噬菌体生物扩增法与其它方法在结核菌检测中的比较

目的通过三种方法的比较,研究噬菌体生物扩增法在结核菌检测中的意义和可行性。方法同一份标本分别做抗酸杆菌涂片法、BACTEC MGIT 960培养法和噬菌体生物扩增法。结果检测的243例标本中,噬菌体生物扩增法阳性104例,抗酸杆菌涂片法阳性44例,BACTEC MGIT 960培养法95例阳性。结论噬菌体生物扩增法检测结核菌阳性率远高于涂片法,略高于BACTEC MGIT 960培养法。噬菌体生物扩增法可以快速鉴定结核分枝杆菌,用其检测标本中的结核分枝杆菌具有很高的特异性和较高的敏感性。     

BACTEC960培养阳性530株分枝杆菌的形态学特征探讨

目的探讨分枝杆菌在BACTEC960中的生长特点和涂片抗酸染色形态特征,为菌群鉴定提供初步意见。方法收集福州肺科医院临床标本经BACTEC960培养阳性530例,进行直接涂片抗酸染色、菌群鉴定和药敏试验。结果结核分枝杆菌在MGIT培养管中呈絮状沉淀生长,镜检呈绳索状排列。非结核分枝杆菌（NTM）呈混浊生长,镜检呈散在、团粒状、块状、碎片状和松疏束状等不规则排列。结论结核分枝杆菌在BACTEC960中培养形成有特点的缠结,在显微镜下很容易识别,对鉴定分枝杆菌有初筛作用。     

结核性胸膜炎患者胸腔积液分枝杆菌检测结果分析

目的 :通过分析结核性胸膜炎患者胸腔积液分枝杆菌检测结果,探讨提高其阳性检出率的方法。方法 :采集267例临床诊断为结核性胸膜炎患者的胸腔积液,离心后弃上清,用氢氧化钠(Na OH)消化处理,磷酸盐缓冲液(PBS)中和离心,取沉淀涂片抗酸染色镜检,接种MGIT960系统培养管和罗氏培养基,分析培养和涂片镜检结果 ,采用χ~2检验比较抗酸杆菌涂片与分枝杆菌培养阳性率的差异,BACTEC MGIT 960系统与罗氏培养阳性率的差异。结果:267例结核性胸膜炎患者胸腔积液经消化处理后,抗酸杆菌涂片阳性者81例,阳性率为30.6%,涂片1~8条/300个视野至1+以下者占涂片阳性的97.5%。罗氏培养233例,培养阳性39例,阳性率为16.7%,培养1+以下者为97.4%。MGIT960系统培养221例,培养阳性72例,阳性率为32.6%。消化后涂片法阳性率高于罗氏培养法(χ~2=7.92,P0.05)。结论:结核性胸膜炎患者胸腔积液中抗酸杆菌菌量少。胸腔积液经消化集菌可显著提高抗酸杆菌涂片阳性率。相比罗氏培养,MGIT 960系统能显著提高分枝杆菌培养的阳性率。     

BACTEC MGIT 960和BACT/ALERT 3D系统快速培养和鉴定痰中抗酸杆菌

目的对抗酸染色阳性痰行分枝杆菌培养和鉴定。方法采用萋一尼氏抗酸染色法对临床诊断肺结核患者的晨痰涂片直接镜检,抗酸染色阳性痰经BACTEC960和BACT/ALERT3D系统进行分枝杆菌培养,分别经对硝基苯甲酸（PNB）和噻吩-2-羧基肼（TCH）培养基生长试验行分枝杆菌菌群和结核分枝杆菌复合群菌种鉴定。结果抗酸染色阳性痰标本的分枝杆菌培养阳性率100％,大多数为结核分枝杆菌（9／10）,少数为非结核分枝杆菌（1／10）,最快6天即可报告分枝杆菌阳性培养。结论BACTEC 960和BACT／ALERT3D系统具有快速培养分枝杆菌作用,抗酸染色阳性痰有必要行分枝杆菌培养和鉴定,有利于肺结核与非结核分枝杆菌病的鉴别诊断、结核分枝杆菌菌种鉴定和抗结核药物敏感性试验。     

昆明地区结核分枝杆菌标本培养检测及耐药情况分析

目的 了解昆明地区结核病患者和疑似结核病患者中Mtb培养检测情况和耐药情况。方法 收集1928例结核病患者和疑似结核病患者2046份标本,包括痰、支气管刷检物或肺泡灌洗液、胸腹腔积液、脑脊液、尿液、脓液、其他标本（淋巴液、心包积液、分泌物、穿刺液等）。使用BACTEC MGIT 960全自动分枝杆菌快速培养仪和中性罗氏培养基进行培养,分别记录初始抗酸涂片结果,BACTEC MGIT 960全自动分枝杆菌快速培养仪、中性罗氏培养基报告阳性后的涂片结果。分别对培养时间、培养阳性率、培养污染率及5种一线抗结核药物（S、INH、RFP、EMB和PZA）的耐药情况作统计分析。结果 BACTEC MGIT 960全自动分枝杆菌快速培养仪和中性罗氏培养基阳性率分别为38.2%（782/2046）和32.6%（666/2046）;结核诊断率37.3%（719/1928）;抗结核一线药耐药率为41.9%（212/506）,耐多药率（至少同时耐INH和RFP）为20.0%（101/506）。结论 昆明地区结核病患者对一线抗结核药物耐药情况严重。     

支气管肺泡灌洗液XpertMTB/RIF检测在HIV感染者肺结核诊断中的应用价值

目的评估支气管肺泡灌洗液(BALF)结核分枝杆菌rpoB基因和突变检测(XpertMTB/RIF),在诊断艾滋病病毒(HIV)感染合并肺结核中的应用价值。方法对499例HIV感染者BALF标本进行XpertMTB/RIF检测,配对标本同时进行结核分枝杆菌快速培养和药敏试验(BACTEC MGIT 960)、抗酸染色涂片法、实时荧光定量法(PCR-荧光法)检测;同时采用结核分枝杆菌抗原特异性γ-干扰素酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测患者对应外周血标本,比较各种检测方法的阳性率、灵敏度和特异性。结果 BACTEC MGIT 960培养、XpertMTB/RIF、抗酸染色涂片法、PCR-荧光法及ELISPOT检测的阳性率分别为20.4%、13.4%、5.0%、6.6%、22.4%,5种检测方法阳性率差异有统计学意义(χ2=101.03,P0.001)。以传统BACTEC MGIT 960培养阳性并经过菌种鉴定为结核分枝杆菌的79例标本为金标准:XpertMTB/RIF、抗酸染色涂片法、PCR-荧光法、ELISPOT的灵敏度依次为:77.2%、26.3%、38.0%、60.3%;特异性依次为:98.8%、99.2%、99.5%、85.1%;阳性预测值依次为:92.4%、87.0%、93.8%、44.4%;阴性预测值依次为:95.7%、87.5%、89.2%、91.5%。对XpertMTB/RIF、抗酸染色涂片法、PCR-荧光法及ELISPOT四种方法与BACTEC MGIT 960培养进行一致性检验发现,XpertMTB/RIF与BACTEC MGIT 960培养具有最强一致性(Kappa值为0.814),PCR-荧光法一般(Kappa=0.493),而抗酸染色涂片法和ELISPOT法最差(Kappa值分别为0.356、0.397)。结论与其他4种常见结核诊断方法相比,支气管肺泡灌洗液XpertMTB/RIF检测技术在HIV感染合并肺结核患者的诊断中具有较高的应用价值,是一种快速省时、敏感性和特异性均高的结核分枝杆菌快速检测方法。     

防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核的诊断价值

目的研究防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)技术对痰菌阴性肺结核患者的诊断价值。方法对96例痰菌阴性肺结核患者进行经支气管镜防污染支气管肺泡灌洗,防污染支气管肺泡灌洗液经过前处理,离心沉渣行涂片荧光染色镜检抗酸杆菌、改良罗氏法分离培养及BACTEC MGIT960快速结核菌培养。结果防污染支气管肺泡灌洗液离心沉渣镜检抗酸杆菌阳性20例(20.8%),改良罗氏培养基分离培养阳性30例(31.3%),BACTEC MGIT960快速培养技术培养阳性59例(61.5%),最终获病原学确诊62例,确诊率为64.6%。结论防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核患者具有重要的诊断价值,对灌洗液进行多种检查可提高检出的阳性率。     

涂片镜检结合胶体金法对结核杆菌复合群的鉴别价值

目的探讨结核分枝杆菌在BACTEC960中湿片镜检形态特征及胶体金法对结核杆菌复合群的鉴别价值。方法收集陕西省结核病防治院经BACTEC 960培养阳性920例,进行直接涂片湿片镜检、涂片抗酸染色、胶体金法菌群鉴定,并以PNB(对硝基苯甲酸)和TCH(噻吩-2-羧酸肼)鉴别培养基菌群检测为标准。结果结核分枝杆菌(MTB)在液体培养管中呈镜检呈索状排列98.3%(832/846);非结核分枝杆菌(NTM)镜检呈团状排列32.43%(24/74)、块状排列35.13%(26/74)、散在排列为24.32%(20/74)。胶体金法检测结核分枝杆菌的敏感性98.34%(832/846),特异性98.64%,阳性预测值99.87%,阴性预测值86.90%。结论湿片观察结核分枝杆菌在BACTEC 960培养管中形成索状排列,较涂片抗酸染色更简便、快速,对鉴定分枝杆菌有初筛作用。     

防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核的诊断价值

目的　研究防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)技术对痰菌阴性肺结核患者的诊断价值。方法 对96例痰菌阴性肺结核患者进行经支气管镜防污染支气管肺泡灌洗,防污染支气管肺泡灌洗液经过前处理,离心沉渣行涂片荧光染色镜检抗酸杆菌、改良罗氏法分离培养及BACTEC MGIT960快速结核菌培养。结果 防污染支气管肺泡灌洗液离心沉渣镜检抗酸杆菌阳性20例(20.8%),改良罗氏培养基分离培养阳性30例(31.3%),BACTEC MGIT960快速培养技术培养阳性59例(61.5%),最终获病原学确诊62例,确诊率为64.6%。结论 防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核患者具有重要的诊断价值,对灌洗液进行多种检查可提高检出的阳性率。     

利用960系统快速鉴定结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的可行性研究

目的探讨应用BACTEC MGIT960系统的分枝杆菌生长指示管(Mycobacter GrowthIndicator Tube,MGIT)加入对硝基苯甲酸(ρ-Nitro benzoic Acid,PNB)区分结核分枝杆菌复合群(MTBC)与非结核分枝杆菌(NTM)的可行性。方法用含PNB MGIT检测5株标准分枝杆菌菌株的体外抑菌浓度,并对111株临床分离菌株与传统改良罗氏(L wenstein-Jensen,L-J)PNB鉴定进行比较。结果以PNB300μg/ml为界,111株临床分离菌株PNB MGIT法与L-J PNB的菌群鉴定相比较符合率为90.09%;鉴定结果报告平均7.72 d,与L-J PNB法比较有显著性差异,检测时间明显缩短(P<0.001)。结论应用960系统PNB MGIT法鉴定分枝杆菌菌群的方法快速、准确、实用。     

BACTEC-MGIT960快速培养药敏对肺结核诊治的应用和评价

目的 BACTEC—MGIT960快速培养药敏在肺结核诊治中的应用评价。方法 采用BACTEC—MGIT960进行快速培养药敏，并与改良罗氏培养基和改良7H9培养基进行比较。结果 BACTEC—MGIT960培养报告时间仅8．5d，明显短于改良7H9培养基(20．6d)和改良罗氏培养基(30．8d)。BACTEC—MGIT960药物敏感试验结果与其它检测方法相比，符合率在90％以上，平均报告时间仅6．5d，明显短于改良7H9培养基(17d)和改良罗氏培养基(26．5d)。结论 BACTEC—MGIT960快速培养药敏有助于肺结核的诊断和治疗，是一种快速、有效、可靠的方法。     

利用960系统快速鉴定结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的可行性研究

目的　探讨应用BACTEC MGIT960系统的分枝杆菌生长指示管(Mycobacter Growth Indicator Tube,MGIT)加入对硝基苯甲酸(ρ-Nitro benzoic Acid,PNB)区分结核分枝杆菌复合群(MTBC)与非结核分枝杆菌(NTM)的可行性。方法 用含PNB MGIT检测5株标准分枝杆菌菌株的体外抑菌浓度,并对111株临床分离菌株与传统改良罗氏(Lwenstein-Jensen,L-J)PNB鉴定进行比较。结果 以PNB300μg/ml为界,111株临床分离菌株PNB MGIT法与L-J PNB的菌群鉴定相比较符合率为90.09%;鉴定结果报告平均7.72 d,与L-J PNB法比较有显著性差异,检测时间明显缩短(P<0.001)。结论 应用960系统PNB MGIT法鉴定分枝杆菌菌群的方法快速、准确、实用。     

Bactec960等三种分支杆菌分离培养方法的临床应用评价

目的:评价一种新型快速自动化检测分支杆菌系统.方法:应用分支杆菌标准菌株及62例临床标本同时接种Bactec960MGIT培养基、Bactec4607H12B培养基和酸罗氏培养基,观察其培养结果、阳性出现的时间以及污染情况.     

MGIT960与罗氏培养法在结核分枝杆菌培养及药敏试验中的比对分析

目的 比对全自动Bactec MGIT960（MGIT960）系统与改良罗氏（L-J）培养方法 2者在结核分枝杆菌培养、鉴定及药敏试验中的优越性。 方法 按国家疾病预防控制中心（CDC）-碧迪项目辽宁工作方案要求和国际标准WS288-2009《肺结核诊断标准》纳入临床病例。本实验共纳入病例435例,其中男性319例,女性116例,平均年龄52.3岁（10～86岁）。上述每份病例标本均分别进行痰液涂片抗酸染色（萋-尼法）镜检,L-J固体培养和MGIT960系统液体培养。培养阳性者分别进行一线药物异烟肼（INH）、利福平（RIF）、链霉素（STR）和乙胺丁醇（EMB）的L-J法药敏试验（比例法）和MGIT960药敏试验;分别计算出抗酸染色镜检与MGIT960和L-J培养的符合率; L-J培养和MGIT960培养阳性检出率;L-J和MGIT960两种培养方法药敏试验所需的培养时间及符合率等。 结果MGIT960培养法和L-J培养法与痰涂片镜检的阳性符合率分别为90.8%（187/206）和89.3%（184/206）;MGIT960与L-J结果符合率92.8%（219/236）;MGIT960和L-J平均培养时间分别为9.5 d和31.5 d;MGIT960和L-J一线药物INH、RIF、STR和EMB敏感性试验的符合率分别为92.7%、95.9%、91.8%和97.3%。 结论 全自动MGIT960系统培养方法的敏感度和特异度高于L-J培养法,报告时间平均缩短至9.5-d,该系统是目前最为理想的快速结核分枝杆菌培养、鉴定和药敏试验检测系统。     

联合使用CapiliaTB方法和涂片形态学鉴定结核分枝杆菌复合群

背景：台湾许多医院使用全自动BACTEC分枝杆菌生长指示管（MGIT）960系统鉴定临床标本中的分枝杆菌,使用很费劳力的BDProbeTecET（CTB）系统或生化方法鉴定BACTEC阳性培养物中的结核分枝杆菌复合群（MTC）。目的：评估CapiliaTB方法能否在BACTEC阳性培养物中鉴别MTC,从而替代BDProbeTecET（CTB）或生化方法。实验设计：收集分枝杆菌阳性的BACTEC培养物,用生化方法鉴别培养物中的MTC。然后用涂片观察卷曲索状、CapiliaTB方法或BDProbe—TecET（CTB）系统进行鉴定,比较各结果。结果：收集了233例BACTEC分枝杆菌阳性培养物,CapiliaTB方法的敏感性和特异性分别为96．9％和98．6％,BDProbeTecET（CTB）系统为99．4％和97．3％,联合使用CapiliaTB和涂片卷曲索状方法,对于交叉结果的特异性达到100％,对于组合结果的敏感性为100％。结论：CapiliaTB方法可以用于BACTEC培养物中MTC的鉴定。结合涂片中的卷曲索状可以降低假阳性和假阴性。     

艾滋病患者血中分支杆菌的快速检测和鉴定

本文用放射性肉汤培养基联合基因探针检测和鉴定艾滋病(AIDS)患者血液中结核杆菌和鸟分支杆菌.从153例AIDS 或相关综合征患者中收集到875份血样,接种Bactec BA 培养基,每天测放射性.生长指数(GI)>20时进行抗酸染色和免疫荧光镜检.GI>20且抗酸染色阳性的培养物再用探针检测.培养物离心,加溶菌剂并超声裂解沉淀,加探针孵育、分离,洗涤后弃上清。γ-计数器计数。杂交率>10%者判为阳性。在罗-琴氏培养基培养,以便生化鉴定和药敏试验.平均培养19.2±7天后,17例患者的82份血样分支杆菌阳性(9.2%)。基因探针检查,6例患者的     

体液标本经消化液处理在结核病发现中应用评价

目的了解消化液处理标本抗酸染色在提高结核分枝杆菌检出率方面的价值。方法以BACTECMGIT960检出阳性样本为参照,消化液处理标本抗酸染色比较直接涂片抗酸染色和L—J培养这两种方法,对消化液处理标本抗酸染色的阳性检出率做出评价。结果MGIT960检出的阳性样本共635例,经消化液处理直接涂片的阳性检出率为48．03％（305／635）,与直接涂片抗酸染色阳性检出率（62．20％（395／635））比较,两者无统计学差异;较L—J培养管87．55％（556／635）的阳性检出率,两者有显著的统计学差异。结论消化液处珲后的抗酸涂片并不比多次直接涂片抗酸染色对结核分枝杆菌的阳性检出率高。     

不同细菌学与病理学检查技术对骨关节结核诊断的效能研究

目的:回顾性分析脓液标本细菌学检测技术和组织标本病理学检测技术诊断骨关节结核的检测效能。方法:以2016年1月至2018年12月在北京胸科医院住院治疗的213例送检同部位脓液和组织标本进行检测的疑似骨关节结核患者作为研究对象,取新鲜脓液标本进行涂片染色镜检、GeneXpert MTB/RIF(GeneXpert)检测、实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测和BACTEC MGIT 960液体培养(MGIT 960液体培养);组织标本经石蜡包埋后进行抗酸染色镜检和FQ-PCR检测。结果:根据骨结核临床诊断综合参考标准(CRS),186例纳入患者诊断为骨关节结核,其中124例为确诊结核患者,23例为高度疑似结核患者,39例为疑似结核患者;27例患者排除骨关节结核。与CRS比较,脓液标本涂片镜检、MGIT 960液体培养、FQ-PCR、GeneXpert以及组织标本抗酸染色和FQ-PCR检测的敏感度分别为28.7%(49/171)、49.0%(48/98)、58.1%(25/43)、87.5%(161/184)、48.6%(90/185)和85.4%(146/171);特异度分别为100.0...     

结核分枝杆菌RNA恒温扩增实时荧光检测技术检测肺泡灌洗液诊断肺结核的价值

收集陕西省结核病防治院2021年10月至2022年7月疑似肺结核住院患者的肺泡灌洗液,同时进行涂片抗酸杆菌染色、分枝杆菌BACTEC MGIT 960液体培养(简称“培养”)及菌种鉴定、GeneXpert MTB/RIF、结核分枝杆菌RNA恒温扩增实时荧光检测技术(simultaneous amplification and testing for Mycobacterium tuberculosis,SAT-TB),并对结果进行分析。以培养法(菌种鉴定结果为结核分枝杆菌复合群)为参考标准,SAT-TB诊断肺结核的敏感度为80.61%(399/495),特异度为87.74%(1259/1435),阳性预测值为69.39%(399/575),阴性预测值为92.92%(1259/1355),约登指数为0.68。SAT-TB技术具有敏感度和特异度较高的特点,对临床快速诊断活动性结核病具有一定的价值。     

BACTEC系统对依赖利福平结核分支杆菌生长与耐药性的分析

目的　探讨依赖利福平结核分支杆菌 (依R菌)在BACTEC系统中的生长特征,以便用该系统鉴定依R菌。方法 选取L -J法初步鉴定的依R菌,制成菌液 (10^-4mg/ml)分别以0.1ml接种于含不同利福平 (R)浓度 (1～384μg/ml)的7H-12液体培养基中培养,用BACTEC法测定不同实验瓶生长指数 (GI),判断耐药性,并对培养物称重及进行形态 (抗酸染色)观察。结果 (1)耐药性,依R菌在R1～96μg/ml10个浓度中均耐药,R192μg ml临界,384μg/ml敏感。 (2)菌体重量,R6、8、10、12、24μg/ml各瓶细菌重量 (分别为87、125、116、104、65mg)明显高于对照瓶 (35mg),重量比为1.9～3.6,平均2.9,其余各耐药瓶与对照瓶无明显差别。 (3)培养物涂片抗酸染色,可见各R瓶内结核分支杆菌菌体比对照瓶粗大、染色质深、染色颗粒明显,以R8μg/ml瓶最为典型。 结论 依R菌在含R(6～24μg/ml)环境中生长旺盛,在无R环境中生长不良。