一氧化碳对TLR4/NF-κB信号通路影响的研究进展

在炎性反应中Toll样受体4(TLR4)触发细胞内信号传导通路,从而激活核转录因子-κB(NF-κB),调控大量炎性因子释放。一氧化碳(CO)是一种新型递质,在多种炎性反应动物模型中,低浓度CO具有抗炎作用,而其发挥抗炎作用的机制十分复杂。本文就CO对TLR4/NF-κB信号通路影响的研究进展做一综述,阐述CO的抗炎作用。     

超短波调控NF-κB/TLR4信号通路抑制大鼠急性肺损伤炎症反应的研究

目的:观察超短波对大鼠急性肺损伤炎症反应的作用及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、Toll样受体4(Tolllike receptors 4,TLR4)表达的影响。方法:将24只雄性SD大鼠随机分成3组:对照组,急性肺损伤组,超短波组,每组8只。气管内滴注脂多糖建立急性肺损伤模型。造模后的即刻、4h、8h分别给予干预组大鼠超短波治疗,电极板胸背对置,间距11cm,每次干预15min。采用HE染色观察肺组织病理学表现,肺损伤评分评估损伤程度,湿/干重比值(W/D)评估肺水肿,ELISA检测血清炎症因子白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)的水平,RTPCR及Western-blot分别检测NF-κB、TLR4 m RNA及蛋白表达水平。结果:与对照组比较,HE染色见急性肺损伤组大鼠肺组织结构受损,肺损伤评分及肺组织湿/干重比值(W/D)增高(P0.01);血清炎症因子IL-6、TNF-α的水平上升(P0.01);NF-κB、TLR4 m RNA表达及蛋白相对表达量明显升高(P0.01)。与急性肺损伤组比较,超短波组大鼠肺组织结构受损程度明显减轻,肺损伤评分降低(P0.01);肺组织湿/干重比值(W/D)下降,但尚不具备显著性意义(P0.05);血清炎症因子IL-6、TNF-α水平下降(P0.05,P0.01);NF-κB、TLR4 m RNA表达及蛋白相对表达量降低(P0.01,P0.01)。结论:超短波通过抑制NF-κB/TLR4信号通路,降低炎症因子IL-6、TNF-α的水平,抑制急性肺损伤炎症反应。     

TSNⅡA对大鼠IRI肾脏TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的探讨丹参酮ⅡA(TSNⅡA)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)肾脏Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响及对炎症因子水平的下调作用,并分析其对肾脏IRI保护作用机制。方法选取雄性Wistar大鼠建立大鼠肾IRI模型,采用随机数字表表法随机分为五组,每组12只,其中A组大鼠为假手术组;B组为IRI模型组;C组为ST2825干预组,注射ST2825(100 mg/kg);D组为Bay-7082干预组,注射Bay-7082(50μg/kg);E组为TSNⅡA干预组:实验前3 d开始TSNⅡA干预组股静脉注射丹参酮ⅡA注射液(5 mg/kg),每天1次。18 h后,取大鼠下腔静脉血液2 ml,检测血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)浓度,并处死大鼠,应用免疫组化法检测肾脏TLR4和NF-κB阳性表达率。结果 B、C、D和E组TLR4和NF-κB阳性率均高于A组,C、D和E组TLR4和NF-κB阳性率均低于B组,E组TLR4和NF-κB阳性率分别为(38.27±2.87)%和(40.76±4.20)%,均高于C和D组,差异均具有统计学意义(P0.05)。B、C、D和E组血清TNF-α、IL-1和IL-6水平均高于A组,C、D和E组血清TNF-α、IL-1和IL-6水平均低于B组,E组血清TNF-α、IL-1和IL-6水平分别为(76.02±4.28)pg/L、(86.41±6.32)ng/L和(80.28±5.60)ng/L,均高于C和D组,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论TSNⅡA能够下调大鼠肾脏TLR4和NF-κB水平,抑制TLR4/NF-κB信号通路,降低炎症因子水平,实现对肾脏IRI的改善与保护作用。     

miR-146 调控TLR4/NF-κB 通路减少卵泡颗粒细胞凋亡及干预卵巢早衰中的机制研究

目的 探究miR-146 通过调控Toll 样受体4（TLR4）/ 核因子-κB（NF-κB）减少卵泡颗粒细胞凋亡和干预卵巢早衰（premature ovarian failure,,POF ）的机制。方法 野生小鼠实验:60 只SPF 级C57BL/6 小鼠随机分为对照组（n=30）和POF 组（n=30）。POF 组建立卵巢早衰模型,造模后15 天qPCR 检测2 组小鼠卵巢组织中miRNA-146表达水平;基因敲除鼠实验:40 只C57BL/6 小鼠和20 只miR-146 敲除小鼠分为三组:对照组（n=20）、野生型POF组（n=20）和miR-146 敲除POF 组（n=20）,野生型POF 组和miR-146 敲除POF 组建立POF 模型,建模后15 天HE染色分析各组小鼠卵巢组织病理情况及原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和闭锁卵泡数,ELISA 检测各组小鼠卵巢组织炎症信号通路分子TLR,NF-κB, 肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白介素6（IL-6）的表达水平;Western blot 检测卵巢组织凋亡蛋白BCL2-Associated X 蛋白（Bax）,B 淋巴细胞瘤-2 基因（Bcl2）和TLR4 信号通路蛋白TLR4,NF-κB表达水平。结果 野生鼠实验表明与对照组相比,POF 组小鼠卵泡中miR-146 表达水平下调（0.51±0.14 vs 1.52±0.21）,差异具有统计学意义（t=7.338,P<0.01）;基因敲除鼠实验表明:与对照组相比,野生型POF 组和miR-146 敲除POF组原始卵泡（9.43±2.03,6.43±1.60 vs 16.82±2.11）、初级卵泡（6.15±1.11,5.01±1.10 vs 8.88±1.12）、次级卵泡（5.11±1.71,4.01±1.26 vs 7.11±1.34）均降低,闭锁卵泡（10.17±1.41,11.46±1.96 vs 7.18±1.64）升高,差异具有统计学意义（F=7.787, 8.214, 9.726, 7.811, 均P<0.01）。与对照组相比,野生鼠POF 组和miR-146 敲除POF 组小鼠卵巢组织TLR4（68.18±5.92pg/ml,91.11±16.34 pg/ml vs 24.81±2.81 pg/ml）,NF-κB（74.19±8.11 pg/ml,88.11±16.71pg/ml vs 68.18±5.92 pg/ml）,TNF-α（72.81±2.10 pg/ml,94.31±2.26 pg/ml vs 28.07±3.67 pg/ml）和IL-6（69.19±7.11,81.11±16.34 vs 19.43±10.81 pg/ml）分泌显著升高,差异均有统计学意义（F=6.281, 7.264, 8.724, 6.817, 均P <0.01）;与对照组相比,野生鼠POF 组和miR-146 敲除POF 组小鼠卵巢组织Bax 蛋白表达水平降低（1.18±0.19. 0.61±0.14 vs1.81±0.21）,Bcl2 蛋白表达升高（0.59±0.05, 0.91±0.05 vs 0.58±0.02）,TLR4（1.10±0.12, 0.41±0.04 vs 1.13±0.11）和NF-κB（0.81±0.02, 0.31±0.06 vs 0.87±0.27）降低,差异均有显著性统计学意义（F=7.235, 6.714, 7.612 ,7.737, 均P<0.01）。结论 miR-146 具有减少卵泡颗粒细胞凋亡的作用,其机制可能与TLR4/NF-κB 信号通路的调控和抑制炎症因子的释放相关。     

中风Ⅱ号对PC12细胞化学损伤模型TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响

目的:观察中风Ⅱ号口服液对PC12细胞化学损伤模型TLR4/My D88/NF-κB通路的影响。方法:制作PC12细胞化学性损伤模型,用中风Ⅱ号含药血清干预,并设空白对照组、模型组进行比较,MTT法测定细胞增殖,RT-PCR检测TLR4、My D88、TRIF、NF-κB m RNA表达,Western Blot检测TLR4、My D88、TRIF、NF-κB蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组PC12细胞增殖显著降低(P<0.01),TLR4、My D88、NF-κB的m RNA和蛋白表达显著升高(P<0.01或P<0.05);与模型组比较,中风Ⅱ号含药血清低剂量组、高剂量组PC12细胞增殖显著升高(P<0.01或P<0.05),TLR4、My D88、NF-κB的m RNA和蛋白表达显著降低(P<0.01或P<0.05);与低剂量组比较,高剂量组PC12细胞增殖显著升高(P<0.01或P<0.05),TLR4、My D88、NF-κB的m RNA和蛋白表达显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论:中风Ⅱ号可通过抑制TLR4/My D88/NF-κB通路,进而调控炎症级联反应,保护PC12细胞化学性损伤。     

基于TLR4/NF-κB通路探究益气活血清热解毒方对动脉粥样硬化模型大鼠的干预效果

目的研究基于Toll样受体4（TLR4）/核因子κB（NF-κB）通路探究益气活血清热解毒方对动脉粥样硬化模型大鼠的干预效果。 方法将60只大鼠随机分为正常组10只、其余50只大鼠建立动脉粥样硬化模型作为动脉粥样硬化组,喂养4周后每组随机抽样2只,取主动脉经HE染色光镜观察,以发现动脉粥样硬化斑块为建模成功,建模成功后将动脉粥样硬化组剩余48只大鼠分为模型组（9只）、辛伐他汀组（9只）、益气活血组（10只）、清热解毒组（10只）、益气活血清热解毒中药组（10只）5个亚组。建模成功后益气活血组、清热解毒组、益气活血清热解毒中药组分别给予药液9 ml/（kg·d）体重灌胃,辛伐他汀片组给予辛伐他汀药液5 ml/（kg·d）体重灌胃,正常组和模型组给予生理盐水9 ml/（kg·d）,以上各组均连续灌胃8周。对比分析各组的血脂指标甘油三脂（TG）、血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）、超敏C反应蛋白（Hs-CRP）、白介素-6（IL-6）水平及TLR4/NF-κB通路蛋白表达量。 结果与正常组相比,模型组、辛伐他汀组、益气活血组、清热解毒组、益气活血清热解毒中药组TG、TC、LDL-C、Hs-CRP、IL-6水平升高,HDL-C水平降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）;与模型组相比,辛伐他汀组、益气活血组、清热解毒组、益气活血清热解毒中药组TG、TC、LDL-C、Hs-CRP、IL-6水平降低,HDL-C水平升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）;与辛伐他汀组、益气活血组、清热解毒组相比,益气活血清热解毒中药组TG、TC、LDL-C、Hs-CRP、IL-6水平降低,HDL-C水平升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。与模型组相比,益气活血清热解毒中药组TLR4、NF-κB表达量降低（P=0.001）。 结论益气活血清热解毒方可起到调节动脉粥样硬化大鼠血脂、缓解炎症症状的作用,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路有关。     

基于TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路探讨黄连解毒汤对冠状动脉性心脏病小鼠心肌保护作用

目的 研究基于Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路探讨黄连解毒汤对冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)小鼠心肌保护作用。方法 50只6周的雄性SD小鼠中取10只作正常对照组,其余小鼠给予高脂饮食建立CHD模型。采用随机数字表法将40只模型小鼠分为模型组、黄连解毒汤低、中、高剂量组,每组各10只。黄连解毒汤低、中、高剂量组每日分别以10、20、40 g/kg剂量进行灌胃,每日1次,持续6周;正常组、模型组每日给予等量蒸馏水灌胃。干预后采用生化法检测各组总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)水平,酶联免疫吸附试验检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛、内皮素水平;采用苏木精-伊红染色法观察小鼠心肌细胞病理形态,蛋白质印迹法检测心肌组织中TLR4、NF-κB、NLRP3的表达。比较各组小鼠血脂、心肌组织中抗氧化相关指标和TLR4、NF-κB、NLRP3的表达。结果 模型组、黄连解毒汤低、中、高剂量组血脂水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);黄连解毒汤低剂量组与模型组血脂水平比较,差...     

雷公藤内酯醇对类风湿关节炎大鼠TLR4/NF-κB信号通路的调控作用研究

目的观察雷公藤内酯醇治疗类风湿关节炎(RA)大鼠的疗效,并通过Toll-样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路探讨其作用机制。方法将24只健康SD大鼠,随机分为空白对照组、RA模型组、阳性药双氯芬酸组、雷公藤内酯醇组,每组6只。采用热杀死结核分枝杆菌诱导RA模型组、阳性药双氯芬酸组、雷公藤内酯醇组大鼠制作RA模型;造模成功后,阳性药双氯芬酸组给予10mg/kg双氯芬酸灌胃,雷公藤内酯醇组大鼠给予6mg/kg雷公藤内酯醇灌胃,空白对照组和RA模型组大鼠给予等量0.9%氯化钠溶液灌胃。采用ELISA法测定大鼠血清中炎性细胞因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-4、IL-6]表达水平;评价关节炎指数及足体积。免疫组织化学法检测关节滑膜组织TLR4、NF-κB、p-NF-κB蛋白表达,q-PCR法检测滑膜组织TLR4mRNA的表达。结果与空白对照组比较,RA模型组血清中TNF-α、IL-4、IL-6表达水平显著升高(P0.05);与RA模型组比较,阳性药双氯芬酸组血清中TNF-α、IL-4、IL-6表达水平显著下降(P0.05),且雷公藤内酯醇组TNF-α、IL-4、IL-6表达水平呈极显著下降(P0.01)。与RA模型组比较,雷公藤内酯醇组在第8、12、16、20天时关节炎指数和足体积显著降低(P0.05),阳性药双氯芬酸组在第12、16、20天时关节炎指数和足体积显著降低(P0.05)。与空白对照组比较,RA模型组滑膜组织中TLR4、NF-κB、p-NF-κB蛋白表达量和TLR4mRNA表达量显著上调(P0.05);与RA模型组比较,阳性药双氯芬酸组滑膜组织中TLR4、NF-κB蛋白表达量和TLR4mRNA表达量显著下降(P0.05),雷公藤内酯醇组滑膜组织中TLR4、NF-κB、p-NF-κB蛋白表达量和TLR4mRNA表达量显著下调(P0.05)。结论雷公藤内酯醇可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路的信号因子表达,从而降低炎性因子的产生,减少炎性反应,起到治疗RA的作用。     

片仔癀通过抑制TLR4/MAPK信号通路减轻LPS诱导的BV2小胶质细胞神经炎症损伤研究

目的:研究片仔癀(PZH)对脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞神经炎症损伤的保护作用及机制。方法:将BV2小胶质细胞培养于含有10%胎牛血清和1%青霉素-链霉素的RPMI-1640完全培养基中,并置于5%CO2,37℃培养箱中常规培养。将BV2小胶质细胞以5×104个/mL的密度接种于96孔板,LPS(100 ng/mL)诱导BV2小胶质细胞炎症反应,同时分别用不同浓度PZH(0.05、0.10、0.15 mg/mL)干预12 h,加入MTT并于4 h后检测其490 nm处吸光度。将BV2小胶质细胞以5×104个/mL的浓密度接种于24孔板,LPS(100 ng/mL)诱导BV2小胶质细胞炎症反应,分别用不同浓度PZH(0.05、0.10和0.15 mg/mL)干预12 h,收集上清并使用ELISA法测定细胞上清中IL-6的水平。将BV2小胶质细胞以1.6×105个/mL的密度接种于6孔板,LPS(100 ng/mL)诱导BV2小胶质细胞炎症反应,同时分别用不同浓度PZH(0.05、0.10、0.15 mg/mL)干预12 h,使用TRIzol试剂提取总RNA,逆转录制备cDNA,然后采用RT-qPCR法检测BV2小胶质细胞中炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α转录水平。将BV2小胶质细胞以1.6×105个/mL的密度接种于6孔板,LPS(100 ng/mL)诱导BV2小胶质细胞炎症反应,同时分别用不同浓度PZH(0.05、0.10、0.15 mg/mL)干预12 h,加入RIPA蛋白裂解液提取蛋白质,然后采用Western blot法检测BV2小胶质细胞中TLR4、ERK1/2、p-ERK1/2、p38、p-p38、JNK、p-JNK、COX-2和iNOS蛋白表达水平。结果:①MTT实验结果显示,与正常对照组比较,不同浓度PZH和LPS各自单独干预或者两者共同干预对BV2小胶质细胞活力均无明显影响(P>0.05)。②ELISA结果显示,与正常对照组比较,模型组IL-6分泌水平明显上升(P<0.001);与模型组比较,不同浓度PZH可显著降低IL-6分泌水平(P<0.05,P<0.05,P<0.01)。③RT-qPCR结果显示,与正常对照组比较,模型组IL-1β(P<0.001)、IL-6(P<0.001)和TNF-α(P<0.01)转录水平明显上升;与模型组比较,不同浓度PZH可明显降低IL-1β(P<0.05,P<0.01,P<0.001)、IL-6(P>0.05,P<0.01,P<0.001)和TNF-α(P<0.01,P<0.01,P<0.001)转录水平。④Western blot结果显示,不同浓度PZH能显著抑制LPS诱导的TLR4/MAPK信号通路的激活,减少TLR4(P>0.05,P<0.05,P<0.05)、p-ERK1/2(P>0.05,P<0.05,P<0.01)、p-p38(P<0.05,P<0.01,P<0.01)、COX-2(P<0.01,P<0.01,P<0.001)和iNOS(P<0.01,P<0.01,P<0.01)蛋白表达水平,但对p-JNK蛋白表达无明显影响(P>0.05)。结论:片仔癀可明显改善LPS诱导的神经炎症损伤,其作用可能与抑制TLR4/MAPK信号通路激活相关。     

艾拉莫德通过TLR4/NF-κB通路抑制骨关节炎软骨细胞模型凋亡及炎症反应

目的 研究艾拉莫德对骨关节炎(OA)软骨细胞模型凋亡及炎症反应的调控作用及机制。方法 培养软骨细胞株ATDC5,采用10 ng/mL白细胞介素(IL)-1β刺激的方法建立OA软骨细胞模型,给予不同浓度(0.6、1.2、1.8 mg/L)艾拉莫德处理,转染pcDNA质粒或pcDNA-Toll样受体4(TLR4)质粒。检测细胞增殖活力(以A₄₉₀表示)、凋亡率,裂解型caspase-3(Cleaved caspase-3)、TLR4、核因子-κB(NF-κB)p-p65表达水平,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-8水平。结果 模型组A₄₉₀低于对照组,凋亡率、Cleaved caspase-3、TLR4、NF-κB p-p65、TNF-α、IL-6、IL-8水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不同浓度艾拉莫德组A₄₉₀高于模型组,凋亡率、Cleaved caspase-3、TLR4、NF-κB p-p65、TNF-α、IL-6、IL-8水平均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05...     

基于TLR4/NF-κB通路探讨藏红花素对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用CSCD

目的:基于Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路研究藏红花素对局灶性脑缺血再灌注损伤(FCIR)大鼠的神经元保护作用,探讨藏红花素防治FCIR损伤可能的作用机制。方法:将128只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、藏红花素组、藏红花素+脂多糖组,每组32只。造模前7 d开始,藏红花素组通过腹腔注射藏红花素溶液;藏红花素+脂多糖组通过腹腔注射藏红花素溶液、脂多糖溶液;假手术组和模型组通过腹腔注射生理盐水。4组注射剂量均为5 mL/(kg·d),1次/d,连续干预7 d。采用线栓法复制FCIR大鼠模型。再灌注24 h后,采用改良神经功能缺损评分(mNSS)评价大鼠神经功能缺损状况;采用氯化三苯四氮唑(TTC)染色法、干湿重法分别计算脑梗死率和脑组织含水量;采用苏木精-伊红(HE)染色法、TUNEL染色法观察皮质神经元病理学改变和凋亡状况;采用ELISA法检测脑组织TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症因子水平;采用Western blot法检测TLR4、核因子-κB p65(NF-κB p65)、p-NF-κB p65、IκBα、p-IκBα、Cleved Caspase-3、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果:(1)神经功能、脑梗死率及脑含水量:与假手术组比较,模型组大鼠mNSS评分、脑梗死率、脑含水量明显升高(P<0.05);与模型组比较,藏红花素组和藏红花素+脂多糖组mNSS评分、脑梗死率、脑含水量均明显降低(P<0.05);与藏红花素组比较,藏红花素+脂多糖组mNSS评分、脑梗死率、脑含水量均明显升高(P<0.05)。(2)皮质神经元病理学改变及凋亡状况:假手术组皮质神经元形态正常、结构完整;模型组皮质神经元可见排列紊乱、数量减少、空泡变性、胞浆固缩深染、核膜边界不清、炎细胞浸润等病理学改变;藏红花素组皮质神经元病理学改变明显改善。与假手术组比较,模型组皮质神经元凋亡指数明显升高(P<0.05);与模型组比较,藏红花素组和藏红花素+脂多糖组凋亡指数明显降低(P<0.05);与藏红花素组比较,藏红花素+脂多糖组凋亡指数明显升高(P<0.05)。(3)炎症因子水平:与假手术组比较,模型组TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,藏红花素组和藏红花素+脂多糖组TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显降低(P<0.05);与藏红花素组比较,藏红花素+脂多糖组TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显升高(P<0.05)。(4)蛋白表达:与假手术组比较,模型组TLR4、Cleved Caspase-3相对表达量及p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκBα/IκBα、Bax/Bcl-2表达比值均明显升高(P<0.05);与模型组比较,藏红花素组和藏红花素+脂多糖组TLR4、Cleved Caspase-3相对表达量及p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκBα/IκBα、Bax/Bcl-2表达比值均明显降低(P<0.05);与藏红花素组比较,藏红花素+脂多糖组TLR4、p-NF-κB、p-IκBα相对表达量及p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκBα/IκBα表达比值明显升高(P<0.05)。结论:藏红花素能够抑制FCIR大鼠炎症反应和皮质神经元凋亡,减轻皮质神经元损伤,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路活化有关。     

当归多糖减轻癫痫幼鼠海马组织炎症及凋亡的作用及机制

目的:研究当归多糖(APS)减轻癫痫幼鼠海马组织炎症及凋亡的作用及机制。方法:3周龄的雄性SD幼鼠随机分为对照组、模型组、模型+APS组、模型+APS+脂多糖(LPS)组。采用戊四氮点燃的方法建立癫痫模型,给予APS或APS+LPS腹腔注射干预;采用脑电图检测脑电频率及波幅,采用TUNEL染色检测海马组织细胞凋亡率,采用Elisa法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的含量,采用Western Blot检测cleaved caspase-3、bax、bcl-2、TLR4、NF-κB的表达水平。结果:与对照组比较,模型组脑电频率及海马组织中bcl-2的表达水平显著降低,脑电波幅、血清中TNF-α、IL-1β、HMGB-1的含量、海马组织的细胞凋亡率及TNF-α、IL-1β、HMGB-1的含量、cleaved caspase-3、bax、TLR4、NF-κB的表达水平显著增加;与模型组比较,模型+APS组脑电频率及海马组织中bcl-2的表达水平显著增加,脑电波幅、血清中TNF-α、IL-1β、HMGB-1的含量、海马组织的细胞凋亡率及TNF-α、IL-1β、HMGB-1的含量、cleaved caspase-3、bax、TLR4、NF-κB的表达水平显著降低;与模型+APS组比较,模型+APS+LPS组比较,脑电频率及海马组织中bcl-2的表达水平显著降低,脑电波幅、血清中TNF-α、IL-1β、HMGB-1含量、海马组织细胞凋亡率及TNF-α、IL-1β、HMGB-1含量、cleaved caspase-3、bax、TLR4、NF-κB的表达水平显著增加。结论:APS能减轻癫痫幼鼠海马组织的炎症及凋亡,作用可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。     

基于TLR4/NF⁃κB信号通路探讨益生菌对肝内胆汁淤积大鼠的保护作用

目的 探讨益生菌对肝内胆汁淤积大鼠的保护作用及其机制.方法 将40只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、模型+益生菌组和正常+益生菌组,模型+益生菌和正常+益生菌组给予益生菌5×107 CFU/(kg·d)灌胃14 d,正常组及模型组给予生理盐水处理,于实验第12天给药4 h后,模型组和模型+益生菌组75 mg/kgα...     

右美托咪啶对颅脑损伤患者术中TLR4-NF-κB信号通路水平的影响

目的 探讨右美托咪啶对颅脑损伤患者术中Toll样受体4(TLR4)-核因子(NF)-κB信号通路水平的影响。方法 前瞻性将2021年6月至2022年12月太原钢铁(集团)有限公司总医院收治的82例颅脑损伤患者纳入研究,按照随机数字表法分为实验组(n=41)与对照组(n=41)。两组患者于麻醉诱导前给予盐酸戊乙奎醚,以舒芬太尼、丙泊酚、顺阿曲库铵进行麻醉诱导,以瑞芬太尼、七氟烷、丙泊酚维持麻醉。实验组于麻醉诱导前10 min给予右美托咪啶,对照组以等量0.9%氯化钠溶液代替右美托咪啶。记录两组不同麻醉药物使用情况;术前(T₀)、术毕(T₁)、术后24 h(T₂)时,检测比较两组肌酸激酶BB(CK-BB)、颅内压水平、炎症因子[白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平及TLR4-NF-κB信号通路表达情况。结果 两组不同麻醉药物剂量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。T₀、T₁时,两组CK-BB、颅内压水平组间比较,差异均无统计学意义(P...     

2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者外周血TLR4、 NF-κB mRNA水平及其与胰岛素抵抗的关系

目的 探讨2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者外周血Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)mRNA水平,以及二者与胰岛素抵抗(IR)的相关性.方法 选择2020年8月至2021年8月该院收治的T2DM患者187例作为研究对象,根据是否合并NAFLD分为合并NAFLD组99例,...     

HIF-1α通过TLR4/NF-κB信号通路对 心肌缺血-再灌注大鼠心肌损伤的保护机制分析

目的分析缺氧诱导因子1α(HIF-1α)通过TLR4/NF-κB信号通路保护心肌缺血-再灌注(MIRI)大鼠心肌损伤的作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、MIRI组和HIF-MIRI组各10只,HIF-MIRI组于造模前24 h腹腔注射二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG,20μg/g),MIRI组和HIF-MIRI组大鼠采用手术结扎法制备MIRI模型,对照组只打开心包,不结扎。造模成功后,HE染色检测各组大鼠心肌组织损伤;试剂盒检测血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)水平; ELISA法测定心肌组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β和IL-6水平;实时荧光定量(RT)-PCR测定HIF-1αmRNA的表达; Western Blot检测HIF-1α、Toll-样受体4(TLR4)、核转录因子(NF-κB)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3的表达。结果与对照组相比,MIRI组和HIF-MIRI组大鼠血清CK-MB和LDH、炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著升高(P 0. 01),心肌组织HIF-1αmRNA的表达显著上调(P 0. 01),HIF-1α、TLR4、NF-κB和Caspase-3蛋白的表达显著上调(P 0. 01);与MIRI组相比,HIF-MIRI组大鼠血清CK-MB和LDH水平、炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6显著下降(P 0. 01),心肌组织HIF-1αmRNA和蛋白的表达显著上调(P 0. 01),TLR4、NF-κB和Caspase-3蛋白的表达显著下调(P 0. 01),HE染色显示心肌组织的病理变化明显减轻。结论 HIF-1α可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路抑制炎症因子的释放,降低机体炎症因子水平,改善MIRI心肌损伤。     

高三尖杉酯碱对K562细胞NF-κB和BCL-2蛋白表达的影响

本研究旨在探讨高三尖杉酯碱（HHT）对K562细胞增殖、凋亡及BCL-2和NF-κB蛋白表达的影响。不同浓度HHT作用K562细胞后用MTT法、流式细胞仪、Western blot等方法分别检测细胞增殖、凋亡、BCL-2及NF-κB蛋白表达水平。结果表明,HHT作用48h,浓度依赖性抑制K562细胞增殖,Ic50为43．89rig／ml。HHT10ng／ml作用48h,K562细胞凋亡率明显增高;细胞周期阻滞于G0／G1期;BCL-2和NF-κB蛋白表达水平明显低于对照组（P〈0．05）。结论：HHT对K562细胞有显著的增殖抑制、细胞周期阻滞和凋亡诱导作用,抑制NF-κB和BCL-2表达可能是其抗CML的机制之一。