酶联免疫方法检测粪便幽门螺杆菌抗原的评价

目的：评价酶联免疫方法检测粪便幽门螺杆菌抗原（Helicobacter pylori antigen,HpAg)的可靠性和准确性。方法：应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测Hp感染可疑者140例的粪便标本中的HpAg,同时与其它3种常用的临床诊断方法[组织切片染色镜检、发离培养，快速脲酶试验（Rapid Urease Test,RUT)]进行比较评价。结果：ELISA检测粪便HpAg阳性率（84．3％）与其它3种方法的阳性率差异无显著性。诊断敏感度和特异性分别为98．3％和83．3％，阳性预期值96．6％，阴性预期值90．9％，总有效率95．7％，结论：ELISA检测粪便HpAg感染简便易行，敏感性和特异性均较高，无创伤性，值得推广。     

幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位基因的克隆表达及免疫原性

幽门螺杆菌 (Ｈｐ)与胃炎、消化性溃疡、胃癌、胃淋巴瘤等关系密切。Ｈｐ在我国普遍人群的感染率约 5 0 %～ 80 % ,可经口传播。如何预防和根除Ｈｐ感染是目前临床治疗的重点。免疫疗法有望成为预防和治疗该类感染性疾病的最有效方法之一[1] 。在Ｈｐ的免疫防治研究方面 ,应用细菌的超声粉碎抗原、纯化尿素酶 (Ｕｒｅ)、细胞空泡毒素和热休克蛋白 (Ｈｓｐ)等作为抗原免疫动物均取得了较好的免疫预防和治疗效果[2 4 ] 。但由于Ｈｐ属微需氧菌 ,培养条件要求高 ,难以获得大量天然来源的Ｕｒｅ及Ｈｓｐ等亚单位成分 ,我们对Ｈｐ重要的保护性抗…     

酶联免疫方法检测粪便幽门螺杆菌抗原的评价

目的评价酶联免疫方法检测粪便幽门螺杆菌抗原(Helicobacter pylori antigen, HpAg)的可靠性和准确性.方法应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Hp感染可疑者140例的粪便标本中的HpAg、同时与其它3种常用的临床诊断方法[组织切片染色镜检、细菌分离培养,快速脲酶试验(Rapid Urease Test, RUT)]进行比较评价.结果 ELISA检测粪便HpAg阳性率(84.3%)与其它3种方法的阳性率差异无显著性.诊断敏感度和特异性分别为98.3%和83.3%,阳性预期值96.6%,阴性预期值90.9%,总有效率95.7%.结论 ELISA检测粪便HpAg感染简便易行,敏感性和特异性均较高,无创伤性,值得推广.     

幽门螺杆菌临床分离株尿素酶基因B的原核表达、纯化及免疫活性

目的:在大肠杆菌中表达幽门螺杆菌临床分离株尿素酶B(UreB),纯化重组蛋白并分析其免疫活性.方法:将pGEX-4T-1-UreB重组菌BL21复舒,挑单菌落接种于含氨苄的LB培养基中.0.5 mmoL异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组融合蛋白的表达,使用纯化的重组蛋白免疫小鼠.ELISA检测血清抗体效价,并使用感染患者血清进行Western-blotting鉴定重组蛋白反应原性.结果:SDS-PAGE示在约87 kD相应分子量可见融合蛋白表达,产物主要在表达上清以可溶形式存在,纯化蛋白免疫小鼠能诱导产生特异性体液免疫应答,ELISA检测特异性IgG效价为1:51 200.Western blotting示重组蛋白能被幽门螺杆菌感染患者血清识别.结论:UreB在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物具有较好的免疫原性及反应原性.     

幽门螺杆菌尿素酶基因的克隆及表达

目的构建幽门螺杆菌尿素酶基因B亚单位（ureB）的原核表达质粒,诱导重组蛋白表达。方法以幽门螺杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增尿素酶基因B亚单位,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分离后连接克隆载体并测序,构建重组原核表达载体。结果成功扩增出1710bp的目的基因,测序结果证实与预期一致,该基因在大肠杆菌表达系统中得到表达。结论在大肠杆菌中成功表达幽门螺杆菌尿素酶基因B亚单位蛋白,为幽门螺杆菌疫苗的研发奠定了基础。     

快速尿素酶试验检测幽门螺杆菌的体会

通过对２６６０例胃镜检查者进行幽门螺杆菌检测,说明快速尿素酶试验是胃镜室检测幽门螺杆菌简便经济、快速可靠的方法。本文介绍了尿素酶试验的操作过程和结果判定,讨论了幽门螺杆菌的检测结果对临床治疗的重要意义。     

两种不同抗原在幽门螺杆菌临床诊断中的比较

采用Sephadex－G200凝胶层析和酸性甘氨酸提取法，制备了两组不同的HP抗原，并分别以此为包被抗原，用SPA－ELISA方法检测了经临床生物学特性鉴定，确定为HP感染的阳性标本26例，阴性标本18例。结果以Sephadex－G200凝胶层析和酸性甘氨酸提取的抗原，对HP感染的阳性检出率分别为92％和62％。提示以Sephadex－G200凝胶层析提纯的抗原，在幽门螺杆菌临床诊断中的特异性明显优于酸性甘氨酸提取的抗原。     

120例反复腹痛儿童幽门螺杆菌抗检测分析

为探讨幽门螺杆菌（Hp） 感染与小儿消化道疾病的关系，采用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定120例反复腹痛患儿血清Hp抗体IgG，其中阳性54例，阳性率45％，阳性率随年龄增长而增加，提示对反复腹痛儿童进行血清Hp抗体检验简单、快速，敏感度及特异性均较高。     

快速尿素酶和组织病理检测幽门螺杆菌的比较

自从1983年Marshall和Warren成功地分离出幽门螺杆菌(H.pylori)以来,国内外学者对此进行了广泛的研究。大量资料认为,H.pylori是消化性溃疡的重要病因,与慢性胃炎和胃癌,乃至与动脉粥样硬化等也有密切的关系。同时发展     

应用混合纯化重组亚单位抗原诊断幽门螺杆菌感染

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)感染的血清学检测因经济简便而倍受重视,所用抗原的特异性是该方法诊断符合率高低的关键。我们采用基因工程技术克隆了Hp热休克蛋白A亚单位(HspA)和尿素酶B亚单位(UreB)的基因,并将其在基因工程菌中成功表达,在此基础上对重组蛋白rHspA和rUreB进行了纯化。之后,我们取纯化的rHspA、rUreB和二者的混合物以及实验室制备的其他2种抗原,用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行HP抗体的对比检测。     

幽门螺杆菌标准株NCTC11639 HSPA基因的克隆、表达及其抗原性的鉴定

目的:构建含人幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)热休克蛋白A(heatshockproteinA,HSPA)编码基因的重组质粒,测定、分析其核酸序列,并在E.coli中表达,研究其抗原性。方法:应用PCR技术从HpDNA染色体中扩增HSPA编码基因片段,将其T-A克隆和测序,并与GenBank公布的其他Hp菌株基因序列比较,再将目的基因克隆至表达载体pGEX-4T-1上进行表达和纯化,用Westernblot检测产物的抗原性并用ELISA法对29株小鼠抗Hp全菌单克隆抗体进行鉴定。结果:HSPA基因全长351bp(GenBank登录号为DQ141574),核酸同源性为96%～98%,表达的HSPA融合蛋白分子量约为41ku,表达产物可被Hp感染患者血清识别,29株抗小鼠Hp全菌单克隆抗体中有4株是针对HSPA抗原的。结论:重组HSPA具有较好的抗原性,为Hp疫苗的研究奠定基础。     

幽门螺杆菌感染对血氨浓度的影响

目的　探讨消化系统疾病中幽门螺杆菌 (HP)感染对患者血氨浓度变化的影响。方法　分别用全自动生化仪及尿素酶依赖性试验对 75例消化性溃疡患者的血氨浓度及HP感染情况进行动态观察。结果　HP阳性组入院时的血氨浓度明显高于HP阴性组和HP阳性组根除治疗后的血氨浓度 (P <0 .0 1) ;HP阴性组 2次血氨测定结果差异无显著性 (P >0 .0 5 )。HP阳性组中HP根除治疗结束时有 4例患者血氨浓度由入院时的正常范围转为增高 ,两者差异有显著性 (P <0 .0 1)。 3例合并肝硬化患者 ,经护肝与降血氨等治疗 ,血氨未下降 ;后经胃镜检查证实分别合并胃溃疡 1例、十二指肠球部溃疡 2例 ,检查HP均呈阳性 ,经应用PPI三联根除治疗 ,疗程 1周 ,其血氨均下降至正常。结论　HP感染能导致血氨浓度增高 ,可能为肝性脑病的诱因之一。肝硬化伴有上消化道出血病 ,若同时有HP感染 ,在HP根除治疗前 ,如静脉持续应用PPI等强效制酸剂 ,可较长时间引起胃内 pH值 >6 ,从而使胃内氨向血中弥散 ,有诱发或加重肝性脑病的可能 ,应引起临床医师的重视     

应重视幽门螺杆菌的分离培养

目的：通过比较3种不同幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp)感染诊断方法之间的差异，使临床重视Hp的分离培养工作。方法：对2000年我院胃镜检查者312例同时作Hp分离培养，病理切片和快速脲酶试验，比较其检出率，结果：近期未用抗菌药物治疗的十二指肠溃患者活检材料中Hp分离培养检出率达93．75％，把其他2种方法与分离培养相比，则快速脲酶试验存在20．72％的假阳性和3．98％的假阴性结果，病理切片存在8．11％的假阳性和32．84％的假阴性结果；快速脲酶试验和病理切片组合后与分离培养相比，则存在2．99％的假阴性和23．42％的假阴性，结论：分离培养是Hp感染诊断的金标准，临床上应积极推广应用。     

邵阳市幽门螺杆菌血清尿素酶抗体阳性率分析

目的了解幽门螺杆菌血清尿素酶抗体在邵阳市健康人群中阳性率情况。方法采用胶体金法检测血清幽门螺杆菌尿素酶抗体1 520例,并对检测结果进行分析。结果 1 520例体检者幽门螺杆菌血清尿素酶抗体阳性率为55.5%,男女幽门螺杆菌血清尿素酶抗体阳性率差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄组幽门螺杆菌血清尿素酶抗体阳性率差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论邵阳市幽门螺杆菌感染率很高,应引起重视。     

慢性胃炎与消化性溃疡患者幽门螺杆菌的感染状况及诊断方法

本文通过200例患者活检标本的对比研究证明,幽门螺杆菌在消化性溃疡与活动期慢性胃炎中有较高的感染率,分别为68%～92%和62.9%～92.6%;而非活动期慢性胃炎仅为36.6%～39.8%.同时证明,用pH试纸检测尿素酶的存在是一个经济、简易、快速、有较高特异性和敏感性的诊断幽门螺杆菌感染的方法.     

幽门螺杆菌动力在胃黏膜定植中的机制研究

幽门螺杆菌能在人类的胃定植并且在胃内存活数十年甚至一生,幽门螺杆菌有很多潜在的致病因子使其定植在胃的特殊环境中.动力是必须的定植因子,依据于幽门螺杆菌无动力突变株不能感染无菌乳猪,动力不能作为定植因子是因为在活体胃腔内幽门螺杆菌的动力很快失去,幽门螺杆菌动力的作用尚未清楚.本文的目的 是探讨对定植与幽门螺杆菌动力之间的关系.     

幽门螺杆菌的检测在胃十二指肠疾病中的意义

为了研究幽门螺杆菌在胃十二指肠疾病中的临床意义,我们采用快速尿酶法与病理染色方法进行对照研究。结果表明两种方法的幽门螺杆菌检出符合率达80％以上。两者比较无统计学意义（P>0.05）,提示快速尿酶法结果可靠。本文对185例胃十二指肠疾病的检测结果表明胃及十二指肠溃疡的幽门螺杆菌检出率分别为66.7％和78.1％。慢性浅表胃炎的检出率为 54.5％,胃癌及伴有胆汁返流胃炎的检出率为50 ％及 7.7％。这些结果提示幽门螺杆菌的感染与慢性胃炎及消化性溃疡有着密切的关系。胆汁返流可能造成胃内pH的改变,不利于幽门螺杆菌的生长,胃癌与幽门螺杆菌的关系有待进一步研究。