旋毛虫成虫排泄?分泌蛋白对卵清蛋白诱导的小鼠变应性鼻炎的保护作用

目的　探讨旋毛虫成虫排泄?分泌蛋白（Adult?worm excretory?secretory protein, AES）对卵清蛋白（Ovalbumin, OVA）诱导的小鼠变应性鼻炎的保护作用。方法　18只雌性BALB/c小鼠随机分为3组：A组为空白对照组,B组为变应性鼻炎组,C组为AES治疗组。A组小鼠给予PBS;B组小鼠经腹腔注射抗原佐剂混悬液进行基础致敏,隔日1次,共7次,后以5% OVA溶液滴鼻进行局部激发,每日1次,共7次,诱导建立变应性鼻炎模型;C组小鼠在诱导变应性鼻炎基础上,于基础致敏和局部激发时分别加入25 μg AES进行干预。末次激发后观察各组小鼠30 min,并进行行为学评分;采用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中IFN?γ、IL?4、IL?5、IL?10及TGF?β水平变化,HE染色后镜下观察小鼠鼻黏膜病理改变。结果　3组小鼠行为学评分差异有统计学意义（F = 110.12, P < 0.01）;B组小鼠行为学评分显著高于A组[（7.17 ± 0.75）分和（1.33 ± 0.52）分,P < 0.01],且鼻黏膜病理损伤更为显著;经AES治疗后,C组小鼠行为学评分[（3.83 ± 0.75）分]显著下降（P < 0.01）,鼻黏膜病理损伤亦显著缓解。3组小鼠血清中IFN?γ水平差异有统计学意义（F = 7.50,P < 0.01）,B组小鼠血清中IFN?γ水平显著低于A组（P < 0.05）;经AES治疗后,C组小鼠血清中IFN?γ水平较B组显著升高（P < 0.05）。3组小鼠血清中IL?4 （F = 470.81,P < 0.01）、IL?5水平（F = 68.20,P < 0.01）差异均有统计学意义,B组小鼠血清中IL?4、IL?5水平均显著高于A组（P均 < 0.01）;经AES治疗后,C组小鼠血清中IL?4、IL?5水平均较B组显著降低（P均 < 0.01）。3组小鼠血清中IL?10（F = 174.91,P < 0.01）、TGF?β水平（F = 9.39,P < 0.01）差异均有统计学意义;经AES治疗后,C组小鼠血清中IL?10、TGF?β水平均显著高于B组（P均 < 0.05）。结论　旋毛虫AES对OVA诱导的小鼠变应性鼻炎有显著的保护作用。     

细粒棘球蚴囊液蛋白对卵清蛋白诱导的小鼠变应性鼻炎效果

目的　观察细粒棘球蚴囊液蛋白（hydatid cyst fluid protein,HCFP）对卵清蛋白（ovalbumin,OVA）诱导的小鼠变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）的保护作用。方法　将24 只BALB/c小鼠（8～10周龄,体质量约20 g）随机分成A（空白对照组）、B（空白干预组）、C（AR模型组）、D （AR + HCFP干预组）4组,每组6只。在基础致敏阶段（实验第0、2、4、6、8、10、12天）,A、B、C、D组小鼠分别腹腔注射200 μL无菌磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline, PBS）,含20 μg HCFP的无菌PBS溶液,含50 μg OVA 和5 mg Al(OH)3凝胶的无菌PBS溶液,含50 μg OVA、5 mg Al(OH)3凝胶和20 μg HCFP 的无菌PBS溶液。在局部激发阶段（实验第14～20 天）,A、B、C、D组小鼠分别鼻腔滴注体积为40 μL的无菌PBS、含20 μg HCFP的无菌PBS、含2 mg OVA的无菌PBS、含2 mg OVA和20 μL HCFP的无菌PBS。观察各组小鼠行为学改变并进行行为学评分,采用酶联免疫吸附试验（enzyme⁃linked immunosorbent assay,ELISA）检测各组小鼠血清γ干扰素（interferon⁃γ, IFN⁃γ）、白细胞介素4（interleukin⁃4, IL⁃4）、IL⁃5、IL⁃10、转化生长因子⁃β（transforming growth factor⁃β, TGF⁃β）和OVA特异性IgE抗体（OVA⁃sIgE）水平,采用苏木精⁃伊红（HE）染色观察各组小鼠鼻黏膜病理学改变。结果　C组小鼠行为学评分[（6.83 ± 0.50）分]显著高于A组[（1.17 ± 0.52）分]和B组[（1.33 ± 0.52）分],D组小鼠行为学评分[（3.50 ± 0.50）分]较C组降低（P均 < 0.05）。4组小鼠血清IFN⁃γ（F = 4.08, P < 0.05）、IL⁃4（F = 275.90, P < 0.05）、IL⁃5（F = 96.82, P < 0.05）、IL⁃10（F = 77.67, P < 0.05）、TGF⁃β（F = 9.98, P < 0.05）及OVA⁃sIgE水平（F = 44.69, P < 0.05）差异均有统计学意义。C组小鼠血清IFN⁃γ水平低于A、B组和C组,且血清IL⁃4、IL⁃5、OVA⁃sIgE水平均高于A、B组和C组（P均 < 0.05）;D组小鼠血清IL⁃10、TGF⁃β水平高于C组（P均 < 0.05）。镜下观察显示,C组小鼠鼻黏膜纤毛脱落缺损明显,杯状细胞数量增多且体积增大,间质水肿,黏膜下见小血管扩张;D组小鼠鼻黏膜病变较C组轻。结论　HCFP对OVA诱导的小鼠AR具有保护效果。     

旋毛虫成虫排泄分泌蛋白抗CLP诱导的小鼠脓毒症的观察

目的 目的 探讨旋毛虫成虫排泄分泌蛋白 （AES） 对盲肠结扎穿孔术 （CLP） 诱导的小鼠脓毒症的抑制作用。方法 方法 将48只BALB/c小鼠随机分为3组, 即假手术对照组 （PBS + sham组, A组）、 脓毒症组 （PBS + CLP组, B组）、 AES蛋白治疗 组 （AES + CLP组, C组）。A组和B组于CLP术后经腹腔注射200 μl PBS, C组术后经腹腔注射含25 μg AES蛋白的等量 PBS。每组随机抽取8只, 建模后观察各组小鼠的一般情况及96 h生存率; 每组其余8只小鼠于建模后12 h取肝、 肺、 肾, HE染色观察病理改变; 以酶联免疫吸附试验 （ELISA） 检测小鼠血清中TNF?α、 IL?1β、 IL?6、 IL?10及TGF?β细胞因子水平 的变化。结果 结果 3组小鼠96 h生存率差异有统计学意义 （χ2 = 21.16, P < 0.05）; 与A组 （100%） 相比, B组小鼠生存率 （0） 降低 （P < 0.05）, 且肺、 肝及肾脏损伤明显加重; 经AES治疗后, C组存活率 （75%） 明显增加 （P < 0.05）, 小鼠肺脏、 肝脏及 肾脏病理损伤亦显著缓解。3组小鼠血清中的促炎因子TNF?α （F = 27.11, P < 0.05）、 IL?1β （F = 18.75, P < 0.05） 及IL?6 （F = 100.93, P < 0.05） 水平差异均有统计学意义; B组小鼠的促炎因子水平均高于A组 （P均< 0.05）; 经AES治疗后, C组 小鼠上述3种促炎因子水平较B组均显著下降 （P均< 0.05）。3组小鼠血清中的调节性细胞因子IL?10 （F = 10.88, P < 0.05） 及TGF?β （F = 11.37, P < 0.05） 水平差异亦有统计学意义; 经AES治疗后, C组小鼠IL?10及TGF?β分泌水平较B组亦 明显增加 （P < 0.05）。结论 结论 旋毛虫AES对CLP诱导的BALB/c小鼠脓毒症有显著的缓解作用。     

日本血吸虫虫源性抗原诱导效应性B细胞分化的研究

目的 目的 观察日本血吸虫可溶性虫卵抗原 （SEA） 和可溶性成虫抗原 （SWAP） 诱导小鼠效应性B细胞分化情况。方 方 法 法 SEA、 SWAP和脂多糖 （LPS） 分别体外刺激小鼠脾脏单个核细胞和脾脏CD19+ B细胞, 72 h后采用流式细胞术检测 CD19+ IL?6+ 及CD19+ IFN?γ+ 细胞比例; 用酶联免疫吸附试验 （ELISA） 检测抗原刺激后脾脏B细胞培养上清中IL?6和IFN?γ 水平。用SEA、 SWAP、 PBS分别和不完全弗氏佐剂混合免疫小鼠, 每周1次, 共3次, 末次免疫后7 d取小鼠脾脏, 流式细胞 术检测CD19+ IL?6+ 及CD19+ IFN?γ+ 细胞比例, 用ELISA法检测培养上清中IL?6和IFN?γ水平。 结果 结果 SEA与LPS可以体 外诱导脾脏单个核细胞和脾脏B细胞分化为CD19+ IL?6+ B细胞 （F = 5.099, P < 0.05; F = 6.951, P < 0.05）, 并刺激脾脏B细 胞分泌IL?6 （F = 55.184, P < 0.01）; SEA免疫小鼠后, 可以在体内刺激小鼠脾脏B细胞分泌IL?6 （F = 19.244, P < 0.01）, 并诱 导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+ IL?6+ B细胞 （F = 14.904, P < 0.05）。SWAP可以体外诱导脾脏单个核细胞分化为 CD19+ IFN?γ+ B细胞 （F = 3.277, P < 0.05）, 但不能单独诱导脾脏B细胞分化为IFN?γ+ B细胞, 也不能刺激脾脏B细胞分泌 IFN?γ; SWAP免疫小鼠后, 可以在体内刺激小鼠脾脏B细胞分泌IFN?γ （F = 31.886, P < 0.01）, 并诱导其分化为CD19+ IFN? γ+ B细胞 （F = 49.873, P < 0.01）。 结论 结论 日本血吸虫SEA可以优势诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+ IL?6+ B细胞, 而 SWAP可以优势诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+ IFN?γ+ B细胞, 但依赖于其他免疫细胞的参与。     

亚洲日月蛤多糖的分子检测及其干预小鼠日本血吸虫肝纤维化的初步研究

目的 检测亚洲日月蛤多糖的分子特性,探讨其在干预小鼠日本血吸虫肝纤维化中的作用。方法 提取并纯化亚洲日月蛤多糖,采用凝胶排阻法对其分子量进行测定,应用PMP柱前衍生法对其单糖组成进行检测。取50只雌性BALB/c小鼠,随机分成5组,每组10只小鼠。A组给予生理盐水灌胃,B、C、D、E组小鼠分别经腹部皮肤攻击感染血吸虫尾蚴（30 ± 2）条/只;饲养第8周末,C、D、E组小鼠分别给予多糖、吡喹酮及多糖 + 吡喹酮治疗,B组小鼠给予生理盐水;第16周末,收集小鼠肝脏及血清,通过HE染色观察小鼠肝脏虫卵肉芽肿病变及肝纤维化情况,采用ELISA法检测血清IFN?γ、IL?13水平。结果 亚洲日月蛤多糖相对分子量为11.7 kDa,其多糖主要由葡萄糖组成。C、D组和E组小鼠血清IFN?γ浓度显著高于对照组（F = 63.525,P < 0.01）,C、D组和E组小鼠血清IL?13浓度显著低于B组（F = 99.788,P < 0.01）。HE染色显示,B、C、D、E组小鼠肝组织均见不同程度虫卵结节和纤维化改变,A组小鼠肝脏正常,E组虫卵结节较B组少（c2 = 7.875,P < 0.05）。结论 亚洲日月蛤多糖具有明显的抗日本血吸虫肝纤维化作用,与吡喹酮联用效果更好。     

旋毛虫重组成虫丝氨酸蛋白酶抑制剂对小鼠脓毒症急性肾损伤的保护作用

目的　探讨旋毛虫重组成虫丝氨酸蛋白酶抑制剂（TsadSPI）对小鼠脓毒症急性肾损伤的保护作用。方法 BALB/c雄性小鼠随机分为假手术组、模型组、TsadSPI治疗组,每组6只,共18只。模型组和TsadSPI治疗组小鼠采用盲肠结扎穿孔术（CLP）构建脓毒症急性肾损伤模型,假手术组小鼠剖腹探查,不结扎、不穿孔盲肠。术后30 min,假手术组和模型组小鼠腹腔注射100 μL PBS溶液,TsadSPI治疗组小鼠腹腔注射100 μL含有2 μg TsadSPI蛋白的PBS溶液。造模后12 h,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）水平以评价肝肾功能,HE染色观察小鼠肾脏结构改变,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清中肿瘤坏死因子（TNF）?α、白细胞介素（IL）?6、IL?10、转化生长因子（TGF）?β水平,采用免疫组化染色评估肾脏组织中髓样分化因子88（MyD88）、核因子?κB p65（NF?κB p65）表达水平。结果　术后12 h,3组小鼠血清ALT（F = 41.031,P < 0.001）、AST（F = 54.757,P < 0.001）、Cr（F = 24.142,P < 0.001）和BUN水平（F = 214.849,P < 0.001）差异均有统计学意义,模型组小鼠ALT、AST、Cr和BUN水平均显著高于假手术组（P < 0.001）,而TsadSPI治疗组小鼠ALT、AST、Cr和BUN水平均显著低于模型组（P < 0.001）。HE染色结果显示,小鼠CLP术后肾脏损伤严重,TsadSPI治疗后损伤明显缓解。ELISA检测结果表明,3组小鼠血清TNF?α（F = 47.502,P < 0.001）和IL?6水平（F = 222.061,P < 0.001）差异均有统计学意义,TsadSPI治疗组小鼠TNF?α、IL?6水平较模型组显著下降（P < 0.001）;3组小鼠血清IL?10（F = 16.227,P < 0.001）和TGF?β水平（F = 52.092,P < 0.001）差异均有统计学意义,TsadSPI治疗组小鼠血清IL?10、TGF?β水平较模型组均显著升高（P < 0.001）。免疫组化染色结果表明,模型组小鼠肾脏组织内MyD88表达水平及NF?κB p65核阳性率显著高于TsadSPI治疗组。结论　TsadSPI可减少小鼠肾脏组织内MyD88表达及NF?κB p65核阳性率,进而上调免疫调节因子、下调促炎因子水平,从而保护脓毒症造成的肾脏损伤。     

miR-150及其靶基因IRAK2在变应性鼻炎小鼠模型中的表达

目的探讨miR-150及其靶基因IRAK2在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜中的表达及其作用。方法SPF级Balb/c小鼠20只,随机分为两组,变应性鼻炎模型组(AR)、对照组(NC),每组10只。模型组用卵清蛋白(OVA)致敏建立变应性鼻炎小鼠模型;对照组使用生理盐水替代。每组随机取4只小鼠,病理检查;每组剩余6只小鼠取其鼻黏膜,实时定量PCR检测小鼠鼻黏膜中miR-150及IRAK2 mRNA表达水平,蛋白印迹法(Western blot)检测IRAK2蛋白的表达,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中OVA特异性IgE、IL-4、IL-13的含量,模型组与对照组miR-150相对表达量与IRAK2 mRNA的相对表达量、OVA特异性IgE、IL-4、IL-13的相关性分析采用Pearson相关性分析。结果AR组小鼠动物行为学评分均大于5分;病理组织HE染色显示AR组鼻黏膜纤毛大量脱落,组织间质水肿、小血管扩张、腺体增生、炎性细胞浸润;血清OVA特异性IgE、IL-4、IL-13表达增加。AR组小鼠鼻黏膜miR-150表达较NC组降低(P<0.05);IRAK2 mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05);且AR组鼻黏膜IRAK2蛋白表达水平也比NC组增加(P<0.05)。AR组与NC组miR-150相对表达量与IRAK2 mRNA表达量和OVA特异性IgE、IL-4、IL-13的含量呈负相关(r=-0.841、-0.869、-0.834、-0.857,P<0.05)。结论miR-150在变应性鼻炎模型小鼠中表达降低且与IRAK2、OVA特异性IgE、IL-4、IL-13含量存在负相关,二者的表达差异可能在变应性鼻炎的发生发展中发挥作用。     

巴西日圆线虫虫体蛋白体外诱导THP-1来源巨噬细胞极化的研究

目的　分析巴西日圆线虫虫体蛋白体外诱导人单核细胞白血病THP?1细胞来源巨噬细胞的极化方向,探索机体对巴西日圆线虫感染的免疫应答机制。方法　建立并维持巴西日圆线虫培养的实验室循环,无菌条件下收集L3和L5虫体,分别制备虫体蛋白;建立THP?1细胞体外培养体系,经500 ng/mL佛波酯（PMA）刺激培养后呈贴壁状态的M0型细胞分别采用500 ng/mL脂多糖（LPS）+ 100 ng/mL γ?干扰素（IFN?γ）、白细胞介素4（IL?4）+ IL?13（浓度均为100 ng/mL）、L3及L5虫体蛋白（浓度均为5 mg/mL）进行刺激,同时设不加任何刺激的阴性对照组。通过显微镜镜检观察刺激后细胞形态、实时荧光定量PCR（qPCR）检测M1/M2型巨噬细胞特异性基因mRNA表达水平、流式细胞术检测巨噬细胞表面标志物及酶联免疫吸附试验（ELISA）检测M1/M2型巨噬细胞分泌的细胞因子含量,观察巴西日圆线虫虫体蛋白体外诱导THP?1来源巨噬细胞的极化方向。结果　THP?1细胞经PMA刺激培养呈贴壁的M0型细胞后,经LPS + IFN?γ刺激培养后呈特征性M1型极化;经IL?4 + IL?13刺激培养后呈特征性M2型极化;经L3和L5蛋白刺激培养后均呈特征性M2型极化。阴性对照组、LPS + IFN?γ刺激组、IL?4 + IL?13刺激组、L3蛋白刺激组、L5蛋白刺激组间M1型巨噬细胞比例差异有统计学意义（[χ2] = 3 721.00,P < 0.001）,其中LPS + IFN?γ刺激组M1型巨噬细胞比例最高;各组间M2型巨噬细胞比例差异有统计学意义（[χ2] = 105.43,P < 0.001）。各组间C?C基序趋化因子配体2（CCL2）、肿瘤坏死因子α（TNF?α）、IL?12b、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、IL?10、甘露糖受体C型1（Mrc1）基因mRNA表达水平差异均有统计学意义（F = 191.95、129.95、82.89、11.30、9.51、12.35,P均< 0.001）,各组间CD86、CD206阳性率差异均有统计学意义（[χ2] = 24 004.33、832.50,P均< 0.001）。LPS + IFN?γ刺激组IL?1β、TNF?α表达水平均显著高于IL?4 + IL?13刺激组、L3蛋白刺激组及L5蛋白刺激组（P均< 0.001）;IL?4 + IL?13刺激组、L3蛋白刺激组和L5蛋白刺激组TGF?β1、IL?10表达水平均显著高于阴性对照组和LPS + IFN?γ刺激组（P均< 0.05）。结论　巴西日圆线虫L3和L5虫体蛋白体外均可诱导THP?1来源巨噬细胞向M2型极化。     

源自日本血吸虫的半胱氨酸蛋白酶抑制剂对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎的影响

目的 探讨日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂（Schistosoma japonicum cysteine protease inhibitor,SjCystatin）对葡聚糖硫酸钠（Dextransulphate sodium,DSS）诱导的小鼠急性溃疡性结肠炎的抑制作用。方法 18只雌性C57BL/6小鼠随机分为3组：A组为对照组,B组为肠炎组,C组为SjCystatin治疗组。A组给予蒸馏水,B、C组连续饮用3％DSS溶液7 d诱发肠炎;C组每天经腹腔注射10 μg SjCystatin,A和B组注射PBS。观察各组小鼠临床表现,进行临床疾病活动指数（Disease activity index,DAI）评分。第7天处死小鼠,观察结肠大体及组织病理改变。同时提取小鼠结肠组织匀浆,采用酶联免疫吸附实验（ELISA）测定其上清中肿瘤坏死因子?α（TNF?α）、白细胞介素?4（IL?4）、IL?6及IL?10水平。结果 与A组[（[0.50±0.28]）分]相比,B组小鼠DAI评分[（[9.30±1.30]）分]明显增加,建模后小鼠结肠病理损伤显著,结肠组织匀浆上清中TNF?α为（321.33 ± 67.01） pg/mL,IL?6为（403.58 ± 180.51） pg/mL,均明显上升。C组小鼠DAI评分为（[6.67±1.57]）分,显著下降（F = 86.86,P < 0.01）;小鼠结肠大体及组织病理明显缓解,结肠组织匀浆上清中TNF?α为（188.14 ± 40.14） pg/mL,IL?6为（209.71 ± 48.47） pg/mL,均显著下降（F = 17.46、9.89, P < 0.01）。结论 SjCystatin对DSS诱导的C57BL/6小鼠急性溃疡性结肠炎有抑制效果。     

细粒棘球蚴慢性感染阶段小鼠血清中炎症因子的变化及意义

目的研究细粒棘球蚴慢性感染阶段小鼠血清中细胞因子水平的变化,探索机体对抗寄生虫感染的免疫应答 机制。方法从病羊内脏分离细粒棘球绦虫原头节,注射入BALB/c小鼠腹腔（2 000个原头节/只）,建立细粒棘球蚴感染 小鼠模型,对照组小鼠腹腔注射等体积PBS。于感染5个月后,采集对照及感染组小鼠血清,采用流式液相多重蛋白定量 技术检测血清中多种细胞因子水平并分析。结果感染组小鼠腹腔、肝脏、肺脏等部位均出现多个单一性包囊;其血清 中IL?17A、IL?6、IFN?γ、MCP?1、IL?12P70、TNF?α等炎症因子水平均显著高于对照组（t = 2.713～9.255,P 均< 0.05）;而抑 炎因子IL?10水平亦显著升高（t = 3.936,P < 0.001）。结论细粒棘球蚴慢性感染阶段小鼠体内炎症因子水平较高,有助 于抑制虫体生长。     

Beneficial effect of anti-interleukin-33 on the murine model of allergic inflammation of the lower airway

Objective. Interleukin (IL)-33, which mediates the T(h)2 allergic pathway, may play a key role in allergic airway inflammation. This study was conducted to evaluate the therapeutic potential of anti-IL-33 antibody for treatment of allergic inflammation of the lower airway in a murine model. Methods. Twenty-four BALB/c mice were used in this study. Saline was used for sensitization and challenge of mice in Group A (control group, n?=?6). Mice in Group B (ovalbumin (OVA) group, n?=?6) received intraperitoneal (ip) and intranasal OVA challenge. In Group C (control IgG group, n?=?6), mice received ip injection with control IgG prior to OVA challenge. Mice in Group D (anti-IL-33 group, n?=?6) received an ip injection of anti-IL-33 prior to challenge. Measurements of serum total and OVA-specific IgE and the number of eosinophils, neutrophils, and lymphocytes in bronchoalveolar lavage (BAL) fluid were performed. We performed histopathologic examination to evaluate the degree of eosinophilic infiltration in lung tissue. Airway hyperreactivity was measured according to change of enhanced pause (Penh). Results. A significant decrease in serum total and OVA-specific IgE and the number of eosinophils and neutrophils in BAL fluid was observed in Group D, compared with Group B or Group C (p?相似文献   

TGF⁃β1 p38MAPK及BMP⁃7蛋白在肝多房棘球蚴病患者肝组织中的表达及意义

目的　检测肝多房棘球蚴病患者肝组织中转化生长因子⁃β1（transforming growth factor⁃β1, TGF⁃β1）、p38MAPK及骨形态发生蛋白⁃7（bone morphogenetic protein⁃7, BMP⁃7）表达水平,探讨其在肝多房棘球蚴病肝纤维化中的潜在作用。方法　以20例肝多房棘球蚴病患者为研究对象,分别采集距肝脏病灶0.5 cm内（A组）、距肝脏病灶0.5～1.5 cm（B组）肝组织及距肝脏病灶2 cm及以上的正常肝组织（C组）。肝组织标本分别行HE和Masson染色观察纤维化病理变化,采用Western blotting检测肝组织中TGF⁃β1、p38MAPK及BMP⁃7蛋白表达水平,分析TGF⁃β1、p38MAPK及BMP⁃7蛋白表达与肝纤维化的相关性。结果　HE染色结果显示,A组和B组肝组织中肝细胞结构排列紊乱、肝小叶结构有不同程度破坏,可见不同程度肝细胞变性、萎缩、坏死及纤维组织增生,并有嗜酸性粒细胞浸润;C组肝组织无异常病理改变,肝细胞结构形态正常、大小均匀,未见明显排列紊乱,肝小叶结构清晰,无或轻度细胞变性、坏死及炎性细胞浸润。Masson染色结果显示,A组和B组肝组织可见汇管区较多纤维结缔组织增生,出现不同程度小叶内纤维化;C组肝组织无明显异常病理改变。A、B、C组肝组织中TGF⁃β1（P < 0.001）、p38MAPK（P < 0.01）及BMP⁃7蛋白（P < 0.05）表达水平差异均有统计学意义,A组和B组TGF⁃β1、p38MAPK及BMP⁃7蛋白表达水平均显著高于C组（P均< 0.05）,B组TGF⁃β1、p38MAPK及BMP⁃7蛋白表达水平亦显著高于C组（P均< 0.05）。TGF⁃β1、p38MAPK及BMP⁃7蛋白表达水平均与肝纤维化程度呈正相关（r = 0.866、0.702、0.801,P均< 0.05）,不同纤维化程度肝组织中TGF⁃β1（F = 72.580,P < 0.01）、p38MAPK（[χ2] = 31.705,P < 0.01）及BMP⁃7蛋白（[χ2] = 48.388,P < 0.01）表达水平差异均有统计学意义。TGF⁃β1蛋白与p38MAPK、BMP⁃7蛋白表达水平均呈显著正相关（r = 0.607、0.702,P均 < 0.001）,BMP⁃7与p38MAPK蛋白表达水平亦呈显著正相关（r = 0.456,P < 0.001）。结论　TGF⁃β1、p38MAPK和BMP⁃7蛋白通过相互作用、共同介导了肝多房棘球蚴病肝纤维化发生。     

Beneficial Effect of Anti-Interleukin-33 on the Murine Model of Allergic Inflammation of the Lower Airway

Objective. Interleukin (IL)-33, which mediates the T_h2 allergic pathway, may play a key role in allergic airway inflammation. This study was conducted to evaluate the therapeutic potential of anti-IL-33 antibody for treatment of allergic inflammation of the lower airway in a murine model. Methods. Twenty-four BALB/c mice were used in this study. Saline was used for sensitization and challenge of mice in Group A (control group, n = 6). Mice in Group B (ovalbumin (OVA) group, n = 6) received intraperitoneal (ip) and intranasal OVA challenge. In Group C (control IgG group, n = 6), mice received ip injection with control IgG prior to OVA challenge. Mice in Group D (anti-IL-33 group, n = 6) received an ip injection of anti-IL-33 prior to challenge. Measurements of serum total and OVA-specific IgE and the number of eosinophils, neutrophils, and lymphocytes in bronchoalveolar lavage (BAL) fluid were performed. We performed histopathologic examination to evaluate the degree of eosinophilic infiltration in lung tissue. Airway hyperreactivity was measured according to change of enhanced pause (Penh). Results. A significant decrease in serum total and OVA-specific IgE and the number of eosinophils and neutrophils in BAL fluid was observed in Group D, compared with Group B or Group C (p < .05). In Group D, treatment with anti-IL-33 resulted in a significant decrease in eosinophilic infiltration in lung tissue, compared with Group B and Group C (p < .05). Degree of airway hyperreactivity, measured by Penh, showed a significant decrease in the anti-IL-33 treatment group, compared with the OVA group or the control IgG treatment group (p < .01, at 50 mg/mL of methacholine). Conclusions: Anti-IL-33 has therapeutic potential for treatment of allergic inflammation of the lower airway.     

尘螨1类嵌合变应原TAT-IhC-R8的致敏效果分析

目的探讨尘螨1类嵌合变应原TAT-Ih C-R8的致敏效果。方法将40只BALB/c小鼠随机分为PBS对照组(PBS组)、OVA致敏组(OVA组)、R8致敏组(R8组)和TAT-Ih C-R8致敏组(TIR8组)4组,每组10只。上述3个致敏组分别用OVA、R8和TAT-Ih C-R8于第0、7、14天进行腹腔注射致敏(剂量为10μg/ml);自第21天起,分别用上述致敏液(剂量为10μg/ml)雾化吸入30 min,连续7 d。PBS组则用PBS进行腹腔注射和雾化吸入。最后一次雾化吸入24 h后将小鼠脱臼处死,分别收集支气管肺泡灌洗液(BLAFs)和血清,并进行脾细胞培养。以ELISA法检测BALFs及脾细胞培养上清液(SCSs)中细胞因子IFN-γ和IL-13水平,以及血清中特异性抗体Ig E(s Ig E)、Ig G1和Ig G2a水平;并对BALF进行白细胞和嗜酸性粒细胞(EOS)计数。此外,制作小鼠肺组织病理切片,经HE染色后进行观察。结果与PBS组相比,OVA、R8组和TIR8组小鼠肺部炎症均明显,表现为肺组织炎性细胞浸润、支气管上皮细胞部分断裂及脱落、血管炎等,而PBS组小鼠未见明显病理改变。TIR8组小鼠BALF中白细胞总数和EOS数均显著高于OVA组和R8组(P均0.01),其BALF及SCSs中IL-13水平亦明显高于OVA组和R8组(P均0.01),但IFN-γ含量则显著低于该两组(P均0.01)。TIR8组小鼠血清s Ig E和Ig G1抗体水平明显高于OVA组和R8组(P均0.01),但其Ig G2a抗体水平则显著低于该两组(P均0.01)。结论TAT-Ih C-R8可有效激发小鼠肺部炎症,且其致敏效果明显优于R8。