经脾注射日本血吸虫虫卵诱发C57BL／6鼠肝脏细胞反应的初…

为探讨日本血吸虫虫卵肉芽肿形成机理和病理作用，本实验改进Ｂｏｔｒｏｓ方法，设虫卵可溶性抗原（ＳＥＡ）致敏组和未致敏组，选用Ｃ５７ＢＬ／６鼠经脾注射虫诱发小鼠日本血吸虫肝肉芽肿，并对虫卵诱发的细胞反应进行了观察。结果显示：（１）经脾注射虫卵诱发小鼠肝肉芽肿方法简单，安全，有效，所建模型，特别是致敏组模型在肉芽肿形成机理研究中较有价值。（２）ＳＥＡ致敏可加强日本血吸虫肝肉芽肿形成。（２）抗体或抗原抗体     

小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型的建立

本文报告应用腹腔注射SEA致敏C57BL/6小鼠,继之经脾脏攻击注射虫卵的方法,建立了小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型,并与自然感染模型作比较.结果证明,SEA致敏组小鼠肝虫卵肉芽肿发生率为100%.其肉芽肿的形态、细胞组成、转化发展过程及单虫卵肉芽肿的直径和面积均与自然感染模型相似.本实验表明经脾脏注射虫卵及SEA致敏建立小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型是一种良好的肉芽肿实验动物模型.     

经脾注射日本血吸虫虫卵诱发C57BL／6鼠肝脏细胞反应的初步探讨

为探讨日本血吸虫虫卵肉芽肿形成机理和病理作用，本实验改进Ｂｏｔｒｏｓ方法，设虫卵可溶性抗原（ＳＥＡ）致敏组和未致敏组，选用Ｃ５７ＢＬ／６鼠经脾注射虫卵诱发小鼠日本血吸虫肝肉芽肿，并对虫卵诱发的细胞反应进行了观察。结果显示：（１）经脾注射虫卵诱发小鼠肝肉芽肿方法简单、安全、有效；所建模型，特别是致敏组模型在肉芽肿形成机理研究中较有价值。（２）ＳＥＡ致敏可加强日本血吸虫肝肉芽肿形成．（３）抗体或抗原－抗体复合物作用参与日本血吸虫肝肉芽肿形成。（４）虫卵及虫卵肉芽肿均对肝细胞具有一定损伤作用。     

嗜中性粒细胞减少在CBA小鼠(而非C57BL/6小鼠)中诱导日本血吸虫虫卵肉芽肿的形成

寄生在门静脉系统的血吸虫能持续排卵,排出的卵沉积在肠组织和肝细胞中,并引起肉芽肿过敏性反应。有报道表明,嗜中性粒细胞能产生肿瘤坏死因子α(TNF α)、白细胞介素(IL) 1α、IL 1 0、IL 1 2以及γ干扰素(IFN γ)等细胞因子,说明嗜中性粒细胞在抗寄生虫感染中发挥了重要作用,但对它是如何参与此过程却了解甚少。为了解在CBA和C5 7BL/ 6小鼠体内,嗜中性粒细胞在日本血吸虫虫卵肉芽肿发育过程中的作用,Hirata开展了此研究。试验采用的小鼠肝脏模型是通过体外移植血吸虫虫卵诱导产生的。所用小鼠为9～1 2周龄的雌性CBA和C5 7BL/ 6…     

免疫耐受对日本血吸虫虫卵肉芽肿形成的影响

目的 探讨免疫耐受对小鼠肝脏虫卵肉芽肿形成的影响。方法 分别用10、100、和1000μg的日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）腹腔注射1周龄小鼠,诱导其对虫卵抗原产生免疫耐受性。在感染日本血吸虫尾蚴后42、56、70和84d分批剖杀小鼠,取出肝脏作病理切片测量肉芽肿的大小。结果 100－1000μg SEA可诱导小鼠产生一定程度的免疫耐受性,使虫卵肉芽肿反应减轻。但是随着时间的延长,这种耐受性逐渐减弱或消失。结论 SEA诱导的免疫耐受性可以减轻血吸虫感染早期的肝脏肉芽肿反应,但对慢性期的作用较弱。     

免疫耐受对日本血吸虫虫卵肉芽肿形成的影响

目的探讨免疫耐受对小鼠肝脏虫卵肉芽肿形成的影响.方法分别用10、100、和1000μg的日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)腹腔注射1周龄小鼠,诱导其对虫卵抗原产生免疫耐受性.在感染日本血吸虫尾蚴后42、56、70和84d分批剖杀小鼠,取出肝脏作病理切片测量肉芽肿的大小.结果100～1 000μg SEA可诱导小鼠产生一定程度的免疫耐受性,使虫卵肉芽肿反应减轻.但是随着时间的延长,这种耐受性逐渐减弱或消失.结论SEA诱导的免疫耐受性可以减轻血吸虫感染早期的肝脏肉芽肿反应,但对慢性期的作用较弱.     

感染亚洲不同地域品系日本血吸虫小鼠的肝虫卵肉芽肿大小

目的 :了解亚洲不同地域品系日本血吸虫对宿主的致病性。方法 :应用相同宿主 C57BL小鼠在同等条件下感染亚洲 7地域品系日本血吸虫后 ,观察和比较其肝虫卵肉芽肿体积大小。结果 :虽然不同地域品系日本血吸虫对小鼠肝组织所致的虫卵肉芽肿体积大小有异 ,但以亲动物的中国台湾品系所致的单个卵的增生期虫卵肉芽肿平均体积为最小。它与亲人体的中国云南、中国广西、中国四川、中国皖鄂、日本、菲律宾 6地品系所致的增生期虫卵肉芽肿平均体积具有显著性的差别。结论 :中国台湾品系日本血吸虫尾蚴感染宿主后 ,寄生虫与宿主的相互关系可能具有某些独特性 ,或存在免疫应答程度上的差异。     

感染亚洲不同地域品系日本血吸虫小鼠的肝虫卵肉芽肿大小

目的 :了解亚洲不同地域品系日本血吸虫对宿主的致病性。方法 :应用相同宿主 C57BL小鼠在同等条件下感染亚洲 7地域品系日本血吸虫后 ,观察和比较其肝虫卵肉芽肿体积大小。结果 :虽然不同地域品系日本血吸虫对小鼠肝组织所致的虫卵肉芽肿体积大小有异 ,但以亲动物的中国台湾品系所致的单个卵的增生期虫卵肉芽肿平均体积为最小。它与亲人体的中国云南、中国广西、中国四川、中国皖鄂、日本、菲律宾 6地品系所致的增生期虫卵肉芽肿平均体积具有显著性的差别。结论 :中国台湾品系日本血吸虫尾蚴感染宿主后 ,寄生虫与宿主的相互关系可能具有某些独特性 ,或存在免疫应答程度上的差异。     

SjR12和SjR47组分抗原对日本血吸虫感染小鼠肝内虫卵肉芽肿形成的影响

本项研究将从日本血吸虫感染家兔红细胞上分离、纯化的12kDa和47kDa蛋白分子,分别称为SjR12（虫源性）和SjR47（卵源性）组分抗原,加福氏完全佐剂免疫小鼠,攻击感染后35d、39d和42d时,各组分三批在相同条件下剖杀小鼠的观察结果：获得31．27～31．33％的减虫率和54．95～72．36％的减卵率;SjR12和SjR47组分抗原均能显著地抑制感染小鼠肝内虫卵肉芽肿形成,特别是SjR47组分抗原具有更显著的免疫抑制作用。本项研究尚未见有类似报道,具有理论意义和应用前景。     

嗜酸粒细胞在日本血吸虫(中国大陆株)感染小鼠体内的作用

以抗嗜酸粒细胞血清(AES)对嗜酸粒细胞(Eos)在日本血吸虫(中国大陆株)感染小鼠体内的作用进行了研究。小鼠经初次感染日本血吸虫尾蚴5wk后,用200条尾蚴攻击感染,并经AES处理,肺部回收童虫数明显高于用正常兔血清(NRS)处理的对照组;正常小鼠经被动转移免疫血清后感染日本血吸虫尾蚴,用AES处理,肺部回收童虫数比NRS对照组明显增多。用日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)皮下致敏小鼠,2wk后经尾静脉注射虫卵形成肺肉芽肿反应,经AES处理后,肺虫卵肉芽肿内Eos受到明显抑制,肉芽肿平均直径明显小于NRS对照组。试验结果提示,Eos是宿主体内对日本血吸虫童虫有效的杀伤细胞之一,其杀伤作用是抗体依赖的Eos介导的细胞毒作用;AES能特异性地仰制肉芽肿内的Eos,并对不同时期肉芽肿的直径有明显的抑制作用。     

益肾蠲痹丸及雷公藤对日本血吸虫虫卵肉芽肿的影响

对感染15条日本血吸虫尾蚴的雌性小鼠.分别于感染后25d及45d起喂服益肾蠲痹丸和雷公藤.结果表明益肾蠲痹丸对虫卵肉芽肿发展具明显抑制作用,肉芽肿平均直径和肉芽肿内嗜酸粒细胞均明显减少.雷公藤对急性期虫卵肉芽肿可有促进发展作用,而对慢性期虫卵肉芽肿则有抑制作用.     

日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原诱导免疫对虫卵肉芽肿影响的初步研究

采用日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原和成虫冷浸抗原分别免疫昆明系小鼠,发现未成熟虫卵可溶性抗原（SIEA）能诱导小鼠产生明显抗卵成熟能力。所得虫卵肉芽肿面积（HE染色,LSAB法）和只用佐剂的对照组存在显著性差异（P＜0．01）,面积显著减小,而对照组和成虫冷浸抗原之间无显著性差异（P＞0．05）。     

日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30对虫卵肉芽肿形成的致敏作用

应用日本血吸虫单克隆抗独特型抗体ＮＰ３０腹腔注射致敏Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，继之经脾脏注射虫卵形成的肝虫卵肉芽肿模型。用ＳＥＡ致敏组作阳性对照，ＳＰ２／０腹水组作阴性对照。实验结果表明，在虫卵攻击后第４ｄ，ＮＰ３０致敏组肝虫卵肉芽肿面积、体积即开始明显增加，出现多量嗜酸性粒细胞浸润。肉芽肿面积在第８ｄ、体积在第１５ｄ达高峰值，与ＳＥＡ致敏组的高峰值相近（Ｐ＞０．０５）。而ＳＰ２／０腹水组肉芽肿的面积、体积至第３２ｄ才达高峰值，其高峰值低于ＮＰ３０致敏组（面积Ｐ＜０．０５，体积Ｐ＜０．０１）。本文提示ＮＰ３０对肝虫卵肉芽肿的形成具有致敏作用。     

免疫增强剂“425”对日本血吸虫感染小鼠虫卵肉芽肿病变作用的研究

应用免疫增强剂当归根提取液,其化学成分主要含有阿魏酸,VitB_(12)和聚乙炔类化合物(代号为“425”),ip 25mg/d·14,至小鼠感染日本血吸虫后14—34d,肝组织内特异性抗体(IgG)为362.67±162.21—480.00±289.45,显著高于对照组的66.67±39.68—245.33±101.50(P<0.01或0.05)。虫卵肉芽肿病变则明显减弱,小鼠虫卵肉芽肿反应增长比为5.24±1.04—3.95±0.77,对照组为6.69±1.19—5.29±0.94。而且还使肝组织内虫卵抗原水平降低。结果表明,免疫增强剂“425”可诱发宿主产生免疫调节作用,控制虫卵肉芽肿病变。     

T细胞缺陷对日本血吸虫感染宿主存活及肝脏虫卵肉芽肿形成的影响

目的观察T细胞缺陷对日本血吸虫感染宿主存活时间,肝脏虫卵肉芽肿形成及日本血吸虫雌虫产卵的影响。方法T细胞缺陷小鼠（裸鼠）和BALB／c小鼠各20只,每只感染日本血吸虫尾蚴（25±1）条,记录感染后存活时间。感染后第42d,从2组存活小鼠中各随机取7只剖杀,取肝组织,计数肝内虫卵;制作肝组织切片,观察虫卵肉芽肿病理学变化,并测量单个虫卵肉芽肿直径。结果20只裸鼠感染日本血吸虫后46d全部死亡。裸鼠肝组织中的雌虫产卵数为（4759．5±2161．3）个／条,BALB／c小鼠为（7323．4±2254．6）个／条,差异有统计学意义（P％0．05）。裸鼠肝脏中单个虫卵肉芽肿直径为（138．4±31．9）μm,与感染组BALB／c小鼠（316．4±68．2）μm比较,差异有统计学意义（P〈0．01）,且不能形成典型局限性虫卵肉芽肿,肉芽肿内嗜酸性粒细胞明显减少,周围肝组织伴有大面积坏死。结论宿主T细胞对虫卵肉芽肿的形成和维持感染宿主的生存具有重要作用。     

日本血吸虫(中国大陆株)26kDa基因重组蛋白(rSjc26GST)对虫卵肉芽肿形成的影响

用日本血吸虫虫卵肉芽肿的小鼠肺模型进行研究。ＩＣＲ雄性小鼠３２只,分成免疫组和佐剂对照组各１６只,免疫组小鼠经ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫。免疫结束后第５天两组小鼠均由尾静脉注射新鲜日本血吸虫虫卵悬液０．２ｍｌ（内含活卵１５００－２０００个）,于注卵后第８天、１６天和２１天分批剖杀小鼠,观察肺部形成的虫卵肉芽肿病变。结果发现免疫鼠肺内肉芽肿大小受到明显抑制,免疫后第８天、１６天、２１天肺肉芽肿平均直径分别为１００．００±１２．６μｍ,１０６．４３±１１．４μｍ,１０５．７０±１１．８μｍ,对照鼠在相应时间分别为１４１．９０±２３．４μｍ,１７６．６７±３４．９μｍ,１９９．５３±２１．７μｍ,抑制率从８天的２９．５％、１６天的３９．８％到２１天的４７．０％逐渐增加,并且免疫组肺相对湿重也较佐剂对照组有所减少,证实ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ具有明确的抗肉芽肿病变效应。     

日本血吸虫感染可诱导共刺激分子（ICOS）转基因小鼠的免疫应答及其病理反应

目的 观察ICOS转基因小鼠感染日本血吸虫后的免疫应答及其免疫病理反应。 方法 收集ICOS转基因小鼠及对照组野生型小鼠分别感染30条日本血吸虫尾蚴后4～8周的血清及脾淋巴细胞培养上清，用ELISA双抗体夹心法检测血清抗体IgG、IgG1、IgG2a的水平和培养上清中的Th1细胞因子γ干扰素（IFN-γ），Th2细胞因子白细胞介素-4（IL-4）水平。取小鼠感染后6、8周肝脏，常规石蜡连续切片，HE染色，在光镜观察单个虫卵肉芽肿病变。 结果 转基因小鼠IFN-γ的表达水平无显著变化，而6、8周时转基因小鼠的IL?鄄4水平呈显著上调表达，分别为（20.8±1.6）pg/ml和（25.3±3.4）pg/ml（P<0.01）。转基因小鼠血清IgG、IgG1表达水平也均高于对照组。在转基因小鼠，反映Th1/Th2免疫平衡的Th2分化指数和IgG1/IgG2a比值也明显呈Th2优势应答，分别为2.20±0.68和5.59±0.31。感染6、8周转基因小鼠肝虫卵肉芽肿反应比对照组更为显著。转基因小鼠肝虫卵肉芽肿体积显著大于同期对照组的肉芽肿，增大率分别为24.48%和26.37%（P<0.01）。 结论 ICOS转基因小鼠感染日本血吸虫后表现出Th2优势应答的免疫学特征，表明ICOS在血吸虫病免疫病理中具有重要作用。     

在体外培养系统中中性粒细胞对日本血吸虫童虫的作用

3小时童虫在含病兔血清、补体和中性粒细胞的培养系统(ISCN)中培养48小时后,约60％的童虫体表有中性粒细胞附着,其中50.8％的童虫已死亡,含病兔血清不含补体(ISCN)、含正常小鼠血清及补体(NSCN)或含正常血清不含补体(NSN)的培养系统中,中性粒细胞粘附童虫体表较少,童虫的死亡率亦低。24小时童虫在ISCN中培养48小时后,中性粒细胞对童虫的附着及童虫死亡率均逊于3小时童虫。在ISCN中,中性粒细胞对72小时童虫几不附着。以中性粒细胞介导的杀死3小时童虫的作用依赖于抗体的存在,但不完全依赖于补体。     

慢性日本血吸虫感染C57BL／6小鼠体内Th1／Th2细胞凋亡的检测

目的 观察日本血吸虫感染晚期C57BL／6小鼠体内Th1、Th2细胞凋亡水平的变化。方法运用流式细胞技术，采用表面分子、胞内因子同时染色的三色标记和间接标记的方法，对日本血吸虫感染13周的C57BL／6小鼠脾脏、淋巴结中的Th1、Th2细胞的凋亡水平进行观察。结果日本血吸虫感染晚期C57BL／6小鼠与正常小鼠相比，Th1、Th2细胞凋亡均显著增加，但Th1细胞凋亡较多而Th2细胞凋亡较少。此阶段Th1细胞凋亡比Th2细胞更加易感。结论Th1、Th2细胞凋亡易感性的不同可能是导致血吸虫感染晚期Th2极化的原因之一，此为血吸虫感染过程中Th极化研究提供了新的证据。