通腑泻肺法对脓毒症大鼠的肺保护作用研究

目的 观察通腑泻肺法对盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒症大鼠的肺保护作用,并探讨其可能机制.方法 42只SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组(n=6)、模型组(n=18)和通腑泻肺组(n=18).模型组和通腑泻肺组采用CLP制备脓毒症模型,制模后即刻通腑泻肺组灌胃通腑泻肺颗粒0.01 mL/g,模型组灌胃等量生理盐水,空白对照组不给予任何处理.制模后3、6、12 h经腹主动脉取血行血气分析;经下腔静脉取血检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量;行支气管肺泡灌洗留取灌洗液(BALF)检测总蛋白(TP)、总磷脂(TPL)、饱和磷脂酞胆碱(DSPC)含量;取肺组织测定湿/干质量(W/D)比值和肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)含量;光镜下观察肺组织病理学改变.结果 与空白对照组比较,模型组制模后pH值、动脉血氧分压(PaO2)、碳酸氢根(HCO3-)、剩余碱(BE)降低,动脉血二氧化碳分压(PaCO2)升高,血清TNF-α和IL-6逐步升高,BALF中TP升高,TPL、DSPC/TPL降低,肺W/D比值及肺组织MDA、MPO含量升高.与模型组比较,通腑泻肺组pH值在制模后3 h升高(7.27±0.04比7.18±0.07,P<0.05),PaO2 (mmHg,1 mmHg=0.133 kPa)在制模后3、6、12 h升高(3 h:128.00±16.05比106.78±10.73,6 h:98.46±15.97比72.80±16.33,12 h:90.70±9.31比74.28±12.19,均P<0.05);血清TNF-α(ng/L)在制模后12 h显著降低(508.20±94.08比756.60±138.77,P<0.05),IL-6(ng/L)在制模后6 h、12 h显著降低(6 h:687.80±35.00比849.40±148.28,12 h:728.80±214.41比917.00±245.96,均P<0.05);BALF中TP(g/L)在制模后12 h显著降低(1.01±0.23比1.60±0.47,P<0.05),TPL(mg/L)在制模后12 h显著升高(86.40±11.33比62.40±16.33,P<0.05),DSPC/TPL在制模后6 h、12 h显著升高(6 h:0.58±0.13比0.38±0.10,12 h:0.45±0.13比0.24±0.07,均P<0.05);肺W/D比值在制模后3 h显著升高(3.84±0.25比2.99±0.50,P<0.01),制模后12 h显著降低(3.21±0.53比4.89±1.14,P<0.05);肺组织匀浆中MDA(nmol/mg)在制模后6 h、12 h显著降低(6 h:4.04±2.58比8.89±2.61,12 h:11.31±3.60比20.60±8.10,均P<0.05),MPO(U/g)在制模后12 h显著降低(4.79±0.66比7.22±1.76,P<0.05).光镜下通腑泻肺组肺组织水肿、充血、渗出和纤维化等病理变化均较模型组减轻.结论 通腑泻肺法治疗脓毒症大鼠能改善低氧血症和代谢性酸中毒,减轻肺水肿和肺组织病理损伤;其肺保护作用机制可能是通过抗氧化、抑制炎症因子表达和释放以及抑制肺表面活性物质降解等途径实现.     

转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α在老龄肺纤维化大鼠血清中表达变化的实验研究

目的:对比观察老龄大鼠和成年大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在博来霉素诱导肺纤维化模型中表达水平的变化,探索老年肺纤维化发病率升高的可能机制.方法:大鼠气管内灌注博来霉素(模型组)或生理盐水(对照组),于第7、14、21、28天分别处死5只,测定血清中TGF-β1、TNF-α的浓度;测定肺组织匀浆中羟脯氨酸(HYP)的浓度;通过HE染色观察肺组织形态的变化.结果:各时间点模型组大鼠肺组织HYP含量、血清中TGF-β1、TNF-α的浓度均较对照组明显增高,差异有显著性(P＜0.05);成年和老龄模型组第7天至第28天肺组织HYP含量、血清中TGF-β1、TNF-α水平逐渐升高,但是成年模型组第21、28天与同组第14天比较差异无显著性(P＞0.05),而老龄模型组在第21天和第28天时仍明显继续升高,且与同组第14天比较差异有显著性(P＜0.05).结论:气管内灌注博来霉素后老龄大鼠HYP、TGF-β1、TNF-α的浓度长时间及高水平表达,是肺纤维化随年龄增加的分子基础,也是老年人肺纤维化发病率升高原因之一.     

屈头鸡果对哮喘小鼠气道炎症细胞及肺组织NF-κBp65、TGF-β1的调节作用研究

目的观察在屈头鸡果的干预作用下,支气管哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)白细胞(WBC)、嗜酸粒细胞(EOS)数量的变化及其肺组织核转录因子κBp65(NF-κBp65)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达水平。方法SPF级BALB/c雌性小鼠50只,随机分为5组,每组10只。A组为正常对照组(腹腔注射生理盐水); B组为哮喘模型组(腹腔注射致敏液); C组为屈头鸡果治疗剂量组(腹腔注射致敏液+灌胃屈头鸡果浆2. 16 g/kg); D组为屈头鸡果中毒剂量组(腹腔注射致敏液+灌胃屈头鸡果浆10. 8 g/kg); E组为地塞米松治疗组(腹腔注射致敏液+地塞米松2 mg/kg)。在末次激发结束后采集其BALF和肺组织,观察镜下各组小鼠BALF中WBC总数与EOS计数;采用蛋白印迹杂交(Western-blot)法测定各组小鼠肺组织NF-κBp65、TGF-β1表达水平。结果 A组小鼠BALF中WBC总数、EOS计数以及肺组织NF-κBp65、TGF-β1表达水平均显著低于B组、C组、D组和E组,差异有显著统计学意义(P 0. 01);C组、D组小鼠BALF中WBC总数、EOS计数显著低于B组(P 0. 05); C组、D组小鼠肺组织NF-κBp65、TGF-β1表达水平亦显著低于B组(P 0. 05); D组有部分小鼠死亡。结论屈头鸡果可调节哮喘小鼠气道中炎症细胞的数量以及肺组织NF-κBp65、TGF-β1的表达水平,从而抑制哮喘气道炎症;但屈头鸡果具有一定毒性,不可过量服用。     

血必净注射液联合地塞米松防治大鼠百草枯中毒慢性肺损伤的作用研究

目的 探讨血必净注射液联合地塞米松防治大鼠百草枯中毒慢性肺损伤的作用及可能机制.方法 30只雄性Wistar大鼠被随机均分为6组,每组5只.腹腔注射质量分数为20%的百草枯80 mg/kg制备大鼠中毒模型;正常对照组予生理盐水.染毒后2 h,治疗组分别向腹腔注射小剂量血必净注射液(1.25 g/kg)、大剂量血必净注射液(2.50 g/kg)、地塞米松(25 mg/kg)及大剂量血必净注射液联合地塞米松(联合治疗),正常对照组和模型组给予等量生理盐水,均每日1次,连用4 d.观察各组大鼠染毒后反应;于28 d处死各组大鼠取相应标本,检测肺系数、肺匀浆中羟脯氮酸(HYP)、血清转化生长因子-β1(TGF-β1),同时行肺组织病理学观察.结果 各治疗组血清TGF-β1、肺HYP均较模型组显著降低,以联合治疗组最为明显,血必净大剂量组和地塞米松组其次,血必净小剂量组仅TGF-β1好于模型组,差异有统计学意义(P均<0.05).比较各组肺系数,联合治疗组最佳,其他治疗组间差异无统计学意义.肺组织病理学观察显示,治疗组肺纤维化及实变程度较模型组轻,其中联合治疗组最轻.结论 血必净注射液联合地塞米松治疗百草枯中毒,通过抑制TGF-β1水平,减少纤维母细胞迁移、活化,抑制胶原蛋白产生,保护肺组织结构,可以更有效地抑制肺纤维化、肺实变.     

骨髓间充质干细胞移植对百草枯中毒导致肺纤维化的影响

目的 观察外源性骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠急性PQ中毒导致的肺纤维化是否产生治疗作用及其可能的机制.方法 取54只SD雄性大鼠,随机(随机数字法)分成3组:A组为空白对照组,B组为PQ+ PBS组,C组为PQ+BMSCs组.其中B组、C组均以120mg/kg的PQ溶液予以一次性灌胃染毒,染毒后6hC组大鼠予以尾静脉注入BMSCs 1×106个/mL,而B组大鼠则予以注入相应剂量的PBS.观察各组大鼠的一般情况,于染毒后7d、14 d、28 d处死未死亡的大鼠,取左下肺组织,行HE和Masson染色观察各组肺组织的病理改变情况,根据Szapiel肺泡炎和肺纤维化的分级法进行肺纤维化评分,并行免疫组织化学检测肺组织中TGF-β1及HGF的表达情况;取右下肺,检测HYP对比各组肺组织中的HYP含量的变化情况.结果 肺组织病理改变:染毒7d后可见B组肺泡炎性改变明显,肺泡腔内可见大量渗出液;C组的肺泡炎性渗出相对B组为轻.14 d可见B组肺泡间质水肿及渗出减轻,但肺间质胶原纤维增多;C组间质纤维化沉积程度相对B组较轻.28 d时B组肺间隔增厚普遍可见胶原纤维沉积,肺泡扩张明显,肺泡间隔断裂,肺泡结构紊乱;C组间隔中的胶原纤维化较B组轻,肺泡基本结构仍可见.HYP含量:B组大鼠肺组织HYP含量随着染毒时间的延长呈进行性增加,28 d时达最高峰,各时间点与A组比较均增高(P＜0.01);C组HYP的含量随时间的延长呈进行性增加,28 d达到最高峰,各时间点均较B组减少(P＜0.01).肺组织TGF-β1及HGF的表达:B组大鼠肺组织TGF-β1表达含量增多且分布范围较A组广,TGF-β1的表达在7d为最高峰,此后逐渐减少,但各时间点均高于A组(P＜0.05);C组大鼠肺组织各时间点TGF-β1表达含量均较B组少(P＜0.05).B组肺组织HGF的表达随着时间点延长逐渐增多,但各时间点比较差异无统计学意义(P＞0.05);B组与A组比较略有增多,但差异无统计学意义(P＞0.05);C组肺组织HGF表达含量随着时间的延长逐渐增多,各时间点比较差异有统计学意义(P＜0.05),各时间点与A组及B组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 外源性BMSCs移植对PQ诱导的肺纤维化程度有一定的抑制作用,可能与其上调HGF表达、下调TGF-β1的表达有关.     

咖啡酸苯乙酸酯对丙烯醛雾化诱导的小鼠早期气道重塑的干预作用

目的丙烯醛雾化吸入2周诱导小鼠气道重塑模型,研究NF-κB易位抑制剂咖啡酸苯乙酸酯（CAPE）对小鼠早期气道重塑的干预作用。方法24只C57BL/6小鼠随机分为4组（每组6只）正常对照组、单纯CAPE组（腹腔内注射CAPE30mg/kg,隔日一次）、丙烯醛组（丙烯醛雾化吸入2h×3次/d,共2周）、丙烯醛雾化合并CAPE干预组（雾化吸入丙烯醛同时腹腔内注射CAPE）。于实验第2周采取各组小鼠肺组织和支气管肺泡灌洗液（BALF）。肺组织HE、MASSON染色和羟脯氨酸定量观察气道平滑肌增生、气道上皮下及管周肺组织胶原沉积情况,Ashcroft评分计算HE染色下小鼠气道及管周肺组织的纤维化严重程度;BALF行细胞计数观察气道炎症反应,ELISA测定BALF中TGF-β1含量。结果（1）丙烯醛组气道炎症反应,平滑肌增生及气道上皮下胶原沉积较正常对照组显著增高（P〈0.05）。（2）丙烯醛雾化合并CAPE干预组气道炎症反应及管周肺组织平滑肌增生,上皮下基底膜沉积较丙烯醛组明显减轻（P〈0.05）。结论NF-κB抑制剂CAPE能够减少致纤维化因子TGF-β1的释放,减轻早期气道炎症反应及重塑的进程。     

血必净联合前列腺素E1防治急性肺纤维化的实验研究

目的探讨血必净注射液联合前列腺素E1防治实验性大鼠急性肺间质纤维化的作用。方法采用一次性气管内注射博莱霉素的方法复制大鼠肺间质纤维化模型,将大鼠随机分为六组,各组动物处死后分离肺组织称重,计算湿肺系数,行肺组织病理观察、羟脯氨酸含量测定、TGF-β1免疫组化染色,行支气管肺泡灌洗并收集灌洗液(BALF)用ELISA方法测定TNF-α水平。结果各治疗组肺损伤程度略轻,尤以中西医结合组程度最轻。各治疗组肺组织羟脯氨酸含量以中西医结合组最低。中西医结合组较其余治疗组更显著抑制TNF-α、TGF-β1的表达。结论血必净注射液联合前列腺素E1能有效改善实验性肺纤维化大鼠的病理改变,并延缓其恶化进程。其机制可能是通过抑制TNF-α和TGF-β1的表达,减轻早期炎症反应并减少胶原蛋白的产生,使炎症及纤维化病变减轻。     

TGF-β1和Smads蛋白在急性肺损伤大鼠中的表达及意义

【目的】探讨转化生长因子β1（TGF-β1）与Smads蛋白在急性肺损伤大鼠肺组织内的表达及意义。【方法】24只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、盐水对照组和模型组三组,每组8只。模型组给予气管内滴注博来霉素A5（BLMA5）、生理盐水溶液（5mg／kg）以复制急性肺损伤动物模型,盐水对照组则用生理盐水代替BLMA5,正常对照组大鼠不进行任何干预。制模后d7行病理切片HE染色观察肺损伤程度、免疫组化技术检测肺组织TGF-β1、Smad2／3和Smad7蛋白的表达水平。【结果】模型组肺组织内TGF-β1、Smad2／3蛋白表达水平显著高于正常对照组和盐水对照组（P〈0．05）;Smad7蛋白在模型组肺组织内表达显著低于正常对照组与盐水对照组（P〈O．05）。【结论】TGF-β1和Smads蛋白可能参与急性肺损伤纤维化的发病过程。     

博莱霉素致小鼠肺纤维化模型的动态演变及其发生机制

目的 了解小鼠肺纤维化模型的动态演变，探讨博莱霉素致肺纤维化的作用机制。方法 36只雄性ICR小鼠，按随机数字表法分为阴性对照组（NC组）和肺纤维化模型组（FMA、FMB、FMC、FMD、FME组），每组6只。除NC组外，其余各组经鼻滴入博莱霉素建立肺纤维化模型。分别于6、14、21、28和35d处死各组小鼠，取外周血经流式细胞仪测定T细胞亚群Th1／Th2和Tc1／Tc2，计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中总细胞数和细胞分类，右肺行苏木素-伊红（HE）及Masson染色，测定左肺组织中羟脯氨酸（HYP）的含量；并提取左肺组织总RNA，采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）了解肺组织中多种细胞因子的表达。测定35d处死小鼠的潮气量（Vt）、0．1秒用力呼气容积／用力肺活量（FEV0．1／FVC）和静态肺顺应性（Cst）。结果 ①肺纤维化各组小鼠BALF中细胞总数与NC组比较均显著增高（P均〈O．01），且其肺组织中HYP含量除FMA组外均显著升高（P均〈0．01）。②FME组VT和Cst均较NC组明显降低（P均〈0．01），FEV0．1／FVC则显著升高（P〈O．05）。③在肺纤维化模型炎症期（FMA组），T细胞Th1／Th2和Tc1／Tc2之间的平衡呈Th1、Tc1优势表达为主；在纤维化形成期（FMB、FMC组），则以Th2、Tc2优势表达；在肺纤维化形成后，Th1、Tc1再度呈优势表达的状态。④肺纤维化模型组中转化生长因子-β1（TGF—β1）和金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）均较NC组显著升高（P均〈0．01）。结论 博莱霉素致肺纤维化小鼠肺功能为限制性通气功能障碍，Th2、Tc2及促纤维化生成因子在肺纤维化形成过程中发挥重要作用。     

格列卫对博莱霉素致小鼠肺纤维化的干预作用

目的 观察酪氨酸激酶抑制剂格列卫对小鼠肺纤维化的干预作用，并探讨其作用机制。方法 120只C57BL／6小鼠被随机分为对照组、模型组、地塞米松组和格列卫组，每组30只。采用气管穿刺注入博莱霉素制备肺纤维化小鼠模型。分别于制模后7、14和21d处死动物，观察各组肺组织病理学变化、肺系数、肺组织羟脯氨酸（HYP）含量及血小板源性生长因子-BB（PDGF—BB）的表达。结果 与对照组比较，模型组动物术后不同时间点肺系数明显增加（P均〈0．05），肺泡炎分级和肺纤维化程度均明显增加（P均〈0．01），肺组织HYP含量明显升高（P均〈0．05），且随术后时间延长不断增加；而PDGF—BB含量也明显高于对照组（P均〈0．05），但随术后时间延长逐渐恢复降低。与模型组比较，格列卫组与地塞米松组的肺泡炎分级和肺纤维化程度均明显减轻，HYP含量和肺组织PDGF—BB表达均降低（P〈0．05或P〈0．01）；格列卫组上述各指标较地塞米松组稍好转；但两组间各指标比较差异均无显著性（P均〉0．05）。结论 格列卫能明显抑制博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化过程。     

血清淀粉样蛋白A1和转化生长因子-β1在敌草快中毒小鼠急性肺损伤中的表达及意义

目的:观察血清淀粉样蛋白A1(SAA1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)在敌草快(DQ)中毒小鼠急性肺损伤中的表达及意义。方法:将128只SPF级健康雌性C57小鼠随机分为对照组(N组,n=32)和模型组(DQ组,n=96),模型组予实验首日一次性腹腔分别注射DQ 20、30、40 mg/kg复制中毒小鼠模型,对照组予注射等剂量生理盐水,常规饲养。于模型建立后第1、3、5、7天分4批次处死小鼠并取材。检测小鼠肺湿/干重比,苏木精-伊红染色观察肺组织病理变化,酶联免疫吸附法检测小鼠血清SAA1的表达情况,免疫荧光定量PCR法检测小鼠肺组织TGF-β1 mRNA表达的情况。结果:与对照组相比,模型组小鼠肺组织炎症损伤严重,血清SAA1含量明显增多(P0.05);肺组织TGF-β1 mRNA的表达均增高(P0.05)。结论:SAA1和TGF-β1在DQ中毒小鼠肺损伤中显著增高,参与其炎症过程,并可能在其病程进展中发挥重要作用。     

牛珀至宝微丸对肺损伤早期纤维化大鼠TGF-β1表达的影响

目的观察牛珀至宝微丸对肺损伤早期纤维化大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法 48只SD大鼠随机均分为4组:对照组(C组)、内毒素组(LPS组)、低剂量牛珀至宝微丸预处理组(LD组)、高剂量牛珀至宝微丸预处理组(HD组)。采用气管内联合腹腔注射内毒素法复制肺损伤早期纤维化模型。实验结束前留取标本测定肺血管通透性(EB值)及肺组织湿/干重量比(W/D);HE染色光镜下观察肺损伤程度(DAD评分);用免疫组化法和蛋白质免疫印迹法测定肺组织TGF-β1蛋白表达;Van Gieson染色法检测肺组织胶原纤维表达。结果与LPS组比较,LD组以及HD组,尤其是HD组的EB、W/D值和DAD评分明显降低(P<0.01),光镜下肺肺损伤及纤维化的程度均减轻,肺组织中TGF-β1表达明显减少(P<0.01)。结论牛珀至宝微丸通过抑制肺组织TGF-β1蛋白的激活,有助于减轻内毒素所致肺损伤早期纤维化。     

内皮祖细胞移植对输血相关急性肺损伤小鼠模型保护作用的研究

目的建立输注人类血浆小鼠输血相关急性肺损伤(TRALI)模型,观察内皮祖细胞(EPC)移植对小鼠肺部炎性免疫反应及组织病理特点的影响。方法 BALB/C雄性小鼠36只,随机分为TRALI组(n=12):腹腔注射脂多糖(LPS),每代谢体质量用量为2mg,2h后经过静脉输注人血浆,注射量为每只1mL;EPC组(n=12):同TRALI组的方法造模后,经尾静脉注入EPC(3×10~6个);正常对照组(n=10):采用假手术处理。光镜分析各组小鼠肺组织病理及湿干比变化。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果 TRALI模型组小鼠肺组织出现肺泡间隔增厚、肺泡内纤维蛋白浸润、肺泡内出血、支气管壁增厚等病理变化,肺组织湿干比增高,EPC组以上病理变化较TRALI组不明显,肺组织湿干比也低于TRALI组,高于正常对照组(P0.05)。TRALI组实验动物的BALF中IL-10、IL-1β、TNF-α含量均显著高于正常对照组和EPC组(均P0.05),EPC组BALF中IL-10、IL-1β、TNF-α含量高于正常对照组(P0.05)。结论 EPC移植对TRALI小鼠模型具有保护作用,减轻肺部炎性免疫反应及组织病理学损伤的程度。该试验为临床治疗TRALI提供新的视角和思路。     

益气活血中药对肾间质纤维化大鼠转化生长因子-β、Smad2和Smad3表达的影响

目的 探讨益气活血中药对肾间质纤维化大鼠转化生长因子-β(TGF-β)、Smad2和Smad3表达的影响.方法 将36只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、西药对照组及中药大、中、小剂量组,每组6只.采用单侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化动物模型.西药对照组及中药大、中、小剂量组于术前2 d灌胃福辛普利钠(10 mg·kg-1·d-1)及中药提取液(7.2、3.6、1.8 ml·kg-1·d-1)各2 ml;假手术组和模型组给予等量生理盐水.各组于术后3周处死大鼠取肾组织,用实时聚合酶链反应(real-time PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测TGF-β、Smad2和Smad3的mRNA和蛋白表达.结果 模型组大鼠肾组织TGF-β、Smad2和Smad3的mRNA和蛋白表达较假手术组均明显升高(P<0.05或P<0.01);益气活血中药各剂量组可以明显抑制模型大鼠肾组织TGF-β、Smad2和Smad3的mRNA和蛋白表达,其中除中药小剂量组对Smad3mRNA的抑制作用较大、中剂量组明显降低外(均P<0.05),其余指标各剂量组间比较差异均无统计学意义.结论 益气活血中药可能通过抑制TGF-β/Smad信号通路中TGF-β、Smad2和Smad3等表达起到治疗作用.     

中药861合剂对脓毒症大鼠心肌纤维化的干预

目的观察脓毒症状态下大鼠心肌纤维化的改变及其与心脏功能的关系,并探讨中药861合剂对心肌纤维化的影响。方法采用经阴茎静脉注射脂多糖的方法制作大鼠脓毒症模型。50只雄性Wistar大鼠随机分为模型组(20只)、中药861合剂干预组(20只)及对照组(10只)。模型组和中药861合剂干预组各分为低剂量组、高剂量组。各组动物处死前均行经右颈总动脉左心室内插管,监测血流动力学及左室功能变化。测定大鼠血清Ⅰ型前胶原羧基端肽(PICP)、转化生长因子β1(TGF-β1);心肌组织匀浆上清羟脯氨酸(HC)含量;及心脏组织Masson染色,光镜、电镜观察心肌病理改变,计算机图像分析系统测定心肌胶原容积分数(CVF)和心肌内血管周围胶原面积(PVCA)。结果 1各组大鼠血流动力学指标无显著差异(P0.05);2各组大鼠左心功能指标比较无显著差异(P0.05);3模型组大鼠的PICP、TGF-β1、HC浓度均有不同程度升高(P0.05或P0.01);且脓毒症越重,升高越显著。中药861合剂干预组大鼠的PICP、TGF-β1、HC升高程度和病理的损害均轻于模型组大鼠,差异有显著性(P0.05或P0.01);4模型组大鼠的CVF和PVCA有不同程度升高(P0.05),中药861合剂干预组大鼠的CVF、PVCA较对照组大鼠无显著差异(P0.05)。结论 1脓毒症早期存在心肌间质改变即心肌间质纤维化,脓毒症越严重,心肌纤维化改变越明显;2中药861合剂能抑制脓毒症心肌纤维化进展,其机制和抑制成纤维细胞的活化,减少TGF-β1的表达有关。     

纳米SiO_2对大鼠肺氧化损伤的研究

目的探讨纳米SiO2对大鼠肺氧化损伤作用机制。方法将24只体质量200 g左右的雄性大鼠随机分成3组(对照组、微米SiO2组和纳米SiO2组),每组8只。用一次性气管注入法,分别给予1 mL的50 mg/mL石英粉尘(微米SiO2)混悬液、1 mL的50 mg/mL纳米SiO2混悬液、1 mL生理盐水。30 d后进行肺泡灌洗,测定2种粉尘染尘后大鼠肺泡灌洗液(BALF)中的巨噬细胞凋亡率、总蛋白含量、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、羟脯氨酸(HYP)含量;观察肺脏病理形态学改变;采用免疫组织化学法检测肺组织中转化生长因子β-1(TGF-β1)和白介素-4(IL-4)蛋白的表达。结果微米SiO2组和纳米SiO2组巨噬细胞凋亡率高于对照组;纳米SiO2组凋亡率高于微米SiO2组,差异有统计学意义。微米SiO2组及纳米SiO2组较对照组MDA、HYP和总蛋白含量均增加,T-AOC下降。免疫组化结果显示:微米SiO2组TGF-β1及IL-4表达明显高于纳米SiO2组和对照组。结论纳米SiO2能够对肺组织造成一定的氧化损伤,但其氧化损伤并不是肺纤维化的主要因素。     

沉默转化生长因子β1基因对新生小鼠晚期肺泡发育的影响

目的:探讨以小分子干扰RNA技术沉默肺转化生长因子β1(TGF-β1)基因对新生小鼠晚期肺泡发育的影响.方法:75只新生KM小鼠,随机分为干扰组、空白对照组和阴性对照组各25只,构建TGF-β1 shRNA慢病毒载体,经鼻内吸入法导入干扰组生后3 d新生小鼠肺内,同时设计一无关序列构建阴性表达慢病毒载体同法导入阴性对照组小鼠肺内,空白对照组不予干预.各组别按小鼠生后4、7、14、21、28 d分别取肺组织观察其组织形态学变化,以RT-PCR和Western blot法检测肺组织中TGF-β1 mRNA和蛋白表达水平.结果:与两对照组相比,干 扰组肺TGF-β1 mRNA在小鼠生后4、7、14、21、28 d明显降低,生后7、14、21、28 d,干扰组肺TGF-β1蛋白水平也明显降低,同时肺泡平均截距明显增大,放射状肺泡计数减少,差异均有统计学意义.阴性对照组和空白对照组各时间点各项指标无统计学差异.结论:沉默TGF-β1基因可阻滞新生小鼠晚期肺泡发育.     

槲皮素对脓毒症急性肺损伤大鼠肿瘤坏死因子-α/白细胞介素-1β的影响

目的 观察槲皮素对脓毒症相关急性肺损伤(ALI)大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的影响,以及槲皮素对脓毒症时的肺保护作用.方法 选用健康雄性Wistar大鼠35只,按随机数字表法分为对照组(5只)、模型组(10只)、槲皮素高剂量组(75mg/kg,10只)和槲皮素低剂量组(50mg/kg,10只).腹腔注射脂多糖(LPS)10mg/kg 2ml建立脓毒症ALI大鼠模型;对照组给予等量生理盐水.治疗组于制模前30min腹腔注射槲皮素.各组于制模后6、12、24h取血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中TNF-α,IL-1β含量;于制模后24h腹腔注射水合氯醛麻醉并处死大鼠,取肺组织行苏木素-伊红(HE)染色观察组织病理学改变,取肺叶测定肺组织湿/干重比值(W/D比值).结果 与对照组比较,模型组制模后6h血清TNF-α(ng/L),IL-1β(ng/L)含量即明显升高(TNF-α:73.00±0.28比28.48±0.26,IL-1β:46.30±0.21比28.38±1.07,均P<0.01),肺W/D比值明显升高(5.710±0.025比3.860±0.034,P<0.01);与模型组比较,槲皮素低、高剂量组制模后6h TNF-α,IL-1β含量即明显下降(TNF-α:55.52±0.31、57.76±0.27,IL-1β:39.47±9.65、41.83±0.16,均P<0.05),肺组织病理改变明显好转,肺W/D比值明显下降(4.810±0.036、4.900±0.029,均P<0.05),两治疗组间炎症介质比较差异无统计学意义;高剂量组肺组织病理损伤改善程度明显优于低剂量组.结论 槲皮素可下调大鼠血清TNF-α,IL-1β含量,对脓毒症ALI大鼠的肺组织起保护作用.     

leflunomide对IgA肾病大鼠肾脏保护作用的机制研究

目的 观察leflunomide对实验性IgA肾病(IgAN)大鼠肾脏病理及肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)表达的影响.方法 建立IgAN大鼠模型,随机分成模型组、泼尼松组、leflunomide组,同时设立正常对照组.用免疫荧光和光镜观察免疫复合物在肾脏的沉积及系膜区基质增生程度;用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别检测肾组织TGF-β1、MCP-1的蛋白和基因表达水平.结果 与模型组比较,leflunomide组免疫复合物在肾脏的沉积明显减少,系膜区基质增生程度显著减轻(P均＜0.01);leflunomide在基因和蛋白水平均能够有效抑制TGF-β1和MCP-1在肾组织中的表达(P＜0.05或P＜0.01).结论 leflunomide能减少免疫复合物在肾脏的沉积,并且下调TGF-β1、MCP-1在肾脏的表达,减少局部炎症反应,减轻系膜区基质增生,延缓肾脏纤维化的进程,保护肾脏.     

血清淀粉样蛋白A在百草枯中毒致小鼠急性肺损伤中的表达及意义

目的:观察血清淀粉样蛋白A1(SAA1)在百草枯中毒小鼠急性肺损伤的表达及意义。方法:SPF级健康雄性昆明小鼠随机分为对照组和中毒组。中毒组予一次性腹腔注射百草枯(20 mg/kg)复制染毒小鼠模型,对照组予注射等剂量生理盐水,24 h后处死小鼠并取材。检测小鼠肺湿/干重比,苏木精-伊红染色观察肺组织病理变化,原位末端缺刻标记法观察细胞凋亡,酶联免疫吸附法检测小鼠血清SAA的表达情况,免疫荧光定量PCR法检测小鼠肺组织TGF-β1 mRNA表达的情况。结果:与对照组相比,中毒组小鼠肺组织湿/干重比、肺组织炎症及细胞凋亡显著增加,血清SAA含量明显增多(P0.05);肺组织TGF-β1 mRNA的表达均增高。结论:SAA在百草枯中毒小鼠肺损伤中显著增高,参与其炎症过程,并在其病程进展中发挥重要作用。