下调miR-320a表达对缺氧/复氧诱导的心肌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨下调miR-320a表达对心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤模型的影响,并阐明其相关作用机制。方法：采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测急性心肌梗死(AMI)患者血清中和H/R诱导的心肌H9C2细胞中miR-320a表达水平。将miR-320a inhibitor、inhibitor NC、小干扰Janus激酶(si-JAK2)和si-NC质粒分别转染至H9C2细胞中,同时设空白对照组,确定转染成功后进行H/R处理。H9C2细胞分为对照组、H/R组、H/R+inhibitor NC组、H/R+miR-320a inhibitor组、H/R+miR-320a inhibitor+si-NC组和H/R+miR-320a inhibitor+si-JAK2组。双荧光素酶报告基因检测miR-320a与Janus激酶2 (JAK2)的靶向关系,CCK-8法检测各组细胞增殖率,生化法检测各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平和细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,RT-qPCR法检测各组细胞中miR-320a和JAK2 m...     

miR-18a对结直肠癌SW116细胞辐射敏感性的影响

目的:探讨miR-18a与结直肠癌SW116细胞辐射敏感性之间的关系,阐明miR-18a影响细胞凋亡和自噬的可能机制。方法:人结直肠癌SW116细胞分为miR-18a NC组、miR-18a mimic组、miR-18a NC+4Gy组和miR-18a mimic+4Gy组。qRT-PCR法检测照射前后SW116细胞中miR-18a的表达;集落形成实验观察miR-18a对SW116细胞辐射敏感性的影响;GFPLC3形态学方法检测SW116细胞自噬率;流式细胞术检测SW116细胞凋亡率;采用生物信息学方法预测miR-18a的靶基因,以荧光素酶报告基因验证miR-18a与靶基因3'UTR结合;Western blotting法检测SW116细胞中共济失调-毛细血管扩张突变基因(ATM)蛋白表达。结果:与照射前比较,照射后SW116细胞中miR-18a表达水平明显降低(P<0.05)。集落形成实验,与miR-18a NC组比较,miR-18a mimic组SW116细胞辐射敏感性增强(P<0.05),细胞凋亡率和自噬率明显增加(P<0.05)。与miR-18a NC+4Gy组比较,miR-18a mimic+4Gy组SW116细胞中ATM蛋白表达减少。结论:miR-18a的靶基因为ATM;miR-18a mimic可促进辐射诱导的细胞凋亡和自噬,且能增加结直肠癌SW116细胞辐射敏感性。     

miR-296抑制自噬促进角膜新生血管生成

目的 本研究探讨miR-296在角膜新生血管生成中的作用以及其对自噬蛋白LC3B-Ⅰ/Ⅱ、p62的调控作用。方法 利用血管内皮生长因子诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)建立体外角膜新生血管模型。实验分为6组(Control组、模型组、VEGF+miR-296 mimic NC组、VEGF+miR-296 mimic组、VEGF+miR-296 inhibitor NC组、VEGF+miR-296 inhibitor组)。采用RT-qPCR检测miR-296在体外新生血管中的表达;转染过表达或者低表达miR-296,采用CCK-8、划痕实验、成管实验探究miR-296在体外角膜新生血管生成中的作用;采用KEGG和GO分析预测miR-296参与的通路及其靶基因的作用;采用Western blot检测miR-296对自噬蛋白LC3B-Ⅰ/Ⅱ、p62表达的影响。结果 RT-qPCR结果显示,与Control组相比,模型组中miR-296表达升高[(2.84±0.23)比(1.32±0.04),t=6.42,P<0.01];与VEGF+miR-296 mimic NC组相比,VEGF+m...     

miR-133a调控RUNX2/BMP2信号通路参与激素性股骨头坏死的机制

目的 探讨微RNA (miR)-133a调控生长相关转录因子2 (RUNX2)/骨形态蛋白2 (BMP2)信号通路参与激素性股骨头坏死（SONFH）的机制。方法 收集本院接受髋关节置换SONFH患者（SONFH组）骨髓及股骨颈骨折不愈合患者（对照组）骨髓，提取骨髓间充质干细胞（BMSCs），经表型鉴定、成骨、成脂分化鉴定后检测BMSCs miR-133a、RUNX2 mRNA和蛋白表达水平，双荧光素酶鉴定miR-133a与RUNX2的靶向关系。实验分组包括对照组、SONFH组、抑制剂对照组（inhibitor con组）、miR-133a抑制剂组（miR-133a inhibitor组）、miR-133a inhibitor+si-RUNX2组。实时定量PCR (RT-qPCR)检测细胞中miR-133a、RUNX2 mRNA水平；Western blotting检测BMSCs中RUNX2、BMP2、骨钙素（OCN）、Ⅰ型胶原蛋白（COL-Ⅰ）蛋白水平；CCK-8检测细胞增殖情况；茜素红染色鉴定细胞矿化能力。结果 BMSCs细胞表型鉴定结果显示，细胞表面CD71、CD44表达，CD34...     

miR-186下调KIF3C抑制PI3K/AKT信号通路抗肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 ：探究驱动蛋白家族成员3C(kinesin family member 3C,KIF3C)和微小RNA(mircoRNA,miR)-186对人肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其调控机制。方法 ：体外培养人肺癌A549细胞系,然后转染miR-186mimics、miR-186 inhibitor、siRNA(si)-KIF3C、miR-186 inhibitor+si-KIF3C及mimic NC、inhibitor NC和si-NC至A549细胞,分别设为miR-186 mimic组、miR-186 inhibitor组、si-KIF3C组、miR-186 inhibitor+si-KIF3C组及NC组（mimic NC组、inhibitor NC组和si-NC组）,非转染的细胞设为Con组。用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)测定A549细胞中miR-186及KIF3C基因表达水平;蛋白免疫印迹（western blotting,WB）法测定KIF3C和磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（phosphatidylin...     

miR-125a-5p通过黏着斑通路对铝染毒GC2-spd细胞凋亡的影响

目的 探讨miR-125a-5p在铝染毒小鼠精母细胞系(GC2-spd)模型中对黏着斑信号通路及GC2-spd细胞凋亡的影响。方法 建立铝染毒GC2-spd细胞模型，分为对照组(CG),铝染毒组(ALG),铝染毒组+miR-125a-5p inhibitor阴性对照组(ALG+inhibitor NC)及铝染毒组+miR-125a-5p inhibitor组(ALG+inhibitor);利用RT-qPCR检测ALG与CG细胞中miR-125a-5p的表达情况；利用Western blot检测CG组、ALG组、ALG+inhibitor NC组及ALG+inhibitor组Itga7、Pak4、Akt1、Bax及Caspase-9的表达情况；利用CCK8实验及流式细胞术实验检测各组GC2-spd细胞的活性和凋亡率。结果 RT-qPCR结果显示，与对照组比较，ALG组细胞中miR-125a-5p的表达显著升高；Western blot结果显示，抑制miR-125a-5p的表达后，可显著升高铝染毒GC2-spd细胞中Itga7、Pak4和Akt1的表达，降低Bax及Caspase-9的表达...     

MicroRNA-124对喉鳞状细胞癌细胞自噬、侵袭和迁移的影响

目的探讨microRNA-124(miR-124)在人喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中的表达及其对LSCC细胞自噬、侵袭和迁移的影响。方法选取2016年1月至2018年9月新乡医学院第一附属医院手术切除的LSCC组织及癌旁组织(距离肿瘤边缘1～2 cm)标本各12例,采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LSCC组织和癌旁组织中miR-124表达;体外培养人Hep-2细胞,将其分为miR-124类似物(miR-124 mimics)组、miR-124抑制剂(miR-124inhibitor)组、类似物阴性对照(mimics NC)组、抑制剂阴性对照(inhibitor NC)组、mimics+西罗莫司组和inhibitor+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,进行细胞转染;采用qRT-PCR检测miR-124 mimics组、miR-124 inhibitor组、mimics NC组、inhibitor NC组细胞中miR-124的表达水平,Western blot法检测LSCC组织、癌旁组织和mimics NC组、miR-124 mimics组、inhibitor NC组、miR-124 inhibitor组细胞中自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ的表达,Transwell小室法检测miR-124 mimics组、miR-124 inhibitor组、mimics NC组、inhibitor NC组、mimics+西罗莫司组和inhibitor+3-MA组细胞的侵袭能力,细胞划痕实验检测miR-124 mimics组、miR-124 inhibitor组、mimics NC组、inhibitor NC组、mimics+西罗莫司组和inhibitor+3-MA组细胞的迁移能力。结果 LSCC组织中miR-124相对表达量显著低于癌旁组织(P <0. 05)。LSCC组织中LC3B-Ⅱ蛋白表达显著高于癌旁组织(P <0. 05)。miR-124 mimics组细胞中miR-124相对表达量显著高于mimics NC组(P <0. 05),miR-124 inhibitor组细胞中miR-124相对表达量显著低于inhibitor NC组(P <0. 05)。miR-124 mimics组细胞LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量显著低于mimics NC组(P <0. 05),miR-124 inhibitor组细胞LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量显著高于inhibitor NC组(P <0. 05)。miR-124 mimics组侵袭细胞数显著少于mimics NC组和mimics+西罗莫司组(P <0. 05),miR-124 inhibitor组侵袭细胞数显著多于inhibitor NC组和inhibitor+3-MA组(P <0. 05)。划痕培养72 h后,inhibitor NC组和inhibitor+3-MA组细胞的划痕愈合率低于miR-124 inhibitor组(P <0. 05);培养96 h后,mimics NC组和mimics+西罗莫司组细胞的划痕愈合率高于miR-124 mimics组(P <0. 05)。结论人LSCC组织中miR-124表达显著下调,人LSCC组织和miR-124过表达细胞中自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ表达显著上调,miR-124可能通过抑制自噬而抑制LSCC细胞的侵袭和迁移能力。     

miR-150-5p与NCAPG的靶向关系及其对肝细胞肝癌Huh7细胞的抑制作用

目的：探究miR-150-5p与非SMC凝聚体Ⅰ复合物亚基G (NCAPG)的靶向关系及其对肝细胞肝癌(HCC)细胞生物学功能的影响,为HCC的临床诊断和治疗提供潜在靶点。方法：通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-150-5p与NCAPG的靶向关系。将HCC Huh7细胞根据转染质粒不同分为模拟物阴性对照(mimic NC)组、miR-150-5p模拟物(miR-150-5p mimic)组、miR-150-5p模拟物+过表达阴性对照(miR-150-5pmimic+ovNC)组和miR-150-5p模拟物+过表达NCAPG(miR-150-5p mimic+ovNCAPG)组。实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组细胞中NCAPG mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中NCAPG蛋白表达水平,5-乙炔基-2’-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)实验检测各组细胞EdU阳性率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Transwell实验检测各组细胞中迁移和侵袭细胞数。将裸鼠分为agomiR-NC组、agomiR-150-5p组、agomiR-150-5p+过表达阴性...     

长非编码RNA NEAT1通过miR-141-3p/EGFR参与瘢痕疙瘩形成的调控机制

目的 探讨长非编码RNA NEAT1在瘢痕疙瘩中表达情况及参与瘢痕疙瘩形成的调控机制。方法 收集27例瘢痕疙瘩组织作为观察组,27例瘢痕疙瘩旁的正常皮肤组织作为对照组,采用实时荧光定量(RT-qPCR)检测其NEAT1、miR-141-3p的表达水平。取对数生长期的瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF)或293T细胞,随机分为空白对照组(Black组)、阴性对照组(NC组)、si-NEAT1组、miR-141-3p mimic组、si-NEAT1+OE-EGFR组、miR-141-3p mimic+OE-EGFR组。si-NEAT1组、miR-141-3p mimic组、si-NEAT1+OE-EGFR组、miR-141-3p mimic+OE-EGFR组细胞应用脂质体转染法分别进行si-NEAT1、miR-141-3p mimic、si-NEAT1+OE-EGFR、miR-141-3p mimic+OE-EGFR、阴性对照质粒转染,Black组细胞不作处理。RT-qPCR检测各组细胞中NEAT1和miR-141-3p的相对表达量。CCK-8法检测细胞增殖。使用生物信息学分析预测NEAT1与mi...     

MiR-92a-3p靶向KLF4促进肝细胞癌恶性进程

目的:探究微小RNA-92a-3p(miR-92a-3p)对肝细胞癌(HCC)的影响及其分子机制。方法:qRT-PCR检测人肝细胞癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402、HepG2、Hep3B和人正常肝细胞系HL-7702中miR-92a-3p和Krüppel样因子4(KLF4)的表达。将SMMC-7721、Bel-7402细胞分组为Inhibitor NC组、miR-92a-3p Inhibitor组、mimic NC组、miR-92a-3p mimic组、mimic NC+oe-NC组、mimic NC+oe-KLF4组、miR-92a-3p mimic+oe-NC组、miR-92a-3p mimic+oe-KLF4组。qRT-PCR检测细胞中miR-92a-3p和KLF4的mRNA表达水平。Western blot检测KLF4蛋白表达水平。MTT增殖实验检测细胞活力。划痕愈合、Transwell侵袭实验分别检测细胞迁移能力和侵袭能力。通过TargetScan分析miR-92a-3p与KLF4的靶向关系,并通过双荧光素酶实验验证。结果:相比于正常细胞,miR-92a-3p在H...     

基于lncRNA DGCR5介导miR-1180/SFRP1/Wnt通路对结直肠癌细胞生长转移的影响

目的 分析长链编码RNA (lncRNA) DiGeorge综合征临界区基因5 (DGCR5)对结直肠癌细胞生长转移的影响,并基于miR-1180/分泌型卷曲相关蛋白1 (SFRP1)/Wnt通路分析其中的机制。方法 选取人结直肠癌细胞系SW480进行培养。将SW480细胞分为对照组（C组,正常培养SW480细胞）、DGCR5 NC组（SW480细胞+转染DGCR5 NC载体）、DGCR5 mimic组（SW480细胞+转染DGCR5 mimic载体）以及DGCR5 inhibitor组（SW480细胞+转染DGCR5inhibitor载体）。转染完成后采用qPCR检测各组细胞中DGCR5的表达,验证细胞是否转染成功;分别采用CCK8法、克隆形成实验、平板划痕实验以及Transwell实验检测细胞活力、增值、迁移以及侵袭情况。荧光素酶报告测定lncRNA DGCR5与miR-1180的靶向关系;qPCR检测转染后各组细胞miR-1180/SFRP1的表达;WB检测各组细胞SFRP1、Wnt和β-catenin蛋白表达水平。结果 与DGCR5 NC组比较,DGCR5 inhibitor组...     

miR-181靶向TIMP3调控胆囊癌细胞迁移及侵袭的实验研究

目的研究miR-181靶向金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP3)调控胆囊癌细胞迁移及侵袭的作用。方法培养胆囊癌GBC-SD细胞,转染miR-181 mimic、阴性对照(NC)mimic、TIMP3 siRNA、NC siRNA、表达TIMP3的重组质粒、空白质粒,荧光定量PCR检测miR-181的表达量,Western blot检测TIMP3的表达量,Transwell检测细胞迁移和侵袭活力,生物信息学分析及荧光素酶报告基因实验验证miR-181靶向TIMP3;皮下注射转染miR-181 mimic或NC mimic的GBC-SD细胞后建立荷瘤鼠模型,检测移植瘤质量及miR-181、TIMP3表达量。结果细胞实验显示:转染miR-181 mimic促进细胞迁移及侵袭、抑制细胞中TIMP3的表达及双荧光素酶报告基因的荧光素酶活力;转染TIMP3 siRNA促进细胞迁移及侵袭;转染表达TIMP3的重组质粒后,miR-181 mimic促进细胞迁移、侵袭的作用减弱。动物实验显示:转染miR-181 mimic使移植瘤的质量减轻、移植瘤中TIMP3的表达增加。结论 miR-181具有促进胆囊...     

miR0-34a通过调控SESN2表达促进耳蜗毛细胞凋亡的机制

目的 探讨miR-34a通过调控SESN2的表达促进耳蜗毛细胞（HEI-OC1）凋亡的机制。方法 双萤光素酶报告基因实验检测miR-34a与SESN2靶向相关性;分别构建对照组（NC组）、SESN2过表达组（SESN2组）、共转染SESN2过表达载体及miR-34a mimic组细胞（SESN2+miR 34a mimic组）。应用CCK-8、Annexin V-FITC/PI流式细胞术和ELISA实验分别检测各组HEI-OC1细胞增殖、凋亡及细胞内氧化应激因子表达的变化,WB检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax与caspase-3及AMPK信号通路中AMPK磷酸化及SIRT1蛋白表达的变化。结果 共转染miR-34a mimic与pGL3-PIK3CA-SESN2-WT后,细胞内萤光素酶活性受到显著抑制;与NC组相比,SESN2组细胞的增殖能力明显增加,而凋亡率显著降低,而SESN2+miR-34a mimic组细胞的增殖及凋亡均无明显变化,提示过表达miR-34a会削弱SESN2对HEI-OC1细胞的保护作用。同时,与NC组相比,SESN2组细胞中凋亡抑制蛋白Bcl-2与SIRT1、p-AMPK/AMPK蛋白相对表达量增加,抑制凋亡蛋白Bax、caspase-3表达,同时细胞内抗氧化应激因子SOD、CAT及GSH-Px表达量随SESN2增加而升高,MDA表达量减少,反之共转染miR-34a mimic能够逆转上述分子表达变化。结论 miR-34a可能通过靶向抑制SENS2表达,促进AMPK/SIRT1信号通路激活、加速细胞内氧化损伤发挥对HEI-OC1细胞凋亡的促进作用。     

miR-671-3p靶向调控CKAP4对人脑胶质瘤细胞增殖及迁移的影响

目的探讨miR-671-3p靶向调控细胞骨架相关蛋白4(CKAP4)对人脑胶质瘤细胞增殖及迁移的影响。 方法收集术后脑胶质瘤组织及配对癌旁正常组织标本,检测其miR-671-3p和CKAP4表达水平。将人脑胶质瘤U251细胞株分为miR-671-3p NC组、miR-671-3p mimic组和miR-671-3p inhibitor组,并转染相应质粒。采用实时荧光定量PCR测定miR-671-3p表达,CCK-8实验测定细胞增殖能力,Transwell实验测定细胞迁移能力。Western blotting测定CKAP4表达水平。 结果人脑胶质瘤组织中miR-671-3p、CKAP4表达水平高于癌旁正常组织(P＜0.05)。细胞增殖率、迁移率miR-671-3p mimic组高于miR-671-3p NC组,miR-671-3p inhibitor 组低于miR-671-3p NC组(P＜0.05)。miR-671-3p对CKAP4具有靶向调节作用。miR-671-3p mimic组CKAP4蛋白表达量低于miR-671-3p NC组,miR-671-3p mimic组低于miR-671-3p inhibitor组(P＜0.05)。 结论miR-671-3p可靶向调控CKAP4促进人脑胶质瘤细胞增殖及迁移能力。     

miR-148-3p抑制剂下调Akt2调控HUVECs细胞增殖及凋亡机制研究

目的 探究微RNA(miR)-148-3p对模拟角膜新生血管形成常见体外细胞模型人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的增殖及凋亡的影响。方法 实验分2个阶段,第1阶段,HUVECs分为：空白对照组(以HUVECs不作任何处理)、NC inhibitor组(转染NC inhibitor)、miR-148-3p inhibitor组(转染miR-148-3p inhibitor)。采用CCK-8法检测抑制miR-148-3p表达对HUVECs增殖能力的影响;TargetScan筛选miR-148-3p潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验进行验证;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Akt2表达水平变化;第2阶段,HUVECs分为：NC组(转染过表达质粒Akt2的阴性对照)、Akt2组(转染过表达Akt2质粒);NC inhibitor组、miR-148-3p inhibitor组、miR-148-3p inhibitor+Akt2组(共转染miR-148-3p inhibitor和过表达Akt2质粒),采用CCK-8法检测miR-148-3p inhibitor和Akt2对HUVECs...     

微核糖核酸-125a通过调控细胞凋亡和炎症反应延缓阿尔茨海默病进展的研究

目的 探究微核糖核酸-125a(mircoRNA-125a,简称miR-125a)在PC12阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)细胞模型中，对细胞凋亡、总神经突生长和炎症因子水平的影响。方法 采用Aβ1-42毒化神经生长因子诱导的PC12细胞株构建PC12 AD模型细胞，采用荧光定量聚合酶链式反应检测miR-125a相对表达量。将miR-125a模拟物(mimic)、对照mimic、miR-125a抑制剂(inhibitor)和对照inhibitor转染至PC12 AD模型细胞后，统计Hoechst 33342阳性细胞数和碘化丙啶阳性细胞数，计算细胞凋亡率；于显微镜下观察细胞形态，计算总神经突生长长度；采用ELISA法测定细胞上清液中炎症因子水平。结果 Aβ1-42组miR-125a相对表达量显著少于对照组(P<0.05)。miR-125a mimic组细胞凋亡率为(7.55±1.56)%,显著低于对照mimic组的(13.00±1.11)%(P<0.05);miR-125a inhibitor组细胞凋亡率为(19.34±2.41)%,显著高于对照...     

miR-30c-2过表达联合阿霉素对甲状腺乳头状癌细胞增殖及迁移能力的影响

目的 探究微小RNA-30c-2(microRNA-30c-2,miR-30c-2)联合阿霉素对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖和迁移能力的影响。方法 体外培养TPC-1细胞,将细胞分为空白对照组(未做任何处理的细胞,即Control组)、过表达对照组(瞬时转染NC mimic质粒,即NC mimic组)、过表达组(瞬时转染miR-30c-2过表达质粒,即miR-30c-2组),采用qRT-PCR技术检测细胞中miR-30c-2的表达水平;将TPC-1细胞分为4组,分别为空白对照组(未做任何处理的细胞,Control组)、阿霉素处理组(使用阿霉素混合液培养TPC-1细胞24 h、48 h)、过表达组(瞬时转染miR-30c-2过表达质粒,即miR-30c-2 mimic组)、共处理组(阿霉素混合液与转染miR-30c-2过表达质粒共同培养TPC-1细胞24 h、48 h),CCK-8试验及细胞划痕实验分别检测4组细胞的增殖和迁移能力。结果 经qRT-PCR检测,与NC mimic组相比,过表达组的miR-30c-2表达水平明显升高(P<0.001);CCK-8实验表明,阿霉素+m...     

miR-4295在鼻咽癌细胞增殖中的作用

目的探讨miR-4295在鼻咽癌细胞发生发展及增殖过程中的作用及相关的分子机制。方法通过脂质体转染miR-4295 mimic,inhibitor及其NC到鼻咽癌细胞株6-10B,CNE2。分别应用MTT实验、软琼脂集落形成实验检测miR-4295对鼻咽癌细胞增殖能力的影响;WB和QPCR方法检测miR-4295、细胞周期素D1(CyclinD1)、p21cip1、Rb、pRb在细胞中蛋白及mRNA的表达水平。通过Targetscan分析预测miR-4295与SOX9的3’UTR的结合情况,采用双荧光素酶报告实验检测miR-4295与SOX9的结合情况,同时采用WB检测细胞株中SOX9的表达。结果MTT、软琼脂集落形成实验均显示过表达miR-4295后鼻咽癌细胞增殖能力明显增强,细胞生长速率高于NC组,细胞集落形成个数多于NC组,差异均有统计学意义(P0.05);而miR-4295沉默后鼻咽癌细胞增殖能力明显降低,与NC-in组相比,差异有统计学意义(P0.05);WB及QPCR结果显示:过表达miR-4295后,细胞周期蛋白CyclinD1表达升高而细胞周期抑制因子p21cip1下调;通过Targetscan预测发现miR-4295靶向结合SOX9的3’UTR,荧光素酶活性检测结果发现miR-4295过表达后荧光素酶活性明显低于NC组及突变组,差异有统计学意义(P0.05)。结论上调miR-4295可通过抑制SOX9蛋白翻译从而促进鼻咽癌细胞增殖能力,并调节细胞周期相关蛋白,在鼻咽癌发生发展中扮演重要的角色。     

miR-603对宫颈癌SiHa细胞增殖和迁移的影响及其机制

目的 探讨miR-603抑制宫颈癌细胞增殖和迁移的机制。方法 采用基因编辑系统(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated nuclease 9, CRISPR/Cas9)分别敲除宫颈癌细胞SiHa中人乳头瘤病毒16(human papilloma virus 16, HPV16)E6、E7后采用real-time PCR检测miR-603的表达。将宫颈癌细胞SiHa分为4组：mimic NC组、mimic 603组、inhibitor NC组和inhibitor 603组,将mimic NC、mimic 603、inhibitor NC及inhibitor 603分别转染SiHa细胞,通过real-time PCR检测miR-603的表达水平,CCK-8法检测SiHa细胞增殖能力,Transwell小室法检测SiHa细胞迁移能力。双荧光素酶报告试验检测miR-603是否与IQ结构域GTP酶激活蛋白3(IQ motif-containing GTPase activating p...     

miR-373-3p通过靶向Rab22a调节结肠癌SW480细胞增殖和转移

目的探究miR-373-3p通过靶向Rab蛋白22a(Rab22a)对结肠癌SW480细胞增殖和转移的调节作用。方法 RT-PCR检测结肠癌组织和细胞中miR-373-3p的表达。荧光素酶报告检测miR-373-3p和Rab22a相互作用关系。将SW480细胞分为空白对照组(SW480组)、阴性对照组(mimic NC组)、miR-373-3p mimic组、pLV-Rab22a组、pLV-Rab22a+miR-373-3p组,各组分别转染miR-373-3p或Rab22a重组慢病毒,RT-PCR检测miR-373-3p和Rab22a转录水平,CCK-8法检测细胞增殖水平,划痕愈合法检测细胞迁移,Transwell法检测细胞侵袭,Western blot检测Rab22a、Ki67、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)蛋白表达。结果与正常结肠组织比较,结肠癌组织中miR-373-3p表达降低。与人正常结肠细胞NCM460比较,结肠癌细胞株miR-373-3p均降低。在荧光素酶报告实验中,与Rab22a WT+mimic NC比较,Rab22a...