冬凌草甲素诱导人胰腺癌SW1900细胞DNA损伤及对H2AX蛋白表达的影响

目的 研究冬凌草甲素(ORI)诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤对磷酸化组蛋白(H2AX)表达的影响.方法 彗星实验检测ORI诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤的程度.Western印迹检测不同浓度ORI作用胰腺癌SW1900细胞后H2AX蛋白的磷酸化.免疫荧光实验检测Phos-S1981 ATM和γ-H2AX焦点.结果 彗星实验结果表明不同浓度的ORI(20,40,80μmol/L)处理SW1900细胞48 h后,可发生DNA损伤,并且随浓度增加,DNA损伤加重.Western印迹检测不同浓度ORI作用胰腺癌SW1900细胞后,H2AX蛋白发生磷酸化,γ-H2AX随着浓度增加表达增大.免疫荧光实验发现Phos-S1981 ATM和γ-H2AX焦点随着浓度增加表达量增加.结论 ORI可以诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤;H2AX蛋白发生磷酸化,具体DNA损伤信号通路有待进一步研究.     

木犀草素对人胃癌HGC-27细胞迁移的影响及机制

目的 观察木犀草素对人胃癌细胞系HGC-27细胞迁移能力的影响,并探讨其作用机制.方法 用10、20、40 μmol/L木犀草素培养HGC -27细胞.用划痕实验、Transwell实验观察不同浓度木犀草素对同样条件培养下胃癌HGC-27细胞迁移能力的影响,并采用Westem blot方法检测金属基质蛋白酶-7(MMP-7)mRNA.结果 划痕实验中培养24h后,未经木犀草素处理的HGC-27细胞运动迁移基本完全覆盖了划痕区域,而经10、20、40 μmol/L 木犀草素处理的HGC-27细胞仅覆盖了96.2％、72.3％、55.6％的划痕区域.Transwell实验中经10、20、40 μmol/L木犀草素处理的HGC细胞穿膜数量占对照组细胞穿膜数量的百分比分别为97.6％、59.5％、20.0％.经10、20、40μmol/L木犀草素处理的HGC-27细胞内MMP-7蛋白的表达水平明显降低,并与木犀草素的浓度呈负相关.结论 木犀草素抑制了胃癌HGC-27细胞的迁移能力,其作用与抑制HGC-27细胞内的MMP-7蛋白表达水平有关.     

非小细胞肺癌ERCC1和Rad51表达与铂类药物化疗疗效的关系

用免疫组化SP法检测53例非小细胞肺癌(NSCLC)患者铂类药物化疗后的核苷酸切除修复交叉互补组1(ERCC1)和DNA损伤修复蛋白(Rad51)的表达情况,分析ERCC1和Rad51的表达与患者中位生存时间(MST)和中位无病生存时间(DFT)的关系.结果:ERCC1和Rad51的阳性表达率分别为42.8%、57.5%,其阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤组织学类型、分期及分化程度无关(P>0.05).单一ERCC1阴性或Rad51阴性的患者MST和DFT均明显长于ERCC1阳性或Rad51阳性的患者(P均<0.05).两种蛋白均阳性表达者的MST、DFT分别短于两蛋白阴性表达者(P均<0.05).认为ERCC1和Rad51的联合检测可以预测NSCLC患者术后铂类药物辅助化疗的疗效.     

苦楝素诱导小鼠肝细胞DNA损伤

目的:观察苦楝素对DNA损伤及损伤修复的影响。方法:体外采用苦楝素与小鼠胚胎肝细胞BNL CL2细胞株共培养,CCK-8检测肝细胞活力,吸光度检测肝细胞内ROS含量,Western blot检测γ-H2AX、Parp-1、poly ADP-ribose蛋白表达,观察不同浓度苦楝素以及苦楝素不同作用时间对DNA损伤及损伤修复的影响。结果:随着苦楝素浓度升高,肝细胞BNL.CL2细胞活力逐渐下降(P0.0001),ROS含量升高(P0.05),同时γ-H2AX蛋白质含量随着苦楝素作用时间的延长而升高(P0.0001)。苦楝素作用0.5～1.0 h Parp-1自身PAR化量达最高(P0.05);而苦楝素作用时间自1～24 h Parp-1的PAR逐渐减少(P0.05)。结论:苦楝素可通过增加细胞内ROS诱导DNA损伤,同时抑制Parp-1的活性从而抑制DNA损伤的修复。     

冬凌草甲素通过激活ATM蛋白诱导人肝癌HepG2细胞G_2/M细胞周期阻滞

目的研究冬凌草甲素诱导肝癌HepG2细胞G2/M细胞周期阻滞的机制。方法不同浓度的冬凌草甲素(16、32、64μmol/L)处理HepG2细胞48 h后,流式细胞仪检测冬凌草甲素诱导肝癌HepG2细胞的细胞周期。Western印迹检测不同浓度冬凌草甲素作用肝癌HepG2细胞后H2AX蛋白的磷酸化。免疫荧光实验检测Phos-S1981ATM和γ-H2AX焦点。结果彗星实验结果表明不同浓度的冬凌草甲素(16、32、64μmol/L)处理HepG2细胞48 h后,可发生G2/M细胞周期阻滞,并且随浓度增加细胞周期阻滞增加。Western印迹检测不同浓度冬凌草甲素作用肝癌HepG2细胞后,H2AX蛋白发生磷酸化,γ-H2AX随着浓度增加表达增大。免疫荧光实验发现Phos-S1981ATM和γ-H2AX焦点随着浓度增加表达量增加。结论冬凌草甲素可以诱导肝癌HepG2细胞G2/M细胞周期阻滞,H2AX蛋白发生磷酸化,诱导DNA损伤的发生。     

Abl相互作用蛋白1过表达对胃癌细胞系AGS体外凋亡及迁移的影响

目的 研究Abl相互作用蛋白1(ABI1)过表达对人胃癌细胞系AGS体外凋亡及迁移的影响,初步探讨ABI1在胃癌发生发展中可能的作用机制.方法 首先应用脂质体转染方法分别将基因重组表达载体鼠干细胞病毒(MSCV)-绿色荧光蛋白(GFP)-ABI1质粒和对照载体MSCV-GFP质粒导入胃癌细胞系AGS,用嘌呤霉素筛选获得稳定表达MSCV-GFP-ABI1和MSCV-GFP的细胞系;其后应用流式细胞仪及Transwell小室检测ABI1过表达对AGS细胞体外凋亡及迁移能力的影响.结果 流式细胞仪检测显示,AGS细胞凋亡率与ABI1过表达后AGS细胞凋亡率无明显变化,差异无统计学意义(P＞0.05);Transwell小室检测显示,AGS细胞迁移能力与ABI1过表达后AGS细胞迁移能力比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 ABI1过表达抑制胃癌细胞系AGS的体外迁移能力,提示影响胃癌细胞的迁移可能是ABI1在胃癌发生发展中发挥作用的重要途径之一.     

ROS在幽门螺杆菌对胃上皮细胞DNA损伤中的作用

目的:探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染过程中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的变化与DNA损伤之间的关系.方法:将H.pylori ACTC43504(Cag A+,Vac A+)感染正常胃黏膜系GES-1细胞,分别通过活细胞工作站观察细胞内ROS变化和多功能酶标仪定量检测细胞内ROS含量.采用凯基彗星实验法(单细胞凝胶电泳)检测DNA损伤.结果:ROS的水平和H.pylori的作用浓度呈正比,至MOI 300∶1时ROS荧光最强.不同浓度的N-乙酰半胱氨酸(N-acety-L-cysteine,NAC)均可抑制H.pylori感染所引起的ROS的生成.H.pylori可导致DNA损伤,NAC预处理后,GES-1细胞的尾长、彗星长、尾矩及Olive尾矩数值均较H.pylori组有明显下降趋势.结论:H.pylori作用GES-1细胞后,可使ROS生成增多,损伤DNA.抑制ROS的生成可减轻H.pylori感染导致的DNA损伤.     

调控靶向Xklp2表达对肺鳞癌细胞放射线照射后γ-H2AX蛋白表达的影响

目的探讨调控靶向Xklp2(TPX2)表达对肺鳞癌细胞放射线照射后γ-H2AX蛋白表达及细胞核内γ-H2AX和MDC1斑点形成的影响。方法利用前期构建的稳定转染TPX2 shRNA质粒的SK-MES-1细胞和稳定转染TPX2过表达质粒的NCI-H226细胞,采用Western印迹检测4 Gy照射后0～24 hγ-H2AX蛋白表达,免疫荧光技术观察4 Gy照射后4 h细胞核内γ-H2AX和MDC1斑点形成情况。结果 4 Gy照射后0～24 h,TPX2干扰的SK-MES-1细胞和TPX2过表达的NCI-H226细胞中γ-H2AX蛋白表达水平均出现显著增加后逐渐下降的趋势,但在TPX2干扰的细胞中,各时间点γ-H2AX蛋白表达水平均显著高于单纯照射组(P<0. 05),而在TPX2过表达细胞中,各时间点γ-H2AX蛋白表达水平均显著低于单纯照射组。②照射后4 h,下调TPX2表达则γ-H2AX和MDC1核内斑点形成增加,而过表达TPX2则γ-H2AX和MDC1核内斑点增加幅度降低(P<0. 05)。结论照射后H2AX磷酸化及γ-H2AX和MDC1核内斑点形成变化,提示TPX2参与DNA损伤修复。     

15-LOX-1基因表达对胃癌细胞增殖的抑制作用

目的研究15-LOX-1基因对人胃癌细胞增殖的影响。方法通过脂质体介导瞬时转染15-LOX-1基因于培养的胃癌细胞株（AGS）中，以转染空载体pcDNA3．1（＋）的细胞及未转染质粒的细胞作为对照；用RT—PCR和Westernblot检测人胃癌细胞的15-LOX-1mRNA及蛋白表达；倒置显微镜观察转染前后AGS形态变化；用MTT法比较转染前后AGS的增殖水平，流式细胞术检测转染后AGS细胞周期的变化。结果胃癌细胞系巾未检测到15-LOX—1mRNA和蛋白的表达，转染后的AGS表达有15-LOX—1的mRNA及蛋白。转染重组质粒绀细胞增殖显著低于未转染组及空质粒转染组（P〈0．05），转染后AGS细胞G0／G1期细胞明显增加，S期细胞明显减少，与未转染组及空质粒转染组相比均有显著性差异（P〈0．05）。结论15-LOX-1基因能抑制胃癌细胞的增殖，为进一步探讨胃痛的发病机制及治疗提供实验依据。     

~(60)Coγ射线照射对血管内皮细胞生物学作用的影响

目的观察~(60)Coγ射线照射对血管内皮细胞生物学作用的影响。方法用不同剂量~(60)Coγ射线照射人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),通过细胞生长曲线和克隆形成实验观察细胞增殖存活情况;流式细胞术检测照射后细胞周期的变化;中性单细胞凝胶电泳及蛋白印迹法(Western blot)观察细胞照射后DNA分子损伤及修复情况。结果 ~(60)Coγ射线照射后,HUVEC细胞生长速度及增殖率降低,降低程度与照射剂量呈正相关;HUVEC细胞周期出现G_2/M期阻滞;HUVEC细胞出现明显的DNA双链断裂,γH2AX和DNA-PKcs表达增加。结论 ~(60)Coγ射线照射抑制血管内皮细胞增殖,导致G_2/M期阻滞,促进DNA断裂,相关修复蛋白表达增加。     

MicroRNA-21在胃癌细胞中促进上皮-间质转化的研究

目的探讨MicroRNA-21在胃癌细胞上皮-间质转化中的作用及其机制。方法利用Lipofectamine 2000脂质体将miR-21 mimics、miR-21 inhibitor转染入AGS细胞中;Real-time聚合酶链反应(RT-PCR)法测定AGS细胞内miR-21的表达;采用划痕法、Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blotting方法检测上皮-间质转化(EMT)相关蛋白表达的表达变化。结果 AGS细胞转染miR-21 mimics后,细胞的迁移和侵袭能力均高于对照组(P<0.05),Western blot结果显示E-Cadherin、PTEN表达下降,Vimentin表达升高;AGS细胞转染miR-21 inhibitor后,细胞的迁移和侵袭能力均低于对照组(P<0.05);E-Cadherin、PTEN表达升高,Vimentin表达降低。结论 miR-21可以诱导AGS胃癌细胞迁移和侵袭。E-cadherin和PTEN表达下调和上调Vimentin可能是miR-21作用的分子机制。miR-21在胃癌肿瘤转移中可能起着重要作用,可能成为胃癌治疗的一个潜在靶点。     

Ku蛋白与肿瘤

Ku蛋白是DNA结合蛋白,能与DNA末端及DNA损伤导致的双链DNA断裂(DSBs)结合．Ku蛋白,由Ku70／Ku80两亚基紧密结合形成的异二聚体结构,与DNA依赖的蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)结合形成DNA依赖的蛋白激酶全酶(DNA-PK),在DSBs的非同源末端结合(NHEJ)修复途径中发挥重要作用．此外,Ku蛋白在维持端粒结构也有着重要作用．Ku蛋白缺失会造成小鼠成纤维细胞明显的染色体的畸变和淋巴瘤的发生．在人的肿瘤中,Ku蛋白的活性与肿瘤的发生发展相关．Ku蛋白的DNA末端结合(DEB)活性以及表达和功能与肿瘤对抗癌治疗抵抗相关．因此,Ku蛋白可作为一个治疗靶点克服肿瘤细胞对抗癌的抵抗而增强对肿瘤的杀伤作用．     

microRNA-31对胃癌细胞系AGS迁移的影响

目的探讨胃癌组织中microRNA(miR)-31的表达情况及miR-31对胃癌细胞系AGS迁移的影响。方法收集27例胃癌患者的胃癌组织和对应的正常组织,采用实时定量(qRT)-PCR检测miR-31的表达水平。筛选胃癌细胞系AGS细胞作为研究载体,通过转染miR-31mimics(实验组)使胃癌细胞系AGS细胞内miR-31的表达升高。采用划痕愈合实验和Transwell小室实验观察miR-31对胃癌AGS细胞迁移能力的影响。结果胃癌组织miR-31的表达明显低于对应的正常组织(P<0.05);与对照组相比,实验组miR-31的表达水平升高(P<0.05)。划痕实验结果显示实验组迁移距离明显小于对照组(P<0.05),Transwell小室实验结果显示转染miR-31mimics后,胃癌AGS细胞的迁移能力下降。结论 miR-31在胃癌组织中呈低表达,过表达的miR-31能够抑制AGS细胞的迁移。     

丙型肝炎病毒抑制DNA损伤修复相关基因生长阻滞和DNA损伤诱生蛋白45α的表达

目的 探讨HCV感染对DNA损伤修复相关基因生长阻滞和DNA损伤诱生蛋白45 α(GADD45 α)表达的影响. 方法 建立全基因HCV JFH1感染的Huh7,5.1细胞模型.用相对荧光定量PCR和Western blot分别检测HCV JFH1感染和未感染的Huh7.5.1细胞中GADD45 α mRNA和蛋白质的表达水平.组间数据比较用单因素方差分析.结果 HCV JFH1感染的Huh7.5.1细胞内有HCV RNA高水平复制及HCV NS5A蛋白质和核心蛋白的表达.与未感染Huh7.5.1细胞相比,HCV JFH1感染72h的细胞内GADD45αmRNA和蛋白质相对表达量均明显降低,分别为0.57±0.09比1.00±0.11和0.28±0.03比1.00±0.07,差异均有统计学意义(F值分别为75.407和560.04,P值均＜0.01). 结论 HCV下调GADD45 α的转录和蛋白质表达,影响DNA损伤修复,这可能是HCV感染致肝癌发生的机制之一.     

RFWD3在胃癌AGS细胞中的表达及其对凋亡的影响

[目的]探讨外源性基因环指和WD重复结构域相关蛋白3(RFWD3)对胃癌凋亡的影响。[方法]TCGA数据库选出目的基因,实验分shCtrl组(对照组)和shRFWD3组,RT-PCR检测该基因在胃癌细胞株中的表达,构建慢病毒载体,慢病毒感染胃癌细胞,WB检测RFWD3被敲减后蛋白的表达,流式细胞仪检查凋亡率,然后检测caspase3/7蛋白的活性,观察细胞凋亡的情况。[结果]通过TCGA数据库及统计分析,筛选出目的基因RFWD3,RT-PCR检测该基因在胃癌AGS细胞中表达较高与其他3种胃癌细胞(MGC-803、BGC-823、SGC-7901)相比P<0.05,慢病毒感染胃癌AGS细胞后感染率80%,WB检测RFWD3被敲减后蛋白的表达下降,流式细胞仪检测shRFWD3组发生凋亡的AGS细胞显著增加,通过检测caspase3/7蛋白,显示shRFWD3组caspase3/7蛋白活性显著升高(P<0.05)。[结论]干扰目的基因RFWD3促进胃癌AGS细胞的凋亡,为胃癌的科学研究与临床治疗提供可能的机制研究。     

精液冷冻对不育患者精子核DNA链完整性影响的研究

目的探讨冷冻保存对不育患者精子核DNA链完整性的影响。方法采用彗星试验检测40例非少精子症不育患者精液冷冻前及复苏后精子核DNA链的完整性。结果复苏后精子彗星细胞率为(41.9±10.7)%,与冷冻前[(40.8±11.2)%]比较差异无显著性(P>0.05);复苏后精子DNA四级损伤彗星细胞率为(20.0±7.0)%,与冷冻前[(11.0±3.4)%]比较差异有非常显著性(P<0.01)。结论精液冷冻对不育患者完整的精子核DNA链无影响,但可能加重冷冻前已有损伤精子核DNA链的损伤程度。     

敲低Spectrinβ Ⅱ加重棕榈酸诱导的心肌细胞损伤

目的 研究血影蛋白β Ⅱ（Spectrin βⅡ）在棕榈酸诱导的小鼠原代心肌细胞DNA损伤和细胞凋亡中的作用。 方法 ①Western blot检测棕榈酸处理后小鼠原代心肌细胞Spectrin β Ⅱ表达量变化。②分别用Ad-sh-scramble（对照组）和Ad-sh-Spectrin β Ⅱ（Spectrin β Ⅱ干涉组）的腺病毒感染小鼠原代心肌细胞,荧光显微镜下观察病毒的感染效率。利用Western blot和qPCR检测Spectrin β Ⅱ的干涉效率。③Western blot检测棕榈酸处理后Ad-sh-scramble组和Spectrin β Ⅱ干涉组小鼠原代心肌细胞DNA损伤指标γ-H2AX及凋亡蛋白剪切型半胱天冬酶3(cleaved-caspase 3)的表达,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡水平。 结果 ①给予棕榈酸处理的小鼠原代心肌细胞Spectrin β Ⅱ蛋白水平显著降低（P<0.05）。②与Ad-sh-scramble组相比,Ad-sh-Spectrin β Ⅱ组Spectrin β Ⅱ的蛋白和mRNA水平均显著降低（P<0.05）③给予棕榈酸处理后,与Ad-sh-scramble组相比,Ad-sh-Spectrin β Ⅱ组的γ-H2AX2和cleaved-caspase 3蛋白表达显著升高（P<0.05）,并且细胞凋亡率显著升高（P<0.05）。 结论 敲低Spectrin β Ⅱ加重棕榈酸诱导的小鼠原代心肌细胞DNA损伤和细胞凋亡。     

小剂量顺铂诱导的胃癌AGS细胞凋亡及对Survivin表达的影响

目的探讨小剂量顺铂(DDP)诱导胃癌细胞株AGS(ATCC CRL-1739)凋亡及对凋亡抑制蛋白Survivin表达的影响,为晚期胃癌DDP治疗策略提供理论依据。方法 AGS细胞经小剂量DDP处理后用MTS法检测癌细胞增生的抑制,流式细胞仪测定细胞凋亡率,RT-PCR检测Survivin mRNA及Western blot法检测Survivin蛋白的表达。结果小剂量DDP可抑制AGS细胞的增生并诱导其凋亡,肿瘤细胞的凋亡与DDP浓度及作用时间有依赖关系,但至一定浓度后,凋亡达最高,再增加浓度后仅增加坏死率,5 mg/L以上DDP在作用24 h后凋亡率不再增加。10 mg/L的DDP对癌细胞有较强时效关系的细胞毒性。胃癌AGS细胞Survivin mRNA的表达随DDP浓度升高而增加,至DDP达2 mg/L时表达最高,再增高浓度时反而下降;Survivin蛋白表达与其mRNA表达一致。结论小剂量DDP对胃癌细胞株AGS有凋亡诱导作用;对Survivin mRNA及蛋白表达均有诱导作用。     

siRNA特异性干扰EgRad9基因表达对细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤机制的影响

目的研究小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)特异性干扰Eg Rad9基因表达后对细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤机制的影响。方法利用电穿孔法将Eg Rad9-si RNA干扰序列和阴性对照干扰序列转染细粒棘球蚴原头节,实验分为Eg Rad9-si RNA-354、-614、-971干扰组,阴性对照组和空白对照组。电转染3 d后,加入自然状态下原头节最大耐受浓度的H_2O_2处理1 h,伊红染液染色后,倒置荧光显微镜下观察原头节活性并计算存活率。收集各组原头节的培养液,进行碱性磷酸酶活性的检测。电转染3 d后,加入自然状态下原头节耐受H_2O_2的最大耐受浓度处理1 h后,TRIzol法提取总RNA。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测Eg Rad9m RNA的表达。采用彗星实验检测干扰Eg Rad9基因表达后细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤情况,活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测干扰Eg Rad9基因表达后细粒棘球蚴原头节体内ROS的含量,采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析。结果自然状态下细粒棘球蚴原头节体外耐受H_2O_2的最大浓度为0.4 mmol/L,干预时间为1 h;电穿孔法可将绿色荧光干扰序列有效的导入原头节体内,实验组和阴性对照组的原头节体内均有明亮的绿色荧光斑点;而空白对照组原头节体内无绿色荧光斑点。Eg Rad9-si RNA-354、-614、-971干扰组原头节的存活率分别为(42.99±4.03)%、(29.86±5.87)%和(56.48±4.64)%,初步筛选最有效干扰序列为Eg Rad9-si RNA-614。si RNA-354、-614、-971干扰组碱性磷酸酶活性分别为0.024±0.001、0.004±0.001、0.039±0.002,其中Eg Rad9-si RNA-614组碱性磷酸酶活性与阴性对照组(0.095±0.001)和空白对照组(0.099±0.001)相比,差异均有统计学意义(t=10.227、10.934,均P0.01),表明该组原头节Eg Rad9基因经干扰后对其活性影响最大,最有效干扰序列为Eg Rad9-si RNA-614。Eg Rad9-si RNA-354、614、971干扰组Eg Rad9 m RNA表达量分别为0.432±0.055、0.291±0.079、0.612±0.032,其中经Eg Rad9-si RNA-614序列干扰后,Eg Rad9 m RNA表达量与阴性对照组(1.001±0.020)和空白对照组(1.001±0.012)相比均显著下调(t=7.874、7.663,均P0.01),可确定最有效干扰序列为Eg Rad9-si RNA-614。相同电泳条件下,Eg Rad9-si RNA-614干扰组原头节DNA碎片离开核向阳极迁移,形成拖尾;Eg Rad9-si RNA-614干扰组彗星尾距OTM值为13.901±2.263,与阴性对照组(0.074±0.020)和空白对照组(0.047±0.034)相比,差异有统计学意义(t=12.845、13.251,均P0.01)。经Eg Rad9-si RNA-614序列干扰后,原头节体内ROS含量为13.024±0.154,与阴性对照组(2.728±0.083)和空白对照组(2.555±0.007)相比,差异有统计学意义(t=9.296、10.134,均P0.01)。结论Eg Rad9基因在细粒棘球蚴原头节DNA氧化损伤过程中发挥重要作用,Eg Rad9-si RNA-614干扰片段可特异性干扰Eg Rad9基因的表达,并降低原头节修复DNA氧化损伤的能力。     

韩宗超

目的 观测过氧化氢诱导的大鼠衰老神经细胞DNA损伤与修复情况。方法 在荧光显微镜下观察不同浓度H2O2处理的3月、8月和26月龄大鼠的脑皮质、海马和基底节经分离的神经细胞及氧化损伤断裂的单链DNA,并做彗星图像分析。结果 在相同浓度H2O2介导下,衰老神经细胞DNA损伤分值较正常神经细胞高,皮质细胞较海马、基底节区细胞DNA损伤分值高,细胞更易受损伤。给予0．5～4．0 h孵育后,表明脑细胞最大修复时间仅为1．0 h,且衰老神经细胞较正常神经细胞的DNA损伤分值高,修复能力下降。当H2O2介导浓度为64 μmol／L时,3月龄鼠脑皮质、海马和基底节神经细胞DNA损伤分值依次为250、213和205,26月龄鼠DNA损伤分值依次为355、340和335。当H2O2介导浓度为128 μmol／L时,26月龄鼠DNA修复率约为10％。结论 彗星实验是一种非常敏感的检测DNA损伤与修复的方法。