手性衍生化-反相高效液相色谱法测定L-肌肽的光学纯度

目的建立柱前手性衍生化-反相高效液相色谱法(HPLC)测定L-肌肽对映体的纯度。方法以邻苯二甲醛/N-乙酰基-L-半胱氨酸(OPA/NAC)为手性衍生化试剂,反应生成具有荧光吸收的一对非对映异构体衍生物,采用C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流速1.0mL·min-1,50mmol·L-1乙酸铵缓冲溶液(pH6.0)-甲醇(70:30,V/V)流动相,柱温35℃,λex=350nm,λem=450nm。结果L-肌肽与其光学异构体分离度大于3,在0.104～2.68mg·L-1范围内,D-肌肽衍生物色谱峰面积与其浓度呈良好线性关系,检测限浓度为0.02mg·L-1。结论建立的L-肌肽光学异构体(杂质)手性衍生化-HPLC拆分检查法方便准确,可用于L-肌肽的光学纯度控制。     

多巴对映异构体的柱前衍生化HPLC法手性拆分

目的：建立多巴对映异构体的柱前衍生化拆分分析方法。方法：采用柱前衍生化反相高效液相色谱法,以氯甲酸乙酯为酰化剂,L-丙氨酸-β-萘胺（L-Ala-β-NA）为柱前衍生化试剂,在室温反应20 min 后,依利特 Hypersil ODS2（4.6 mm ×250 mm,5μm）为色谱柱;乙腈-0.05%三氟乙酸为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min-1;柱温为25℃;检测波长为280 nm。结果：多巴对映体衍生物获得了基线分离,并确认了R（-）-和S（+）-两个衍生物的色谱峰。结论：该方法经济可行,操作较简便,为多巴的药理学研究和光学异构体纯度测定提供了参考。     

高效液相色谱间接拆分法的手性衍生化试剂研究进展

现代药理学研究证明 ,药物的手性与药效有密切关系 ,药物不同光学异构体进入人 (或生物 )体 ,经体内受体酶、载体等完全不同的分子处理所引起的药效或毒副作用往往存在着显著的差异[1,2 ] 。随着人们对单一光学异构体高疗效新药物产品不断增长的需求 ,生产具有高疗效低副作用的光学异构体新药物已成为医药工业的一个重要趋势。在药物的单一对映体制备及分离技术中 ,色谱法手性拆分是经济且富有生命力的方法 ,正在起着越来越大的作用[3 ] 。就单一对映体的定量测定而言 ,传统的旋光度法由于测定可靠性不够 ,正在减少使用 ;而色谱方法正成为医…     

柱前衍生化-反相高效液相色谱法拆分酮洛芬对映异构体

目的 :建立一种用柱前衍生化反相高效液相色谱法分析酮洛芬对映异构体的方法。方法 :采用二氯亚砜和S - (- )- 1- (1-萘基 )乙胺作为衍生化试剂 ,S - ( ) -酮洛芬和R - (- )酮洛芬衍生化后生成一对非对映异构体。选用HypersilC18柱 ,以乙腈 -水 -乙酸 -三乙胺 (5 8∶42∶0 1∶0 0 2 )为流动相 ,在 2 5 4nm下检测。色谱流份经电喷雾离子阱多级质谱分析验证。结果 :非对映异构体色谱峰的保留时间分别为 7 3min和 8 5min ,分离度为 1 9。结论 :衍生化产物稳定 ,方法灵敏度高 ,重现性好 ,操作简单 ,可用于药品质量控制和对映体选择性药物动力学研究。     

柱前手性衍生化反相高效液相色谱法拆分地佐西平对映异构体的研究

用乙酰葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)作柱前手性衍生化试剂,以反相高效液相色谱法成功地拆分了地佐西平对映异构体。在此基础上建立了地佐西平对映异构体纯度和血药浓度测定方法。已用于测定右旋地佐西平的光学纯度和小鼠血药浓度。     

柱前衍生化高效液相色谱法拆分人体血浆和尿液中阿替洛尔对映 …

高效液相色谱法分离和测定人体血浆和尿液中Ｓ（－）－和Ｒ（＋）－阿替洛尔对映体。选用盐酸甲氧胺为内标，Ｒ（＋）－苯乙基异氰酸酯为衍生化试剂，ＯＤＳ为固定相，流动相为水－甲醇－异丙醇－二氯甲烷（５３．２：４１．６：４．８：０．４），荧光检测波长２３５／３００ｎｍ（Ｅｘ／Ｅｍ）。     

盐酸芬氟拉明对映体的柱前衍生物GC法分析

以ω－莰烷酰氯为衍生试剂,采用柱前衍生化ＧＣ法,成功地分析了盐酸芬氟拉明、金刚乙胺和盐酸氯胺酮。光谱分析确证了芬氟拉明酰胺衍生物的结构,优化了盐酸芬氟拉明酰胺衍生物的结构,优化了盐酸芬氟拉明衍生条件,建立了盐酸花氟拉明的内标法定量分析方法。     

柱前衍生化高效液相色谱法拆分人体血浆和尿液中阿替洛尔对映体的研究

高效液相色谱法分离和测定人体血浆和尿液中 S(- ) -和 R( ) -阿替洛尔对映体。选用盐酸甲氧胺为内标 ,R ( ) -苯乙基异氰酸酯为衍生化试剂 ,ODS为固定相 ,流动相为水 -甲醇 -异丙醇 -二氯甲烷 (5 3 2∶4 1 6∶4 8∶0 4 ) ,荧光检测波长 2 35 /30 0nm (Ex/Em)。血、尿样品经碱化后乙酸乙酯提取 ,并用氯仿 2次抽提。S(- ) -和R ( ) -阿替洛尔对映体血、尿样品的线性范围分别为 10～ 10 0 0ng/mL和 2 5～ 15 0 0ng/mL ,绝对回收率均在 84 %以上 ,RSD均小于6 0 %。此法已经用于阿替洛尔对映体的药代动力学和药效学研究     

柱前衍生化RP-HPLC拆分酮洛芬对映异构体的研究

摘 要 目的：建立酮洛芬对映异构体的拆分方法。方法: 采用柱前衍生化RP HPLC法,以L-丙氨酸-β-萘胺（L-Ala-β-NA）为手性衍生化试剂,色谱柱：Hypersil ODS-2柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相：乙腈-0.025 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液（40∶60,v/v）,流速：1.0 ml·min^-1,检测波长：245 nm,柱温：25℃,进样量：10μl。结果: 酮洛芬对映体衍生物获得较好的基线分离,S-(+) 对映体和R-(-) 对映体衍生物的色谱峰保留时间分别在24.2 min和26.0 min处。右旋酮洛芬在0.025~0.125 mg质量范围内线性关系良好（r=0.998 1）,平均回收率为90.93%（RSD=4.10%,n=9）。结论:该方法简便、准确、快速,为酮洛芬的光学异构体的测定提供了参考依据。     

高效液相色谱法手性色谱柱分离β—阻滞剂对映体

目的：对两种β－阻滞剂进行对映体分离。方法：采用高效液相色谱法手性色谱柱对β－阻滞剂阿替洛尔和盐酸普萘洛尔进行对映体拆分。结果：两种药物均能达到较好的分离效果,结论：该法简单方便,适用于对β－阻滞剂对映体的分离,可采用该法进行药物有效成分的测定。／     

高效液相色谱法手性拆分奥美拉唑对映异构体

目的：手性拆分奥美拉唑对映异构体,建立检查埃索美拉唑钠原料药中R-异构体的HPLC方法。方法：采用Chiral pak IC手性柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以正己烷-异丙醇-甲醇-三乙胺（40∶40∶20∶0.1,v/v/v/v）为流动相,检测波长为302 nm,柱温为30 ℃,流速为1.0 mL·min^-1。结果：埃索美拉唑及其R-异构体的分离度（R）大于7。R-异构体的检测限和定量限分别为32 ng·mL^-1和80 ng·mL^-1,线性范围为0.5~30 μg·mL^-1。自制三批埃索美拉唑钠盐中R-异构体的含量均为0.02%,R-异构体的限度符合要求。结论：该方法简便,快速,可用来检查埃索美拉唑钠原料药中R-异构体的限度。     

HPLC柱前衍生法测定妥布霉素

方法 对妥布霉素HPLC测定方法进行了研究。目 的 选用2,4- 二硝基氟苯(DNFB)柱前衍生化,以Agilent Hypersil ODS为色谱柱,0.25%三羟甲基氨基甲烷溶液-乙腈-0.5mol·L-1硫酸溶液(40∶59∶1)为流动相,流速为1.2ml·min -1,检测波长365nm。结果 在10～100μg范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,r＝0.9999。平均回收率为100.9%,RSD为1.5%。结论 本方法简便准确,重 现性好,可用于妥布霉素的质量控制。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定复方氨基酸制剂的应用研究

研究了以２，４－二硝基氯茉（ＤＮＣＢ）作生化度剂在ＰＨ９．１的硼砂缓冲液中沸水浴加热１ｈ，制得１７种ＤＮＰ－氨基酸，用于反相高效液相色谱（ＲＰ－ＨＰＬＣ）测定复方氨基酸的方法。采用Ｃ８柱，以腈－醋酸盐缓冲系统梯度洗脱，２２ｍｉｎ内１７种氨基酸的ＤＮＰ衍生物及衍生剂水解峰可较邹分离；衍生化产物稳定，３６０ｎｍ处紫外检测，最低检出限为０．１μｇ。本法简便，重现性好，结果较为满意。     

柱前衍生-高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠的浓度

目的：建立快速柱前衍生．高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠（VPA）的浓度。方法：血样经酸化后用正戊烷提取,以环已烷羧酸为内标,w-溴苯乙酮为衍生化试剂,采用Agilent HC—C18柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇·水（73：27）,检测波长为262nm,流速1．0ml·min^-1,柱温40℃。结果：血清中VPA浓度在10．12～182．16μg·ml^-1范围内具有良好的线性关系（r=0．9997）,平均相对回收率为99．17％,日内、日间RSD均小于6％,最低定量浓度为10．12μg·ml^-1。结论：本法简便、快速、准确,适合临床常规血药浓度监测。     

高效液相色谱法测定人血浆中异烟肼及乙酰异烟肼浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血浆中异烟肼(INH)及其代谢物乙酰异烟肼(AcINH)浓度的方法。方法:血浆加入三氯醋酸沉淀蛋白后,将上清液分为2份,一份加入蒸馏水,另一份加入盐酸,80℃孵育1h后,分别加入1%桂皮醛进行柱前衍生化。色谱柱为HypersilBDSC18,流动相为0.02mol/L磷酸二氢钾(pH=4.0)-乙腈(69∶31),检测波长为340nm,流速为1ml/min。结果:INH检测浓度在0.57～145.88μmol/L范围内线性关系良好,INH和AcINH平均回收率分别为101.1%、101.5%,日内、日间相对标准差均<10%。结论:本法可用于异烟肼血药浓度监测及乙酰化酶代谢能力研究。     

柱前衍生化-HPLC法测定复方新斯的明眼用凝胶中牛磺酸的含量

目的：建立复方新斯的明眼用凝胶中牛磺酸的含量测定方法。方法：样品液经2,4-二硝基氟苯柱前衍生化后,采用高效液相色谱法。色谱柱为Eclipse XDB-C18（150mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液（30：70）,检测波长为360nm。结果：牛磺酸的线性范围为4．92～98．40μg·ml^-1（r=0．9999,n=5）。平均回收率为96．95％,RSD为1．16％（n=9）。结论：本方法简便快速、专属性好、重复性好。     

柱前衍生化RP-HPLC测定米格列奈钙光学纯度

目的建立柱前衍生化-反相高效液相色谱法测定S-米格列奈钙的光学纯度。方法采用手性衍生化试剂S-萘乙胺（S-NEA）,以1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC·HCl）和1-羟基苯并三唑（HOBt）为偶联剂对样品S-米格列奈钙进行衍生化。衍生产物以乙腈-0.01mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液（pH2.5）（50∶50）为流动相,在AgilentZorbax C18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱上进行分离,流速为1.5mL·min^-1,检测波长为225nm,柱温为30℃。结果R-米格列奈在0.3～3.0μg·mL^-1内线性关系良好,检测限和最低定量下限分别0.1和0.3μg·mL^-1,平均回收率为102.4%,日内日间精密度考察中RSD均小于5%。结论该方法灵敏度高,衍生化产物稳定,重复性好,可用于S-米格列奈钙光学杂质的检测。     

柱前荧光衍生化HPLC-RIF法测定人血清托吡酯浓度

目的：建立血清中托吡酯（topiramate，TPM）浓度的高效液相色谱-荧光测定法。方法：选用金刚烷胺为内标，以二氯甲烷萃取血清中的托吡酯，经氯甲酸芴甲酯（FMOC-C1）衍生化后用HPLC法对衍生产物进行分析。以pH6乙腈-磷酸盐缓冲液为流动相，流速1ml&#183;min“梯度洗脱；荧光检测器检测波长为315nm，激发波长为260nm。结果：色谱图中TPM衍生物与杂质峰分离良好，血清中的内源性杂质无干扰。TPM在0．25-25μg&#183;ml-1浓度范围内有良好的线性关系（r=0．9991，n=6），最低检测限为0．25μg&#183;ml-1。日内与日间RSD均〈10．0％。结论：本法可以测定人血清中托吡酯浓度。