吸入类药物临床前研究中鼻组织脱钙技术优化：用于大鼠鼻黏膜组织病理学检查

目的 研究不同脱钙液对大鼠鼻组织的脱钙作用及其病理切片染色效果。方法 选择10%乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）、10%甲酸、5%硝酸脱钙液3种不同脱钙液，在室温静置及微波条件下，对大鼠鼻组织的脱钙时间和脱钙效果进行比较分析，综合评估骨组织经不同脱钙方法后制成病理切片质量。结果 常温条件下鼻组织经过EDTA脱钙液所需脱钙时间最长，微波条件下鼻组织经硝酸脱钙液所需脱钙时间最短，经EDTA脱钙液的鼻组织切片质量、HE染色、MASSON染色和免疫组化染色中质量最佳，硝酸脱钙液的鼻组织的切片质量最差，甲酸脱钙液的鼻组织HE染色效果较佳，MASSON和免疫组化染色质量略差。结论 EDTA脱钙液配合微波进行的鼻组织脱钙，脱钙效率明显提升，且切片和染色效果俱佳。     

甲酸脱钙液的浓度对骨组织脱钙后切片染色效果的研究

目的探讨骨组织经不同浓度的甲酸脱钙液24小时脱钙后切片染色效果,选择最佳甲酸脱钙工作液。方法350例骨组织标本每例取材3份,分别用40％、30％、20％的甲酸脱钙液常温下脱钙24小时,观察三种不同浓度的甲酸脱钙液脱钙后骨组织的切片和HE染色情况。结果骨组织经40％甲酸脱钙液脱钙后,切片完整,但HE染色核质偏浅,胞浆偏红;30％甲酸脱钙液脱钙后,切片完整,HE染色核质清晰,胞浆鲜艳;20％甲酸脱钙液脱钙后,切片不够完整,HE染色核质偏浅,胞浆偏浅。结论脱钙液脱钙后应保持组织切片完整,染色效果良好,且30％的甲酸脱钙液是较理想的工作液。     

甲酸脱钙液的浓度对骨组织脱钙后切片染色效果的研究

目的探讨骨组织经不同浓度的甲酸脱钙液24小时脱钙后切片染色效果,选择最佳甲酸脱钙工作液。方法350例骨组织标本每例取材3份,分别用40％、30％、20％的甲酸脱钙液常温下脱钙24小时,观察三种不同浓度的甲酸脱钙液脱钙后骨组织的切片和HE染色情况。结果骨组织经40％甲酸脱钙液脱钙后,切片完整,但HE染色核质偏浅,胞浆偏红;30％甲酸脱钙液脱钙后,切片完整,HE染色核质清晰,胞浆鲜艳;20％甲酸脱钙液脱钙后,切片不够完整,HE染色核质偏浅,胞浆偏浅。结论脱钙液脱钙后应保持组织切片完整,染色效果良好,且30％的甲酸脱钙液是较理想的工作液。     

微波-EDTA脱钙技术在免疫组织化学染色中的应用研究

目的探讨微波(MW)-乙烯二胺四乙酸钠(EDTA)快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响.方法根据实验条件将待脱钙组织分为4组,即MW-EDTA(15℃),Jenkins脱钙-固定液(20℃),10%EDTA(20℃)和10%硝酸(20℃),其中MW-EDTA方法中EDTA的浓度分别是4%、7%、10%、13%和16%.应用免疫组织化学LSAB染色,光镜观察免疫组织化学染色结果.结果MW-EDTA脱钙的免疫组织化学染色阳性细胞显著高于Jenkins脱钙-固定液(20℃)、10%ED-TA(20℃)及10%硝酸脱钙(20℃)3种脱钙方法,其时间明显缩短.其中用10%和13%浓度的EDTA脱钙的组织,其免疫组织化学染色阳性细胞又明显多于EDTA浓度为4%、7%和16%者.结论以MW-10%EDTA技术进行组织脱钙,其脱钙时间短、免疫组织化学染色效果好.     

微波-EDTA脱钙技术在免疫组织化学染色中的应用研究

目的探讨微波(MW)—乙烯二胺四乙酸钠(EDTA)快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响。方法根据实验条件将待脱钙组织分为4组，即MW—EDTA(15℃)，Jenkins脱钙-固定液(20℃)，10％EDTA(20℃)和10％硝酸(20℃)，其中Mw—EDTA方法中EDTA的浓度分别是4％、7％、10％、13％和16％。应用免疫组织化学路AB染色，光镜观察免疫组织化学染色结果。结果MW—EDTA脱钙的免疫组织化学染色阳性细胞显著高于Jenkins脱钙—固定液(20℃)、10％ED—TA(20℃)及10％硝酸脱钙(20℃)3种脱钙方法，其时间明显缩短。其中用10％和13％浓度的EDTA脱钙的组织，其免疫组织化学染色阳性细胞又明显多于EDTA浓度为4％、7％和16％者。结论以Mw—10％EDTA技术进行组织脱钙，其脱钙时间短、免疫组织化学染色效果好。     

EDTA抗原修复液用于促蓝液的应用和体会

目的探讨EDTA抗原修复液是否可用做HE染色和免疫组织化学染色的促蓝液。方法分别采用HE染色法及免疫组织化学染色对脱钙后骨组织(10例)、冰冻脂肪组织(10例)、平滑肌组织(10例)、甲状腺组织(10例)及肠癌组织进行染色(10例)。分别采用流水冲洗、43℃温水、即用型PBS、pH=9.0 EDTA修复液作为促蓝液进行蓝化。结果在HE染色组的5种蓝化方式中,以EDTA抗原修复液蓝化2min(实验时间为夏天)蓝化最充分、效果最佳、不易脱片、层次分明、细胞核蓝色鲜艳、核膜及染色质形态结构特点清楚、核浆对比度明显;在免疫组织化学染色组,复染苏木精后,经EDTA抗原修复液蓝化2min,各组组织细胞核结构显示清晰,能很好的衬托组化阳性信号。结论 HE染色和免疫组织化学染色均可以将EDTA抗原修复液用于促蓝液,且在免疫组织化学染色中,EDTA抗原修复液的效果与流水冲洗效果相当,而且节省了蓝化的时间。     

大体骨组织免疫组织化学染色的比较

骨组织因其十分坚硬,脱钙时间长,且在常规HE及免疫组织化学染色中均极易脱片,不能观察完整的骨组织结构。常规骨组织采用混合酸即45％盐酸、55％甲酸和EDIA脱钙。20例兔股骨头10例采用混合酸液(福尔马林100ml,生理盐水800ml,甲酸70ml,盐酸80ml,三氯化铝结晶60g,冰醋酸25ml)脱钙,10例采用45％盐酸、55％甲酸脱钙,均用10％中性福尔马林     

两种EDTA脱钙方法的比较

目的寻求切片制作更容易、染色效果更好的脱钙方法。方法对兔下颌骨分别使用15％EDTA微波脱钙法及15％EDTA低温脱钙法进行脱钙,从切片制作、免疫组化染色等方面进行比较。结果以15％EDTA低温脱钙法对兔下颌骨进行脱钙后,制作切片时脱片率明显降低,染色效果更好。结论以科学实验为目的对骨组织进行脱钙时,选用15％EDTA低温脱钙法能取得更准确的实验结果。     

微波技术在病变骨组织脱钙中的应用

骨和含钙组织脱钙处理是影响临床病理检查时间和效果的一个较为重要的环节。传统的脱钙方法对骨组织脱钙时间长,组织易变色,效果不大理想。我科采用微波技术处理骨和含钙组织的脱钙,弥补了过去传统方法的不足,效果较好,现报告如下。１材料 微波仪为ＹＷＹ７８１　Ｂ型医用微波仪。脱钙液分为甲液和乙液两种,甲液含浓硝酸 ５ｍｌ, １０％甲醛 ７５ｍｌ,冰醋酸 ２５ｍｌ;乙液含浓硝酸１０ｍｌ,１０％甲醛７５ｍｌ,冰醋酸２５ｍｌ。筒状烧杯一个,小烧杯一个,标本为充分固定的骨组织。２方法 外检病变的骨组织,取材时将含钙少、硬…     

骨髓穿刺组织石蜡制片方法改进的探讨

由于骨髓组织含有大量的钙盐而非常坚硬,不能直接进行石蜡制片,而经过脱钙处理后,才能进行切片、HE染色、特殊染色和免疫组化染色。脱钙过度或不当均可影响上述染色。因此,脱钙时间和脱钙液的选择十分重要。传统的方法用14％硝酸脱钙液脱钙常出现脱钙过度或不足,难以掌握,常造成组织切片不完整、组织结构破坏、细胞模糊不清,     

淋巴组织细针吸取细胞HE染片褪色后作免疫组化的探讨

目的 探讨淋巴组织细针吸取细胞(FNAC)HE染片褪色后作免疫组化的效果.方法 12例淋巴组织细针吸取细胞学HE染片,采用高锰酸钾-草酸褪色后应用免疫组织化学S-P法,对12例淋巴组织针吸细胞涂片进行标记,光学显微镜下观察染色效果.结果 HE染色细胞学诊断:5例无恶性细胞,4例核异质细胞,3例可疑恶性细胞;HE染片褪色行免疫组化标记后诊断:3例转移性癌,3例可疑恶性淋巴瘤,6例无恶性细胞.结论 FNAC检查对初筛淋巴结疾患的良恶性判断及肿瘤分型有重要意义;淋巴组织细针吸取细胞HE染片褪色后行免疫组化染色,方法简便易行,在病理诊断中有一定的应用价值.     

CD44在肝癌与肝硬化组织中的表达

目的 为了探讨粘附分子ＣＤ４４在肝癌、肝硬化患者组织中的表达以及其与肝癌、肝硬化的关系。方法 应用免疫组织化学检测ＣＤ４４在２６例肝癌、１６例肝硬化以及５例正常肝组织中的表达情况。结果 ＣＤ４４在正常肝中均有阳性表达,而在肝硬化组织中表达明显增强,在肝癌组织中表达差异很大,并且与肿瘤分化程度密切相关。结论 ＣＤ４４分子在肝病中的表达随病情而异,对肝细胞肝癌的分化诊断及预后判断具有一定意义。     

人乳头状瘤病毒表达在尖锐湿疣诊断中的应用研究

目的　研究人乳头状瘤病毒 (HPV)在尖锐湿疣 (CA)中的表达 ,并探讨 HPV表达在 CA诊断中的价值。方法　 1对 2 0 0例标本行甲醛固定、石蜡包埋、切片、HE染色。 2采用 SABC免疫组织化学法 ,一抗为兔抗 HPV抗体 ,检测 CA中 HPV的表达。结果　 1HE染色 2 0 0例 CA中 ,具有典型 CA组织结构者 180例、具有不典型 CA组织结构者 2 0例。其中 1例伴有癌变。 2用 HPV抗体检测 2 0 0例 CA标本 ,阳性为 190例 ,占 95 %,其中女性 180例中阳性 174例 ,占 96 .6 %;男性 2 0例中阳性 16例 ,占 80 %。另外在典型组织学结构的 CA中 ,有2例 HPV阴性 ,其余 8例 HPV阴性均在不典型组织学结构中。结论　 CA是由 HPV所引起 ,应依据 HPV免疫组织化学法或原位杂交法的阳性表达做出病理诊断。 CA要与假性湿疣、寻常疣、乳头状瘤相鉴别。 CA可能癌变。     

骨形态发生蛋白-2在糖尿病大鼠种植体周围的表达

目的:应用大鼠糖尿病模型,观察实验性2型糖尿病(T 2DM)大鼠种植体周围骨形态发生蛋白-2(BM P-2)的表达水平,探讨影响糖尿病种植体骨整合的分子生物学机制,试图为发现新的治疗糖尿病骨整合方法打下理论基础。方法:将48只大鼠均分为正常组和糖尿病组。糖尿病组按40 m g/kg腹腔内一次性注射枸橼酸钠链脲佐菌素溶液建立T 2DM模型。在胫骨近骺端种植纯钛种植体。种植后2,4,8周分批分次处死动物。采用不带种植体脱钙标本硬组织切片、脱钙标本切片常规苏木精-伊红染色(HE染色)和免疫组织化学法检测种植体周围骨组织中骨形态BM P-2的表达并做图像分析。结果:HE染色镜下观察糖尿病组骨形成滞后。正常组和糖尿病组的种植体周围骨组织BM P-2免疫组织化学灰度值两组间差异有显著性(P<0.05)。结论:糖尿病者的骨质疏松化倾向可能与糖尿病种植修复较正常者失败率高有关,糖尿病者BM P-2的减少可能是影响种植体骨整合的原因之一。     

用稀盐酸降低林可霉素药品中B组分的工艺研究

研究稀盐酸降低林可霉素药品中B组分的新工艺，探讨在恒温、四级萃取条件下稀盐酸浓度对萃取的影响。结果表明，最优工艺方案为稀盐酸浓度0．07％．且稀盐酸与料液操作的体积比不宜大于2：1。     

大鼠胶质瘤模型的C6胶质瘤细胞的增殖动力学研究

目的　在建立C6 Wistar胶质瘤大鼠模型的基础上 ,研究大鼠胶质瘤模型的C6胶质瘤细胞的增殖动力学。方法　应用流式细胞仪检测、PCNA免疫组化染色和核仁组织区银染三种方法 ,研究C6胶质瘤细胞的增殖动力学指标 ,并进行相关性分析。结果　 1、肿瘤细胞接种 2周后 ,肿瘤模型建立 ,HE染色见肿瘤细胞增殖活跃 ,各项增殖指标显示该肿瘤增殖活性较强。 2、AgNor面积、AgNOR计数与S期百分比和PCNA指数具有良好的相关性 ,AgNOR面积 (P <0 0 1)比AgNOR计数 (P <0 0 5 )相关性更强     

诊断用彩色多普勒超声辐照对小鼠早孕胚胎细胞超微结构的影响

目的:应用彩色多普勒超声辐照早孕小鼠胚胎,观察小鼠早孕胚胎细胞超微结构的变化。方法:8只孕6~7 d成年昆明种小鼠,按彩超辐照时间不同随机等分为4组,组(对照组)、组(辐照10 min组)、组(辐照20 min组)、组(辐照30 min组),仪器采用百胜公司DU-8型彩色超声诊断仪。照射条件:腹部凸阵探头,探头频率为3.0MHz,MI=0.9 TiS=0.9。照射后24 h取小鼠胚胎标本,HE染色光镜观察组织结构,透射电镜观察超微结构变化。结果:各组光镜下观察胚胎组织结构均未见异常。照射30 min组小鼠胚胎细胞电镜检查发现染色质浓缩边集、线粒体肿胀等超微结构变化。结论:彩色多普勒超声辐照早孕小鼠可引起胚胎细胞超微结构发生改变。     

Influence of the acid type on the physical and drug liberation properties of chitosan-gelatin sponges

The influence of acid type used to dissolve chitosan on the resulting sponge physical properties, and their consequent effect on the drug liberation were investigated. Chitosan was dissolved in different acid solutions and chitosan-gelatin sponges were produced by frothing up the polymer solution and then freeze-drying the foam. Prednisolone was used as a model drug. Using tartaric or citric acid resulted in instable, soft, elastic and disintegrating sponges with fast drug release. Elastic but harder sponges from stable foams were obtained when hydrochloric or lactic acid were used. The use of acetic or formic acid enabled the production of stable foams, soft and elastic sponges and a slow drug release. The rate of drug release was decreased by crosslinking the polymers with glutaraldehyde, but only if acetic, formic or acetic acid were used. Therefore, it is possible to manipulate the mechanical properties and the drug liberation rate by using different acids to dissolve chitosan.