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1.
目的:研究miR-93对卵巢癌细胞系OVCAR3侵袭及迁移能力的影响。方法:用miR-93的成熟模拟物过表达miR-93,用化学合成的特异性抑制物下调miR-93的表达。通过miRNA特异的定量PCR验证miR-93的过表达和抑制效率,采用MTT、软琼脂集落形成和Transwell侵袭实验分析miR-93表达对OVCAR3细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。结果:miR-93过表达后,OVCAR3细胞的侵袭和迁移能力显著增强(分别达3.82倍和2.56倍)。降低内源性miR-93的表达后,OVCAR3细胞的侵袭和迁移能力分别下降了66.57%和57.26%。结论:miR-93能明显促进卵巢癌OVCAR3细胞的侵袭和迁移。  相似文献   

2.
目的:研究溶血磷脂酸受体在人卵巢癌细胞系和人卵巢癌组织中蛋白的表达。方法:用免疫细胞化学和免疫组织化学法检测LPA1,LPA2和LPA3蛋白在人卵巢癌细胞系3AO、OVCAR3、SKOV3和人卵巢癌组织中的表达水平。结果:免疫细胞化学显示LPA1,LPA2和LPA3蛋白在人卵巢癌细胞系中均有表达;免疫组织化学显示LPA1蛋白在正常卵巢上皮和卵巢良性肿瘤中高表达,LPA2和LPA3蛋白在人卵巢癌组织中高表达。结论:LPA1,LPA2和LPA3在人卵巢癌细胞系和人卵巢癌组织中均有广泛表达;LPA2,LPA可能与卵巢癌的发生发展密切相关。  相似文献   

3.
NS398对人卵巢癌细胞系CAOV3和OVCAR3生长抑制作用的研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
Wang CY  Wang M  Wang XY  Zhang SL  Wang YX  Li LK 《中华妇产科杂志》2003,38(7):415-418,i002
目的 观察环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)选择性抑制剂——氮-2,环己氧-4,硝基苯-甲基磺胺(NS398),对人卵巢癌细胞系CAOV3和OVCAH3生长的抑制作用。方法 应用免疫组织化学(免疫组化)链霉菌抗生物素蛋白一过氧化物酶连接(SP)法,在蛋白水平,对人卵巢上皮浆液性癌细胞系CAOV3、OVCAR3的COX-2表达情况进行检测;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)快速比色法,观察NS398对CAOV3、OVCAR3生长的抑制作用,并通过倒置相差显微镜及电子显微镜观察细胞形态学的变化;通过DNA梯形电泳和末端脱氧核苷转移酶(TdT)介导的脱氧尿嘧啶三磷酸(dUTP)缺口末端标记(TUNEL)实验,对细胞凋亡情况进行检测。结果 CAOV3、OVCAR3的COX-2蛋白表达均为阳性。NS398对CAOV3、OVCAR3增殖的抑制率,均随着作用时间的延长和药物浓度的增加而增加。NS398作用后,CAOV3、OVCAR3细胞胞浆空泡化,可见凋亡小体,细胞表面的微绒毛消失。DNA梯形电泳显示特征性的梯形谱带,TUNEL实验可见凋亡细胞。结论 COX-2很可能成为卵巢癌化学药物治疗(化疗)的有效靶点,COX-2抑制剂——NS398有可能成为卵巢癌化疗的有效药物。  相似文献   

4.
目的探讨卵巢癌过继细胞免疫治疗新方法。方法提取卵巢癌细胞(COC1和COC2n)可溶性抗原(TSA),用TSA和抗CD3单克隆抗体(CD3McAb)共同诱导正常人外周血单个核细胞(PBMC)产生细胞毒性T细胞(CTL),用CTL于体外杀伤COC1细胞和裸鼠体内抑制COC2n移植瘤的生长,体外和淋巴因子激活杀伤细胞(LAK)、淋巴因子和抗CD3单抗激活的杀伤细胞(CD3AK)细胞进行比较,体内和CD3AK细胞进行比较。结果CTL、CD3AK和LAK对COC1细胞的细胞毒作用分别为79.4%、52.1%和51.7%(P<0.01)。在体内,CTL与CD3AK和未经处理的对照组比较,卵巢癌细胞移植到裸鼠体内的第9天,肿瘤平均体积分别为44.4±24.2mm3、118.8±40.0mm3和443.0±158.7mm3(P<0.01),裸鼠平均生存期分别为28.5天、25.5天和17天(P<0.01)。结论本方法诱导产生的CTL,在体内、体外对卵巢癌细胞均有较高的细胞毒作用,能明显抑制肿瘤生长,为卵巢癌治疗提供了新的思路。  相似文献   

5.
目的 探讨子(癎)前期患者外周血CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(CD4+CD25+Tr)和cD4+CD25high 调节性T淋巴细胞(CD4+ CD25high Tr)在子(癎)前期发病中的作用.方法 2005年10月至2006年3月对安徽省立医院子(癎)前期患者30例和正常早、晚期妊娠及正常非妊娠组妇女各13例、22例及15例,采用流式细胞仪检测其外周血CD4+CD25+Tr和CD4+CD25high Tr占CD4+T细胞的比率,分析其与子(癎)前期的关系.结果 子(癎)前期组妇女外周血CD4+CD25+Tr和CD4'cD25 highrrr表达率分别为(6.64±1.10)%和(0.53±0.17)%,明显低于正常晚期妊娠组妇女的(12.26±1.32)%和(1.18±0.05)%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).正常非妊娠组妇女外周血CD4+CD25'Tr表达率(10.8±1.05)%和正常早期妊娠组CD4'CD25'Tr表达率(11.21±1.40)%比较,差异无统计学意义,但均低于正常晚期妊娠组(P<0.05).结论 CD4+CD25+Tr和CD4+cD25high Tr可能与子(癎)前期的发病机制有关.  相似文献   

6.
目的探讨子前期患者外周血CD4+ CD25+调节性T淋巴细胞(CD4+ CD25+Tr)和CD4+CD25high调节性T淋巴细胞(CD4+ CD25highTr)在子前期发病中的作用。方法2005年10月至2006年3月对安徽省立医院子前期患者30例和正常早、晚期妊娠及正常非妊娠组妇女各13例、22例及15例,采用流式细胞仪检测其外周血CD4+ CD25+Tr和CD4+ CD25highTr占CD4+T细胞的比率,分析其与子前期的关系。结果子前期组妇女外周血CD4+CD25+Tr和CD4+ CD25highTr表达率分别为(6.64±1.10)%和(0.53±0.17)%,明显低于正常晚期妊娠组妇女的(12.26±1.32)%和(1.18±0.05)%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。正常非妊娠组妇女外周血CD4+ CD25+Tr表达率(10.8±1.05)%和正常早期妊娠组CD4+ CD25+Tr表达率(11.21±1.40)%比较,差异无统计学意义,但均低于正常晚期妊娠组(P<0.05)。结论CD4+ CD25+Tr和CD4+ CD25highTr可能与子前期的发病机制有关。  相似文献   

7.
目的:研究卵巢癌细胞培养上清能否诱导树突细胞前体细胞亚群比例发生变化。方法:以脐血来源的CD34+干细胞通过细胞因子FLT3-L(100ng/ml)、SCF(50ng/ml)的诱导在体外扩增分化为DC前体细胞(pre-DC)。培养并收集卵巢癌细胞株SKOV3上清,经透析法浓缩。将上清培养的pre-DC,经不同浓度上清(0%、25%、50%、75%、100%、150%)作用后,用流式细胞仪(flowcytometry,FCM)检测pre-DC表面抗原CD123、CD11c、HLA-DR、CD80、CD86的表达。结果:上清促进CD11c和HLA-DR抗原的表达,不促进CD123、CD80、CD86抗原的表达。结论:卵巢癌细胞株上清影响两类DC前体细胞亚群的比例变化,可能通过此途径参与形成腹腔免疫缺陷。  相似文献   

8.
目的评价宫颈癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Regulatery T cell,Treg)及其Foxp3表达的临床意义。方法收集中国医科大学附属盛京医院自2012年1月至2013年6月手术治疗的早期宫颈癌患者(FIGO分期≤Ⅱ期)34例,高级别宫颈上皮内瘤变(CIN2/3)患者30例以及20例健康女性作为正常对照。流式细胞技术检测各研究组手术前、后及对照组外周血Treg及Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞比例,应用t检验和单因素方差法进行统计学分析。结果比较宫颈癌、CIN2/3及对照组外周血Treg及Foxp3+Treg细胞所占CD4+T细胞比例,各组间差异有统计学意义(P0.05);术后早期(7d),宫颈癌及CIN2/3患者外周血Foxp3+Treg细胞所占比例较术前显著下降(P0.05),但Treg细胞所占比例无显著性变化(P0.05);术后恢复期(1个月),宫颈癌及CIN2/3患者外周血Foxp3+Treg细胞所占比例较术后早期无显著变化,但Treg细胞所占比例较术后早期显著性降低(P0.05)。结论宫颈癌患者外周血Treg细胞及其Foxp3的表达均与病变程度相关;Treg细胞Foxp3的表达具有不稳定性;宫颈癌肿瘤微环境可能是维持Treg细胞分化增殖及Foxp3稳定表达的外在客观条件。  相似文献   

9.
子宫内膜癌是女性生殖系统中常见的三大恶性肿瘤之一,其发病机制除涉及多因素、多阶段的复杂生物过程,以及长期无孕激素拮抗的雌激素刺激子宫内膜发生恶变外,还与人体免疫系统的异常改变密切相关。而近年肿瘤免疫在子宫内膜癌的研究中仍是一个热点话题,其中CD4^+T淋巴细胞作为肿瘤免疫应答的主要参与者,被分为一系列多功能的免疫细胞亚群,包括1型辅助性T细胞、2型辅助性T细胞、17型辅助性T细胞和调节性T细胞,以及近年新发现的9型辅助性T细胞和22型辅助性T细胞。CD4^+T细胞亚群的分化调节、免疫功能与多种肿瘤的发病机制和肿瘤患者预后密切相关,各亚群细胞数量及分泌的细胞因子的失衡又会促进多种肿瘤的恶性进展。然而,CD4^+T细胞亚群及细胞因子在子宫内膜癌中的研究尚处于起步阶段。本文就近年CD4^+T细胞亚群在子宫内膜癌中的作用加以综述。  相似文献   

10.
探讨卵巢癌过继细胞免疫治疗瓣方法。方法 提取卵巢癌细胞可溶性抗原,用TSA和抗CD3单克隆抗体共同诱导正常人外周血单个核细胞产生细胞毒性T细胞,用CTL于体外杀伤COC1细胞和裸鼠体内抑制COC2n移植瘤的生长,体外和淋巴因子激活杀伤细胞,淋巴因子和抗CD3单抗激活的杀伤细胞细胞进行比较,体内和CD3-AK细胞进行比较。  相似文献   

11.
目的:研究卵巢上皮癌细胞中STAT3表达与DC、CD4+、CD8+表达之间的关系及临床意义,探讨卵巢癌发生过程中肿瘤免疫逃逸的机制。方法:选择42例卵巢上皮性癌患者为研究对象,25例卵巢良性肿瘤患者及13例正常卵巢组织为对照。用免疫组织化学SABC法检测组织中STAT3与DC、CD4+、CD8+的表达,并进行半定量及相关性分析。结果:(1)STAT3在卵巢上皮性癌中表达增高,与良性和正常对照组的差异有统计学意义(P<0.005);按FIGO分期,Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期的差异有统计学意义(P<0.05);(2)DC、CD4+在卵巢上皮性癌中表达降低,与良性和正常对照组的差异有统计学意义(P<0.005);按FIGO分期,Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期的差异有统计学意义(P<0.05);(3)CD8+在卵巢上皮性癌中表达降低,与良性和正常对照组的差异有统计学意义(P<0.005);按FIGO分期,Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ~Ⅳ期比较,低表达率增高,但无统计学意义(P>0.05);(4)卵巢上皮癌组织中STAT3表达与DC、CD4+、CD8+表达之间呈负相关,相关系数分别为-0.230、-0.081、-0.102,P均<0.05。结论:STAT3与DC、CD4+、CD8+的表达可作为判断卵巢癌恶性程度的指标;STAT3与DC、CD4+、CD8+在肿瘤组织的表达呈负相关。各因素间相互影响,可能是导致肿瘤逃脱机体免疫监视的机制之一。  相似文献   

12.
妊娠是一种自然同种半异体移植现象,其成功有赖于母体妊娠免疫耐受,而母胎耐受的建立和维持涉及到多种机制的参与.比较经典的有母胎界面的机械作用:首先,绒毛中的血管壁、绒毛间隙、基底膜和绒毛上皮细胞共同构成母胎机械性屏障.另外,胎盘滋养细胞表面的唾液黏蛋白能遮盖滋养层细胞表面的组织相容性抗原,且这层黏多糖和免疫活性的淋巴细胞都带负电荷,互相排斥.还有就是多因素作用的免疫屏障,比如妊娠早期胎儿滋养层细胞Ⅰ类主要组织相容性复合体分子与母体子宫的自然杀伤细胞的相互作用,胎源性凋亡因子Fas通过与滋养层细胞表达的相关配体结合导致母体特异性T细胞大量表达Fas,从而启动凋亡途径,补体调节蛋白的表达等.而作为一个具有独立免疫调节功能的T细胞亚群,调节性T细胞(regulatory Tcells,Treg细胞)由Sakaguchi等[1]在对啮齿类动物的研究中首次发现,其免疫学特性主要表现在抑制自身反应性T细胞的活化,参与机体免疫耐受,在正常妊娠过程中扮演了一个相当重要的角色.  相似文献   

13.
目的 探讨宫颈癌HeLa细胞中Bcrp1+细胞的生物学特性.方法 采用细胞免疫荧光标记及流式细胞仪分选HeLa细胞中Bcrp1+及Bcrp1-细胞,透射电镜观察两种表型细胞的形态,倒置显微镜观察两种表型细胞培养不同时间(24、48、72 h)后的生长情况;采用流式细胞仪检测两种表型细胞的细胞周期及细胞凋亡情况;采用蛋白印迹法检测两种表型细胞中增殖周期相关蛋白--增殖细胞核抗原(PCNA)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达情况(结果均以"表达丰度"表示).结果 (1)分选结果显示,宫颈癌HeLa细胞中,Bcrp1+细胞占7.1%,Bcrp1-细胞占92.9%.透射电镜观察,与Bcrp1-细胞相比较,Bcrp1+细胞核大、核仁明显、胞质内线粒体丰富、粗面内质网增多.倒置显微镜观察,分选后的Bcrp1+细胞迅速进入分裂状态,培养24 h即贴壁生长,而Bcrp1-细胞培养48 h方有少量贴壁生长;培养24、48、72 h时,Bcrp1+贴壁细胞分别占72.8%、81.1%、80.4%,Bcrp1-贴壁细胞分别占3.3%、18.7%、12.6%,各个时间点两种表型细胞的贴壁细胞所占百分比分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(2)流式细胞仪检测显示,Bcrp1+细胞中S期细胞比例(54.1%)和增殖指数(55.6%)均高于Bcrp1-细胞中S期细胞比例(21.1%)和增殖指数(47.0%),差异均有统计学意义(P<0.05);而Bcrp1-细胞中G0/G1及G2/M期细胞比例(分别为53.0%、25.9%)均高于Bcrp1+细胞(分别为44.4%、1.5%),差异均有统计学意义(P<0.05).Bcrp1+细胞的凋亡率为0.2%,Bcrp1-细胞为5.3%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05).(3)蛋白印迹法检测显示,在Bcrp1+细胞中PCNA蛋白的表达水平(表达丰度为3140)高于Bcrp1-细胞(表达丰度为2255),而caspase-3蛋白的表达水平(表达丰度为1970)低于Bcrp1-细胞(表达丰度为3551),分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 宫颈癌HeLa细胞中Bcrp1+细胞具有较强的抗凋亡能力及旺盛的生命力,高表达PCNA蛋白、低表达caspase-3蛋白,是一群具有肿瘤干细胞特征的细胞.Bcrp1+的HeLa细胞中可能含有宫颈癌干细胞.  相似文献   

14.
卵巢癌是我国最常见的妇科恶性肿瘤之一,70%的患者确诊时已届晚期,故5年生存率极低。腹膜种植、转移是卵巢癌细胞转移的主要方式,也是卵巢癌患者致死的主要原因。CD44是目前研究较多的腹膜转移相关黏附分子,它主要介导细胞与细胞、细胞与基质之间的黏附,进而参与肿瘤的侵袭和转移。我们尝试以CD44反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)体外转染卵巢癌细胞系CAOV3,观察其对癌细胞黏附和侵袭能力的影响。  相似文献   

15.
目的:探讨原因不明复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)与蜕膜CD4+ CD25+ T细胞和CD8+ CD28-T细胞的关系。方法:采用流式细胞四色荧光法,检测原因不明复发性流产17例(URSA组)和正常早孕人流20例(对照组)的蜕膜CD4+ CD25+ T细胞及其FoxP3(+)表达,CD8+ CD28- T细胞及其表面CD95、CD95L表达。结果:两组蜕膜中CD4+ CD25+ T细胞比例无明显差异(P>0.05),URSA组蜕膜CD4+ CD25+ T细胞中FoxP3阳性率明显低于对照组(P<0.0001)。两组蜕膜CD8+ CD28- T细胞比例及其细胞表面CD95和CD95L的阳性表达率均无明显差异(P>0.05);结论:蜕膜CD4+ CD25+ FoxP3(+)T调节细胞明显减少,是导致URSA患者母胎界面免疫耐受异常的重要原因。  相似文献   

16.
免疫抑制是母体成功妊娠必需的,近来研究认为CD4+CD25调节性T细胞(Treg)是免疫抑制机制中的关键成分.该类细胞是Treg的重要亚群,在体内自然存在,能分泌白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β),表达IL-2Rα(CD25),细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4)分子等.在早、中期妊娠,母体全身和蜕膜的CD4+CD25Treg比率明显增加,通过细胞直接接触的方式抑制效应性T细胞的活性及分泌抑制性细胞因子等,可能在人类妊娠中扮演重要的角色.  相似文献   

17.
目的:探索宫颈癌细胞系HeLa、SiHa中侧群细胞(SP)的分选方法,并初步探讨其生物学特性.方法:流式细胞术(FACS)检测Hoechst 33342染色后的人宫颈癌HeLa、SiHa细胞系,明确SP细胞所占比例.免疫细胞化学法检测SP与non-SP细胞中乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的表达.比较SP和non-SP细胞体内免疫缺陷鼠的致瘤性.比较SP、non-SP及HeLa细胞的自我更新和化疗耐受性.结果:HeLa、SiHa细胞系中SP细胞分选比例分别为(1.07±0.32)%和(0.83±0.76)%.SP细胞中BCRP表达显著高于non-SP细胞.HeLa细胞中分离出的SP与non-SP细胞的致瘤率、致瘤潜伏期及瘤体体积无显著差异;而SiHa细胞中分离出的SP与non-SP细胞比较,致瘤潜伏期较短、肿瘤体积较大.体外培养7天后,SP细胞的生长速度显著高于non-SP与HeLa细胞.曲古霉素(TSA)浓度在0.05 μmol/L时对细胞的抑制作用最明显,其作用于SP细胞72h后的存活分数(SF)[(86.68±8.78)%]显著高于non-SP细胞[(49.06±6.26)%]及未分选的HeLa细胞[(43.69±4.84)%](P<0.05).结论:SP细胞中可能含有大量干细胞样肿瘤细胞,具有很强的增殖、再生能力及化疗耐受性,可为宫颈癌临床治疗研究提供新的靶点.  相似文献   

18.
19.
目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞及CD28、CTLA-4协同刺激分子在人孕早期母胎免疫耐受中的作用机制。方法:以15例黄体期育龄妇女外周血为对照,应用流式细胞术对15例早孕期正常妊娠者、15例早孕期自然流产患者外周血淋巴细胞中CD4+CD25+T细胞亚群及CD28、CTLA-4分子的表达进行分析。结果:早孕期正常妊娠者外周CD4+CD25+T细胞比例显著高于早孕期自然流产患者及黄体期育龄妇女(P<0.05);早孕期自然流产患者外周CD28分子的表达水平显著高于早孕期正常妊娠者及黄体期育龄妇女(P<0.05);各组淋巴细胞基本不表达表面CTLA-4(CTLA-4s)分子,而均表达细胞内CTLA-4(CTLA-4i)分子,各组间CTLA-4i分子表达水平比较无显著性差异。结论:人早孕期外周CD4+CD25+调节性T细胞比例下降及CD28分子表达水平上升可能与早期妊娠失败有关。  相似文献   

20.
目的评价免疫调节T细胞和细胞因子在再生障碍性贫血(再障)细胞免疫功能紊乱中的作用。 方法2004 02—2005 06中山大学第二附属医院采用流式细胞术检测27例特发性再障患儿骨髓及外周血淋巴细胞亚群和CD+4CD+25T细胞水平,ELISA检测骨髓转化生长因子(TGF β1)和Flt 3L水平,并与正常儿童对照。 结果与对照组比较,初诊再障患儿外周血和骨髓CD+8T细胞均显著增高(P<0.05),重型再障(SAA)组伴外周血CD-3CD+56NK细胞及骨髓B细胞显著下降(P<0.05)。初诊SAA组骨髓CD+4CD+25T细胞\[(7.5±3.4)%\]显著高于对照组\[(4.3±0.9)%,P<0.05\],初诊SAA组及轻型再障(MAA)组骨髓CD+4CD+25/CD+4比值分别为(28.9±11.1)%和(28.2±9.4)%,均显著高于对照组\[(17.4±0.9)%,P均<0.05\],骨髓TGF β1分别为(2.2±1.7)μg/L和(2.0±0.6)μg/L,均较对照组[(4.4±0.9)μg/L]显著降低(分别为P<0.01、P<0.05),而Flt 3L水平分别为(1031.1±321.8)ng/L和(694.7±424.7)ng/L,均较对照组[(63.0±37.5)ng/L]显著增高(P均<0.01)。缓解期SAA儿童除外周血CD+8T细胞仍较对照组显著增高外,其余上述指标均接近正常水平。相关分析显示,骨髓CD+4CD+25T细胞与CD+3CD+4T细胞呈显著正相关(r分别为0.495、0.540,P<0.01);Flt 3L与骨髓CD+3、CD+4、CD+8T细胞及CD+4CD+25T细胞均呈显著正相关(r分别为0.732、0.542、0.688、0.405,P分别<0.01、0.01、0.01、0.05),而TGF β1与骨髓CD+8T细胞和Flt 3L水平呈显著负相关(r分别为-0.431、-0.482,P分别<0.05、<0.01)。 结论儿童再障发病与CD+4CD+25T细胞数量缺乏无关,骨髓TGF β1水平显著降低和Flt 3L水平显著增高可能在再障儿童T淋巴细胞数量增多和功能紊乱中起重要作用。  相似文献   

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