HPV、HSV2感染及C—cerbB—2表达与宫颈癌关系

目的：探讨汕头地区宫颈癌的发生与HPV，HSV2感染以及C-cerbB-2表达的相关性。方法：采用PCR技术检测宫颈癌（84例）组织与正常宫颈（13例）组织的HPV－DNA，HSV2－DNA，并用免疫组化SP法检测同一宫颈癌组织标本与正常宫颈组织标本的C-cerbB-2表达情况。结果：（1）宫颈癌组织HPV－DNA，HSV2－DNA阳性率为47．6％，46．4％，正常宫颈组织则为7．7％，15．4％，宫颈癌组织的HPV，HSV2感染率均显著高于正常宫颈组织（P＜0．01，P＜0．05）。（2）宫颈癌组织中，HPV，HSV2双阳性24例，经统计学处理，HPV和HSV2间的感染有显著相关性（P＜0．05）。（3）宫颈癌组织的C-cerbB-2表达率为34．5％，显著高于正常宫颈组织（0／13，P＜0．05）。（4）75．9％的C-cerbB-2阳性患者（22／29）与HPV与HPV和（或HSV2）同时呈现阳性。结论：汕头地区宫颈癌的发生与较高的HPV，HSV2感染率和C-cerbB-2表达率密切相关，三者的共同作用可能是宫颈癌发生发展的重要因素。     

衡阳地区性乱人群中HSV2感染的研究

目的：了解性乱人群典型皮损及无皮损的生殖道分泌物中2型单纯疱疹病毒（HSV2）的感染情况。方法：用PCR法对衡阳地区310例性乱者作HSV2－DNA检测。结果：187例典型皮损的性乱人群中,115例检出HSV2－DNA,阳性率为61．5％,其中男性阳性率为54．9％,女性阳性率为77．8％,男女之间差异显著（P＜0．05）。123例无皮损性乱人群中,28例检出HSV2－DNA,HSV2－DNA检出率为22．8％,其中男性阳性率为20．9％,女性阳性率为27．0％。结论：衡阳地区性乱人群中HSV2有较高的感染率,典型皮损区HSV2－DNA检出率高于无皮损的生殖道分泌物。     

单纯疱疹病毒性脑炎脑脊液基因诊断

目的：采用聚合酶链反应（PCR）扩增检测脑脊液（CSF）中单纯疱疹病毒（HSV）特异性DNA，观察其临床诊断应用价值。方法：36例临床确诊病毒性脑炎用PCR扩增检测脑脊液、血液HSV，并行病毒分型。同时与38例非脑炎组对照。结果：病毒性脑炎组36例脑脊液中，HSV－DNA阳性19例（19／36，52．78％），血液HSV－DNA阳性13例（13／36，36．11％），低于脑脊液阳性率。结论：本检测为临床提供了一个早期、快速诊断、HSE简便方法。     

HBV感染孕妇HBV-DNA与ToRCH抗体检测分析

目的：了解HBV感染孕妇体内HBV－DNA复制情况与ToRCH感染的关系。方法：ELISA法筛查出136例HBV感染孕妇，荧光定量PCR检测HBV－DNA的体内复制情况。同时检测弓形体（ToX)，风疹病毒（RuV)，巨细胞病毒（CMV），单纯疱疹病毒（HSV，I／II）四种病原体（ToRCH)的血清特异性IgM抗体，结果：HBV感染孕妇当血清中HBV－DNA复制量＞10^4拷贝时，ToRCH总感染率明显升高，结论：检测ToRCH特异性抗体结合HBV－DNA定量检测，建议作为HBV感染孕妇孕期常规检测项目。     

孕母乙肝标志物及HBV—DNA含量与新生儿宫内感染关系的探讨

目的探讨HBsAg阳性孕妇血清乙肝标志物及HBV—DNA含量与其新生儿宫内感染的关系。方法选择HBsAg阳性的孕妇1237例,采用双抗体夹心酶联免疫吸附（ELISA）法检测其分娩前血清乙肝标志物含量,荧光定量聚合酶链反应法（PCR）定量检测HBV—DNA,并同时检测其新生儿血清乙肝标志物及HBV—DNA水平。结果（1）在1237名孕妇中,其新生儿发生宫内感染者39例,感染率为3．15％（39／1237）,其中PIBeAg阳性孕妇其新生儿宫内感染率为11．4％（37／324）,较HbeAg阴性孕妇的新生儿宫内感染率[0．2％（2／913）]明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。血清HBV高复制状态（HBV—DNA≥10^6copy·ml^-1）的孕妇其新生儿宫内感染率为23．4％（33／141）,较血清HBV低复制状态（HBV—DNA〈10^6copy·ml^-1）孕妇的新生儿宫内感染率[1．9％（6／316）]明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）发生宫内感染的39例新生儿血清HBV—DNA水平显著低于其母血HBV—DNA水平,但两组数值之间无相关（r=-0．03,tr=0．18,P=0．86）。结论孕妇分娩前HBeAg阳性和HBV—DNA高滴度是发生新生儿HBV宫内感染的危险因素,但孕妇分娩前血清HBV—DNA滴度与新生儿血清HBV—DNA滴度之间无相关性。     

孕母乙肝标志物及HBV-DNA含量与新生儿宫内感染关系的探讨

目的探讨HBsAg阳性孕妇血清乙肝标志物及HBV—DNA含量与其新生儿宫内感染的关系。方法选择HBsAg阳性的孕妇1237例,采用双抗体夹心酶联免疫吸附（ELISA）法检测其分娩前血清乙肝标志物含量,荧光定量聚合酶链反应法（PCR）定量检测HBV—DNA,并同时检测其新生儿血清乙肝标志物及HBV—DNA水平。结果（1）在1237名孕妇中,其新生儿发生宫内感染者39例,感染率为3．15％（39／1237）,其中PIBeAg阳性孕妇其新生儿宫内感染率为11．4％（37／324）,较HbeAg阴性孕妇的新生儿宫内感染率[0．2％（2／913）]明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。血清HBV高复制状态（HBV—DNA≥10^6copy·ml^-1）的孕妇其新生儿宫内感染率为23．4％（33／141）,较血清HBV低复制状态（HBV—DNA〈10^6copy·ml^-1）孕妇的新生儿宫内感染率[1．9％（6／316）]明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）发生宫内感染的39例新生儿血清HBV—DNA水平显著低于其母血HBV—DNA水平,但两组数值之间无相关（r=-0．03,tr=0．18,P=0．86）。结论孕妇分娩前HBeAg阳性和HBV—DNA高滴度是发生新生儿HBV宫内感染的危险因素,但孕妇分娩前血清HBV—DNA滴度与新生儿血清HBV—DNA滴度之间无相关性。     

HBsAg与HBeAg阴性孕妇乙肝垂直传播的临床观察

目的观察HBsAg与HBeAg阴性孕妇的新生儿乙型肝炎病毒（HBV）宫内感染状况。方法选择HBsAg和HBeAg阴性、其他HBV血清标志物阳性孕妇的新生儿作为观察组,同期HBV血清标志物全部阴性孕妇的新生儿作为对照组。采用套式PCR方法检测两组新生儿血清及外周血单个核细胞（PBMC）中的HBV—DNA。结果观察组32例新生儿中,血清HBV—DNA阳性4例,阳性率12．5％（4／32）,PBMC中HBV—DNA阳性8例,阳性率25％（8／32）,其中血清与PBMC均阳性1例,宫内感染率34．3％（11／32）。对照组21例新生儿血清HBV—DNA和PBMC中HBV—DNA均为阴性。结论HBsAg及HBeAg阴性而其他HBV血清标志物阳性的孕妇也可能发生HBV的垂直传播。     

HBV-DNA的含量与宫内感染的关联性

目的：探讨孕妇血清中HBV—DNA含量与胎儿宫内感染及造成宫内感染的相关因素．方法：用ELISA方法筛选HBsAg阳性孕妇228例,并用定量PCR技术检测HBsAg阳性孕妇血清以及脐血中HBV—DNA．新生儿根据有无HBV感染分为胎儿感染组及非感染组（对照组）,调查宫内感染的相关因素,结果：HBsAg,HBeAg、抗HBc阳性孕妇的新生儿脐血HBV—DNA捡出率21％（14／68）;HBsAg．抗HBe,抗HBc阳性者为1．7％（2／117）;HBsAg和HBeAg双阳性者为20％（3／15）;HBsAg和抗HBc阳性者为11％（2／19）;HBsAg单一抗原阳性者脐血中未捡出HBV—DNA．胎儿总感染率为9,2％（21／228）．胎儿宫内感染率随孕妇血清中HBV—DNA含量增加而升高,宫内感染的危险性越大．胎儿感染组与非感染组在多种临床相关因素中先兆早产孕妇胎儿感染者多于非感染组（P〈0．05）．结论：孕妇不同的感染状态影响宫内HBV感染率,HBeAg与HBV—DNA高滴度是胎儿宫内感染的高危因素．孕妇出现先兆早产使胎儿的感染率增加．     

妊娠早期妇女巨细胞病毒感染状况的研究

目的：检查孕妇绒毛巨细胞病毒（ＣＭＶ）感染，了解孕妇ＣＭＶ的早期感染状况。方法：采用ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、病毒分离方法检测３２例早孕妇女血清ＣＭＶ－ＩｇＭ、宫颈和绒毛ＣＭＶ－ＤＮＡ。结果：孕妇血清ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率９．３８％（３／３２）；宫颈ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性率为１２．５％（４／３２）；绒毛ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性１例，分离阳性１例，阳性率为６．２５％（２／３２）；２例绒毛ＣＭＶ感染，但血清及宫颈检查正常。结论：妊娠早期绒毛的ＣＭＶ感染率为６．２５％，母亲血清和宫颈检查正常并不能排除胎儿先天感染的可能。     

运用实时荧光定量PCR技术研究孕妇TORCH感染情况

目的：运用实时荧光定量PCR技术（Real0time fluorogenic quantitative PCR)研究孕妇早期合并TORCH感染情况及其对胎儿和新生儿的危害，方法：采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ－PCR）技术对166例早中孕妇女（小于20孕周）进行TORCH病原体检测（包括RV，CMV，TOX，HSV－I，Ⅱ）。结果：166例孕妇中TORCH的阳性率分别为：RV＝1．81％（3／166），HSV．7．23％（11／166），CMV＝4．22％（7／166），TOX＝15．66％（26／166），部分病例在羊水中检测到病原.结论：（1）实时荧光定量PCR技术是一项简便快速准确的检测病原体的方法，与传统PCR法相比有独特的优越性，在临床上具有广泛的应用前景；（2）孕妇TORCH感染是不容忽视的生物致畸因子，各地妇保机构应加强孕妇及育龄妇女的筛查和管理，以减少畸形儿出生。     

乙肝病毒携带孕妇血清和乳汁中HBV—DNA定量检测研究

目的探讨HBV携带孕妇血清HBV标志物与血清、乳汁中HBV—DNA含量之间的关系,评价母乳喂养的安全性。方法利用EUSA筛查乙肝五项至少一项阳性的孕妇血清HBV—M．将其分为HBeAg阳性组和HBeAg阴性组共180例。同时应用荧光定量PCR对其血清和乳汁中的HBV—DNA进行检测。结果HBeAg阳性组孕妇的血清和乳汁HBV—DNA阳性率为97．7％（88,90）和62．2％（74／90）,HBV—DNA平均载量的对数量为7．32±1．83和4．02±1．21。HBeAg阴性组孕妇的血清和乳汁HBV—DNA阳性率为55．5％（50／90）和13．3％（13／90）,HBV—DNA平均载量的对数量为5．62±0．93和3．32±0．51。孕妇血清中HBeAg阳性组其乳汁和血清中HBV—DNA阳性率及病毒载量与HBeAg阴性组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HBV携带孕妇的血清中HBV—DNA载量越高,其乳汁HBV—DNA含量越高;二者高度相关（r=0．932,P〈0．01）。血清HBV载量高的孕妇最好不要进行母乳喂养。     

乙型肝炎病毒表面抗原阳性孕妇前S1抗原检测分析

目的检测乙型肝炎表面抗原（HbsAg）阳性孕妇血清乙型肝炎前S1抗原（PreSlAg）与乙肝病毒DNA（HBV DNA）的结果,探讨PreS1Ag在妇幼保健工作的使用价值。方法对288名HbsAg阳性孕妇血清用酶联免疫吸附法检测PreS1Ag,用荧光定量PCR法检测HBVDNA。结果288名HbsAg阳性孕妇PreSiAg总阳性率为76．4％（220／288）、PCR总阳性率为82．6％（238／288）;HbeAg（－）血清学模式组PreS1Ag阳性率为73．4％（160／218）、HbeAg（＋）血清学模式组PreS1Ag阳性率为85．7％（60／70）,两组PreS1Ag阳性率无显著性差异（P〉O．05）;PCR（－）组PreS1Ag阳性率为26％（13／50）、PCR（＋）组PreS1Ag阳性率为87％（207／238）,两组PreS1Ag阳性率有显著性差异（P〈0．05）。结论PreS1Ag与HBeAg无明确相关,与HBVDNA有较好的一致性．基层妇幼保健机构可通过检测PreS1Ag补充了解孕妇乙肝病毒的复制状态,做好防治措施。     

孕妇血清人巨细胞病毒脱氧核糖核酸与先天感染的关系

目的：探讨孕妇血清人巨细胞病毒脱氧核糖核酸（ＨＣＭＶ－ＤＮＡ）与先天感染的关系。方法：应用套式聚合酶链反应检测９６例孕妇血清及３２例孕妇分娩时的脐血清ＨＣＭＶ－ＤＮＡ。结果：９６例孕妇血清ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性检出率为１０．４％;７全犯罪 清ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性孕妇脐血清ＨＭＶ－ＤＮＡ检出率为５７％（４／７）,２５例阴性孕妇脐血甭ＨＣＭＶ－ＤＮＡ检出率为１２％（３／２５）,血清ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性孕     

对孕妇外周血中的单个有核红细胞及游离DNA来源的鉴定

目的：探讨孕妇外周血中单个胎儿有核红细胞及游离DNA在非创伤性产前诊断的可行性。方法：对116个孕妇外周血进行检测。（1）对51例14－26孕周的妇女外周血经密度梯度离心后用显微操作分离单个有核红细胞。（2）提取65例孕妇（5－40孕周）外周血血浆DNA。（3）应用巢式聚合酶链反应（PCR）扩增单个有核红细胞的男性SRY基因,应用引物延伸预扩增（PEP）法及巢式PCR扩增孕妇血浆游离DNA的SRY基因。结果（1）分选单个有核红细胞的成功率为90．20％（46／51）。（2）单细胞SRY基因的结果与胎儿实际性别的符合率为82．61％（38／46）,敏感性为80．00％（24／30）,特异性为87．50％（14／16）。（3）游离DNA的SRY基因的结果与胎儿实际性别的符合率为90．77％（59／65）,敏感性为89．13％（41／46）,特异性为94．74％（18／19）。结论（1）孕妇外周单个有核红细胞及游离的DNA可来自胎儿,它可成为产前诊断的胎儿物质来源。（2）单细胞分离技术使孕妇外周血中的胎儿有核红细胞的分选纯度几乎达到100％。解决了母胎细胞混合的难题,为非创伤性产前诊断提供了一条新思路。     

人胎盘型谷胱甘肽S转移酶在胃癌组织中的表达与基因甲基化关系的研究

应用S—P法检测116例胃癌和53例胃癌前病变的GST－π表达和限制性内切酶及PCR、Southern印迹方法检测14例胃癌及其相应正常胃粘膜GST－πDNA5'端调控区CCGG特定位点的甲基化水平。GST－π阳性率：正常胃粘膜10％（4／39），胃癌77％（89／116），肠上皮化生76％（19／25），不典型增生89％（25／28）。GST－π在胃癌及癌前病变中的表达较正常胃粘膜增高（P＜0．01）。胃癌组织中GST－π基因较正常胃粘膜呈现高度去甲基化（P＜0．01），胃癌GST-π基因5'端调控区低甲基化与其GST－π表达增加里相关性（P＜0．05）。GST－π在胃癌及癌前病变中的表达与胃癌的发生、发展密切相关。GST－π可作为胃癌的肿瘤相关抗原；GST－π基因5'端调控区低甲基化可能是GST－π高表达的分子机制。     

孕妇外周血血浆胎儿DNA的检测

目的：建立可靠有效的检测孕妇血浆胎儿DNA的方法,探讨其在非创伤性产前诊断中的价值。方法：采用引物引伸预扩增（PEP）法及巢式PCR技术对65例孕妇外周血血浆DNA进行正常男性SRY基因检测。结果：单用巢式PCR技术和联合应用PEP,PCR技术对怀男胎的孕妇血中SRY基因检出率分别为65．2％（30／46）和89．1％（41／46）,两组差异有极显著性,对怀女胎孕妇血中SRY基因的未检出率为78．9％（15／19）和94．7％（18／19）,两组差异无显著性。结论：应用PEP法可对胎儿DNA进行全基因组扩增使DNA模板量增加,并使继后的PCR技术检测SRY基因的敏感性明显提高,PEP法是解决母血中胎儿细胞数量太少的途径之一,孕妇血浆中胎儿DNA可成为非创伤性产前诊断的胎儿物质来源。     

孕妇HBV-DNA载量与胎儿宫内感染的关系

目的：探讨孕妇血清中乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）载量与胎儿宫内感染发生率的关系。方法：通过荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法检测孕妇血清标本中HBV-DNA含量水平及新生儿血清标本中HBsAg、HBV-DNA情况。结果：128例HBsAg阳性孕妇的HBV-DNA检出阳性率为32．81％（42／128）,胎儿宫内感染率为17．97％（23／128）,且胎儿宫内感染率随血清HBV-DNA含量的增加而升高,HBV-DNA含量与胎儿宫内感染率呈正相关（X^2=7．44,P〈0．01）,孕妇血HBV-DNA含量高时婴儿脐血HBsAg或HBV-DNA阳性率明显升高。结论：孕妇血清中HBV-DNA载量升高是造成胎儿宫内感染的主要因素之一。     

通用引物检测宫颈脱落细胞中病毒的临床应用

目的：探讨通用引物检测多种病毒的PCR方法。方法：应用聚合酶链反应-酶谱法（PCR－EC）和疱疹病毒通用引物,检测宫颈脱落细胞单纯疱疾病毒Ⅰ型（HSV—Ⅰ）、单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV—Ⅱ）、爱泼期坦—巴尔病毒（EBV）和人5细胞病毒（HCMV）。结果：健康人（20例）和宫颈糜烂患者（34例）。HCMV阳性检出率分别为10．0％和41．2％,两者差异显著（P＜0．05）;HSV—Ⅰ分别为5．O％和及14．7％;HSV—Ⅱ分别为1l％和20．6％;FBV分别为15．0％和17．6％;可检测到1fg的DNA。结论：通用引物PCR－EC检测HCMV、HSVⅠ、HSVⅡ、EBV,具有敏感、特异、便捷、快速、经济的特点,对病毒感染早期快速诊断及流行病学研究提供了科学的方法。     

胎盘HBV-DNA定量检测与宫内感染关系的研究

目的 探讨胎盘HBV—DNA含量与官内感染的关系及作为胎盘传染性和病毒复制的直接指标的可靠性。方法 采用FQ～PCR（荧光探针定量聚合酶链反应）检测344例HBV标志物阳性孕妇足月分娩后的胎盘的HBV—DNA含量，并分别检测同一孕妇分娩前的外周血及脐血的HBV—DNA含量，比较其测定值范围及相互关系。结果 344例孕妇按乙肝标志物组合，分为三组，分别检测分娩前外周血HBV—DNA、胎盘HBV—DNA及脐血HBV—DNA，检出率分别为：（1）HbsAg携带组90例，22．2％（20／90）、33．3％（30／90）和5．6％（5／90）；（2）大三阳组134例，70．9％（95／134）、85．8％（115／134）和11．9％（16／134）；（3）小三阳组120例，20.8％（25／120）、20．8％（25／120）和3．3％（4／120）。孕妇乙肝标志物阳性以大三阳组HBV—DNA阳性率最高，胎盘组织HBV—DNA含量与母血HBV—DNA含量有一致性和相关性。结论 外周血HBV—DNA阳性孕妇更易发生胎盘感染。官内感染的程度可随胎盘组织HBV—DNA含量增加而程度加重。胎盘HBV—DNA含量可作为一个宫内感染的判断指标。     

同源序列PCR检测孕妇外周血白细胞中HSV感染

目的 检测HSV的特异性基因片段。方法 应用同源序列检测了134例孕妇全血、白细胞、血清中HSV的特异性基因片段。结果 该方法可同时扩增HSVI、Ⅱ，在134例孕妇的全血、白细胞中HSVI阳性率为14．9％，HSVⅡ阳性率为27．6％；血清中HSVI阳性率为1．5％，HSVⅡ阳性率为5．2％，提示HSVI、Ⅱ可能储存于人体白细胞中。结论 应用同源序列PCR检测孕妇白细胞中HSV感染可能为HSV感染的优生学检测提供依据。