法测定血浆ADM、ET、AngⅡ的含量，化学比色法测定NO含量，比较血浆ADM含量的改变及与其它因素的相关性。结果：血浆ADM、ET、AngⅡ含量，A组明显低于B组和对照组（P〈0．01），血浆NO含量亦明显下降（P〈0．05）。A组血浆ADM、ET、AngⅡ略呈正相关。结论 长期高血糖损害血管内皮细胞，使ADM、NO减少，而ET、AngⅡ升高。糖尿病合并糖尿病足时各种血管活性物质都明显减少，在糖尿病足形成发展中发挥不良作用。     

丰富环境对卒中后认知障碍小鼠认知功能及突触可塑性的影响

目的探讨丰富环境干预对卒中后认知障碍小鼠认知功能的影响及相关作用机制。 方法采用光栓法制作小鼠卒中后认知障碍模型,采用随机数字表法将实验小鼠分为假手术标准环境组（Sham+SE组）、卒中后认知障碍标准环境组（PSCI+SE组）和卒中后认知障碍丰富环境组（PSCI+EE组）。各组小鼠在相应环境下分别饲养28d后,采用水迷宫检测小鼠认知功能,采用电生理方法检测小鼠海马长时程增强,采用Western blot法检测海马突触素表达情况,采用电镜定量检测海马CA1区神经元突触超微结构变化。 结果与Sham+SE组小鼠比较,PSCI+SE组小鼠水迷宫成绩显著下降（P<0.05）,卒中对侧海马长时程增强诱导障碍（P<0.05）,海马CA1区突触素表达显著降低（P<0.05）,海马CA1区神经元突触数量、突触间隙宽度、突触后膜致密物厚度及突触界面曲率均发生明显不良改变（P<0.05）;PSCI+EE组小鼠水迷宫成绩、海马长时程增强、CA1区突触素表达、CA1区神经元突触结构均较PSCI+SE组有显著改善（P<0.05）,但与Sham+SE组间差异仍具有统计学意义（P<0.05）。 结论丰富环境干预可改善卒中后小鼠认知功能,其作用机制与提高卒中对侧海马突触可塑性有关。     

基于网络药理学分析黄芩素降低血压和调控炎症的作用机制

目的：探讨黄芩素对AngⅡ诱导高血压小鼠血压及血清中炎症相关因子表达的影响,并基于网络药理学进一步分析黄芩素治疗高血压的潜在作用机制。方法：利用AngⅡ皮下埋泵灌注的方式建立高血压小鼠模型,将24只C57BL/6小鼠随机分为对照组、AngⅡ组、AngⅡ+黄芩素组。黄芩素每天灌胃剂量为5 mg/（kg·d）,对照组和AngⅡ组给予等体积生理盐水灌胃,连续干预4周。利用鼠尾无创血压仪每周监测各组小鼠血压;利用Bio-plex试剂盒检测各组小鼠血清中炎症相关因子的表达。同时,运用ETCM、TCMSP数据库筛选黄芩素的作用靶点基因;再运用Disgenet、OMIM等数据库筛选高血压疾病相关的靶点基因,取两者交集,并利用KEGG进行通路富集分析。结果：AngⅡ组第1～4周的收缩压、舒张压及平均动脉压均显著高于对照组（P<0.05）;黄芩素干预2周后,能显著抑制AngⅡ诱导高血压小鼠收缩压、舒张压及平均动脉压的升高（P<0.05）;与对照组比较,AngⅡ组小鼠血清中的白介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白介素-1α (IL-1...