开放线粒体KATP通道对心肌细胞氧化应激损伤的保护作用

目的观察ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂二氮嗪对心肌细胞氧化应激损伤的保护作用,并探讨其作用机制.方法采用过氧化氢(500 μmol·L-1)诱导法制备大鼠培养心肌细胞氧化应激损伤模型,通过检测培养液中乳酸脱氢酶以及用流式细胞仪结合罗丹明-123和碘化丙啶双标记法检测线粒体膜电位和细胞存活状态,观察二氮嗪(100 μmol·L-1)对氧化应激损伤的保护作用.结果二氮嗪预处理后,细胞培养液中乳酸脱氢酶活性较过氧化氢处理组显著降低(P＜0.01),细胞存活率升高,并可减少氧化应激造成的线粒体膜电位的丢失,其作用可被线粒体KATP通道阻断剂5-羟基癸酸酯所拮抗.结论二氮嗪对过氧化氢造成的培养心肌细胞氧化应激损伤具有保护作用,其可能通过激活线粒体KATP通道介导.     

二氮嗪预处理大鼠海马脑片抗缺氧无糖损伤作用与激活PKC-ERK1/2通路有关

目的观察二氮嗪预处理对大鼠海马脑片缺氧无糖(oxygenglucosedeprivation,OGD)损伤的作用及PKC、ERK1/2抑制剂对其的影响。方法建立大鼠海马脑片OGD损伤模型,分别以25、50、100μmol·L-1二氮嗪灌流海马脑片30min,或分别用mitoKATP通道、PKC、ERK1/2抑制剂5HD、chelerythrine、U0126灌流30min,再用二氮嗪(100μmol·L-1)预处理,观察OGD13min、复氧1h后顺向群峰电位(orthodromicpopulationspike,OPS)的变化。结果二氮嗪预处理组(50、100μmol·L-1)OPS消失时间明显延长,复氧供糖后OPS恢复良好;二氮嗪(100μmol·L-1)预处理抗OGD损伤作用可被5HD完全取消,可被chelerythrine或U0126部分取消。结论mitoKATP通道特异性开放剂二氮嗪预处理有抗海马脑片OGD损伤作用,该效应与激活PKCERK信号通路有关。     

埃他卡林对心肌细胞损伤保护作用的药理学特征

目的研究KATP通道开放剂埃他卡林(iptakalim,Ipt)对心肌细胞氧化应激损伤的保护作用,并探究其作用机制。方法采用200μmol.L-1的过氧化氢(H2O2)损伤体外培养的乳鼠心肌细胞2 h,建立氧化应激心肌细胞损伤模型;以二氮嗪(diazoxide,Dia)作为阳性对照药物,采用生物化学法检测各处理组细胞培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogen-ase,LDH)活性、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及MTT法检测心肌细胞损伤程度,反映埃他卡林对该模型的影响。结果过氧化氢损伤后,细胞存活率降低,LDH释放量明显升高,SOD活力下降;埃他卡林预处理后,细胞培养液中LDH活性较过氧化氢处理组降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05),细胞存活率浓度依赖性升高(P<0.01)。该保护作用可被线粒体KATP通道阻断剂5-羟基癸酸酯(5-HD)拮抗,也可被KATP通道阻断剂格列本脲(glibenclamide,Gli)阻断。结论埃他卡林对H2O2造成氧化应激损伤的心肌细胞具有明显的保护作用,其保护作用与线粒体膜和细胞膜的KATP通道激活有关。     

异丙酚对宫内窘迫胎鼠的神经保护作用

目的观察异丙酚对宫内窘迫胎鼠的神经保护作用。方法 SD大鼠♀18只,交配后获得孕鼠。将孕鼠随机分为6组(n=3):假手术组(S组)、缺血/再灌注组(IR组)、异丙酚低、中、高剂量组(P1~P3组)和荷包牡丹碱组(B组)。S组和IR组孕鼠经尾静脉注射生理盐水1 m L。P_1~P_3组孕鼠经尾静脉分别注射异丙酚10、30、50 mg·kg~(-1)。B组在注射异丙酚50 mg·kg~(-1)的同时,腹腔注射荷包牡丹碱5 mg·kg~(-1)。夹闭子宫卵巢动脉11 min。再灌注3 d后取材,每只孕鼠各取2只胎鼠,每组6只。制作切片,计算海马CA1区神经元损伤指数(LI)。硫代巴比妥酸反应法检测胎鼠脑组织丙二醛(MDA)含量。结果 S组LI为7.2±0.9,MDA为(3.86±0.20)μmol·g~(-1),与之相比,IR组的LI为71.9±2.8,MDA为(9.10±0.45)μmol·g~(-1)(P<0.01)。与IR相比,异丙酚各组的LI分别为40.8±2.6,21.4±1.4,20.1±1.3,MDA分别为(7.32±0.41),(5.65±0.27),(5.44±0.28)μmol·g~(-1)(P<0.05)。B组的LI,MDA分别为(51.2±2.3),(7.54±0.31)μmol·g~(-1),翻转了异丙酚的保护作用。结论异丙酚对宫内窘迫胎鼠具有神经保护作用。     

低氧及运动对大鼠不同脑区血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨低氧和(或)运动对大鼠脑干、小脑、前脑皮质、海马和纹状体等不同脑区血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平及脑功能的影响。方法 60只成年雄性SD大鼠随机分为对照组、低氧安静组、常氧运动组和低氧运动组。实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白印迹法检测建模后大鼠不同脑区VEGF表达水平的变化,Morris水迷宫实验检测大鼠神经系统功能。结果各组大鼠神经系统功能无显著差异,低氧及低氧运动引起大鼠前脑皮质、海马和纹状体VEGF表达增高,常氧运动仅引起大鼠海马VEGF表达增高。结论低氧和(或)运动可引起大鼠不同脑区VEGF表达增加,为低氧训练的开展提供进一步的实验支持。     

线粒体KATP开放剂二氮嗪促进星形胶质细胞摄取谷氨酸

目的研究线粒体ATP敏感性钾通道(mitochondrial ATP-sensitive potassium channel, mitoKATP)开放剂二氮嗪(diazoxide)对星形胶质细胞摄取谷氨酸(glutamate)的影响.方法取新生大鼠脑星形胶质细胞作原代培养,用液体闪烁计数仪测定[3H]-D,L-谷氨酸的摄入量判断细胞的谷氨酸摄取功能.结果二氮嗪呈浓度依赖性地促进星形胶质细胞摄取谷氨酸,且能抑制1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)对星形胶质细胞摄取谷氨酸的损伤作用;浓度在100μmol·L-1以上时,二氮嗪可完全逆转MPP+对星形胶质细胞摄取谷氨酸的抑制作用;二氮嗪的上述作用可被选择性mito KATP 阻断剂5-羟基癸酸 (5-hydroxydecanoate,5-HD)拮抗.结论二氮嗪通过开放mitoKATP增强星形胶质细胞谷氨酸转运体(glutamate transporters, GluTs)的功能.     

剖宫产术后瘢痕子宫足月妊娠阴道试产的临床观察

目的观察剖宫产术后瘢痕子宫足月妊娠阴道试产的安全性和可行性。方法抽取60例行阴道试产的剖宫产术后瘢痕子宫足月妊娠产妇作为实验组;抽取60例行剖宫产分娩的剖宫产术后瘢痕子宫足月妊娠产妇作为对照组。结果实验组阴道试产成功率为90%,实验组产妇24 h出血量(200.5±20.64)mL低于对照组(300.3±52.12)mL,住院时间(3.8±1.3)d短于对照组(6.8±0.8)d,两组新生儿Apgar评分、新生窒息发生率、产妇产褥病发生率无显著差异(P>0.05)。结论符合阴道试产指征的剖宫产术后瘢痕子宫足月妊娠产妇阴道试产成功率较高,但是在试产过程中一旦发现有风险,要转剖宫产术。     

香芹酚通过降低一氧化氮水平防治大鼠脑缺血/再灌注损伤的研究

目的研究香芹酚通过降低一氧化氮水平对大鼠脑缺血/再灌注(CI/R)损伤的保护作用。方法制做大鼠脑中动脉闭塞(MCAO)2 h后再灌注24 h模型,将大鼠随机分为5组:假手术组,模型组,香芹酚低、中、高剂量组。实验终末,评价神经功能及脑梗死面积,并检测脑组织中NO的含量。结果与模型组相比,香芹酚组神经功能学评分显著下降(P<0.05),大鼠脑梗死面积亦显著减少(P<0.05)。模型组中再灌注24 h后,大鼠缺血侧和自身对照侧皮质及海马NO的含量异常升高(P<0.05);香芹酚组缺血侧和自身对照侧皮质及海马NO的含量明显降低(P<0.05)。结论香芹酚对大鼠CI/R损伤有保护作用,其机制与降低CI/R损伤时的脑组织中的NO水平可能相关。     

小产钳在新式剖宫产手术中的应用

目的探讨双叶小产钳在剖宫产术中应用价值。方法总结分析我院2011年8月至2012年7月期间双叶小产钳在剖宫产手术中应用效果。结果观察组胎头娩出时间(20±5)s短于对照组(30±6)s,两组差异有统计学意义(P<0.05);观察组新生儿Apgar评分(9.35±0.45)分高于对照组(8.23±1.01)分,两组差异有统计学意义(P<0.05);术中出血量观察组为(296±61)mL少于对照组为(365±98)mL,两组差异有统计学意义(P<0.05);两组新生儿面部损伤及子宫切口撕裂差异无显着性(P>0.05)。结论剖宫产术中徒手取胎头困难者使用双叶小产钳可明显缩短娩胎头时间,减少新生儿窒息率及术中子宫出血量,且不增加新生儿面部损伤及子宫切口撕裂,值得推广。     

右美托咪定对全脑缺氧缺血损伤大鼠海马内星形胶质细胞VEGF表达的影响

目的探讨右美托咪定对全脑缺氧缺血损伤大鼠海马内星形胶质细胞中血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法取SD大鼠24只,体重250~280 g,采用随机数字表法将其分为3组(n=8):假手术组(S组)、常规复苏组(C组)和右美托咪定组(D组)。C组和D组采用窒息后心跳骤停法建立大鼠全脑缺氧缺血损伤模型,S组大鼠仅行气管插管不夹闭窒息,D组于气管夹闭前尾静脉注射负荷剂量右美托咪定4μg/kg,S组和C组分别给予等容量生理盐水。各组大鼠于自主循环恢复后12、24、48及72 h进行神经功能缺失评分(Neuropathy disability score,NDS),于72 h测定NDS后处死大鼠,取海马组织,采用TUNEL法标记检测海马神经元凋亡情况,采用免疫荧光双标法测定各组大鼠海马内星形胶质细胞VEGF的表达情况。结果与S组比较,C组各时点NDS评分均显著升高(P<0.05);D组大鼠在12 h时NDS评分与C组比较差异无统计学意义(P>0.05),D组大鼠在24、48和72 h三个时点NDS评分显著低于C组(P<0.05)。与S组比较,C组大鼠海马内神经元凋亡率和星形胶质细胞VEGF的表达均升高;与C组比较,D组大鼠海马内神经元凋亡率降低,星形胶质细胞VEGF的表达升高(P<0.05)。结论右美托咪定可减轻全脑缺氧缺血损伤大鼠脑损伤,降低海马内神经元的凋亡率,其机制可能与促进海马内星形胶质细胞上VEGF的表达有关。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤AQP-4表达及依达拉奉治疗效果的研究

目的：探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage,HIBD）后脑组织水通道蛋白-4（AQP-4）的表达变化及依达拉奉（edaravone）对其治疗效果的影响。方法：将7日龄Wistar大鼠120只随机分为3组：假手术组、缺氧缺血模型组（HIBD组）及依达拉奉治疗组,每组各40只。每组根据处死的时间不同又分5个亚组：6、24h、3、5、7d组,每亚组各8只,各组分别于不同时间点处死动物,测脑组织含水量,并采用免疫组化方法检测AQP-4的表达。结果：AQP-4在缺氧缺血6h即增强,3d达高峰,5～7d逐渐降低（P〈0.01）;治疗组各时间点AQP-4表达水平较HIBD组明显降低（P〈0.01）。结论：AQP-4参与了HIBD脑水肿的发生发展过程,依达拉奉可降低AQP-4的表达,从而减轻脑水肿,这可能是其脑保护作用机制之一。     

天麻素经十二指肠给药后的大鼠脑药动学特征（英文）

目的研究天麻素在大鼠十二指肠给药后的脑药动学和不同脑区的分布。方法将大鼠麻醉后,通过其十二指肠给天麻素,剂量为200 mg·kg^-1。在规定时间点收集血浆、脑脊液和4个不同脑区（皮质、海马、丘脑、小脑）的脑微透析液。采用HPLC法测定所收集液体中的药物浓度,采用DAS 2.0药动学软件计算药动学参数。结果天麻素给药后能迅速进入脑部,4个不同脑区和脑脊液的t_max分别为（40.0±6.1）、（42.5±7.7）、（37.5±9.5）、（42.5±7.7）和（55.8±16.0）min,其AUC与血浆AUC的比值分别为（2.6±1.0）%、（2.6±0.9）%、（3.0±0.9）%、（5.3±2.1）%和（6.0±2.6）%。天麻素在小脑的AUC明显大于在其他3个脑区的AUC（P<0.05）。结论天麻素经十二指肠给药后能迅速入脑部,但是入脑量低,所有AUC_脑/AUC_血浆均<6%。     

粒细胞集落刺激因子对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后脑组织VEGF及bax的影响

目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后脑组织血管内皮生长因子(VEGF)及bax的影响。方法7d龄Wistar大鼠168只随机分为3组:假手术对照组(A组),HIBD组(B组),HIBD+G-CSF治疗组(C组)。各组根据处死时间不同又分为7个亚组:6,12,24,48,72h组,5d组,7d组。建立HIBD模型,C组在缺氧缺血后即刻给予G-CSF(100μg/kg)。各组分别于HIBD后不同时间点取脑组织,A组也在相应时间点取脑组织,用免疫组织化学法检测各组脑组织中VEGF及bax的表达。结果A组脑组织各时间点均无明显VEGF和bax阳性表达;B组各时间点脑组织均可见VEGF和bax阳性表达,24～48h为表达高峰期,以后逐渐下降;C组各时间点脑组织VEGF阳性表达较A组和B组均明显增高,bax阳性表达较A组增高,但较B组均明显降低。同一时间点3组VEGF阳性表达相比差异均有统计学意义(P<0.01)。结论①新生大鼠HIBD后各时间点脑组织VEGF表达增加,可能与HIBD后神经组织自身修复能力有关;bax表达亦增加,与神经细胞凋亡有关。②G-CSF治疗后可明显增加新生大鼠HIBD后脑组织VEGF表达,降低bax表达,从而促进脑组织缺氧缺血损伤后结构和功能上的恢复。     

rhG-CSF对新生鼠缺氧缺血性脑损伤HIF-1α表达的影响

目的：探讨重组人粒细胞集落刺激因子（recombinant human granulocyte colony-stimulating factor,rhG-CSF）对缺氧缺血性脑损伤新生鼠海马区及皮质HIF-1α（hypoxiainducible factor 1α）表达的影响。方法：将7日龄新生Wistar大鼠随机分成假手术组,HIBD组和rhG-CSF治疗组。在乙醚麻醉下行右侧颈总动脉结扎,氮氧混合气缺氧2.5h制备HIBD模型。应用免疫组织化学法检测HIF-1α。结果：免疫组化结果显示：在新生大鼠大脑皮层和海马区,HIBD组较假手术组HIF-1α表达明显增加（P〈0.01）,治疗组较HIBD组HIF-1α表达明显增加（P〈0.01）。结论：缺氧缺血性脑损伤后,脑组织HIF-1α表达增加,可能与促进血管形成及抑制神经细胞凋亡有关。rhG-CSF可能通过调节HIF-1α的表达,减少神经细胞凋亡,增强脑组织对缺氧的耐受,从而改善缺氧缺血性脑损伤小鼠的预后。     

孕酮对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠血脑屏障通透性及脑水肿的影响

目的研究孕酮(PROG)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠血脑屏障(BBB)通透性和脑水肿的作用,并进一步探讨其潜在的机制。方法 7 d龄SD大鼠96只,随机分成4组:正常组、假手术组、缺氧缺血(HI)组和PROG组。建立HIBD动物模型,HI后24 h,伊文思蓝示踪剂检测BBB;干/湿法测定脑含水量;免疫组织化学法观察大脑皮质水孔通道蛋白4(AQP4)表达。结果正常组和假手术组BBB通透性、脑含水量和脑皮质AQP4的表达差异无显著性(P>0.05);HI组BBB通透性、脑含水量和脑皮质AQP4的表达明显高于假手术组(P<0.01);PROG组BBB通透性、脑含水量和脑皮质AQP4的表达明显低于HI组(P<0.05)。结论 PROG通过减轻BBB破坏和脑水肿对HIBD新生大鼠起脑保护作用,PROG的脑保护作用可能与下调新生大鼠脑皮质AQP4的表达有关。     

丹参素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织SOD、MDA的影响

目的 观察丹参素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织SOD、MDA的影响及探讨丹参素的脑损伤保护作用机理.方法 7日龄SD新生大鼠78只,随机分成5组:假手术组(n =6);缺氧缺血模型组(n =18);丹参素低剂量组(n =18);丹参素中剂量组(n =18);丹参素高剂量组(n =18).通过结扎左颈总动脉和吸入8%低氧混合气制备缺氧缺血性脑损伤(HIBD)动物模型.假手术组不进行缺氧缺血处理.丹参素各治疗组按低、中、高剂量分别于造模后0、24 h两个时点按15 mg/kg、30 mg/kg、60 mg/kg腹腔注射用生理盐水稀释至0.5 ml的丹参素注射液.缺氧缺血模型组及假手术组于相应时点腹腔注射生理盐水0.5 ml.假手术组于缺氧缺血后6 h,HIBD组与各丹参素组于缺氧缺血后6 h、24 h、48 h断头取脑,测定脑组织匀浆SOD、MDA.结果 与假手术组比较,缺氧缺血模型组新生大鼠大脑中MDA水平升高,SOD活性降低;应用丹参素治疗后MDA水平回降,SOD活性回升,且呈剂量效应.差异有统计学意义(P<0.05).结论 丹参素有减轻新生大鼠缺血再灌注时氧自由基引起的氧化损伤作用,从而发挥脑保护作用.     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时Bcl-2蛋白表达的研究

目的：通过研究新生大鼠脑缺血时bcl-2蛋白在海马区的表达特点，探讨bcl-2蛋白在缺血缺氧性脑损伤（HIBD）的作用。方法：56只7日龄新生SD大鼠随机分为1个对照组和7个实验组。给动物吸入含有92％氮气和8％氧气混合气体建立新生大鼠HIBD动物模型，分别在脑损伤后不同时间点（0．5、1、3、6、12、24、48、72h等）断头处死动物，取海马组织，用免疫组织化学方法检测海马脑神经细胞凋亡及bcl-2蛋白表达情况。结果：TUNEL染色的阳性细胞数与bcl—2蛋白阳性的细胞数在HIBD后的不同时间点出现分别有显著差异．海马区bcl-2蛋白阳性细胞在HIBD后立即出现，6h达到高峰，之后渐下降。结论：bel-2蛋白强表达于海马缺血区和缺血周边区的神经元。与神经元的存活或死亡有一定联系。     

高压氧对缺氧缺血新生大鼠脑组织神经可塑性相关蛋白的影响

目的研究高压氧(HBO)对缺氧缺血新生大鼠脑组织神经相关蛋白(GAP-43)和神经生长抑制因子(Nogo-A)的影响,探讨HBO对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用及机制。方法7日龄Wistar大鼠24只随机分为3组:正常对照组(CON组),HIBD组和HBO组,每组各8只,HBO组于缺氧缺血1h后行HBO处理,每日1次,连续7d。各组分别于17日龄时处死取材。苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织病理改变,免疫组织化学方法检测3组大鼠大脑皮层GAP-43蛋白和Nogo-A表达。结果HBO组病理改变较HIBD组减轻。GAP-43表达:平均灰度值HIBD组较正常对照组明显降低(P<0.05),HBO组较HIBD组明显降低(P<0.05)。Nogo-A表达:平均灰度值HIBD组较正常对照组降低(P<0.05),HBO组较HIBD组明显增加(P<0.05)。结论HBO治疗可以通过增加缺氧缺血新生大鼠脑组织GAP-43蛋白和降低Nogo-A的表达,发挥其对脑损伤的保护作用。     

血乳酸联合血糖监测在产后新生儿窒息诊断中的应用

目的：探讨血乳酸联合血糖监测在产后新生儿窒息诊断中的应用价值。方法 选取2013年2月．2014年3月在我院出生的80例发生窒息的新生儿为观察组。并选取同期健康新生儿30例作为对照组。统计分析两组血乳酸和血糖水平与新生儿窒息的关系并进行产后新生儿窒息发生的危险因素的多因素分析。结果：观察组血乳酸和血糖水平分别为（5．86±2,18）mmol／L和（5．15±2．26）mm01／L,显著高于对照组的（2．81±0．49）mmol／L和（2．74±0．62）mmol／L,差异有统计学意义（P〈O．05）。Pearson相关性分析结果显示,血乳酸和血糖水平均与新生儿窒息呈负相关（P〈O．05）。logistic多元回归分析结果显示产后新生儿窒息发生的危险因素有高血乳酸、血糖、间接胆红素和血压等。结论：血乳酸联合血糖监测可能成为产后新生儿窒息的重要预测指标,可用于产后新生儿窒息的辅助诊断。     

尿视黄醇结合蛋白和尿微量白蛋白对新生儿窒息肾损害早期诊断价值

目的探讨尿视黄醇结合蛋白和尿微量白蛋白对新生儿窒息肾损害的早期诊断价值。方法选取2010年2月至2012年2月间于我院及无锡市第四人民医院接受诊断和治疗的新生儿窒息患者60例,根据患者的Apgar评分,分为轻度窒息组和重度窒息组,另选取同期入院的正常足月新生儿作为对照组。观察比较对照组、轻度窒息组和重度窒息组患者的尿视黄醇结合蛋白(RBP)、尿微量白蛋白(Alb)以及尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)的含量差异。结果重度窒息组的RBP含量为(420.5±101.4)μg.L-1,明显高于轻度窒息组的(289.2±96.8)μg.L-1和对照组的(170.4±89.3)μg.L-1(P0.05);轻度窒息组的RBP含量明显高于对照组(P0.05)。重度窒息组的Alb含量为(21.41±8.76)mg.L-1,明显高于轻度窒息组的(13.12±4.65)mg.L-1和对照组的(8.82±3.81)mg.L-1(P0.05);轻度窒息组的Alb含量明显高于对照组(P0.05)。重度窒息组、轻度窒息组和对照组之间BUN和Cr含量比较结果差异无显著性(P0.05)。结论尿视黄醇结合蛋白和尿微量白蛋白对新生儿窒息肾损害早期诊断价值较高,值得推广。