RTN4C裸基因抑制人肝癌细胞生长及转移的体内实验研究

目的:研究RTN4C裸基因直接注射抗肝癌生长及转移复发作用.方法:将RTN4C装入逆转录病毒载体,扩增提取RTN4C裸基因,以LacZ为对照组.将不同裸基因和生理盐水与LCI-D20裸鼠人肝癌同时皮下接种或待LCI-D20肝癌成瘤后注射,观察对肿瘤成瘤和生长影响.LCI-D20肿瘤裸鼠皮下接种后10天,分别瘤内注射不同裸基因,观察其对肿瘤生长转移影响.LCI-D20肿瘤肝内接种,接种后22天行肝癌切除术,术中经切缘或脾内注射不同裸基因,观察其对术后转移复发的影响.结果:不同裸基因与LCI-D20肝癌同时皮下接种对照组、LacZ组、RTN 4C组,肿瘤直径分别为(1.81±0.12)cm,(1.61±0.27)cm、(0.43±0.04)cm.裸基因肿瘤内注射对照组、LacZ组、RTN4C组,瘤径(cm)分别为0.91±0.09,0.90±0.06,0.25±0.04;肝癌切除术应用裸基因转移灶累及部位数、切缘复发瘤直径、肝内转移灶数目,转移灶累及肝叶数在对照组、LacZ组与RTN4C组间存在显著差异.脾内注射效果优于肝切缘组注射.结论:RTN4C裸基因注射具有抑制LCI-D20肝癌生长及防治肝癌切除术后转移复发作用.     

植入式丝裂霉素控释剂对人肝癌裸鼠移植瘤增殖、凋亡及耐药性影响的研究

目的　探讨植入式丝裂霉素 (MMC)控释剂对人肝癌裸鼠移植瘤增殖、凋亡及耐药性的影响。方法　将不同剂量的MMC控释剂植入人肝癌LCI D2 0裸小鼠皮下移植瘤内 ,与MMC腹腔注射组、硅胶载体植入剂组、生理盐水腹腔注射组对照 ,比较其凋亡指数、增殖细胞核抗原 (PCNA)指数及P 糖蛋白的表达。结果　MMC控释剂瘤内植入可明显抑制人肝癌LCI D2 0裸小鼠皮下移植瘤细胞增殖 ,诱导肿瘤细胞凋亡 ,且不增加肿瘤细胞的耐药性。结论　丝裂霉素控释剂瘤内植入可能成为临床治疗中晚期肝癌的新方法。     

人胃癌移植瘤演进过程中肥大细胞的研究

目的 :为了探讨肥大细胞与肿瘤演进的关系。方法 :将冻存的人胃低分化粘液腺癌MGC 80 3细胞悬液先在裸小鼠皮下接种成瘤 ,瘤直径 1cm时取完整瘤组织块再分别接种到裸小鼠的皮下、胃壁上至成瘤。分早 (2 0d以内 )、中 (2 0～ 4 0d)、晚 (40d以上 )三期观察皮下和胃壁移植肿瘤的侵袭转移情况并用甲苯胺蓝染色法检测肥大细胞。结果 :皮下、胃壁移植瘤都只在晚期才出现转移 ,皮下组肺转移率 57 1%(4/ 7) ,胃壁组肺、肝、胃周淋巴结转移率皆为 50 0 %(3/ 6 ) ,并广泛扩散至肠、脾、肝、肾等处。正常皮下组织和皮下移植瘤早、中、晚三期肥大细胞数目分别为 18.77± 8.6 0 ,4 .30± 5.4 9,5.50± 3.86和 2 .6 7± 2 .2 8,正常胃壁和胃壁移植瘤早、中、晚三期肥大细胞数目分别为 12 .6 3± 4 .4 7,6 .0 3± 3.11,3.59± 1.6 9和 1.97± 2 .13,两组肥大细胞数目基本上为依次递减(P <0 .0 1)。结论 :肥大细胞在肿瘤侵袭转移过程中可能有一定的抑制作用。     

联合应用angiostatinK(1-3)和endostatin裸DNA对人脑胶质瘤生长的抑制作用

目的 :探讨联合应用angiostatinK(1 3) {ASK(1 3) }和endostatin(ES)裸DNA对人脑胶质瘤生长的影响和作用特点 .方法 :在 1 5只裸鼠皮下接种SHG4 4人脑胶质瘤细胞并分A ,B和C组 (n =5 ) ;在接种后第 1 2日 ,A组 :给予瘤体内注射 2 0 μL脂质体包裹的各 5 μg的 pcDNA S ASK (1 3)和pcDNA S ES质粒 ;B组 :瘤体内注射 2 0 μL脂质体包裹的 1 0μgpcDNA 3.1质粒 ;C组 :瘤体内注射 2 0 μL无菌生理盐水 ;3d后重复注射 1次 .每日定时观察肿瘤生长情况 .4 0d后处死裸鼠 ,检测和计算肿瘤体积、坏死率、血管数和抑瘤率 .结果 :A ,B和C组肿瘤的终体积分别是 4 .4 1 6± 1 .88cm3 ,8.0 34± 1 .85cm3 和 8.0 5 6± 1 .91cm3 ,A组抑瘤率为 4 6 .8% ;A ,B和C组肿瘤的平均坏死率分别为 39.1 2± 7.35 % ,9.1 7± 7.89%和 9.2 1± 7.4 8% ,A与B或C组比较差异显著 (P <0 .0 1 ) ,B ,C组比较差异不显著 (P >0 .0 5 ) .3组的血管计数分别为 3.92± 1 .89,1 1 .8± 2 .0 4和 1 2 .0± 2 .2 1 ,A与B或C组比较差异显著 (P <0 .0 1 ) ,B ,C组比较差异不显著 (P >0 .0 5 ) .结论 :联合应用ASK(1 3)和ES裸DNA可抑制胶质瘤的血管生成、导致其坏死增加 ,进而抑制肿瘤生长 .其作用机制有待深入研究 ,该实验为胶质瘤的抗血管生成     

奥曲肽对人肝癌诱导肿瘤血管生成的抑制作用

目的　探讨生长抑素类似物奥曲肽对人肝癌诱导肿瘤血管生成的抑制作用。方法　采用人肝癌LCI D2 0裸鼠角膜微囊移植模型 ,利用体视显微镜和显微数码摄像系统 ,动态观测奥曲肽对人肝癌诱导肿瘤血管生成能力的影响。应用人肝癌LCI D2 0皮下移植瘤模型 ,采用CD34免疫组织化学SP法检测肿瘤标本微血管密度 (MVD) ,观察奥曲肽对人肝癌诱导的肿瘤血管生成和皮下移植瘤生长的影响。结果　LCI D2 0肝癌组织移植裸鼠角膜微囊能够诱导角膜新生血管形成 ;与对照组相比 ,奥曲肽组动物角膜新生血管芽生延迟 ,新生毛细血管网稀疏、生长缓慢 ;术后第 7、9、12、15、18、2 1天 ,奥曲肽组人肝癌诱导的角膜新生血管积分比对照组减少 (P <0 0 5 )。奥曲肽对LCI D2 0皮下肿瘤生长具有抑制作用 ,免疫组化研究表明 ,治疗组肿瘤内MVD(2 1 7± 4 2 7)比对照组MVD(31 8± 3 87)减少 (P <0 0 1)。结论　生长抑素类似物奥曲肽对人肝癌诱导肿瘤血管生成具有抑制作用 ,可能为肝癌的治疗提供一个新的途径。     

裸大鼠人高转移肝癌皮下和原位移植模型的建立

目的探讨建立裸大鼠人高转移肝癌的皮下和原位移植模型的可行性,并观察其生物学特性。方法体外培养人高转移肝癌株HCCLM3接种于裸大鼠皮下,建立皮下移植模型,然后用此移植瘤组织再接种于裸大鼠肝内,建立肝原位移植瘤模型。皮下移植的裸大鼠每周称重、测量瘤径,原位移植的裸大鼠每周称重,两组裸大鼠分别于移植8周后处死,通过巨检、镜检等观察移植肿瘤的生物学特性。结果裸大鼠皮下均成瘤,未见肺转移,裸大鼠原位移植成瘤率90％,肺转移70％,腹水发生率50％,自发消退率0％。结论裸大鼠人高转移肝癌HCCLM3移植瘤模型成功率高,原位移植有高转移,无自发消退现象,可作为研究肝癌转移和药物筛选的理想模型。     

血管内皮细胞生长因子抑制剂对成骨肉瘤生长的影响

通过动物接种方法研究血管内皮细胞生长因子 (VEGF)抗体对骨肉瘤生长的抑制作用。将OS 732骨肉瘤细胞以 1 0 70 / (mL·只 )的剂量接种于BALB/C型裸鼠腋窝部皮下 ,并分成 4组 :A组于接种次日于瘤体局部注射VEGF抗体 ,B组于接种后 2周瘤体局部注射抗体 ,C组于接种次日于瘤体局部注射PBS ,D组不注射抗体。VEGF注射剂量为 2 0 0 μg/ (只·次 ) ,每周 3次 ,共 3周。 4周后处死A、C2组裸鼠 ,6周后处死B、D 2组裸鼠。每组均取出瘤组织作病理切片。计算肿瘤体积及肿瘤内微血管密度 ,并对结果进行分析。结果显示 ,A组的肿瘤体积小于B、C、D 3组 ,在接种后 2 5d与D组有统计学差异 (P <0 .0 5 ) ;B、C、D 3组间无统计学差异。 4组肿瘤内微血管密度的比较 ,无统计学差异。提示 ,VEGF抗体对骨肉瘤早期的生长有明显的抑制作用 ,可作为转移病灶的预防及治疗方法之一。     

血管生成抑制素基因对人原发性肝细胞癌裸鼠移植瘤的治疗作用

目的：研究血管生成抑制素基因对人原发性肝癌裸小鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法：建立人原发性肝癌裸小鼠皮下移植瘤模型。将荷瘤裸小鼠随机分为3组；肿瘤对照组，空载体组及angio基因治疗组分别瘤内直接注射裸露DNA质粒，不同时段观察皮下肿瘤生长情况，绘制计算皮下肿瘤生长曲线：病理学检查；原位末端标记（TUNEL）法检查细胞原位凋亡；放射免疫法检测裸小鼠血清甲胎蛋白变化；透射电镜观察细胞超微结构变化。结果：皮下肿瘤生长曲线及病理学检查结果显示，angio基因瘤内注射可部分抑制肿瘤生长。TUNEL法检测显示，angio组凋亡指数明显高于肿瘤对照组。扫描电镜观察细胞超微结构变化。发现angio基因治疗组内有明显的细胞凋亡发生。结论：angio基因直接瘤内注射能抑制人原发性肝癌裸小鼠移植瘤肿瘤生长。其作用机理可能为抑制肝癌的血供从而抑制肿瘤生长。     

人卵巢癌细胞系HO-8910裸鼠皮下移植瘤的建立

目的:探讨建立卵巢癌细胞系HO8910的裸鼠皮下移植瘤模型的适宜条件。方法:分别用2.5×106/100μL(A组),3.5×106/100μL(B组)和4.5×106/100μL(C组)的细胞接种浓度,注入裸鼠后项中间皮下,观察成瘤情况;用4.5×106/100μL的细胞接种浓度,分别接种于裸鼠后项中间(C组),背部(D组)和前肢腋窝皮下(E组),观察成瘤情况;分别用第38代(F组),第25代(G组)和第10代(C组)的肿瘤细胞4.5×106/100μL,注入裸鼠后项中间,观察各组成瘤情况。结果:A组成瘤率为60%,B组和C组的成瘤率均为100%,但C组的成瘤速度明显高于B组;C组,D组和E组的成瘤率均为100%,注射肿瘤细胞后第2周,C组,D组和E组的肿瘤生长平均相对体积分别为3.0593±0.6851,2.4348±0.4862和2.4039±0.3631,各组间差异无显著性;注射肿瘤细胞后第4周,C组,D组和E组的肿瘤生长平均相对体积分别为13.4832±2.2639,9.3437±1.0986和8.9537±1.0041,C组显著高于D组和E组(P<0.01);G组的成瘤率为30%,F组的成瘤率为50%,与C组相比,差异有显著性(P<0.01)。结论:使用HO8910细胞株,接种浓度为4.5×106/100μL,接种部位为后项中间,接种时尽量使用传代次数少,细胞活性高的细胞,能获得较理想的裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型。     

克拉霉素治疗小鼠Lewis肺癌的实验研究

目的　研究克拉霉素对小鼠Lewis肺癌的治疗效果和作用机制 ,为临床应用提供实验依据。方法　C5 7BL/6小鼠右肋处皮下接种Lewis肺癌 ,6h后随机分为 2组 ,每组 15只 ,分别接受克拉霉素 5 0mg·kg-1·day-1(实验组 )或等体积 5 %葡萄糖 (对照组 )腹腔内注射 ,每日 1次 ,连用 2 1d。观察比较实验组与对照组小鼠存活时间、移植瘤体积、肿瘤组织内微血管度和肺脏转移瘤数目。结果　实验组小鼠的平均存活时间为 (2 7 0± 2 6)d ,肿瘤组织内微血管密度为 18 7± 11 4,肺脏表面的转移瘤数目为 12 0±2 9,对照组小鼠的上述参数分别为 (19 1± 2 0 )d、2 4 5± 13 7和 18 6± 5 4,两组差异非常显著 (P <0 0 5 )。结论　克拉霉素具有抗肿瘤血管生成和抗肿瘤转移的作用 ,在肿瘤的综合治疗中具有一定的应用价值     

降钙素对乳腺癌荷瘤裸鼠肿瘤生长和骨代谢的作用

目的 :研究降钙素对人乳腺癌细胞系MCF 7荷瘤裸小鼠的肿瘤生长和骨代谢的影响。方法 :建立MCF 7细胞皮下移植瘤的裸小鼠模型 ,分为A、B、C、D 4组 ,分别隔日肌注注射用水或鲑鱼降钙素 (sCT)0 .0 4、0 .2、1μg。 2 0d后观察瘤体大小 ,用邻甲酚酞酪合酮法检测血清钙 ,2 氨基 2 甲基丙醇法检测血清碱性磷酸酶 (ALP) ,以扫描电镜 (SEM)比较不同组裸小鼠的第三腰椎骨质结构。结果 :不同组的瘤体直径和血清钙水平差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。 4组的血清ALP水平分别为 (70 .5 0± 4 .32 )、(78.33± 9.31)、(83.83±8.95 )和 (85 .6 6± 8.5 0 )IU L ,方差分析和t检验显示 ,A组和C组、A组和D组间差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。SEM显示D组裸小鼠的骨质结构较A组致密。结论 :sCT能提高裸小鼠血清ALP活性和改善骨质结构 ,但未观察到其抑癌和降血钙作用。     

艾氏腹水癌克隆细胞株E2G8建立小鼠动物模型生物学特性研究

目的　比较不同品种 (系 )小鼠接种E2G8细胞株的某些生物学特性。方法　将E2G8细胞稀释成不同浓度 ,接种KM、DBA 2、6 15、C57BL 6及BALB c小鼠皮下或腹腔 ,观察小鼠出现可见肿块 腹水时间及小鼠生存时间 ;测量肿块直径 (cm)及瘤重 ;荷瘤小鼠腹腔注射环磷酰胺 (CTX) ,观察E2G8细胞肿瘤模型对CTX治疗的敏感性。结果　E2G8接种BALB c、6 15小鼠皮下毒性最大 ,DBA 2、C57BL 6小鼠次之 ,接种KM小鼠皮下毒性最小 ;接种DBA 2、C57BL 6、6 15小鼠腹腔毒性较大 ,致死性高 ,对BALB c和KM小鼠的致死性弱 ;E2G8瘤细胞在KM和 4种纯系小鼠皮下均能很好生长肿瘤 ,其中在KM小鼠皮下肿瘤生长最大 ,在BALB c小鼠皮下肿瘤最小 ;KM、C57BL 6、6 15、DBA 2、BALB c小鼠皮下接种瘤细胞第 12天瘤重分别为 (2 4 0± 1 30 ) ,(0 90± 0 4 8) ,(1 2 0± 0 38) ,(1 10± 0 2 9) ,(0 80± 0 30 )g ;E2G8细胞接种 5个不同品种 (系 )小鼠制备的肿瘤模型 ,用CTX治疗 ,抑瘤率由高到低依次为6 6 7% (6 15 ) ,5 5 0 % (BALB c) ,5 3 3% (C57BL 6 ) ,5 0 % (KM) ,36 4 (DBA 2 ) ,其中 6 15小鼠建立的模型对CTX的治疗最敏感。结论　E2G8细胞株接种 5个不同品种 (系 )小鼠 ,所测生物学特性不完全相同 ,但是从腹腔 皮下接种、CTX     

克拉霉素治疗小鼠Lewis肺癌的实验研究

目的　研究克拉霉素对小鼠 L ewis肺癌的治疗效果和作用机制 ,为临床应用提供实验依据 .方法　 C5 7BL/ 6小鼠右肋处皮下接种 L ewis肺癌 ,6 h后随机分为 2组 ,每组 15只 ,分别接受克拉霉素 5 0 mg· kg- 1· d- 1 (实验组 )或等体积 5 %葡萄糖 (对照组 )腹腔内注射 ,每日 1次 ,连用 2 1d.观察比较实验组与对照组小鼠存活时间、移植瘤体积、肿瘤组织内微血管密度和肺脏转移瘤数目 .结果　实验组小鼠平均存活时间为 (2 7.0± 2 .6 ) d,肿瘤组织内微血管密度为 18.7± 11.4,肺脏表面的转移瘤数目为12 .0± 2 .9,对照组小鼠的上述参数分别为 (19.1± 2 .0 ) d,2 4.5± 13.7和 18.6± 5 .4,两组差异非常显著 (P<0 .0 5 ) .结论　克拉霉素具有抗肿瘤血管生成和抗肿瘤转移的作用 ,在肿瘤的综合治疗中具有一定的应用价值 .     

体内连续筛选法建立自发性肺转移人肝癌细胞系

目的　从人肝癌裸鼠肺转移灶中建立人肝癌细胞系 ,为探索肝癌转移的分子机制提供模型。方法　用高转移性人肝癌克隆细胞株MHCC97 H接种裸鼠 ,进行 3次肺转移筛选 ,取肺转移瘤建成皮下接种后自发性肺转移的细胞系。检测下列指标 :形态学、生长曲线、克隆形成率、运动速度、核型分析、流式细胞分析、免疫细胞化学检查、HBVDNA、成瘤性和转移性。结果　从裸鼠肺转移灶中培养出人肝癌细胞系HCCLM3,为多边形上皮性癌细胞 ,亚三倍体核型 ,染色体众数范围 5 5～ 5 8条 ;细胞倍增时间 34 9h ;克隆形成率 32 4 %± 3 2 % ;细胞运动速度 (2 0± 2 ) μm/h ;免疫细胞化学显示甲胎蛋白、白蛋白、细胞角质蛋白 8、P16阳性 ,P5 3、nm2 3、HBsAg阴性 ;细胞基因组中有HBVDNA整合。裸鼠皮下接种成瘤率 10 0 % ,5周后自发性肺转移率为 10 0 % ,肺转移灶中位数 12 1个 /裸鼠。瘤组织原位接种于裸鼠肝脏 ,5周后腹壁转移 10 0 %、腹腔内转移 80 %、肝内转移 10 0 %、膈肌转移 70 %、肺转移10 0 % ,肺转移灶中位数 2 6 8个 /裸鼠。结论　建成一个皮下和原位接种均出现自发性高转移的人肝癌细胞系 ,为研究肝癌转移提供了新的实验模型     

裸鼠人肝癌原位移植瘤模型的建立

目的 探讨利用人肝癌细胞系,建立裸鼠人肝癌原位移植瘤模型,在肝细胞癌自杀基因治疗的应用价值.方法 取人肝癌细胞系Be17402和HepG2,制备皮下移植瘤,后将肿瘤组织接种于裸鼠肝内,建立裸鼠肝原位移植瘤模型.HE染色进行病理形态学观察.结果 裸鼠皮下成瘤率为100.0％(4/4).肝内接种肿瘤,裸鼠存活率100.0％(32/32),成瘤率81.3％(26/32);镜下观察肿瘤细胞成浸润性生长;肺、肠系膜淋巴结等组织器官未见肿瘤转移灶.结论 应用人肝癌细胞系建立的裸鼠肝原位移植瘤模型可以很好地模拟人肝癌的解剖学特征,但肝癌转移模型的建立方法尚需探讨.     

骨髓间充质干细胞对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤的作用

目的 研究骨髓间充质干细胞(MSCs)对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤的影响。方法 自C57BL/6小鼠骨髓分离MSCs,制备单细胞悬液并于体外传代培养,取第4～5代细胞用于实验。56只C57BL/6小鼠经Lewis肺癌细胞皮下接种建立小鼠肺癌皮下移植瘤模型,根据MSCs给予时间分为D0组(接种同时给予MSCs)和D10组(接种后第10天给予MSCs）,其中D0组分为3个亚组（n=8）：组1单纯接种肿瘤细胞,组2肿瘤细胞和MSCs共同接种,组3肿瘤细胞接种及尾静脉注射MSCs;D10组分为4个亚组（n=8）：组4(肿瘤细胞接种及瘤体内注射MSCs)及其等量PBS对照组（组5）,组6（肿瘤细胞接种及尾静脉注射MSCs）及其等量PBS对照组（组7）。观察各组移植肿瘤的生长情况,包括肿瘤形成时间及不同时间点的瘤体大小,并进行组间分析比较。结果 在D0组,组1、2、3肿瘤形成时间分别为（9.37±1.41）d、（7.62±1.40）d和（9.25±1.49）d,与组1和组3比较,组2的肿瘤形成时间明显缩短（P<0.05）;而各时间点三组瘤体大小比较,差异无统计学意义（P>0.05）。组4的瘤体显著大于其对照组（P<0.05）;而组6与其对照组的瘤体大小比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 MSCs与Lewis细胞同时接种可加速小鼠肺癌皮下移植瘤形成,而成瘤后MSCs瘤体内注射具有促进移植瘤生长的作用。     

骨髓间充质干细胞对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤的作用

目的 研究骨髓间充质干细胞(MSCs)对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤的影响.方法 自C57BL/6小鼠骨髓分离MSCs,制备单细胞悬液并于体外传代培养,取第4～5代细胞用于实验.56只C57BL/6小鼠经Lewis肺癌细胞皮下接种建立小鼠肺癌皮下移植瘤模型,根据MSCs给予时间分为D0组(接种同时给予MSCs)和D10组(接种后第10天给予MSCs),其中D0组分为3个亚组(n=8):组1单纯接种肿瘤细胞,组2肿瘤细胞和MSCs共同接种,组3肿瘤细胞接种及尾静脉注射MSCs;D10组分为4个亚组(n=8):组4(肿瘤细胞接种及瘤体内注射MSCs)及其等量PBS对照组(组5),组6(肿瘤细胞接种及尾静脉注射MSCs)及其等量PBS对照组(组7).观察各组移植肿瘤的生长情况,包括肿瘤形成时间及不同时间点的瘤体大小,并进行组间分析比较.结果 与组1和组3比较,组2的肿瘤形成时间明显缩短(P<0.05);而各时间点三组瘤体大小比较,差异无统计学意义(P>0.05).组4的瘤体显著大于其对照组(P<0.05);而组6与其对照组的瘤体大小比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 MSCs与Lewis细胞同时接种可加速小鼠肺癌皮下移植瘤形成,而成瘤后MSCs瘤体内注射具有促进移植瘤生长的作用.     

HepG2细胞系皮下接种与肝原位接种成瘤的比较研究

目的 探讨皮下接种成瘤与原位接种成瘤在内环境不同情况下对肿瘤生长、侵袭转移能力的影响.方法 选取人肝癌细胞系HepG2进行体外培养.将BALB/c裸鼠随机分为皮下瘤接种、肝脏原位细胞接种两组.观察裸鼠成瘤率、裸鼠存活率、肿瘤生长速度、肿瘤病理学特点及远处脏器转移.结果 HepG2细胞体外生长状态良好,增殖活跃.皮下接种成瘤率100%,肿瘤呈结节状膨胀性生长,对周围组织有侵袭,但无转移.肝脏原位细胞接种组成瘤率100%,肿瘤呈结节状膨胀性生长,对周围肝组织和腹壁有侵袭,肝内转移率70%,肺转移50%.结论 HepG2细胞皮下和肝原位接种易成瘤,可用于肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)体内研究的实验模型.如果进行HCC的侵袭转移的机制及药物干预治疗等方面的研究,肝原位接种成瘤更能模拟人类肿瘤生长的条件.     

比较两种裸鼠人肝癌转移模型

目的　对两种裸鼠人肝癌转移模型进行比较。方法　分别采用直接注射法和瘤块肝包膜下嵌入法制作裸露人肝癌转移实验动物模型 ,观察接种阳性率、肿块大小、生长速度、肝邻近脏器浸润转移情况。结果　接种后 2周直接注射法和瘤块嵌插法接种阳性率分别为 85 %、90 % (P >0 . 0 5 ) ,肿块大小分别为 (2 . 0 0± 1 90 )mm、(8 .11± 2 . 70 )mm(P <0 . 0 5 ) ,肺转移率 10 .0 % ,前者生长速度慢于后者。结论　两种裸鼠肝癌模型制作方法均为理想 ,直接注射法简便、易行 ,但瘤块嵌插法肿瘤生长速度较快     

腺病毒介导的凝血酶敏感蛋白1抗血管新生衍生物基因转移抑制K562细胞裸鼠体内生长

目的　探讨腺病毒介导的凝血酶敏感蛋白 1(thrombospondin 1,TSP1)抗血管新生衍生物(TSP1f)基因转移对人白血病细胞株K5 6 2裸鼠移植瘤的抑制活性及作用机制。方法　应用RT PCR方法从正常人外周血单个核细胞扩增TSP1fcDNA序列 ;采用AdEasy系统构建TSP1f 重组腺病毒ADV TSP1f;用Western印迹方法检测ADV TSP1f 介导的TSP1f 在K5 6 2细胞中的表达 ;18只皮下移植瘤模型小鼠分为 3组 ,分别于移植瘤内注射 10 9pfuADV TSP1f、10 9pfuADV LacZ及PBS观察对K5 6 2裸鼠体内生长的抑制作用 ;用免疫组化方法比较移植瘤内微血管密度 (MVD)。结果　K5 6 2细胞经ADV TSP1f感染可高效表达 /分泌TSP1f 多肽 ;治疗后 3周ADV TSP1f 治疗组移植瘤体积为 ( 110 8mm3± 179mm3) ,远小于ADV LacZ组 ( 45 18mm3± 45 2mm3)及PBS组 ( 46 6 6mm3± 45 8mm3) ,(P <0 0 1) ;每× 2 0 0倍视野中 ,ADV LacZ、PBS及ADV TSP1f 治疗组组织切片内CD31阳性血管内皮细胞平均数分别为 36± 7,34± 9和 14± 4。结论　ADV TSP1f可显著抑制K5 6 2细胞裸鼠体内生长 ,有望成为治疗恶性肿瘤包括造血系统恶性肿瘤有效的基因治疗药物。