血小板特异性抗体检测对血小板减少性紫癜鉴别的诊断意义

目的探讨血小板特异性抗体（抗GPⅠb、抗GPⅡb、抗CPⅢa）检测对区别免疫性与非免疫性血小板减少性紫癜诊断的临床价值。方法本院有70例血小板减少性紫癜患者,其中37例为免疫性血小板减少患者,33例为非免疫性血小板减少患者,应用单克隆抗体俘获血小板抗原技术（MAIPA）检测血小板特异性抗体（抗GPⅠb、抗GPⅡb、抗Ⅲa）。结果37例免疫性血小板减少患者中有26例血小板特异性抗体检测至少一项阳性,占70．2％。非免疫性血小板减少患者为6．1％。结论自体免疫性血小板减少性紫癜（AITP）患者血小板膜糖蛋白特异性抗体的总阳性率（抗GPⅡb或抗GPⅢa或抗GPⅠb特异性自身抗体阳性）为70．2％。显著高于非免疫组6．1％（χ^2=29．97,P〈0．05）,因此,我们认为血小板特异性抗体检测是特异性较强的一项指标,对提高ITP确诊率及鉴别免疫性和非免疫性血小板减少性紫癜有重要的临床意义。     

PAICA法检测ITP病人血小板特异抗体的临床应用

（1）目的：检测特发性血小板减少性紫癜（ITP）病人及非免疫性血小板减少症病人的抗血小板特异性抗体，并探讨其临床意义；（2）方法：采用血小板相关抗体特性检测技术（PAICA法），检测52例ITP病人，31例非免疫性血小板减少症病人抗血小板GPⅡb/Ⅲa,GPⅠb/Ⅸ的特异性抗体，并与血小板相关抗体IgG(PAIgG)检测结果进行了比较。（3）结果：血小板特异抗体检测的可能性比值及阳性预测值较高，但阴性预测值较低，而PAIgG检测的可能性比值，阳性预测值及阴性预测值均较低。（4）结论：血小板特异抗体检测对肯定ITP诊断有重要的意义，对排除ITP诊断意义不大。     

特发性血小板减少性紫癜自身抗体的特异性免疫诊断

目的 检测特发性血小板减少性紫癜(ITP)及非免疫性血小板减少症的抗血小板特异性抗体及PAIgG,并比较其诊断及鉴别诊断的价值。方法 用酶联免疫吸咐竞争法检测PAIgG,用血小板抗原单克隆抗体固相化法(MAIPA)和改良抗原捕获ELISA法(MACE)检测抗血小板膜糖蛋白(GPⅡ b／Ⅲa、GPⅠ b／Ⅸ和P-选择素)的特异性抗体。结果 PAIgG在ITP组的阳性率为94.0％,非免疫性血小板减少症组为53.3％。MAPIA和MACE在ITP组的阳性率分别为GPⅡb／Ⅲa 31.3％、26.7％,GP Ⅰ b／Ⅸ12.0％、8.7％,P-选择素24.6％、19.3％,在非免疫性血小板减少症组中MAIPA和MACE的阳性率除1例P-选择素阳性外,其余均为阴性,与ITP组相比,P<0.001。结论 PAIgG的敏感性可达90％以上,但特异性较差;而MAIPA和MACE虽然敏感性较低,但具有很高的特异性,并能鉴别免疫性血小板减少和非免疫性血小板减少。抗血小板特异性抗体的检测可成为ITP的特异性诊断指标。     

抗原捕获试验在诊断特发性血小板减少性紫癜中的应用价值

目的：探讨抗原捕获试验在诊断特发性血小板减少性紫癜（ITP）中的应用价值。方法：用抗原捕获试验检测42例ITP患者和21例继发性血小板减少性紫癜（STP）患者的抗血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅱa抗体（抗GPⅡb/ⅡaAb），酶联免疫竞争抑制试验检测血小板相关抗体（PAIg)，比较二者对ITP诊断的敏感性的特异性。结果：抗原捕获试验检测ITP患者抗GPⅡb/ⅡaAb敏感性为73．8％，特异性为90．5％；酶联免疫竞争抑制试验检测ITP患者PAIg敏感性为71．4％，特异性为23．8％。结论：抗原捕获试验检测抗GPⅡb/ⅡaAb在ITP诊断中有重要价值。     

血小板特异性自身抗体和淋巴细胞亚群检测在免疫性血小板减少症中的临床价值

目的检测血小板特异性自身抗体和外周血淋巴细胞亚群在免疫性血小板减少症(ITP)患者中的水平,并探讨两者之间的联系以及自身抗体与ITP病情间的关系,评价其在ITP中的临床价值。方法应用改良的单克隆抗体俘获血小板抗原(MAIPA)法检测40例ITP患者血小板膜糖蛋白(GPⅡbⅢa、GPIbα)特异性自身抗体;利用流式细胞术(FCM)检测ITP患者外周血淋巴细胞亚群(CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD19+、CD19+CD5+)水平。结果 ITP组抗GPⅡbⅢa抗体阳性30例,抗GPIbα抗体阳性26例,其中25%患者仅为单一抗GPⅡbⅢa抗体阳性,15%患者仅为单一抗GPIbα抗体阳性,50%患者为双抗体阳性,10%患者为双抗体阴性。非免疫性血小板减少组与对照组均为阴性。单抗体阳性组采血时血小板计数平均值明显低于双抗体阴性组(P<0.05);双抗体阳性组血小板计数平均值亦明显低于单抗体阳性组和双抗体阴性组(P<0.05)。ITP组与正常对照组相比较,CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+T淋巴细胞百分率以及CD3+CD4+/CD3+CD8+比例减低,CD3+CD8+T淋巴细胞、CD19+B淋巴细胞、CD19+CD5+B淋巴细胞百分率均明显高于对照组(P<0.05)。双抗体阳性组CD19+B淋巴细胞、CD19+CD5+B淋巴细胞百分率明显高于单抗体阳性组(P<0.05)。结论血小板特异性自身抗体检测对鉴别ITP和非免疫性血小板减少症有一定价值,自身抗体与ITP的病情有一定关系;血小板特异性自身抗体和T、B淋巴细胞可能共同参与了ITP的发病过程,并在其中起重要作用。     

特发性血小板减少性紫癜患者血小板相关抗体的表达及意义

目的探讨特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者患病时PAIg的表达评价其在ITP中的临床意义。方法选取40例ITP患儿作为研究对象,同期门诊体检正常儿童20例为对照组,应用酶联免疫吸附法（ELISA法）测定血小板相关抗体（PAIgA、PAIgG）、采取单克隆抗体特异性俘获血小板抗原（MAIPA法）测定血小板特异性抗体抗血小板膜糖蛋白抗体（GPIIb/IIIa、GPIb/IX）,全自动血液分析仪测定血小板计数。结果 PAIgA、PAIgG、GPIIb/IIIa、GPIb/IX、血小板计数对照组分别为（4.22±0.78）ng/107PA、（23.17±3.46）ng/107PA、（0.33±0.01）A值、（0.31±0.01）A值、（137.82±42.37）×109/L,ITP组分别为（45.58±5.32）ng/107PA、（243.34±12.21）ng/107PA、（0.42±0.06）A值、（0.41±0.05）A值、（35.50±21.35）×109/L,两组以上各项指标之间比较均差异有统计学意义（P〈0.05）;ITP组血小板计数与特异性抗体GPIIb/IIIa、GPIb/IX之间具有负相关,相关系数分别为-0.24（P〈0.05）、-0.31（P〈0.05）。结论在ITP患儿中血小板相关抗体及特异性抗体均有明显升高,呈现阳性表达,ELISA法、MAIPA法联合检测有助于鉴别免疫性与非免疫性血小板减少型紫癜,能提高早期诊断率,并且有助于指导临床治疗。     

人血小板功能抗体及其片段的识别

目的研究特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者血小板膜糖蛋白（GP）特异性IgG抗体及其片段的免疫活性及对血小板聚集功能的影响.方法用改良单克隆抗体特异性俘获血小板抗原技术（MAIPA）检测84例慢性ITP患者血浆中抗GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/Ⅸ及GPⅥ自身抗体,比浊法血小板聚集试验筛选出自身抗体阳性并能抑制血小板聚集的患者,用蛋白A柱纯化其血浆IgG抗体并用胃蛋白酶制备F（ab＇）2片段.检测纯化的IgG抗体及其酶切片段与血小板GP的结合活性及对正常人血小板聚集功能的影响.结果 （1）84例ITP患者血浆中,48例（57.1%）抗GPⅡb/Ⅲa和/或GPⅠb/Ⅸ和/或GPⅥ自身抗体阳性,其中7例（14.6%）明显抑制了二磷酸腺苷、瑞斯托霉素或胶原诱导的血小板聚集;（2）纯化的IgG及F（ab＇）2片段具有与相应血小板GP的结合活性;（3）4例患者纯化IgG及F（ab＇）2片段具有抑制血小板聚集的功能.结论 F（ab＇）2片段是IgG自身抗体的功能片段,它不但保留了良好的抗原结合活性且可部分抑制血小板聚集功能,为人源化血小板糖蛋白特异性抗体的制备奠定了基础.     

抑制血小板聚集功能的抗血小板膜糖蛋白GPⅡbⅢa自身抗体的筛选

目的：筛选出血浆中含有抑制血小板聚集的血小板膜糖蛋白GPⅡbⅢa自身抗体的血小板减少性紫癜(ITP)患者，为人源化抗GPⅡbⅢa基因工程抗体的研制做准备。方法：用改良MAIPA法检测24例慢性ITP患者血浆有无血小板膜糖蛋白GPⅡbⅢa自身抗体，用血小板聚集试验研究抗GPⅡbⅢa自身抗体对血小板聚集的影响。结果：24例慢性ITP患者中10例(41．7％)血浆中抗GPⅡbⅢa自身抗体阳性，2例明显抑制血小板聚集功能。结论：少数抗GPⅡbⅢa自身抗体可抑制血小板聚集功能。     

原发性血小板减少性紫癜患者血小板抗体的表达及其对血小板数量和功能的影响

目的 检测原发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血小板抗体,并探讨其对血小板数量及功能的影响.方法 采用单克隆抗体俘获血小板抗原技术(MAIPA)检测ITP患者、非原发性血小板减少患者及健康人血小板抗体,并在健康人富血小板血浆中加入ITP患者血清,观察其对健康人血小板聚集功能的影响.结果 MAIPA法对ITP患者主要血小板自身抗体的检出率为65.4%,ITP患者中抗血小板抗体阳性者血小板数量明显低于抗体阴性者,且血小板数量与抗体水平呈负相关,其中GPⅡb/Ⅲa抗体阳性患者的血小板数量与GPⅡb/Ⅲa抗体水平呈负相关(r=-0.724);GPⅠb/Ⅸ抗体阳性患者的血小板数量与GPⅠb/Ⅸ抗体水平呈负相关(r=-0.571),26例患者中10例血清抑制了健康人血小板聚集功能,其中9例为抗血小板抗体阳性患者,仅1例为抗体阴性患者.结论 ITP患者血小板抗体不仅影响血小板数量,还对血小板功能有影响.     

血小板膜糖蛋白自身抗体检测新方法--流式微球技术

目的 建立流式微球技术检测血小板膜表面糖蛋白特异性自身抗体（GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/IX）,探讨其在特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者体内表达情况及其与激素治疗效果之间的关系.方法 取67例ITP患者及30例健康对照组的外周血,分离、裂解血小板与单抗包被微球共同孵育后加入PE标记多克隆抗体,流式细胞仪分析,评价ITP患者激素治疗效果.结果 ITP患者血小板GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/IX自身抗体荧光强度为4.58（0.22～30.20）、4.78（0.56～22.00）,对照组为0.92（0.23～2.28）、0.87（0.22～2.13）.以微球荧光强度比率（测定/对照）CD41a＞0.025%、CD42＞2.12%定为阳性,用流式微球技术同时检测两种抗血小板抗体,诊断ITP敏感性为95.5%（64/67）、特异性为90.9%,阳性预测值为96.7%.ITP患者激素治疗效果与抗体检测结果呈负相关（r=-0.318）.结论 流式微球技术检测血小板膜糖蛋白自身抗体对ITP诊断的敏感性、特异性较高,对治疗及预后也有一定临床指导意义.     

人血小板膜糖蛋白功能测定的酶联免疫分析方法的建立

目的建立测定血小板膜糖蛋白（GP）功能的酶联免疫分析（ELISA）方法 ,并对其灵敏度、批内和批间差异进行方法学考核。方法以抗血小板CD62P单抗SZ51和抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa（GPⅡb/Ⅲa）单抗7E3分别包板,加入经ADP诱导的或未诱导的正常人富含血小板血浆（PRP）,以生物素标记的抗GPIb单抗SZ2（Biotin-SZ2）反应后,加入亲和素标记的辣根过氧化物酶（Avdin-HRP）检测,邻苯二胺（OPD）显色后,酶标仪读取吸光度（A）值。对其灵敏度及批内、批间差异作方法学评估,应用该方法对抑制性单抗SZ-21和阿司匹林抑制血小板活化的功能效果进行测定,并与流式细胞术（FCM）测定结果进行比较。结果该方法可检测血小板计数低达6.25×109/L（SZ51包被板）和3.13×109/L（7E3包被板）的标本,批内和批间变异系数均小于10%。测得50名健康正常人ADP诱导的（未诱导的）血小板的CD62P和GPⅡb/Ⅲa的A值分别为0.68±0.21（0.18±0.09）和0.87±0.29（0.44±0.14）。ELISA测定结果表明,SZ21和阿司匹林可明显抑制ADP诱导的血小板功能。流式细胞仪测定ADP诱导的（未诱导的）人血小板表面CD62P和GPⅡb/Ⅲa的阳性细胞百分率分别为（60.1±7.12）%[（2.56±0.61）%]和（86.32±17.82）%[（20.25±14.56）%],其批内和批间变异系数均〈10%。结论该方法可以测定血小板功能活化剂或抑制剂对血小板功能的影响,可以测定血栓性疾病或血栓形成相关性疾病引起的血小板活化程度。     

小剂量利妥昔单抗治疗复发难治性免疫性血小板减少症疗效分析

目的 探讨小剂量利妥昔单抗治疗复发难治性免疫性血小板减少症（ITP）的疗效、安全性及治疗前后B细胞、血小板膜糖蛋白特异性自身抗体的变化.方法 利妥昔单抗100mg静脉滴注,每周1次,连用4周,治疗23例复发难治性ITP患者,无使用免疫抑制剂、化疗药、抗凝药及激素冲击疗法.监测治疗前后的血常规,血清免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA）,血小板膜糖蛋白抗体及CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD19＋、CD20＋细胞数.结果 9例完全有效,5例有效,9例无效.中位疗效持续时间8（5～23）个月,有效患者有中3例复发,其余均维持较好.有效患者治疗后血小板自身抗体均转阴.治疗前后外周血血红蛋白、白细胞计数无明显变化,血清IgG、IgM、IgA无明显变化,CD3＋、CD4＋、CD8＋细胞数无明显变化.治疗后CDI9＋/CD20＋细胞明显下降.多数患者耐受好.结论 小剂量利妥昔单抗治疗复发难治性ITP疗效肯定,不良反应可以耐受.     

系统性红斑狼疮合并自身免疫性血小板减少血清学研究

目的探讨与免疫性血小板减少有关的特异性自身抗体：抗CD40配体（CD40L）抗体、抗血小板生成素（TPO）抗体、抗血小板膜糖蛋白（GPIIb／ma）抗体、抗血小板生成素受体（C-mpl）抗体在系统性红斑狼疮（SLE）合并血小板减少患者血清中分布及其作用。方法收集SLE合并自身免疫性血小板减少、SLE血小板正常各60例,酶联免疫吸附法（ELISA）测定该4种抗体,比较各组之间各抗体水平及抗体的阳性率是否存在统计学差异,SLE合并血小板减少患者骨髓细胞学涂片检查常规进行。结果4种抗体的浓度与血小板数目存在不同程度负相关,血小板减少组抗体的阳性率高于血小板正常组SLE合并血小板减少患者中至少能够检测出其中一种抗体阳性的占73％,同时检测出该4种抗体约为13％。4种抗体同时阳性或阴性的血小板减少患者临床表现及实验室指标比较存在统计学差异。结论抗CD40L抗体、抗C-mpl抗体、抗血小板膜糖蛋白GPIIb／ma抗体、TPO抗体介导的自身免疫性血小板减少可能是SLE合并血小板减少的发病机制之一,尚有其他因素参与了SLE合并血小板减少的发病过程。     

肺癌术后应用乌司他丁保护血小板功能的效果分析

目的分析肺癌术后应用乌司他丁保护血小板功能的效果。方法选择我院2009年10月至2010年3月的肺癌术后患者48例,遵照知情同意原则随机分为2组,对照组23例常规治疗,观察组25例加用乌司他丁。结果 2组患者的表面膜糖蛋白受体（GPⅠb、GPⅡb/Ⅲa）比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。2组患者的血小板计数比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论肺癌术后应用乌司他丁保护血小板功能效果满意,值得临床关注。     

血小板减少症患者血小板参数检测的临床意义

目的探究血小板减少症患者血小板参数的变化及其临床意义。方法采用Sysmex XE-2100全自动五分类血液分析仪检测83例不同类型血小板减少症患者，包括24例急性白血病（AL），28例骨髓增生异常综合征（MDS）和31例特发性血小板减少性紫癜（ITP）病人治疗前后血小板计数（PLT）、血小板比积（PCT）、平均血小板体积（MPV）和血小板分布宽度（PDW），并将检测结果与正常对照组进行比较。结果初诊时ITP、AL和MDS患者的PTJT和PCT明显低于正常对照组（P〈0．01），其中ITP患者的MPV和PDW明显高于AL、MDS患者以及正常对照组（P〈0．01），AL和MDS患者的PDW也明显高于正常对照组（P〈0．01），但二者的MPV值与正常对照组比较无明显差异。ITP、AL和MDS患者缓解后PLT和PCT明显上升，而PDW下降，与未缓解组比较有显著差异（P〈0．01），ITP缓解组的MPV明显低于未缓解组（P〈0．01），而AL和MDS缓解组的MPV值与未缓解组比较无显著差异。结论血小板参数的检测对于明确血小板减少的病因及其预后具有重要临床意义。     

血浆血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa与D-二聚体在冠心病患者中的变化及意义

目的：探讨血浆D-二聚体（DD）、血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa（GPⅡb/Ⅲa）在不同类型冠心病（CHD）患者中的变化及意义。方法：分别以干化学法、酶联免疫吸咐双抗体夹心法测定急性心肌梗塞（AMI）患者、不稳定型心绞痛（UAP）患者、稳定型心绞痛（SAP）患者及正常对照组体内血浆DD、GPⅡb/Ⅲa含量,各30例。同时检测冠心病患者空腹血糖（FPG）、血尿酸、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、总胆固醇、甘油三脂、超敏C反应蛋白（hs-CRP）,记录其收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、体重指数、吸烟指数、饮酒史、性别。结果：AMI组、UAP组血浆DD、GPⅡb/Ⅲa浓度大于SAP组及正常对照组,差异具有统计学意义（P〈0.0125）,而AMI组与UAP组比较,差异无统计学意义（P〉0.0125）。SAP组与正常对照组相比,SAP组二者浓度大于正常对照组,但差异无统计学意义（P〉0.0125）。血浆DD、GPⅡb/Ⅲa之间具有明显正相关性（r=0.833,P〈0.05）。DD与年龄、hs-CRP、FPG、SBP有正相关关系（r=0.414,0.250,0.199,0.246,P〈0.05）,GPⅡb/Ⅲa与年龄呈相关关系（r=0.312,P〈0.05）。FPG、hs-CRP为独立影响DD的危险因素,年龄、吸烟指数为独立影响GPⅡb/Ⅲa的危险因素。结论：血浆DD、GPⅡb/Ⅲa与冠心病病情密切相关,并与冠心病多种危险因素相关,因而,血浆DD、GPⅡb/Ⅲa在冠心病中具有重要意义。     

用抗血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa单克隆抗体检测ITP自身抗体的临床应用

本文利用抗血小板膜糖蛋白Ⅱ、b、Ⅲa(GPⅡb、GPⅢa)单克隆抗体,采取酶联免疫双抗体夹心法分别检测了26例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血浆抗GPⅡb、GPⅢa自身抗体.结果显示3例抗GPⅡb阳性(约占11.5%),1例抗GPⅢa(约占3.8%),7例同时抗GPⅡb.GPⅢa(约占26.9%),阳性总数为11例(约占42.3%);且抗GPⅡb. GPⅢa阳性结果与血小板数无关.     

特发性血小板减少性紫癜与抗核抗体和抗心磷脂抗体的关系探讨

目的 探讨抗核抗体（ANA）、抗心磷脂抗体（ACA）与特发性血小板减少性紫癜（ITP）及系统性红斑狼疮（SLE）的关系.方法 采用ELISA法对58例ITP患者,50例SLE患者及50例健康体检者的血清进行ANA、ACA检测,用全自动血细胞分析仪对ANA、ACA阳性和阴性患者治疗前后的血小板计数进行对比分析.结果 ITP及SLE患者ANA和ACA阳性率均明显高于健康对照组,2组比较均有显著差异（P＜0.01）.ANA阳性和阴性的ITP患者治疗前后血小板计数无显著差异（P＞0.05）.ACA阳性和阴性的ITP患者治疗前后血小板计数无显著差异（P＞0.05）.ANA阳性和阴性的SLE伴血小板减少患者治疗前后血小板计数无显著差异（P＞0.05）,ACA阳性和阴性的SLE伴血小板减少患者治疗前后血小板计数无显著差异（P＞0.05）.结论 ITP疾患中,ANA阳性可能是自身免疫反应的一种标志,或者可能是ITP的自身抗体,但不能作为辅助诊断标准;ACA阳性可能是引起血小板减少的一个重要因素,可间接反映ITP患者血小板的受损情况.ANA、ACA阳性与ITP的治疗效果及预后无明显关系.对ANA、ACA阳性的ITP患者应进行随诊,警惕是否会发展成为SLE或其他自身免疫性疾病.