转录因子Hand2在妊娠期糖尿病胎鼠心脏发育过程中的表达

目的：了解妊娠糖尿病（ gestational diabetes mellitus,GDM）母鼠胎鼠心脏发育过程中碱性螺旋-环-螺旋蛋白（ basic helix-loop-helix,bHLH）转录因子Hand2表达的变化规律,探讨其在GDM胎鼠心脏发育异常中的作用机制。方法：114只成年雌性SD大鼠,空白对照组（ n＝24）、GDM组（ n＝30）、阴性对照组（ n＝30）及GDM＋胰岛素干预组（ n＝30）;空白对照组不予任何处理;GDM组腹腔注射2％链脲佐菌素（ streptozotocin,STZ;每只40 mg /kg）;阴性对照组腹腔注射等量的柠檬酸－柠檬酸钠缓冲液（ STZ溶剂）;GDM＋胰岛素干预组在GDM建模成功后皮下注射中效胰岛素控制空腹血糖在正常范围。给药72 h后每天测血糖及体质量,各组分别于孕12 d （ embryotic day 12, E12）、E15和E19剖取胎鼠心脏组织HE染色观察心脏组织病理变化,免疫组化检测Hand2蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测Hand2 mRNA的表达,Western blotting检测Hand2蛋白表达的变化。结果：各组Hand2蛋白的表达呈动态变化：E12可见表达,E15时表达增加,E19时Hand2蛋白表达最高,E12和E15 GDM组Hand2 mRNA及蛋白在胎鼠心肌细胞中的表达呈现下降趋势,差异有统计学意义（ P＜0．05）。结论：妊娠糖尿病母鼠其胎鼠心脏发育异常的发生率明显升高;Hand2 mRNA及蛋白在妊娠糖尿病胎鼠E12和E15心脏表达水平明显下降,提示与GDM胎鼠心脏发育异常相关。     

GATA-4在妊娠期糖尿病胎鼠心脏中的表达

 目的：了解妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus, GDM）胎鼠心脏发育过程中锌指转录因子GATA结合蛋白4（GATA binding protein 4, GATA-4）的变化规律,为深入探讨其在GDM胎鼠心脏发育异常中的作用机制奠定基础。方法：80只SPF级成年SD雌鼠随机分为对照组（n=40）和GDM组（n= 40）,通过阴道涂片确定受孕后,GDM 组予腹腔注射2%链脲佐菌素（streptozotocin, STZ;每只40 mg/kg）,对照组予腹腔注射等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。给药72 h后每天监测血糖,各组分别于孕12、15、19 d剖取胎鼠心脏组织,HE染色观察心脏组织病理变化,免疫组化检测GATA-4的表达,实时荧光定量RT-PCR检测GATA-4 mRNA的表达,Western blotting检测GATA-4蛋白的变化。结果：对照组及GDM组GATA-4蛋白的表达呈动态变化：孕12 d可见表达,孕15 d表达最高,孕19 d表达下降;与对照组相比,GDM组GATA-4 mRNA及蛋白的表达呈现下降趋势,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：妊娠期糖尿病胎鼠心脏发育异常率显著增高,GATA-4与GDM胎鼠心脏发育异常可能有相关性。     

糖尿病妊娠胎鼠胰β细胞分泌颗粒的立体定量分析

目的：探讨糖尿病妊娠时胎鼠胰β细胞中分泌颗粒的变化。方法;取Ｗｉｓｔａｒ大鼠制作糖尿病妊娠模型,于妊娠第１７,１８,１９,２０天取胎鼠胰腺,进行透射电镜观察及立体重建等立体定量分析。结果;正常对照组第１９天β颗粒的所有参数显著大于第１８天的;而在实验组,１８天β颗粒的所有参数显著大于第１７天内。实验组于对照组比较,第１７,１８天β颗粒的平均直径,平均体各,平均表面积及体密度较对照组的显著增加,而且     

糖尿病妊娠胎鼠胰岛β细胞的形态学和体视学研究

本实验选用雌性Wistar大鼠，妊娠第一天腹腔注射四氧嘧啶（15mg/100g体重），分别于妊娠第17，18，19，20天剖腹取胎胰，一部分用改良Bouin液固定，石腊包埋切片，HE染色及免疫组织化学PAP法显示β细胞，并测定β细胞的数面密度和体密度，另一部分常规电镜制片及观察，结果显示，实验组β细胞的数面密度均显高于对照组，第17，18天实验组胎鼠β细胞分泌颗粒较对照组的增大，数量增多，而17天胎鼠胰岛为非常不规则的内分泌细胞团，对胰岛素抗血清呈阳性反应的细胞少，阳性反应弱，随着胎鼠的生长发育胰岛细胞逐渐聚集成条索状或团块状，阳性细胞增多，阳性反应渐增强，上述结果提示：妊娠高血糖可以促进胰岛β细胞数量增多，分泌颗粒成熟。     

Bcl-2在人胎肠系膜淋巴结发育中的表达

目的探讨Bcl-2免疫反应阳性细胞在肠系膜淋巴结组织发生过程中的分布及表达情况。方法收集因故终止妊娠人胎回肠33例,采用免疫组织化学SABC法染色显示Bcl-2免疫反应阳性细胞,用BioMiaspro图像分析软件对免疫反应阳性细胞进行计数,有关数据做统计学分析。结果9周胎龄人胎肠系膜淋巴结原基内开始出现极少的免疫反应阳性细胞,随胎龄的增长Bcl-2免疫反应阳性细胞数量随淋巴细胞数量增加而增加,尤以21~28周数量最多（P〈0.05）。Bcl-2阳性细胞早期散在分布,21周以后逐渐在淋巴小结聚集成团,在副皮质区呈集落样分布。随胎龄增长,Bcl-2免疫反应阳性强度略增加,13~20周Bcl-2免疫反应阳性强度最强（P〈0.05）。结论Bcl-2在人胎肠系膜淋巴结的组织发生过程中起重要的调节作用。     

血清胎球蛋白A、胎球蛋白B在妊娠期糖尿病中的表达及其与妊娠结局的关系

目的探讨血清胎球蛋白A(Fetuin A)、胎球蛋白B(Fetuin B)在妊娠期糖尿病(GDM)中的表达及其与妊娠结局的关系。方法于2018年10月至2019年5月期间,选取在我院进行治疗的GDM患者82例作为GDM组,根据患者的妊娠结局将其分为不良妊娠组(32例)和正常妊娠组(50例)。另选取同期在我院进行产检的健康孕妇50例作为对照组。收集所有研究对象一般资料并检测血清Fetuin A、Fetuin B水平,另收集GDM组患者的收缩压、舒张压、总胆固醇、三酰甘油、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)等指标,分析GDM患者不良妊娠结局的危险因素,采用受试者操作特征曲线(ROC)分析血清Fetuin A、Fetuin B对GDM患者不良妊娠结局的预测价值。结果GDM组的孕前体质量指数、Fetuin A、Fetuin B均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不良妊娠组的年龄、FBG、HbA1c、Fetuin A、Fetuin B均高于正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析显示,血清Fetuin A、Fetuin B对GDM患者不良妊娠结局均有一定的预测价值,Fetuin A的曲线下面积为0.758,Fetuin B的曲线下面积为0.676,且二者联合检测可进一步提高预测价值;Logistic分析显示,年龄、FBG、HbA1c、Fetuin A、Fetuin B均是GDM患者不良妊娠结局的危险因素(P<0.05)。结论血清Fetuin A、Fetuin B在GDM中呈异常高表达,且二者均为GDM患者不良妊娠结局的危险因素,联合检测对患者的妊娠结局有一定的预测价值。     

孕大鼠和胎鼠心脏系统混沌特征分析

应用计算机化大鼠心电信号采集和处理系统,引导妊娠第21dSD大鼠和胚胎宫内心电,记录母胎鼠心动周期信号混沌图形参数和数值参数,探讨正常妊娠大鼠母胎心脏系统混沌特征,分析母胎鼠自主神经系统发育的差异性。结果显示,(1)正常胎鼠与孕鼠比较,频率和电压较低,差异均有显著性(P<0.01);(2)正常胎鼠和孕鼠心动周期信号功率谱具有类似于人的心动周期信号功率谱三峰特征;正常胎鼠和孕鼠比较,第二峰、第三峰明显较低;(3)正常胎鼠与孕鼠比较,相对分散度、李雅普诺夫指数和分维数均显著较低,差异均有显著性(P<0.01)。本研究表明,正常胎鼠心动周期信号变化的复杂性低于孕鼠,胎鼠心脏混沌程度低于孕鼠,胎鼠自主神经系统发育尚不成熟。     

高原低氧下妊娠大鼠胎盘葡萄糖转运体1的表达及其对胎鼠生长发育的影响

目的 ：分析高原低氧下妊娠大鼠胎盘组织中葡萄糖转运体1(GLUT1)的表达及其对胎鼠发育的影响。方法：将20只妊娠大鼠随机分为常氧组和低氧组,妊娠第9天常氧组常规饲养（平均海拔2 200 m）,低氧组饲养于低压氧舱（模拟海拔5 000 m）,2组妊娠大鼠饲养至妊娠21 d尾静脉采血测定空腹血糖,留取腹主动脉血ELISA法测量血清胰岛素浓度,取出胎盘和胚胎,比较常氧组和低氧组胎盘质量、胎鼠体质量及身长,H-E染色光镜下观察2组胎盘结构,分别采用RT-qPCR和免疫组织化学检测妊娠大鼠胎盘组织中GLUT1 mRNA和蛋白的表达情况,分析胎鼠体质量及身长与妊娠大鼠空腹血糖、胎盘GLUT1蛋白相对表达量的相关性。结果 ：与常氧组相比,低氧组妊娠大鼠空腹血糖下降,血清胰岛素浓度升高;低氧组胎盘质量无变化,低氧组胎鼠体质量及身长降低。光镜下观察,低氧组滋养细胞排列紊乱,细胞间隙增宽,毛细血管扩张,可见大量红细胞。低氧组妊娠大鼠胎盘组织中GLUT1 mRNA的表达上调;GLUT1阳性细胞分布于滋养细胞、红细胞,主要位于细胞膜,且低氧组GLUT1蛋白表达水平增高。Pearson相关性分析显示胎鼠体质量...     

人胎发育过程中Bcl-2和Bax蛋白在小肠中的表达

目的 探讨人胎小肠发育过程中肠壁细胞增殖与凋亡的变化规律,及相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl相关蛋白(Bax)在小肠生长发育中的表达意义.方法 应用免疫组织化学ABC法检测第2、3、4三个月胎龄段,人胎小肠肠壁组织内Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 第2、3、4三个月胎龄段,小肠肠壁肌间神经丛和黏膜下神经丛内均有Bcl-2阳性细胞分布,Bax在小肠黏膜层上皮细胞的细胞质内广泛表达.结论 Bcl-2/Bax蛋白在人胎小肠的生长发育过程中起重要的调节作用.     

中间丝蛋白在胎肺发育分化中的表达

中间丝蛋白作为细胞骨架的主要成份，对于它们与细胞其他结构的相互关系，尤其在细胞发育分化过程中，这些蛋白的表达及其生物学意义，人们的理解远不如微管和微丝，本文用抗中间丝蛋白的单克隆抗体的免疫组化反应，对人胎肺发育分化过程中间丝蛋白的表达进行观察，结果表明，胎肺发育分化阶段中间丝蛋白在一定的时期表现出两种或两种以上种类的共同表达，这与成体细胞中间丝蛋白的高度特异性存在显而易见的差异，本文对于中间丝蛋白     

CO_2气腹对胎鼠脑超微结构和Caspase-3表达的影响

目的探讨CO2气腹对胎鼠脑组织结构及脑组织Caspase-3表达的影响。方法选择不同CO2气腹压力,建立孕鼠的CO2气腹模型,于鼠孕17 d的24 h内取胎鼠脑组织分别进行HE染色、免疫组化、电镜制片,观察胎鼠脑组织结构变化和胎鼠脑组织Caspase-3表达。结果透射电镜观察显示随气腹压力的增加,胎鼠脑组织可见细胞轻微可逆性损害。Caspase-3在实验组与对照组间胎鼠脑组织表达无明显变化（P〉0.05）,同时组间Caspase-3的表达也无显著性差异（P〉0.05）。结论 CO2气腹压力升高对胎鼠大脑细胞产生可逆性轻度损伤。     

E_15胎鼠内侧膝状体超微结构观察

取E_(15).胎鼠内侧膝状体,固定、脱水、包埋、超薄切片,透射电镜观察.神经细胞散在分布,细胞核偏位,表面呈齿状,核膜下染色质较浓密.细胞浆含大量游离核糖体,粗面内质网已出现.线粒体嵴数目少,而其基质密度高.高尔基复合体的扁平囊可达5层之多.胞浆中可见中空的大泡.神经细胞的突起较少.本文认为E_(15)内侧膝状体处于巳分化、低发育状态.     

C反应蛋白表达在2型糖尿病大血管病变中意义

目的:探讨C反应蛋白(CRP)与2型糖尿病(T2DM)大血管病变发生的关系。方法:将T2DM患者60人随机分为合并大血管并发症组与无大血管并发症组,每组各30例,正常对照组30例。检测病人血清中血脂、糖化血红蛋白(HbA1c)和CRP水平。结果:2型DM患者的CRP水平明显高于正常对照组(P<0.05),其中有大血管并发症组显著高于无大血管并发症组(P<0.05),Logstic回归分析显示,CRP水平是T2DM患者大血管并发症发生的独立危险因素。结论:CRP与T2DM的发生相关,升高的CRP是促使T2DM并发大血管病变的独立危险因素。     

nNOS和iNOS在神经管畸形胎鼠大脑皮质中的表达及意义

目的 研究乙烯硫脲（ETU）致神经管畸形胎鼠大脑皮质中nNOS和iNOS表达情况,进一步探讨nNOS和iNOS在脑发育中的作用。方法 应用免疫荧光、Western—blot及Real—time PCR方法检测nNOS和iNOS在正常胎鼠、ETU致畸的神经管畸形胎鼠的大脑皮质表达情况并进行定位、定量分析。结果 nNOS在给药无畸形组、脊柱裂畸形组胎鼠大脑皮质中的表达与正常对照组相比无明显差异（p〉0．05）,而在脑膜膨出组胎鼠大脑皮质中nNOS的表达与正常对照组明显减少（p〈0．01）;iNOS在各组均未检测到。结论 nNOS在脑膨出的胎鼠大脑皮质中表达明显减少,提示nNOS参与了脑异常发育过程。     

维甲酸下调高氧暴露下胎鼠肺成纤维细胞及Ⅱ型肺泡上皮细胞MMP-2表达

目的探讨维甲酸(RA)对高氧暴露下胎鼠肺成纤维细胞(LFs)和肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)基质金属蛋白酶-2 (MMP -2 )表达的影响及调控。方法原代培养胎鼠肺LFs及AECⅡ,待其生长至亚汇合状态时,随机分为:空气组、空气+RA组、高氧组和高氧+RA组。于培养2、6、12、2 4和4 8(AECⅡ)或72h(LFs)时,采用半定量RT- PCR方法检测MMP 2和TIMP 2mRNA表达,应用Westernblot检测p38和磷酸化p38(p p38)蛋白表达水平。结果(1)与空气组比较,高氧可促进胎鼠LFs、AECⅡMMP 2mRNA和胎鼠LFsp p38表达(P <0 . 0 1或P <0. 0 5 ) ;(2 )RA能部分下调高氧诱导的胎鼠LFs、AECⅡMMP 2mRNA高表达和明显降低胎鼠LFsp p38表达;(3)高氧、RA对胎鼠LFs、AECⅡTIMP -2mRNA和胎鼠LFsp38蛋白表达无明显影响;(4)胎鼠LFsp p38与MMP 2mRNA表达呈显著性正相关(r =0. 76 7,P <0. 0 1,n =18)。结论高氧可促进胎鼠LFs、AECⅡMMP 2mRNA表达;p38通路参与高氧状态下胎鼠LFsMMP -2表达调控;RA可在转录后水平调节p38的活性状态从而实现对MMP-2的表达调控。     

胎鼠胰腺干细胞原位移植治疗糖尿病的实验研究

目的：原位移植胎鼠胰腺干细胞，探讨其在糖尿病鼠胰腺微环境中转分化为胰岛样细胞团的可行性。方法：分离纯化SD大鼠胎鼠胰腺干细胞；荧光原位杂交（fluorescent in situ hybridization, FISH）检测SRY上的性别决定区（sex determining region on Y, SRY）以鉴别雄雌；免疫细胞化学检测巢蛋白（Nestin）、胰十二指肠同源异型盒基因（PDX-1）的表达及流式细胞术测定Nestin细胞含量以鉴定胰腺干细胞；分胰腺实质内移植组、实验对照组及空白对照组，10只/组；监测各组大鼠血糖及血浆胰岛素含量，8周后取大鼠胰腺组织切片观察，FISH检测SRY，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）观察各组大鼠胰腺内Nestin、PDX-1及胰岛素等mRNA的表达情况，免疫印迹（Western blotting）检测PDX-1及胰岛素的蛋白表达水平。结果：有5只胎鼠经FISH检测为雄性。免疫组化示存在Nestin 和PDX-1阳性细胞，流式细胞术测定Nestin阳性细胞含量占74.1%。胰腺实质内移植组大鼠于移植后第3周血糖开始下降，血浆胰岛素水平逐渐升高；第5周血糖及血浆胰岛素均达到正常水平并维持。取第8周大鼠胰腺组织切片HE染色可见外源性细胞团，FISH检测SRY阳性。RT-PCR示胰腺实质内移植组胰腺组织内胰岛素的mRNA表达明显高于实验对照组（P<0.05），而Nestin及PDX-1的mRNA表达量高于实验对照组及正常组（P<0.05）。Western blotting示干细胞移植组胰腺组织内胰岛素含量接近正常大鼠（P>0.05），而PDX-1的含量高于正常大鼠(P<0.05)。结论：胎鼠胰腺干细胞原位移植后可在体内转分化为胰岛样细胞团且具有良好的功能，移植后可使血糖降至正常，胰腺干细胞原位移植可能为1型糖尿病的治疗提供了一个新的策略。     

Nkx2-5、GATA-4转录因子在心脏发育中的作用

心脏是胚胎发育过程中最先形成的器官。导致心脏形成和发育的确切机制目前还不清楚。转录因子以组织特异性和定量的方式调节其它器官形成和发育 ,从而在胚胎发育过程中起主要的调节作用。转录因子在心脏发育过程中可以调节心肌特异性基因的表达。     

叉头框C2在小鼠胚胎淋巴管发育中的作用

目的:通过研究叉头框C2(Foxc2)和淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)在胚胎淋巴管的表达模式,探讨Foxc2在小鼠胚胎淋巴管发育中的作用.方法:以LYVE-1为淋巴管特异标识物,用免疫组织化学方法研究Foxc2在小鼠胚胎淋巴管发生过程的表达模式.结果:从E10.5开始,在小鼠胚胎颈、胸部背主动脉旁出现Foxc2,呈强阳性表达的淋巴囊.E13.5时,在胸段脊椎两侧、脊椎腹侧的软组织和脊椎背侧的体表外胚层等组织中形成小淋巴管网,但无Foxc2染色.小淋巴管沿体纵轴方向延伸,其间有横向毛细淋巴管联系.E15.5以后,Foxc2蛋白仍在脊椎腹侧大的淋巴管内壁内皮细胞核强表达.在胚胎发育后期,表皮下毛细淋巴管数量增多,中、小淋巴管形成,但皮下以及其他部位的毛细淋巴管则未见Foxc2表达.结论: Foxc2参与了小鼠胚胎早期胸、颈部淋巴囊和中心大淋巴管的形成,胚胎中期的大淋巴管塑形仍需要Foxc2.     

TBX5基因在心脏发育中的作用

近年来 ,国内外学者对控制心脏发育的相关基因做了大量的研究工作 ,其中转录因子在心脏发育中的作用成为研究热点。 TBX5转录因子在早期心脏发育 ,尤其是在心房和左心室的发育中起着关键的不可替代的作用。本文从结构特征、在心脏发育中的作用及可能的作用机制几方面对 TBX5近几年的研究进展作一综述     

视黄酸及相关基因在心脏发育中的作用

视黄酸是维生素A在体内重要的生物活性形式,在胚胎和胎儿发育的关键阶段发挥着重要作用。视黄酸水平过高或过低可导致心脏发育异常,但其导致心脏畸形的确切机制尚不明确。本文就视黄酸的生物学特性、视黄酸异常导致的心脏畸形及其与相关心脏转录因子在心脏发育中的作用作一综述。