耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性，SCCmec分型及毒素基因的检测

目的调查北京大学第一医院致病性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型情况、耐药状况、PVL、TSST-1基因携带率,初步了解临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药原因,为临床感染控制提供依据。方法收集2007年9月至2008年3月住院患者首次分离的53株有致病意义MRSA,用全自动微生物分析仪进行药敏试验,应用PCR方法检测MBSA的SCCmec基因型、PVL、TSST-1基因。结果53株MRSA呈多重耐药特点,SCCmec分型以ⅢA为主（47．2％）,PVL基因均为阴性,12株（22％）MRSA TSST-1阳性。结论53株MILSA的多重耐药性与SCCmec结构密切相关,SCCmec分型技术是探索MRSA多重耐药性与耐药结构有效的分子生物学手段,TSST-1基因阳性株在临床分离的金黄色葡萄球菌中占有较高的比例。     

金黄色葡萄球菌的药敏表型和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型

目的研究从临床标本中分离的金黄色葡萄球菌（SA）的耐药性、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的发生率及其葡萄球菌盒式染体色mec（SCCmec）基因分型。方法采用纸片琼脂扩散法进行SA耐药性检测及MRSA测定,应用多重聚合酶链反应（PCR）进行SCCmec各基因型及PV杀白细胞素（PVL）基因型的检测。结果 102株SA中检出39株MRSA,检出率为38.2%（39/102）。甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）对克林霉素、复方磺胺甲口恶唑、四环素3种抗菌药物耐药率较高,分别为39.7%、31.7%、22.2%;对庆大霉素及喹诺酮类耐药率较低,为6.3%~14.3%。而MRSA对克林霉素、β-内酰胺类抗菌药物100%耐药,对其他药物表现为多重耐药。未检出万古霉素耐药菌株。MRSA菌株的SCCmec基因型以SCCmecⅢ型为主,占71.2%,SCCmecⅣa占10.3%,未检测出PVL基因。结论临床分离的SA中,MRSA耐药率较MSSA高且表现为多重耐药,其SCCmec基因分型主要表现为SCCmecⅢ型,其次是SCCmecⅣa。     

金黄色葡萄球菌的药敏表型和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型

目的研究从临床标本中分离的金黄色葡萄球菌(SA)的耐药性、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的发生率及其葡萄球菌盒式染体色mec(SCCmec)基因分型。方法采用纸片琼脂扩散法进行SA耐药性检测及MRSA测定,应用多重聚合酶链反应(PCR)进行SCCmec各基因型及PV杀白细胞素(PVL)基因型的检测。结果 102株SA中检出39株MRSA,检出率为38.2%(39/102)。甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)对克林霉素、复方磺胺甲口恶唑、四环素3种抗菌药物耐药率较高,分别为39.7%、31.7%、22.2%;对庆大霉素及喹诺酮类耐药率较低,为6.3%~14.3%。而MRSA对克林霉素、β-内酰胺类抗菌药物100%耐药,对其他药物表现为多重耐药。未检出万古霉素耐药菌株。MRSA菌株的SCCmec基因型以SCCmecⅢ型为主,占71.2%,SCCmecⅣa占10.3%,未检测出PVL基因。结论临床分离的SA中,MRSA耐药率较MSSA高且表现为多重耐药,其SCCmec基因分型主要表现为SCCmecⅢ型,其次是SCCmecⅣa。     

鄂尔多斯地区蒙古族人群耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型

目的探讨鄂尔多斯地区蒙古族人群耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子流行病学特点,明确本地区MRSA基因型别及其分布规律。方法收集2009年1月至2011年8月临床分离的MRSA菌株54株。应用多重聚合酶链反应(PCR)对MRSA菌株进行葡萄球菌染色体mec(SCCmec)基因分型、杀白细胞毒素(PVL)毒力基因(pvl)和多位点序列分型(MLST)检测。结果 MRSA菌株的SCCmecⅠ~Ⅴ基因分型分别占0.00%、50.00%、46.30%、1.85%和1.85%;检测出1株pvl基因阳性;24株MRSA菌株MLST分型显示,ST239 13株(54.17%),ST59株(37.50%),ST5 9和ST7各1株(4.17%)。结论鄂尔多斯地区蒙古族人群MRSA菌株以SCCmecⅡ型和SCCmecⅢ型为主。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性变迁及SCCmec基因分型

目的分析2011~2013年北京友谊医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药谱变迁;了解其葡萄球菌盒式染体色mec(SCCmec)基因型分布特点。方法使用WHONET 5.6软件对2011至2013年间MRSA药物敏感结果进行数据分析。收集2013年3月至2013年10月首都医科大学附属北京友谊医院临床检验中心细菌室分离的非重复MRSA 30株,采用多重聚合酶链反应(PCR)对其进行SCCmec基因型分型。结果 2011~2013年3年的调查显示,临床标本中共分离出1 133株金黄色葡萄球菌检出MRSA 662株,检出率58.4%,3年检出率成逐渐上升趋势。MRSA检出标本来源于痰液及咽拭子最多,其次为血液、脓分泌物和尿液标本。MRSA主要分布在ICU、医保中心和急诊。662株MRSA对青霉素均为100%耐药,红霉素、克林霉素、庆大霉素、四环素耐药率均80%,环丙沙星、莫西沙星、左氧氟沙星耐药率97.2%~95%和96.7%~88.8%和97.2%~95.4%,对呋喃妥因、复方新诺明较敏感,耐药率10%,3年中未发现对万古霉素、替加环素,喹努普汀/达福普汀、利奈唑胺耐药菌。检出SCCmec III型有27株,检出率为90.0%;其余3株为未分型菌株,占10.0%。结论本次MRSA耐药监测中,其对万古霉素、利奈唑胺、替加环素均保持着高度敏感性,对呋喃妥因、复方新诺明较敏感,耐药率10%。其SCCmec基因分型以SCCmecⅢ型为主,与国内多数地区、医院报道的以SCCmecⅢ型为主相符。     

多重PCR检测MRSA的SCCmec基因分型

目的了解我院MRSA的流行状况。方法收集2005年1—6月65株社区感染MRSA及60株医院感染MRSA，应用多重PCR对MRSA染色体Dlec基因盒（staphylococcal cassette chromosomeSCCmec）分型及杀白细胞毒素（PVI。）基因检测，应用K—B纸片法进行药敏分析。结果125株MRSA的mecA基因阳性，其中SCCmecII型1株，SCCmecⅢ型120株，SCCmecⅣ型3株，未分型1株；未发现携带PVL基因的MRSA。携带SCCmecII型、SCCmecⅢ型的菌株均为多重耐药株，而携带SCCmecⅣ型的菌株除对8内酰胺类药物耐药外，对其他类别的抗菌药敏感。结论本院分离的MRSA以SCCmecⅢ型为主，发现SCCmecIV型CA-MRSA，但不携带PVL基因；携带SCCmecⅡ、SCCmecⅢ的临床分离株耐药严重。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec分型及耐药性分析

目的探讨临床分离的346株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株的临床分布、SCCmec分型及其对常用抗菌药物的耐药情况。方法选择2014年1月至2015年1月该院分离的784例金黄色葡萄球菌(SA),采用PCR方法对其进行MRSA及MRSA SCCmec基因分型鉴定,并对其检出分布及耐药性进行分析。结果 784株SA中MRSA 346株(占44.13%),MRSA中来自痰液占43.06%,伤口分泌物占48.55%;MRSA对青霉素、左氧氟沙星、红霉素耐药性较高,对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁均敏感。MRSA经SCCmec分型,共发现SCCmecⅡ型130株,SCCmecⅢ型196株,SCCmecⅣ型11株,SCCmecV型9株。结论该院分离的MRSA以SCCmecⅢ型为主,MRSA对多种抗菌药物具有耐药作用,但对万古霉素、替考拉宁等敏感。     

宁夏地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学研究

目的调查临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的染色体m ec基因盒（SCCm ec）分型及杀白细胞素（PVL）的pvl基因携带率,初步了解宁夏地区MRSA分子流行病学特点。方法对2005年9月至2008年1月从临床标本中分离的MRSA菌株进行pvl基因检测,并应用多重聚合酶链反应（PCR）对MRSA菌株进行SCCm ec分型。结果 88株MRSA菌株中pvl基因阳性菌株8株（9.1%）,SCCm ec分型结果为Ⅲ型86株（97.7%）、Ⅱ型2株（2.3%）。结论宁夏地区分离的MRSA菌株SCCm ec分型以Ⅲ型为主,SCCm ec分型是探索MRSA多重耐药性有效的分子生物学手段。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性及SCCmec基因分型研究

目的了解大连地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及其葡萄球菌盒染色体SCCmec的基因型特点。方法采用纸片扩散法检测MRSA对抗菌药物的耐药性;聚合酶链反应(PCR)对SCCmec进行基因分型。结果分离出的38株MRSA菌株均具有多重耐药性,但对万古霉素和氯霉素较为敏感。SCCmec基因型以Ⅱ型最为常见,占86.84%;其次为Ⅲ型,占10.53%;未定型的占2.6%。结论大连地区分离出的MRSA具有多重耐药的特征,SCCmec基因型以Ⅱ型为主。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec检测及耐药性分析

目的探明耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的流行情况,分析葡萄球菌盒染色体mec（SCCmec）的主要分型,通过检测葡萄球菌属细菌的耐药性,为MRSA的流行病学调查和临床治疗提供理论依据。方法用头孢西丁纸片法筛选耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌,用青霉素结合蛋白2a（PBP2a）测定法对MRSA进行确证;应用实时荧光定量PCR系统扩增葡萄球菌染色体mec盒,并对MRSA进行基因分型;用VITEK 32全自动微生物分析仪检测其耐药性。结果 97株MRSA菌株中包括SCCmec II型12株、Ⅲ型77株、IV型8株。所有菌株对包括苯唑西林在内的多种抗生素耐药,对利福平的耐药率均较低,对万古霉素完全敏感,各型别间差异无统计学意义。Ⅲ型MRSA菌株表现为多重耐药,耐药率高于II型、IV型MRSA菌株。结论深圳东部地区临床分离的MRSA SCCmec基因型以Ⅲ型菌株为主,且具有对抗生素多重耐药的特征。     

我国各地区18所教学医院金葡菌临床分离株杀白细胞毒素基因检测及分子流行病学调查

目的研究我国多所医院临床分离金葡菌中杀白细胞毒素（PVL）分布特征及与临床疾病的关系。方法对18所教学医院临床分离809株金葡菌进行PCR检测PVL基因，PVL阳性菌株经纸片扩散法检测MRSA表型，mecA～femB双重PCR确证MRSA基因型，并对PVI，阳性的MRSA进行SCCmec分型，脉冲场凝胶电泳（PFGE）法对PVL阳性的MRSA进行同源性分析。结果809株金葡菌中58株（58／809，7．2％）携带PVL基因。沈阳检出率较高，其次为武汉，与其他医院差异有统计学意义（P〈0．05）；PVL阳性的MRSA15株（15／407，3．5％），MSSA43株（43／402，11．1％），差异无统计学意义（P〉0．05）；PVL阳性的门诊菌株7．9％（5／63），住院6．9％（53／746／，差异无统计学意义（P〉0．05）。PVL阳性的MRSA经SCC—mec分型，Ⅱ型3．8Voo（2／53），Ⅲ型4．7％（12／258），未分型1．0%（1／104），差异无统计学意义（P〉0．05）。PVL阳性的MRSA经PFGE后，A克隆株73．3％（11／15）；B克隆株13．3%（2／15）；C克隆株6．7％（1／15）；D克隆株6．7％（1／15），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PVL可以引起严重感染，及时进行检测并做同源性分析，采取有效的措施控制医院感染的暴发。     

金黄色葡萄球菌毒力基因检测及Spa分型研究

目的 研究深圳市南山区2009-2015年医院内患者临床检测标本、医院台面与医护人员双手涂抹样以及食物中毒样本中金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）蛋白A基因多态性分型（single locus DNA-sequencing of the repeat region of the Staphylococcus protein A gene,Spa）的特征及毒力基因分布情况。方法 采用多重PCR方法检测SA的mecA与femA基因,PCR方法检测24个毒力基因以及SA蛋白A基因,PCR产物测序后序列上传数据库进行比对。结果 87株SA共检出48株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant S. aureus,MRSA）,检出率为55.2%。共检出21种毒力基因,检出率60%的毒力基因有LUKDE（65.5%）、SHE（67.8%）、mpHLG 2（85.1%）、HLD（93.1%）和 HLA（100.0%）。94.3%菌株携带5个以上毒力基因。三类样本中有11种毒力基因检出率差异有统计学意义,分别是SEB、mpSEC、mpSEJ、mpSEO、TST、HLB、HLD、mpHLG 1、mpHLG 2,mpETB和PVL。其中mpETB与PVL仅在患者中检出,肠毒素基因在食物中毒株中携带率较高。MRSA与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（methicillin-sensitive S.aureus,MSSA）的3种毒力基因检出率差异有统计学意义,分别是mpETA、PVL及mpHLG 2;MRSA的毒力基因mpETA与PVL检出率明显高于MSSA（P=0.033, P=0.030）,而mpHLG 2检出率明显低于MSSA（P=0.021）。87株SA分为24种Spa型,患者优势型别为t030（30.0%）与t437（36.7%）,医院其他样本优势型别为t091（50.0%）,食物中毒优势型别为t127（36.8%）与t091（21.1%）。结论 三类样本部分毒力基因检出差异有统计学意义。MRSA与MSSA携带毒力基因差异无统计学意义。三类样本中均存在优势的Spa型别。     

MRSA杀白细胞素基因检测和SCCmec分子流行病学调查

目的 了解我院临床分离的耐甲氧西林金葡菌(MRSA)葡萄球菌染色体mec基因盒(staphyloccoccal cassette chromosome mec,SCCmec)的分布和杀白细胞毒素(Panton-Valentine Leukocidin,PVL)基因的携带状况.方法 收集我院2005年10月-2006年6月从临床标本中分离的30株MRSA(mecA基因阳性).运用多重PCR检测SCCmec的基因型和亚型;PCR扩增PVL基因;纸片扩散法检测MRSA对10种抗菌药物的耐药性.结果 30株MRSA中,SCCmecⅡ型6株(20.0%);SCCmecⅢ型15株(50.0%);SCCmecⅣa型1株和SCCmecⅤ型2株.6株MecA基因阳性菌株未能分型.PVL总阳性率36.7%(11/30),其中SCCmecⅡ1株、SCCmecⅢ5株、SCCmecⅣa 1株,SCCmecⅤ2株、未分型2株.SCCmecⅡ型和SCCmecⅢ型菌株除对β内酰胺类抗生素耐药以外,对其他抗菌药物呈现多重耐药.SCCmecaⅣa和SCCmecⅤ型的菌株除对β内酰胺类抗生素耐药以外,对其他类抗菌药物均敏感.结论 我院临床分离MRSA的SCCmec型别主要以SCCmecⅢ和SCCmecⅡ为主;PVL基因的阳性率较高;携带SCCmecⅡ和SCCmecⅢ的MRSA对抗菌药物呈现多重耐药现象.