IL-34 诱导肺成纤维细胞IL-6、IL-8 表达机制研究

目的:探究IL-34诱导肺成纤维细胞IL-6、IL-8表达的分子机制。方法:体外培养原代人肺成纤维细胞,给予外源性重组IL-34刺激,检测IL-6、IL-8 mRNA和蛋白的变化及MAPK、PI3K-Akt、JAK等信号通路的活化;MAPK、PI3K-Akt、JAK等信号分子抑制剂预处理细胞,观察IL-34刺激IL-6、IL-8 mRNA和蛋白的变化。结果:IL-34可以诱导肺成纤维细胞中IL-6、IL-8表达上调及MAPK、PI3K-Akt、JAK、NF-κB信号通路的活化;特异性信号分子抑制剂可以逆转IL-34诱导肺成纤维细胞中IL-6、IL-8 mRNA和蛋白表达的升高。结论:IL-34可以诱导肺成纤维细胞中IL-6、IL-8表达上调,MAPK、PI3K-Akt、JAK、NF-κB等多种信号通路参与了IL-34诱导IL-6、IL-8表达的信号转导过程。     

DIXDC1的生物学特性及其与肿瘤的关系

DIXDC1是一种含有Dishevelled-Axin(DIX)和coiled-coil(MTH)两种结构域的蛋白,也是Wnt信号通路的正向调节分子,在细胞周期、神经系统发育和行为认知等方面均发挥着重要作用。DIXDC1在多种肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用,能够激活PI3K/AKT信号通路,促进结肠癌细胞的增殖;激活PI3K-AKT/AP-1信号通路,促进肺癌组织细胞的侵袭和迁移;激活Wnt信号通路,调节β-catenin入核,进而促进胃癌细胞的侵袭和迁移。由于DIXDC1在肿瘤中产生的巨大作用,为肿瘤治疗提供了一个潜在靶点。     

PI3K/AKT信号通路与艾滋病相关的研究进展

PI3K/AKT信号通路不仅在众多肿瘤疾病的发生发展中发挥重要作用,其在艾滋病(AIDS)的相关研究中也具有重要作用.通过对近年来与AIDS相关的PI3K/AKT信号通路的研究进行检索、整理,发现PI3K/AKT信号通路不仅对HIV-1的各种靶细胞,包括单核-巨噬细胞、胶质细胞、淋巴细胞、树突状细胞等的感染发挥重要作用...     

NOX-4调控PI3K信号通路参与TGF-β1诱导肺癌细胞表达I型胶原蛋白

 目的：研究NADPH氧化酶4（NOX-4）调控PI3K信号通路在转化生长因子β1（TGF-β1）诱导肺癌细胞表达I型胶原蛋白（collagen I）的作用及分子机制。方法：体外培养人肺癌A549细胞,予TGF-β1刺激后,观察NOX家族和collagen 家族的mRNA和蛋白表达的变化,以及PI3K class I催化亚基的表达和PI3K信号通路活化的变化;NOX-4抑制剂二亚苯基碘鎓（DPI）预先处理肺癌细胞,观察TGF-β1刺激后 collagen I的mRNA和蛋白表达的变化以及PI3K class I催化亚基表达和PI3K信号通路活化。结果：TGF-β1可以诱导肺癌细胞中NOX-4和collagen I的mRNA和蛋白表达升高,并诱导PI3K class I催化亚基中PIK3CD表达升高和PI3K信号通路的活化。NOX-4抑制剂DPI可以抑制TGF-β1诱导的collagen I表达升高;抑制NOX-4并不影响TGF-β1诱导的PI3K催化亚基PIK3CD表达,但可以降低TGF-β1诱导PI3K信号通路的活化程度。结论：NOX-4经调控PI3K信号通路的活化参与了TGF-β1诱导肺癌细胞表达collagen I的分子机制。TGF-β1/NOX-4/PI3K信号通路轴在肺癌细胞collagen I的表达中发挥了调控作用。     

NOX-4调控PI3K信号通路参与TGF-β1诱导肺癌细胞表达Ⅰ型胶原蛋白

目的:研究NADPH氧化酶4(NOX-4)调控PI3K信号通路在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺癌细胞表达Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ)的作用及分子机制。方法:体外培养人肺癌A549细胞,予TGF-β1刺激后,观察NOX家族和collagen家族的mRNA和蛋白表达的变化,以及PI3K class I催化亚基的表达和PI3K信号通路活化的变化;NOX-4抑制剂二亚苯基碘鎓(DPI)预先处理肺癌细胞,观察TGF-β1刺激后collagen Ⅰ的mRNA和蛋白表达的变化以及PI3K class I催化亚基表达和PI3K信号通路活化。结果:TGF-β1可以诱导肺癌细胞中NOX-4和collagen Ⅰ的mRNA和蛋白表达升高,并诱导PI3K class I催化亚基中PIK3CD表达升高和PI3K信号通路的活化。NOX-4抑制剂DPI可以抑制TGF-β1诱导的collagen Ⅰ表达升高;抑制NOX-4并不影响TGF-β1诱导的PI3K催化亚基PIK3CD表达,但可以降低TGF-β1诱导PI3K信号通路的活化程度。结论:NOX-4经调控PI3K信号通路的活化参与了TGF-β1诱导肺癌细胞表达collagen Ⅰ的分子机制。TGF-β1/NOX-4/PI3K信号通路轴在肺癌细胞collagen Ⅰ的表达中发挥了调控作用。     

PI3K-AKT-mTOR信号通路在细胞分化中的作用

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)及其下游分子AKT、TSC1/2和mTOR所组成的信号通路参与增殖、凋亡等多种细胞功能的调节。近年来发现,这一信号通路与细胞的分化密切相关。细胞分化的异常可以引起多种疾病,肿瘤就是一种分化异常的疾病,而PI3K-AKT-mTOR信号传递通路调节失常在肿瘤中最为常见,因此本文旨在综述PI3K-AKT-mTOR信号通路在细胞分化和肿瘤中的作用。     

PI3K/Akt/mTOR信号转导通路与肿瘤

近年来,信号转导通路与肿瘤已成为了研究热点,而无论在生理还是病理条件下磷脂酰肌醇3激酶和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号转导通路在抑制凋亡、促进增殖方面都是一条重要的信号转导通路,并且PI3 K/Akt/mTOR信号传导通路在肿瘤治疗的研究中同样也发挥着重要作用.因而,研究PI3K/Akt/mTOR信号转导通路和主要组成部分以及PI3K、Akt、mTOR抑制剂具有重要意义.     

基于网络药理学探讨白藜芦醇抗衰老的作用机制

目的:运用网络药理学方法探寻白藜芦醇抗衰老的关键靶点及分子作用机制。方法:通过PharmMapper数据库查找白藜芦醇的作用靶点;采用GeneCards数据库搜索衰老的相关蛋白。将白藜芦醇作用靶点和疾病靶点取交集,即为白藜芦醇抗衰老潜在靶点。采用STRING数据库找出靶点的作用关系,以DAVID数据库分析结果,Cytoscape3.8.0软件构建药物-疾病-靶点-通路网络。结果:从PharmMapper得到的91个白藜芦醇(Resveratrol,Res)作用靶点,GeneCards数据库得到的474个衰老相关靶点,两者取交集后共得到22个白藜芦醇抗衰老的作用靶点。在蛋白相互作用网络中IGF1、ESR1、MAPK1和EGFR处于核心位置。在GO富集分析和KEGG通路分析中,EGFR、MAPK1和IGFR均存在于PI3K-Akt通路、FoxO通路和HIF-1通路中。在药物-疾病-靶点-通路网络中,EGFR和MAPK1处于核心位置。结论:Res通过EGFR、MAPK1、IGFR调节PI3K-Akt和FoxO通路抗衰老。     

PI3K-AKT信号通路及其在类风湿性关节炎滑膜细胞增殖和凋亡中的作用

PI3K-AKT信号通路是重要的细胞内信号转导通路,与类风湿性关节炎(RA)的发生发展密切相关。该信号通路的活化状态受到严密调控:包括负调控因子PTEN、SHIP和正调控因子TNF-α、TGF-β、TRAIL等。RA患者滑膜细胞中此信号通路处于异常激活状态,导致下游抗凋亡基因高表达并且影响下游多种效应分子,在RA患者关节滑膜细胞增殖和凋亡失衡中发挥关键作用。过度增生的滑膜细胞向关节软骨和骨组织浸润生长,导致患者关节畸形和功能障碍。因此,使用PI3K-AKT信号通路抑制剂或上调该信号通路中的内源性负性调节蛋白的表达可逆转RA滑膜细胞的过度增殖,为治疗此疾病提供新靶点。     

蛋白激酶C在缺血预适应中的作用

缺血预适应作为一种强大的内源性心肌保护作用，其机制至今尚无定论。在不同实验模型上由不同的机理所介导。人们相信这种普遍存在于动物及人类心脏的保护作用，应有一种共同存在的机制。研究表明，蛋白激酶 Ｃ 在缺血预适应保护机制中起着重要的共同通路作用，成为其细胞跨膜信号传递的中枢环节。     

cAMP信号分子在缺血后适应心肌保护机制中的作用

目的: 研究cAMP信号分子在缺血后适应保护心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法: 制备大鼠心脏Langendorff离体灌流模型,51只大鼠随机分为6组:正常对照组、缺血再灌注组、缺血再灌注后适应组、缺血再灌注后适应+洛利普兰组、缺血再灌注后适应+SQ22536组和缺血再灌注+洛利普兰组。实时记录左室压和冠脉流量,并收集冠脉流出液,再灌注结束时检测其中的乳酸脱氢酶和肌酸激酶的释放,real-time PCR检测凋亡调节因子caspase-3 mRNA表达及bax/bcl-2比值。结果: 缺血再灌注可使心脏左室发展压显著下降、冠脉流量显著减少,冠脉流出液中乳酸脱氢酶和肌酸激酶释放显著增加,caspase-3 mRNA表达及bax/bcl-2比值显著增加。而缺血后适应处理能缓解缺血再灌注所造成的损伤,磷酸二酯酶4抑制剂洛利普兰能增强后适应的保护作用,而腺苷酸环化酶抑制剂SQ22536则能使后适应的保护作用减弱。结论: cAMP信号分子可通过下调凋亡因子而参与缺血后适应的保护作用。     

基于网络药理学推测当归肉苁蓉配伍治疗功能性便秘的作用机制

目的:基于网络药理学方法探讨当归肉苁蓉配伍治疗功能性便秘(Functional constipation,FC)的作用机制.方法:基于公共数据库收集当归、肉苁蓉的活性成分、对应靶点信息和FC疾病靶点信息,交集靶点为共有靶点.Cytoscape 3.7.0构建"当归-肉苁蓉-活性成分-靶点网络"、"当归-肉苁蓉-活性成分-FC共有靶点网络",CytoNCA插件筛选关键基因,构建其蛋白互作网络,并通过DAVID数据库分别进行药物靶点和关键基因的GO功能和KEGG通路生物信息学分析.结果:收集到当归-肉苁蓉药对活性成分39个,包括β-谷甾醇、豆甾醇、阿魏酸等核心成分.成分相关靶点237个,FC疾病靶点2428个.当归-肉苁蓉药对靶点与疾病靶点的交集共有靶点132个,筛选到关键基因74个,涉及PTGS2、PTGS1、AKT1、VEGFA、TP53、CASP和MAPK等核心靶点.富集到TNF信号通路、p53信号通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等112条FC相关通路信息.结论:初步表明当归-肉苁蓉可能通过β-谷甾醇、豆甾醇、阿魏酸等关键活性成分,参与TNF信号通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等调节肠道功能,发挥其多成分、多靶点、多通路治疗FC的作用.     

RISK信号通路在心肌预处理及后处理中的作用

促生存激酶磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3-OH kinase,PI3K)和细胞外信号调节蛋白激酶1/2(extra-cellular signal-regulated protein kinase 1/2,ERK1/2)均为丝氨酸/苏氨酸激酶.缺血预处理(ischemic preconditioning,IPC)是1986年Murry等发现的一种内源性心肌保护现象,即预先反复短暂缺血/再灌注可以提高心肌组织对随后持续缺血/再灌注损伤的耐受性.2003年,Zhao等[1]相对于IPC首次提出缺血后处理(ischemic postconditioning),方法是在持续再灌注开始前进行反复短暂缺血/再灌注,与IPC一样,可以缩小心肌梗死面积.此后许多研究均证实了缺血后处理的心脏保护作用[2-4],而且还发现,心肌缺血后处理和缺血预处理以及模拟上述两者的药物后处理和药物预处理都于再灌注早期阶段通过磷酸化激活PI3K和ERK1/2减轻心肌缺血/再灌注损伤.Hausenloy等[5]首次将PI3K和ERK1/2两者合称为再灌注损伤挽救激酶(reperfusion injury salvage kinase,RISK)信号通路,本文就RISK信号通路在心肌预处理及后处理中的作用进行综述.     

丝胶对2型糖尿病大鼠胰腺胰岛素PI3K-Akt信号通路的调节作用

目的探讨丝胶是否通过影响胰腺胰岛素PI3K-Akt信号通路发挥降血糖的作用。方法 36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组,每组12只。采用高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素(35mg/kg,2次,1次/d)连续腹腔注射法制作2型糖尿病大鼠模型,模型成功标准是空腹血糖≥11.1mmol/L。模型成功建立后,丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃35d。采用ELISA法检测大鼠血清脂联素水平,Western blotting法和Real-time PCR法分别检测大鼠胰腺胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)和Akt蛋白和mRNA的表达情况。结果与糖尿病模型组比较,丝胶治疗组大鼠血清脂联素水平,胰腺IR、IRS-1、PI3K、Akt蛋白和mRNA的表达明显升高(P0.01,P0.05)。结论丝胶可通过上调糖尿病模型大鼠胰腺IR、IRS-1、PI3K和Akt的表达,改善糖尿病时胰腺胰岛素PI3K-Akt信号转导通路的异常,从而发挥降低血糖的作用。     

PI3K/Akt和JAK2/STAT3信号转导通路在SO_2抗大鼠肢体缺血再灌注致急性肺损伤中的作用

目的:探讨PI3K/Akt和JAK2/STAT3信号转导通路在二氧化硫(SO2)抗肢体缺血再灌注(I/R)致急性肺损伤中的作用。方法:应用双大腿根部绑扎止血带复制大鼠双后肢缺血再灌注肺损伤模型。在再灌注前20 min腹腔注射Na2SO3/Na HSO3;在再灌注前1 h静脉注射Stattic或LY294002。应用TUNEL、ELISA、Western blot等方法检测细胞凋亡、细胞因子表达及相关信号通路蛋白表达的情况。结果:与对照组相比,I/R组的MDA及MPO含量、肺系数、细胞凋亡指数、细胞因子表达以及p-STAT3、p-Akt蛋白的水平均显著增高;当应用Na2SO3/Na HSO3后,上述反映肺损伤的各项指标均下降。Western blot检测结果显示I/R后,肺组织中p-STAT3和p-Akt蛋白的水平均明显增加。而应用Na2SO3/Na HSO3后,p-Akt蛋白的水平继续增加,但p-STAT3蛋白的水平却减少(P0.05)。结论:JAK2/STAT3和PI3K/Akt信号通路都参与了SO2抗肢体缺血再灌注致急性肺损伤的作用。JAK2/STAT3通路的活化,能够使I/R损伤加重;相反,PI3K/Akt信号通路的活化,可以使I/R损伤减弱。此外,JAK2/STAT3和PI3K/Akt信号通路之间存在交互作用。     

全基因组表达谱芯片在筛选慢性牙周炎相关基因中的作用

文题释义：全基因组表达谱芯片：通过高通量平行检测基因的一种优越技术手段，可以在全基因的范围中检测慢性牙周炎的差异基因，进而快速的从分子水平为慢性牙周炎的治疗提供实验基础。 PI3K/Akt信号通路：广泛存在于各种细胞中，在细胞的增殖、分化、存活、凋亡、炎症等方面发挥着重要作用，并且该信号通路参与了以骨破坏为主要特征的骨质疏松、骨关节炎、骨肉瘤等疾病中。PI3K是位于细胞内的一种磷脂酰肌醇3激酶，可以激活丝氨酸/苏氨酸激酶Akt后，激活下游因子，进而影响细胞的增殖与凋亡。 背景：全基因组表达谱芯片是一种用于基因表达研究的技术手段，具有高度敏感性以及特异性，它可以在全基因组范围内检测与慢性牙周炎相关的差异基因，从而高效快速地发现与慢性牙周炎密切相关的因子。 目的：应用全基因组表达谱芯片筛选慢性牙周炎相关基因。 方法：选取15例正畸拔牙患者正常牙周膜组织作为对照组，21例慢性牙周炎患者牙周组织。比对4例慢性牙周炎组织和4例正常组织的全基因组表达谱芯片，筛选出上调基因及下调基因。通过Real-Time PCR(7例正常及13例患者)和Western Blot(4例正常及4例患者)对2组牙周膜组织中差异基因PI3K-Akt信号通路的表达进行验证。实验方案由海南医学院第一附属医院伦理委员会批准(批准号：HNM20180034)并获得所有患者的知情同意。 结果与结论：①全基因组表达谱芯片结果分析发现慢性牙周炎样本中均存在显著差异表达的上调基因1 565个，下调基因1 849个；②富集分析发现其中在慢性牙周炎中PI3K-Akt信号通路表达有显著差异(P < 0.001)；③Real-Time PCR及Western Blot 检测发现PI3K及Akt的mRNA和蛋白在慢性牙周炎中较对照组表达高(P < 0.05)；④结果说明，全基因组表达谱芯片在筛选慢性牙周炎相关基因的改变时具有快速且高敏感度等特点。PI3K-Akt信号通路在慢性牙周炎表达出现明显差异，为慢性牙周炎的治疗提供实验依据。 ORCID: 0000-0002-5099-3878(吴慧)；0000-0002-4258-2470(许诺) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程     

基于网络药理学分析冬虫夏草防治急性肾损伤的分子机制北大核心CSCD

目的：基于网络药理学分析冬虫夏草（CS）防治急性肾损伤（AKI）的分子作用机制。方法：应用中药系统药理学数据库（TCMSP）筛选CS的有效成分和作用靶点,从DisGeNET、GeneCards、OMIM、TTD数据库筛选AKI的疾病靶点,运用Cytoscape 3.8.0软件构建“药物-成分-疾病-靶点”可视化调控网络,采用String在线数据库构建CS与AKI共同靶点的蛋白互作网络,DAVID数据库和KEGG数据库对共同靶点进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,探讨其潜在分子机制。结果：CS中筛选得到有效成分9种,防治AKI的作用靶点63个。GO功能富集分析主要包括对药物的反应、信号转导、衰老、细胞增殖调控、细胞凋亡调控等。CS防治AKI的主要富集通路有PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、细胞凋亡通路、TNF信号通路、P53信号通路等。结论：通过网络药理学研究方法预测了CS防治AKI的有效活性成分及作用靶点,并通过PPI网络和KEGG富集分析推测了CS通过多条信号通路调节防治AKI,涉及细胞自噬、凋亡及炎症反应等多环节生物学过程。     

介导GDNF促进DA能神经细胞存活与分化的信号路径的研究

胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)可以通过跨膜的酪氨酸蛋白激酶受体RET激活细胞内两条信号通路,即磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)信号通路和Ras/Raf/MEK/Erk信号通路。为探讨在GDNF促进中脑多巴胺(DA)能神经细胞存活和分化过程中,上述两条信号通路所发挥的作用,本研究在建立GDNF促进中脑DA能神经细胞存活和分化的细胞培养模型的基础上,以PI3K信号通路中PI3K的特异性抑制剂Wortmannin和Ras/Raf/MEK/Erk信号通路中MEK的特异性抑制剂PD98059分别阻断上述两条信号通路;结合免疫细胞化学染色技术,以DA合成的限速酶酪氨酸羟化酶(TH)的染色情况为指标来观察上述两条信号通路对DA能神经细胞存活和分化的影响。结果显示,Wortmannin可以阻断GDNF促进TH阳性神经细胞数目及其突起增加的作用;而PD98059对GDNF的生物学效应没有影响。结果提示PI3K而非Ras/Raf/MEK/Erk信号通路介导了GDNF对中脑DA能神经细胞存活和分化的促进作用。     

ER-α36在乳腺癌中激活非基因组信号通路及诱导耐药

除经典核内雌激素受体(estrogen receptor,ER)介导的基因组信号通路外,越来越多的证据显示,膜性ER介导的非基因组信号通路对乳腺癌细胞的生长、耐药及肿瘤干细胞的富集等发挥重要作用。ER-α36是膜性ER的主要形式,是ER-α66的剪切变异体,主要定位于细胞膜和细胞质,通过非基因组信号通路,激活MAPK/ERK和PI3K/AKT等细胞内重要信号分子,促进乳腺癌细胞生长、诱导Tomaxifen耐药及肿瘤干细胞富集。该文将就ER-α36在此方面的作用作一综述。     

PI3K-Akt-mTOR信号通路与病毒性心肌炎

PI3K-Akt-mTOR是细胞内重要的信号通路,在细胞凋亡、转录、翻译、代谢、血管新生及细胞周期等过程发挥着重要作用。柯萨奇病毒B组3型(coxsackievirus B3,CVB3)导致的病毒性心肌炎是小儿常见的后天性心脏病,大部分非由病毒直接破坏所致,而涉及免疫反应与细胞凋亡。阐明CVB3感染细胞后PI3K-Akt-mTOR信号通路的变化,有助于揭示病毒性心肌炎的发病机制,对心肌炎的治疗与预后起重要作用。