当归内酯对小鼠细胞免疫功能的影响

采用体外实验检测当归总内酯(ASDL)对小鼠胸腺细胞增殖、淋巴细胞转化(LT)、白细胞介素-2(IL-2)诱生作用及对LAK细胞活性的影响.结果显示 ,ASDL单独应用及与ConA、LPS合用时均能明显促进脾细胞增殖;单独应用及与ConA合用都能促进胸腺细胞增殖;不同浓度的ASDL可增强IL-2诱导的LAK细胞杀伤活性;可明显增强小鼠脾细胞产生IL-2的能力;ASDL还能拮抗环磷酰胺(100mg/kg)引起的小鼠免疫功能抑制作用,并恢复小鼠脾细胞产生IL-2的能力.     

当归补血汤对大鼠肝纤维化与肝脏脂质过氧化的影响

目的观察当归补血汤对大鼠肝纤维化的作用及其影响肝脏脂质过氧化的抗肝纤维化作用机制。方法Wistar雄性大鼠采用四氯化碳（CCl4）皮下注射及高脂低蛋白饮食复合因素诱导复制大鼠肝纤维化模型。模型大鼠随机分为模型组(14只),当归补血汤组(14只);另设正常组(10只)。自造模之日起,当归补血汤组以6 g/kg的大鼠体重剂量灌胃,每日1次,共6周。正常组与模型组灌胃以等量生理盐水。HE染色观察肝组织炎症与脂肪变性,天狼猩红染色观察肝组织胶原沉积。试剂盒法测定血清肝功能指标,包括丙氨酸转氨酶(ALT)与天冬氨酸转氨酶(AST)水平、总胆红素(TBil)与白蛋白(Alb)含量。生化法测定肝组织甘油三脂(TG)与丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,Jamall氏法测定肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量,Western印迹法分析肝组织Ⅰ型胶原蛋白表达。结果与正常大鼠比较,模型大鼠血清ALT、AST水平及TBil含量明显升高,Alb含量明显降低;肝组织脂肪变性与胶原沉积明显,TG与MDA含量增加,SOD活性降低（均P<005）。当归补血汤组大鼠肝组织脂肪变性与胶原病理沉积显著改善;血清ALT、AST水平及TBil含量降低,血清Alb含量升高;肝组织Hyp、TG与MDA含量降低,SOD活性提高（均P<005）。结论当归补血汤具有良好的抗实验性大鼠肝纤维化作用,其主要作用机制与抗肝脏脂质过氧化损伤有关。     

肝窦内皮细胞及其影响肝纤维化的研究概况

近年来在肝纤维化的研究过程中肝窦内皮细胞越来越被重视,相关研究也日渐增多,肝窦内皮细胞是肝脏主要的非实质细胞,其特殊的窗孔结构及生理特性决定其在肝纤维化形成中具有重要作用。     

UPLC指纹图谱结合化学计量学方法比较当归和欧当归药材的成分

目的 建立当归Angelica sinensis和欧当归Levisticum officinal药材的指纹图谱,结合化学计量学方法寻找二者的成分差异,从而为建立欧当归掺伪当归的鉴别方法提供依据。方法 采用UPLC法建立指纹图谱,色谱柱为Waters CortecsT3柱(100mm×2.1mm,1.6μm);流动相为0.1%甲酸乙腈溶液-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;体积流量为0.4mL/min;柱温35℃;检测波长为210nm。采用相似度评价、主成分分析(principal component analysis,PCA)和层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)对2种药材的指纹图谱进行评价,寻找2者的成分差异。采用UPLC-MS/MS及NMR波谱等技术对主要差异性成分进行鉴定。结果 从当归和欧当归指纹图谱中分别识别出23个和19个共有峰,与当归指纹图谱共有模式相比,当归样品组内有3批样品相似度较低,为0.59~0.80,其余样品相似度均大于0.99,而欧当归与之相比,相似度在0.53~0.94,且组内差异较大。PCA和HCA结果显示,当归和欧当归可明显分为2组,对区分贡献较大的色谱峰有6个,鉴定为色氨酸、阿魏酸、E-藁本内酯、欧当归内酯A异构体、绿原酸和法卡林二醇,其中后2种成分在欧当归中含量较高,其余成分在当归中含量较高。结论 建立的UPLC指纹图谱结合化学计量学评价方法,简便可行,可有效区分当归和欧当归并揭示其差异性成分,为当归的质量控制及掺伪欧当归鉴别方法<建立提供依据。同时首次从欧当归中分离得到法卡林二醇,该化合物为欧当归区别于当归的主要成分。     

当归中藁苯内酯二聚体的分离和结构鉴定

目的：研究当归Angelica sinensis的化学成分。方法：采用色谱分离，利用波谱进行结构鉴定。结果：从当归中分离鉴定了8个藁苯内酯二聚体，分别鉴定为levistolide A(1),川芎酽内酯O(2),(3Z,3Z′)-6.8′,7.3′-双藁苯内酯(3),tokinolide B(4),isotokinolide B(5),当归双藁苯内酯A(6),E,E′-3. 3′,8. 8′-双藁苯内酯(7)和当归双藁苯内酯B(E,E′-3. 3′,8. 8′-异双藁苯内酯,8)。结论：其中化合物7是首次从当归中分离得到，化合物6和8为新化合物。     

当归挥发油中藁本内酯对实验性非细菌性前列腺炎镇痛作用的研究

目的 观察当归挥发油中藁本内酯对实验性非细菌性前列腺炎的镇痛作用.方法 以昆明小鼠与SD大鼠为实验对象,用阿司匹林与哌替啶为对照药物,设计了3个实验分别选择镇痛率、痛阈值及NGF mRNA等指标对藁本内酯镇痛作用的量效关系和干预机理进行探讨.结果 藁本内酯可以有效缓解醋酸、热板刺激所引起的小鼠疼痛反应,并能显著降低前列腺组织中NGF mRNA的表达水平,且其量效关系呈现出一定的正相关性.结论 藁本内酯具有较好的镇痛抗炎的效果,其镇痛作用的机制与降低非细菌性前列腺炎前列腺组织中NGF mRNA的表达水平密切相关.     

当归芍药散对肝纤维化大鼠的干预作用及对TLR4通路的影响

目的 研究当归芍药散对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的影响,并基于Toll样受体4(TLR4)通路探讨其可能作用机制。方法 取75只SD大鼠,随机选12只作为正常组,其余大鼠采用腹腔注射四氯化碳-橄榄油法建立肝纤维化模型。将造模成功的大鼠随机分为肝纤维化组,TAK-242组及当归芍药散低、中、高剂量组,每组12只。当归芍药散低、中、高剂量分别给予2.5 g/kg、5 g/kg、10 g/kg的当归芍药散灌胃,TAK-242组腹腔注射3 mg/kg TAK-242,均1次/d,连续13周。使用全自动生化分析仪测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)水平,ELISA法测定血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及肝组织中Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)水平,Masson染色进行肝组织病理学观察,RT-PCR法测定肝组织中TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(TRAF6) mRNA表达情况,免疫组化法测定肝组织中TLR4、My...     

肝窦内皮细胞与肝纤维化形成的研究概况

肝窦内皮细胞(sinusoidal endothelial cell,SEC)是数量最多的肝脏非实质细胞,占非实质细胞总数的44%～60%。近年来在肝纤维化的研究过程中肝窦内皮细胞越来越被重视,相关研究也日渐增多,肝窦内皮细胞特殊的窗孔结构及生理特性决定其在肝纤维化形成中具有重要作用。     

当归补血汤对低流体剪切应力作用下内皮细胞功能损伤的保护作用

目的:观察不同当归、黄芪质量比(归芪比)的当归补血汤对低流体剪切应力(FSS)损伤内皮细胞功能的保护作用。方法:采用平行平板流动小室加载低FSS进行造模,实验将内皮细胞分为空白组和模型组(分别予以M199培养液培养2 h),辛伐他汀组(予以0. 1μmol·L~(-1)的辛伐他汀培养2 h),当归补血汤组(予以3 g·L~(-1)归芪比1∶1,1∶3,1∶5的当归补血汤培养2 h),培养结束后弃上清,空白组加载正常FSS,余各组加载低FSS,在30,60,360 min时分别收集每组细胞及灌流液,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖力,硝酸酶还原法检测灌流液中一氧化氮(NO)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞一氧化氮合酶(eNOS) mRNA及蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组细胞分泌NO及表达eNOS在60 min时显著升高(P 0. 01),随后在360 min降低;与模型组比较,当归补血汤对细胞增殖功能无明显影响,但可明显促进第360 min时细胞的NO分泌及eNOS表达,以归芪比1∶3,1∶5的效果更为显著。结论:当归补血汤对低FSS作用下的内皮细胞功能损伤具有一定的保护作用。     

当归补血汤对高尿酸血症大鼠血管内皮细胞功能的影响

目的 观察当归补血汤能否通过降低尿酸而改善大鼠血管内皮细胞功能.方法 将40只大鼠随机分成对照组、模型组、治疗组(低、中、高)剂量,模型组给予高尿酸饮食,对照组给予普通饮食,治疗组给予高尿酸饮食的同时给予当归补血汤治疗(低、中、高)3个治疗剂量;14 d后分别测定各组大鼠血管内皮细胞所分泌的一氧化氮(NO)和一氧化氮和酶(NOS)含量,同时测定血清中尿酸含量、治疗组与模型组比较,观察各项指标有无统计学意义.结果 ①与对照组相比:高尿酸血症组大鼠内皮细胞产生的NO,NOS均减少,有统计学意义(P<0.05).②治疗组与模型组相比较:给予当归补血汤治疗后血清尿酸水平降低,同时血管内皮细胞分泌的NO和NOS含量升高,其中中剂量组与模型组相比有显著的统计学意义(P<0.05),低剂量和高剂量组与模型组相比无统计学意义.结论 当归补血汤可以通过降低尿酸而改善血管内皮细胞功能.从而治疗冠心病.     

血府逐瘀汤对人脐静脉内皮细胞一氧化氮适度刺激作用的研究

目的：探讨血府逐瘀汤对人脐静脉内皮细胞一氧化氮（Nitric oxide,NO）产生的影响。方法：以人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cell -12,HUVEC-12）为材料,采用不同血府逐瘀汤含药血清浓度和干预时间处理HUVEC-12,检测细胞培养上清液中NO浓度的变化。结果：与空白对照组对比,血府逐瘀汤可在一定干预时间段,适度诱导HUVEC-12胞外NO的产生（ P＜0.05）。结论：血府逐瘀汤可能通过适度刺激人内皮细胞NO产生,发挥促进血管新生作用,又避免增生过度的不良反应。     

姜黄素抗肝纤维化作用研究概况

从抗炎抗氧化、抗肝纤维化、抑制肝星状细胞(HSC)增殖、促HSC凋亡和干预细胞因子信号转导等方面综述了姜黄素抗肝纤维化作用的进展。     

肝复康胶囊对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用

目的:探讨中药肝复康对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用.方法:采用四氯化碳致大鼠肝纤维化模型,观察肝复康对肝功能及肝细胞损伤超微结构的影响.结果:肝复康明显改善肝细胞变性及炎细胞浸润等情况,同时明显降低血清转氨酶活性、升高血清白蛋白,降低白球蛋白比例;电镜观察表明肝复康对实验性肝纤维化大鼠肝细胞线粒体等细胞器的损伤有保护作用.结论:肝复康能明显减轻四氯化碳所致的肝细胞损伤,保护肝细胞,改善肝功能.     

心脉灵注射液对内毒素刺激人脐静脉内皮细胞ET-1和NO分泌的影响

目的观察心脉灵注射液(XML)对内毒素(LPS)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)的影响.方法体外培养人脐静脉内皮细胞,根据剂量效应实验结果,使用最适浓度的XML与内毒素100μg/L刺激的HUVEC分别孵育不同的时间,应用MTT法、放免测定法、硝酸还原酶法测定内皮细胞的活力以及培养上清液内ET-1、总硝酸根离子(Nox)的含量.结果与模型组比较,XML浓度为320g/L时,内皮细胞的活力最高(P<0.01),孵育的每个时间点,治疗组培养液中的ET-1的含量都显著降低(P<0.01),Nox的浓度有所增加(在2,4,6h时间点P<0.01).结论XML对内毒素导致的HUVEC损伤有保护作用,能够调节ET-1/NO血管舒缩因子的分泌.     

红景天苷体外抗肝纤维化的实验研究

目的：观察红景天苷对大鼠肝星状细胞增殖及细胞外基质分泌的影响。方法：用不同浓度的红蒂天苷处理大鼠肝星状细胞；以MTT比色法测定细胞的增殖；放射免疫法测定透明质酸和层粘连蛋白；酶联免疫吸附法(ELISA)测定Ⅰ型胶原的水平。结果：红景天苷可剂量依赖性地抑制HSC增殖，不同程度抑制Ⅰ型胶原、透明质酸和层粘连蛋白分泌。结论：红景天苷在体外有显著的抗肝纤维化作用。     

大蒜素对培养人内皮细胞形态及功能的影响

目的 观察大蒜素对内皮细胞形态及内皮功能的影响，方法 观察内皮细胞形态变化，同时检测培养液中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性，丙二醛（ＭＤＡ）及一氧化氮（ＮＯ）的含量，结果一定剂量范围内（５，１０，２０，５０ｕｇ／ｍｌ）的大纱与内皮细胞共同孵育，能使培养液中的ＮＯ含量、ＳＯＤ活性增高，ＭＤＡ含量下降，当大蒜素浓度为１００μｇ／ｍｌ时，上述作用以之，且光镜观察有洛现象，结论 大蒜素能促进内皮细胞ＮＯ的合     

水红花子对免疫肝纤维化大鼠肝功能及血清肝纤维化标志物的影响

目的观察水红花子对免疫肝纤维化大鼠模型血清肝纤维化标志物的影响。方法 40只wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、秋水仙碱组、水红花子组。除正常对照组外,其余各组均给予腹腔注射无菌猪血清,剂量为0.3mL/100g,每周2次,连续12周。模型对照组、正常对照组每日灌服蒸馏水1mL/100g;其余各组灌服相应药物。采用放射免疫的方法观察肝纤维化大鼠血清肝纤维化指标（HA、LN、Ⅳ-C、PCⅢ）的变化。结果与模型对照组比较,各治疗组血清学标志物均有不同程度改善,其中秋水仙碱组PCⅢ、HA、LN显著降低;水红花子组LN、PCⅢ、HA、Ⅳ-C显著降低。结论水红花子可有效降低肝纤维化血清学指标,其作用优于秋水仙碱。     

藏药郎庆阿塔治疗肝纤维化的实验研究

目的:研究藏药郎庆阿塔对复合因素所致大鼠肝纤维化的治疗作用.方法:清洁级Wistar大鼠90只采用复合因素(高脂低蛋白饲料喂养、含乙醇饮用水加皮下注射四氯化碳)制备大鼠肝纤维化模型,造模6周末随机处死12其造模大鼠,通过肝组织病理检查及血清肝功能指标来检查肝纤维化模型成功率.将模型大鼠随机分为模型对照组、阳性药复方鳖甲软肝片组(0.55 g·kg-1)、郎庆阿塔颗粒给药高、中、低剂量组(生药11.4,5.7,2.85 g·kg-1),另设正常对照组.各组大鼠于分组后即日(第7周)开始ig给药,每日1次,连续ig给药7周.治疗结束后,检测血清中生化指标和肝纤维化指标,并取肝脏组织,测定肝脏组织中羟脯氧酸含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)水平,另取肝脏组织标本进行病理组织学检查.结果:郎庆阿塔能明显降低肝纤维化大鼠增高的肝脏系数和肝组织中羟脯氨酸含量(P ＜0.05～p＜0.01),显著降低肝纤维化大鼠血清中异常升高的天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(T-BIL)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原氨端肽( PⅢ NP)及Ⅳ型胶原(CⅣ)(P＜0.05～P＜0.01),升高白蛋白(ALB)和A/G,比值,能明显升高肝组织中SOD活力(P＜0.05～P＜0.01)、降低异常升高的MDA水平(P ＜0.05～P＜0.01),病理组织学检查结果表明郎庆阿塔高、中剂量对肝纤维化大鼠肝纤维组织增生、肝组织炎症活动度均有显著的改善作用(P ＜0.05～P＜0.01),并能显著降低肝组织中胶原纤维面积(P＜0.05～P＜0.01).结论:藏药郎庆阿塔具有明显的治疗肝纤维化作用.     

通心络对早期糖尿病肾病大鼠肾功能及肾组织NO/eNOS表达的影响

目的 观察通心络对高脂饲料联合小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的早期糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠血清一氧化氮(nitric oxid,NO)含量及内皮型一氧化氮合酶(e NOS)蛋白表达的影响,探讨通心络防治早期DN大鼠肾小球高滤过的作用机制。方法采用高脂饲料联合小剂量STZ建立DN大鼠模型,将DN大鼠随机分为模型组、缬沙坦组、通心络组各10只,设立10只正常SD大鼠为空白组,通心络组给予通心络超微粉0.4 g/(kg·d),缬沙坦组给予缬沙坦10 mg/(kg·d)干预8周,于治疗4周、8周监测空腹血糖(fasting blood glucose,FBG),尿微量白蛋白排泄率(urinary albumin excretion,UAER)、血肌酐(serum creatinine,SCr)及尿素氮(blood urea nitrogen,BUN),并计算内生肌酐清除率(creatinine clearance rate,Ccr)。于8周末处死大鼠,称量肾重,计算肾重指数,检测肾组织NO含量及e NOS蛋白表达。多组组间差异比较采用单因素方差分析。结果 与空白组比较,模型组大鼠FBG、UAER、肾重及肾重指数、Scr、BUN、Ccr、NO含量显著升高、e NOS蛋白表达显著增强(P<0.05)。与模型组比较,通心络组及缬沙坦组FBG无明显变化(P>0.05),UAER、Scr、BUN、Ccr、肾重及肾重指数显著下降(P<0.05)。通心络组及缬沙坦组肾组织NO含量较模型组显著降低,e NOS蛋白表达较模型组减弱(P<0.05)。结论 通心络可降低早期DN大鼠UAER、Scr、BUN、Ccr、肾重及肾重指数,保护肾功能。通心络抑制肾组织e NOS蛋白表达,减少肾组织NO的含量,从而降低早期DN大鼠肾小球率过滤,可能是通心络改善肾小球早期高滤过的作用机制之一。