支气管哮喘的免疫发病机制——从Th1/Th2细胞失衡到Th2/Treg细胞失衡

支气管哮喘(简称哮喘)是最常见的呼吸道慢性疾病之一,近年来随着全球哮喘防治创议(GINA)指南的全面推广,哮喘的防治取得了很大的进展。但迄今为止哮喘仍然不能得到根治,还存在对包括吸入肾上腺糖皮质激素在内的综合治疗     

Th17/Treg失衡与炎症性肠病的关系

炎症性肠病(inflammatory bowel disease.IBD)的病因和发病机制尚未完全明确,肠道黏膜免疫系统异常反应所导致的炎症过程在发病中起重要作用.辅助性T细胞17(T helper 17 cells,Th17)可介导慢性炎症和自身免疫性疾病的发生,调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)有抑制自身免疫的功能,二者存在相互转化的关系.有研究表明Th17/Treg转化平衡是维持肠道免疫稳态的重要因素,这可能是导致人类IBD的原因之一.最近研究表明TGF-β,IL-6和维甲酸(retinoic acid,RA)可能是调控二者平衡关系的重要因素.肠道菌群(intestinal flora)与IBD的发生发展关系密切,益生菌(probiotics)对IBD的治疗作用成为研究的热点.深化对Th17/Treg转化调控关系的研究是当前重要的研究课题.     

支气管哮喘患者急性发作期外周血LncRNA NEAT1表达及与Th1/Th2平衡的关系

目的：探讨支气管哮喘（BA）患者急性发作期外周血长链非编码RNA（LncRNA）核富集转录本1（NEAT1）表达水平及其与辅助性T细胞1（Th1）/辅助性T细胞2（Th2）平衡的关系。方法：选取BA缓解期患者36例（缓解期组）、急性发作期患者44例（急性发作期组）,另选取同期体检健康者50例作为对照组。利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）测定外周血LncRNA NEAT1表达,应用流式细胞仪测定外周血单个核细胞（PBMC）中Th1、Th2细胞比例,应用ELISA法测定外周血干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）水平;采用Pearson检验分析BA急性发作期患者外周血LncRNA NEAT1表达与Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值的关系,并绘制ROC曲线分析LncRNA NEAT1表达水平对BA患者急性发作的预测价值。结果：急性发作期组患者外周血LncRNA NEAT1表达水平最高,其次为缓解期组,对照组最低,组间比较差异有统计学意义（均P＜0.05）。PBMC中Th1细胞比例及Th1/Th2比值高低依次为对照组、缓解期组、急性发作期组,Th2细胞比例高低依次为急性发作期组、缓解期组、对照组,组间比较差异有统计学意义（均P＜0.05）。外周血IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4比值高低依次为对照组、缓解期组、急性发作期组,IL-4水平高低依次为急性发作期组、缓解期组、对照组,组间比较差异有统计学意义（均P＜0.05）。BA急性发作期患者外周血LncRNA NEAT1表达与Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值呈负相关（均P＜0.05）。外周血LncRNA NEAT1表达水平预测BA患者急性发作的曲线下面积为0.903,最佳截断值为1.73,敏感性为81.80%,特异性为88.90%。结论：BA患者急性发作期外周血LncRNA NEAT1高表达,可能与Th1/Th2平衡紊乱有关。     

调节性T细胞与辅助性T细胞比例失衡在溃疡性结肠炎发病机制中的作用

溃疡性结肠炎（ulcerativecolitis,UC）是反复发作的以腹痛、腹泻、黏液脓血便为主要表现的炎症性肠病。目前普遍认为UC的发病机制与多种因素有关,其中免疫调节异常是UC研究最活跃的领域。既往研究认为辅助性T细胞1（Thelper,Th1）和Th2细胞亚群失平衡在UC的发病机制中起重要作用,但随着研究的深入,UC在某些状况下并不能用单一的Th1／Th2细胞的模式解释。     

Th17/Treg细胞在炎性关节病的免疫调节作用

炎性关节病包括一大类以外周关节炎为主要表现的风湿性疾病,如类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）、脊柱关节病（spondyloarthropathy,SpA）及其相关的关节炎,如强直性脊柱炎（ankylosingspondylitis,AS）、银屑病关节炎（psoriaticarthritis,PsA）和炎症性肠病关节炎等。免疫细胞在他们的发病过程中起了重要作用。近年又发现了一种以分泌IL-17为主的辅助性T细胞17（Thelpcell 17,Th17）,其介导炎症反应。调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）是一类具有免疫抑制作用的T细胞亚群。Th17与Treg细胞在分化过程中是密切相关的,多种细胞因子参与了他们的发育分化过程,Th17/Treg细胞的平衡对维持正常免疫应答、防止自身免疫性疾病具有重要意义。     

溃疡性结肠炎患者外周血调节性T细胞分析

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是炎症性肠病（inflammatory bowel disease，IBD）的一种，其病因可能涉及遗传、免疫、感染、精神等多种因素，但确切的发病机制尚无定论。近年研究提示，调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）作为具有抑制效应性T细胞增殖和活性的细胞亚群。     

外周血瘦素水平、辅助性T细胞17/调节性T细胞比值与溃疡性结肠炎患者肠黏膜屏障功能障碍的相关性

目的 探讨外周血瘦素(Leptin)、辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)与溃疡性结肠炎(UC)患者肠黏膜屏障功能障碍的关系。方法 选取2018年3月～2020年6月南京医科大学附属明基医院收治的UC患者87例,根据是否存在肠黏膜屏障功能障碍,将所有患者分为肠黏膜屏障功能障碍组(A组,30例)和非肠黏膜屏障功能障碍组(B组,57例)。收集所有患者基线资料(性别、年龄、病程、病变范围、病情程度、吸烟史)及治疗前实验室检查指标[外周血Leptin、C反应蛋白(CRP)、IL-17、Th17及Treg],计算Th17/Treg比值并对上述指标分组进行比较。采用二元logistic回归分析评估各主要指标与UC患者肠黏膜屏障功能障碍之间的关系;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估外周血Leptin、Th17/Treg对UC患者肠黏膜屏障功能障碍发生风险的预测价值。结果 A组患者外周血CRP、IL-17、Leptin水平、Th17百分比及Th17/Treg比值均高于B组,Treg百分比低于B组(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,高CRP、IL-17及Lept...     

基于miRNA表达谱解析细粒棘球蚴病患者体内Th17/Treg失衡机制

目的　观察细粒棘球蚴病患者血清微小RNA（miRNA）表达水平、探讨miRNA对辅助性T 细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）失衡的影响,以阐明细粒棘球蚴慢性感染并长期致病的机制。方法　提取细粒棘球蚴病患者与健康对照者血清总RNA,采用Illumina测序平台进行高通量测序。分别采用miRBase数据库和miRDeep2工具进行已知miRNA注释和新miRNA预测,并进行差异分析。采用miRanda软件和TargetScan软件分别预测差异表达miRNA靶基因后取交集,进行基因本体（GO）富集分析以及京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路分析。在差异表达变化倍数居前20位的miRNA中,匹配可靶向决定Th17细胞和Treg细胞生成的关键转录因子（RORC和FOXP3）或重要调控通路（PI3K⁃Akt和mTOR通路）相关基因的miRNA。结果　细粒棘球蚴病患者与健康对照血清中共有53个差异表达miRNA,其中47个上调表达miRNA、6个下调表达miRNA。GO富集分析显示,差异表达miRNA功能涉及DNA转录翻译、细胞成分、细胞形态、神经发育及代谢分解等过程。KEGG富集分析显示,这些差异表达miRNA靶基因涉及的主要信号通路包括MAPK、PI3K⁃Akt、mTOR等信号通路。在差异表达变化倍数居前20位的miRNA中,有3个潜在靶向调控RORC的miRNA、15个潜在靶向PI3K⁃Akt、mTOR信号通路的miRNA。结论　细粒棘球蚴感染后可使患者血清miRNA表达谱出现明显改变,差异表达miRNA可能通过靶向Th17/Treg关键转录因子或PI3K⁃Akt、mTOR通路而导致Th17/Treg免疫失衡,进而利于细粒棘球蚴在宿主体内长期寄生并慢性致病。     

系统性红斑狼疮患者长链非编码RNA表达变化及其与调节性T细胞相关性的研究

目的通过检测SLE患者长链非编码RNA(lncRNA)的表达变化, 初步探索差异表达的lncRNA与调节性T细胞(Treg)数量间的联系, 分析Treg相关lncRNA与SLE患者临床特征间的相关性, 预测lncRNA调节Treg分化发育的机制, 为SLE的治疗提供新思路。方法收取9例活动期SLE患者外周血, 提取PBMCs, 用全转录组测序分析PBMCs的lncRNA表达谱, 以9名健康人作为对照组, 筛选差异表达的lncRNA, 采用Pearson检验分析lncRNA与Treg数的相关性, 以及Treg相关lncRNA与SLE患者SLEDAI评分、ESR、C3、C4之间的相关性, 用miRcode和Targetscan数据库及共表达网络预测Treg相关lncRNA的靶向基因。结果与健康对照组相比, SLE患者有240个差异表达lncRNA, 包括134个高表达的lncRNA(P<0.05), 106个低表达的lncRNA(P<0.05), 其中ANKRD44-AS1(r=0.74, P=0.022)、LINC00200(r=0.70, P=0.037)、AP001363...     

Treg/Th17细胞失衡对尿毒症血液透析患者微炎症因子及血管钙化的影响

目的探讨尿毒症患者血液透析调节性T细胞(Treg)与辅助性T细胞17(Th17)水平失衡对相关炎症因子及血管钙化因子的影响。方法 105例尿毒症患者为受试对象,其中35例尿毒症合并心血管病行血液透析的患者为观察1组,33例尿毒症行血液透析无心血管病的患者为观察2组,37例尿毒症无心血管病未行血液透析的患者为对照1组,另选取同期的30例正常健康体检者作为对照2组。以流式细胞技术对单个核细胞中Treg、Th17细胞水平进行检测,酶联免疫吸附法(ELISA)对单个核细胞上清液中白细胞介素(IL)-10、IL-6、IL-17等炎症因子及血管钙化因子中的骨形态发生蛋白-2(BMP-2)进行监测,实时荧光定量(PCR)法检测叉头蛋白p3(Foxp3)、维甲酸相关孤独受体γt信使RNA(ROR-γt mRNA)的表达。结果观察1组与对照2组相比,存在Treg/Th17细胞比例失衡、BMP-2异常分泌,主要表现为IL-6、IL-17水平和Foxp3、ROR-γt相对表达量升高,而IL-10水平、Foxp3/ROR-γt相对表达量降低(P0.01);同时,这一失衡在观察1组、观察2组及对照组1组中均存在(P0.01)。结论 Treg/Th17细胞比例失衡将引起尿毒症血液透析患者微炎症因子水平异常,导致血管钙化加剧。     

急性白血病患者血清中lncRNA MUC5B-AS1表达变化及其意义

目的 观察急性白血病患者血清中长链非编码RNA(lncRNA)MUC5B-AS1表达变化,并探讨其意义。方法 急性白血病患者136例（观察组）,同期无血液疾病的健康体检者140例（对照组）,采用实时荧光定量PCR法（qRT-PCR法）检测两组血清lncRNA MUC5B-AS1,并分析血清lncRNA MUC5B-AS1表达与急性白血病患者临床指标,另比较血清lncRNA MUC5B-AS1高、低表达白血病患者化疗后的缓解率和无复发生存率。结果 观察组及对照组血清lncRNA MUC5B-AS1相对表达量分别为2.51±0.42、1.02±0.18,两组比较,P<0.05。血清lncRNA MUC5B-AS1表达与白血病患者临床指标无相关性（P均>0.05）。lncRNA MUC5B-AS1高表达者、低表达者化疗1个疗程后CR率分别为73.68%(56/76)、88.33%(53/60),两者比较,P<0.05。lncRNA MUC5B-AS1高表达、低表达CR患者3年无复发生存率分别为32.14%(18/56)、49.06%(26/53),两者比较,P<0.0...     

溃疡性结肠炎患者外周血Th17/Treg免疫平衡的研究

目的研究溃疡性结肠炎（UC）患者外周血Th17细胞（CD4＋IL-17＋T细胞）与Treg细胞（CD4^＋CD25^＋T细胞）数量以及相关细胞因子的表达水平,分析Th17／Treg细胞免疫平衡在UC发病机制中的作用。方法收集UC患者（UC组）和健康体检者（对照组）的外周肝素抗凝静脉血,分离纯化T淋巴细胞。分别以PE-CD4与FTTC—CD25单抗,PE-CD4与FITC—IL-17的单抗作双色流式细胞术,分析溃疡性结肠炎患者外周血Th17、Treg细胞的百分率,ELISA法检测血清中相关细胞因子IL-17和TGF—β1的水平。结果与对照组比较,溃疡性结肠炎患者外周血Th17细胞百分率升高,Treg细胞的百分率显著下降,Th17／Treg比值升高（P〈0．05）,血清中细胞因子IL-17升高、TGF-β1降低,并且IL-17／TGF-β1比值升高。结论溃疡性结肠炎患者外周血存在细胞免疫功能失调;Th17／Treg细胞数量与免疫平衡状态发生改变,T淋巴细胞耐受机制的破坏可能与溃疡性结肠炎的发病机制有关。     

PARP-1抑制剂5-AIQ对实验性结肠炎小鼠Treg/Th17的调节作用

[目的]探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)抑制剂5-氨基异喹啉酮(5-AIQ)对葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的实验性结肠炎小鼠Th17/Treg平衡的调节作用及其机制。[方法]将30只C57 BL/6 J小鼠随机分为3组:空白组、DSS组、5-AIQ组,每组10只;小鼠自由饮用质量浓度为30 g/L的DSS共7 d,组建UC模型。空白组:正常饮水的同时给予0.9%氯化钠溶液,腹腔注射7 d;DSS组:造模同时给予0.9%氯化钠溶液,腹腔注射7 d;5-AIQ组:造模同时给予5-AIQ(1.5 mg/kg),腹腔注射7 d。观察各组小鼠体质量、大便黏稠度及出血情况、计算结肠炎相关的疾病活动指数(disease activity index,DAI)和结肠组织病理评分,RT-PCR检测小鼠结肠组织中的炎症因子IL-10、IL-17、IL-21、IL-35,同时检测小鼠结肠组织中Th17和Tregs细胞分化相关转录因子RORγt、STAT3、Foxp3、Smad3表达。[结果]与DSS组相比,空白组和5-AIQ组中DAI降低(P0.01);5-AIQ组结肠病理损伤明显改善;与空白组相比,DSS组IL-10、IL-35、Foxp3、Smad3蛋白下调,IL-17、IL-21、RORγt、STAT3蛋白上调;5-AIQ组与DSS组比较,IL-10、IL-35、Foxp3、Smad3蛋白上调,IL-17、IL-21、RORγt、STAT3蛋白下调,差异有统计学意义(P0.01)。[结论]PARP-1抑制剂5-AIQ可能通过调控实验性结肠炎小鼠Treg/Th17免疫平衡起到抑制肠道炎症,保护结肠黏膜的作用。     

普拉梭菌对溃疡性结肠炎不典型增生患者Treg细胞水平及IL-23/IL-17轴的影响北大核心CSCD

目的研究普拉梭菌(Faecalibacteriumprausnitzii)对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)不典型增生患者调节性T细胞(Treg)水平及白介素23(IL-23)/白介素17(IL-17)轴的影响。方法收集25例UC不典型增生患者和20例健康对照者的新鲜粪便以及UC不典型增生患者病变、正常肠黏膜组织。提取新鲜粪便中的细菌基因组DNA,采用实时荧光定量PCR检测普拉梭菌基因拷贝数,采用免疫组化和Western blot检测组织IL-17和IL-23表达水平,采用流式细胞术检测全血Treg细胞水平,比较不同组受试者普拉梭菌含量以及Treg、IL-23、IL-17的差异性,采用Pearson相关分析普拉梭菌含量与Treg细胞水平及IL-23/IL-17的关系。结果UC不典型增生组患者新鲜粪便普拉梭菌含量以及全血Treg细胞水平均显著高于对照组(均P<0.01);病变肠黏膜组织IL-17和IL-23表达水平均显著高于正常组织(P<0.01)。Pearson分析显示,粪便中普拉梭菌含量与外周血Treg细胞水平呈正相关性(r=0.526,P<0.01),而与组织中的IL-23、IL-17水平呈负相关性(r值分别为-0.474和-0.487,均P<0.01)。结论普拉梭菌可改善UC不典型增生患者结肠组织病理学状态,其机制可能为促进Treg细胞的表达以及抑制IL-23/IL-17轴。     

外周血Th17细胞及IL-17^＋FoxP3^＋T细胞在非小细胞肺癌患者的表达变化

目的：探讨辅助性T17（Th17）细胞及白细胞介素17（IL-17）＋叉头蛋白3（FoxP3）＋T细胞在非小细胞肺癌患者外周血中的表达及意义。方法：57例非小细胞肺癌患者作为研究对象．25名正常人作为对照。采用流式细胞术检测外周血Th17细胞、调节性T细胞（Treg细胞）的百分率以及IL-17＋FoxP3＋T细胞占Treg细胞的百分率。结果：Ⅳ期非小细胞肺癌患者外周血单核细胞（PBMC）中Th17细胞百分率高于Ⅰ-Ⅲ期患者及正常对照（均P〈0．01）。非小细胞肺癌患者PBMC中的Treg细胞百分率高于正常对照,并且IL-17＋FoxP3＋T细胞占Treg细胞的百分率高于正常对照（P〈0．05）。结论：Ⅳ期非小细胞肺癌患者中Th17细胞以及II-17＋FoxP3＋T细胞数量增加,Th17以及IL．17＋FoxP3＋T细胞可能参与了非小细胞肺癌的肿瘤远处转移过程．从而影响肿瘤进程。     

人巨细胞病毒感染与冠心病患者Treg/Th17平衡及mi R-155表达的关系

目的 分析人巨细胞病毒(HCMV)感染与冠心病患者外周血调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)平衡及微小RNA-155(miR-155)表达的相关性,探讨HCMV感染在冠心病发生发展中的作用。方法 选择2018年1月至2019年1月期间保定市第四中心医院心内科住院部收治的冠心病患者160例,其中急性冠状动脉综合征(ACS)患者84例作为ACS组,稳定型心绞痛(SAP)76例作为SAP组,另选取同期到本院体检的非冠心病者80例作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清HCMV-IgG、HCMV-IgM及血清白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β(TGF-β)水平;实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测血清miR-155表达;流式细胞术检测外周血Th17、Treg亚群比例,并计算Treg/Th17比值;Pearson分析ACS患者血清HCMV-IgM与miR-155、Treg/Th17相关性。结果 与对照组比较,SAP组与ACS组HCMV-IgM阳性率及HCMV-IgM水平、HCMV-IgG阳性率及HCMV-IgG水平...     

外周血Th17/Treg失衡与老年稳定期COPD患者肺功能及急性加重的相关性

目的 分析外周血辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)失衡与老年稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能及急性加重的相关性.方法 100例老年COPD患者根据病情分为稳定期COPD(SCOPD组58例)和COPD急性加重(AECOPD组42例),同期50名体检者作为对照组.对3组基线资料及SCOPD组和...     

阿托伐他汀治疗NAFLD患者对肝脂肪变和外周血Treg/Th17细胞的影响*

目的 探讨阿托伐他汀治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者对肝脂肪变和外周血调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)的影响。方法 2016年6月～2019年6月我院诊治的NAFLD患者148例,采用随机数字表法将患者分为对照组74例和观察组74例,分别给予常规治疗和在此基础上加用阿托伐他汀治疗24 w。采用ELISA法检测白细胞介素-10(IL-10)、IL-17和IL-18水平,使用流式细胞仪检测外周血Treg和Th17细胞百分比。结果 在治疗24 w末,观察组血清TC、TG、ALT和AST水平分别为(2.0±0.6)mmol/L、(1.2±0.4)mmol/L、(43.8±8.2)U/L和(25.2±7.4)U/L,显著低于对照组【分别为(2.6±0.6)mmol/L、(1.5±0.3)mmol/L、(49.9±8.4)U/L和(29.2±8.1)U/L,P＜0.05】;观察组血清IL-10水平为(31.7±4.4)ng/L,显著高于对照组【(26.3±4.2)ng/L,P＜0.05】,而血清IL-17和IL-18水平分别为(89.5±31.0)pg/mL和(41.8±9.1)pg/mL,显著低于对照组【分别为(104.2±29.5)pg/mL和(52.3±9.2)pg/mL,P＜0.05】;观察组外周血Treg细胞百分比和Treg/Th17细胞比值分别为(1.2±0.2)%和(1.1±0.4),显著低于对照组【分别为(1.3±0.2)%和(1.3±0.5),P＜0.05】,而外周血Th17细胞百分比为(1.1±0.2)%,显著高于对照组【(1.0±0.2)%,P＜0.05】;观察组肝脂肪变改善总有效率为94.6%,显著高于对照组的73.0%(P＜0.05)。结论 应用阿托伐他汀治疗NAFLD患者能显著减轻肝脂肪变,可能与降低了血脂水平,调节了Treg/Th17细胞比例失衡有关。     

调节Th17/Treg细胞平衡的因素及其对炎症性肠病的影响

在炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)中,自身免疫由辅助性T细胞17(T helper cell 17, Th17)细胞驱动并被调节性T细胞(regulatory cells, Tregs)抑制,因此重塑Th17/Treg细胞的平衡对于治疗IBD至关重要.有许多因素参与影响了Th17/Treg平衡,其中包括TCR信号,共刺激信号,细胞因子信号,代谢水平,微生物群等.下面,本文将讲述它们在调节Th17/Treg平衡中的作用以及对IBD的影响.     

非小细胞肺癌患者Th1/Th2型细胞因子的表达及其临床意义

目的研究辅助性T淋巴细胞(helper T lymphocyte,Th)1、2型细胞因子在非小细胞肺癌(non-small cell lung canc-er,NSCLC)患者外周血中的表达。方法采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测40例NSCLC患者手术前后和20例正常对照外周血中Th1型细胞因子白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis fac-tor-α,TNF-α)和Th2型细胞因子IL-10、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的水平。结果 NSCLC组术前IL-2、TNF-α水平较正常对照组明显降低(P<0.05);IL-10、TGF-β1水平则明显升高(P<0.05)。NSCLC患者手术后IL-2、TNF-α水平较手术前明显升高(P<0.01);IL-10、TGF-β1水平则明显降低(P<0.01)。外周血Th1/Th2型细胞因子水平与NSCLC临床病理无关。结论①NSCLC患者呈现Th1抑制和Th2极化状态,是肺癌发生免疫耐受的可能机制;②手术切除肿瘤可在一定程度上逆转Th1/Th2的失衡状态,改善机体免疫状态,对预后产生积极作用。