金黄色葡萄球菌肠毒素B对小鼠树突状细胞表面I—E^k分子表达的影响

目的 探讨金黄色葡萄球菌肠毒素B（SEB）对小鼠树突状细胞（DC）表面I－E^k分子表达的影响。方法 密度 度离心获得小鼠脾单个核细胞，Panning法纯化非贴壁细胞得到DC；免疫组化SABC法检测DC纯度；流式细胞术检测SEB刺激后DC表面I－E^k分子的表达。结果 DC纯度为70％－80％。I－E^k的表达在100ng/mlSEB刺激8h后达到高峰。结论 SEB可显著提高DC表面I－E^k分子的表达，该刺激作用有一最佳最效和时效关系。     

金黄色葡萄球菌及其肠毒素B对慢性实验性哮喘小鼠的影响

目的 探索金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)对实验性支气管哮喘小鼠肺组织Th0细胞分化的在体调节和对气道炎症的作用.方法 32只15～17 d BALB/c小鼠,随机分为4组:对照组、模型组、金黄色葡萄球菌组、金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)组.用卵蛋白(OVA)致敏和激发建立小鼠慢性哮喘模型,在致敏前14 d对幼年鼠做金黄色葡萄球菌或SEB预防性腹腔注射.观察记录小鼠的耗氧量、肺组织切片、支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞及相关细胞因子等的改变.结果 金黄色葡萄球菌组与模型组相比.肺组织病理切片结构紊乱减轻、炎症细胞明显减少,小鼠耗氧量降低(5.24±0.12 vs 5.59±0.18),BALF中IL-4水平明显下降(44.94±4.51 vs 29.37±4.17),IFN-γ水平明显增加(19.61±3.83 vs 29.33±4.04),SEB组也有上述作用(耗氧量:5.09±0.20;细胞介素4:36.68±5.10;γ干扰素:24.27±3.46).结论 金黄色葡萄球菌能明显减轻实验性哮喘的气道炎症,纠正哮喘小鼠肺组织中Th1/Th2细胞因子的失衡,其作用可能是通过其分泌的SEB.     

金黄色葡萄球菌肠毒素B对小鼠淋巴细胞产生肿瘤坏死因子-α的影响

目的　观察金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)对淋巴细胞产生肿瘤坏死因子 (TNF)-α的影响。方法　密度梯度离心法获得鼠脾淋巴细胞 ,不同时间和浓度的SEB处理 ,流式细胞仪检测产生TNF -α的淋巴细胞阳性率。结果　TNF -α的产生在 5d和 10 0ng·ml-1时达到高峰。结论　SEB能有效刺激淋巴细胞产生TNF -α。     

金黄色葡萄球菌肠毒素B对脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的观察金黄色葡萄球菌肠毒素B（SEB）诱导脐静脉内皮细胞的凋亡效应。方法用不同浓度SEB感染脐静脉内皮细胞（HUVEC）2、4、8与12h后,用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果SEB各浓度均可诱导HUVEC发生凋亡,与对照组比较差异有高度统计学意义（P〈0.01）。当SEB浓度为5μg/ml时诱导细胞凋亡的能力最强;5μg/mlSEB作用HUVEC细胞2h后,即可诱导细胞产生明显的凋亡,且随着作用时间的延长,细胞凋亡率逐渐增加（P〈0.01）。结论SEB可以诱导脐静脉内皮细胞凋亡,并表现出明显的时间、剂量效应关系,这可能与金葡菌L型垂直感染影响宫内胎儿发育的机制有关。     

金黄色葡萄球菌及其肠毒素B的生物学特性

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus）是一种革兰阳性球菌，广泛分布于自然界，如空气、水、土壤、饲料和一些物品上，也存在于人、动物的体表、鼻咽及肠道部位，绝大多数的金黄色葡萄球菌对人体是不致病的，但有少数可以引起人或动物致病，属于人兽共患病原菌。金黄色葡萄球菌是引起医院感染以及盆腔炎，产褥感染和细菌性食物中毒的一种主要病原菌，可以分泌20多种毒性蛋白质，这些蛋白质是引起人类疾病的主要病原因子。尤其是其中的肠毒素（Staphylococcal enterotoxins，SEs），是具有超抗原活性的一组细菌毒素，有强大的激活淋巴细胞的能力，可使淋巴细胞产生强烈的细胞毒性作用和高水平的细胞因子，如肿瘤坏死因子（TNF）-α等，对肿瘤细胞具有强大的杀伤作用，金黄色葡萄球菌肠毒素的生物学特性越来越受到研究者的关注。     

产B型肠毒素金黄色葡萄球菌及其L型某些致病物质的比较

目的：比较产B型肠毒素金黄色葡萄球菌（金葡菌）及其L型的某些致病物质。方法：检测金葡菌L型产生血浆凝固酶、耐热核酸酶及肠毒素B的情况，并与原菌进行比较。结果：金葡菌L型使血浆延迟至24h发生凝固，耐热核酸酶的透明环减小，肠毒素B的光密度（OD）值未见明显减少。结论：金葡菌L型仍能产生致病物质，其致病力减弱。     

霉酚酸对小鼠树突状细胞免疫学功能和NF-κB的影响

目的探讨霉酚酸酯(mycophenolate mofetil,MMF)的免疫活性成分霉酚酸(mycophenolate acid,MPA)对小鼠树突状细胞(dendritic cell,DC)免疫学功能以及对其NF-κBp50表达水平的影响。方法在小鼠DC体外培养时加入不同浓度(0.01μmol/L和0.1μmol/L)的MPA,以[3H]-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入值来反映DC的抗原提呈功能,作体外混合淋巴细胞反应(MLR)观察DC对同种T细胞的刺激增殖能力的影响;免疫印迹法(Western blot)检测DC核内NF-κBp50表达水平。结果经MPA处理后,DC的抗原提呈功能和刺激同种T细胞的功能显著下降(均P<0.05);MPA下调了DC核内NF-κBp50表达水平,并且这一作用随着MPA剂量的增加而增强(均P<0.05)。结论MPA对小鼠骨髓来源的DC免疫学功能起负性调节作用,其机制可能与NF-κB活性受到抑制有关。     

葡萄球菌肠毒素B与角朊细胞Fas抗原表达的研究

银屑病是一种表皮细胞增殖和凋亡异常性皮肤病,大量资料表明超抗原与银屑病密切相关,50%银屑病患者皮肤寄居金黄色葡萄球菌,葡萄球菌肠毒素B(SEB)可刺激银屑病患者淋巴细胞活化增殖[1]。为了解SEB或其活化的淋巴细胞对角朊细胞的作用及其与诱导角朊细胞凋亡的Fas抗原表达的关系,本文采用流式细胞仪(FACS)定量分析SEB及其活化的淋巴细胞对角朊细胞Fas抗原表达的影响,以进一步探讨超抗原诱发银屑病的机制1　材料与方法1.1　病例来源　临床和病理确诊的寻常型银屑病患者10例,均来自北京医科大学第三临床医院皮肤科门诊,患者至少一个月未…     

食源性金黄色葡萄球菌肠毒素及耐药性分析

目的了解乌鲁木齐市日常食品中分离出的金黄色葡萄球菌的肠毒素分布情况以及耐药性特征。方法金黄色葡萄球菌的分离以及肠毒素的鉴定依据国标GB 4789.10-2010《食品卫生微生物检验金黄色葡萄球菌检验》进行,利用法国梅里埃全自动微生物生化鉴定系统(VITEK2–compact)对菌株进行生化鉴定和药敏试验。同时对分离出的阳性菌株进行肠毒素测定及分型。结果 2013-2014年检测乌鲁木齐市日常食品样品6类823份,检测出38株金黄色葡萄球菌。通过对金黄色葡萄球菌肠毒素分型,共有12株产生肠毒素,携带率为31.6%。对阳性菌株进行耐药性分析,其中对万古霉素和头孢噻肟敏感,敏感率为100.0%;对青霉素的耐药程度较高,耐药率为71.1%;对诺氟沙星、氧氟沙星、甲氧苄啶敏感性较高,对其他几种抗生素都有不同程度的耐药。结论乌鲁木齐市食品中存在金黄色葡萄球菌潜在的危害,主要来源于肉制品;金黄色葡萄球菌的产毒能力较强,且耐药性较强,应合理用药。     

金黄色葡萄球菌肠毒素及其检测方法的研究进展

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是一种人畜共患病的重要致病菌，该菌在自然界广泛存在于空气、水、尘埃及人和动物的排泄物中。金黄色葡萄球菌能产生多种致病性物质，如毒素、酶类和菌体的一些成份，该菌产生的主要毒素有：肠毒素（Staphylococcal enterotoxins，SE）、葡萄球菌溶素、表皮剥脱毒素、杀白细胞素、毒性休克综合征毒素-1等；产生的主要酶类有：凝固酶、耐热核酸酶、葡激酶等，其中sE在该菌的致病性中起着重要的作用。在美国由SE引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33％，加拿大则更多占45％，我国每年发生的此类中毒事件也非常多见，中毒食品多为奶、肉、鱼、蛋及其制品以及剩饭，剩菜和凉盆；人畜化脓性感染部位常成为传染源。据报道，每100g食物中含18ug SE时即能引起金黄色葡萄球菌食物中毒。因此，研究SE尤其是开展SE的检测和分型工作，对于由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒临床诊断和预防该菌引起的食物中毒均有重要意义。     

金黄色葡萄球菌肠毒素的检测和耐药性分析

目的了解临床分离的金黄色葡萄球菌(SA)产肠毒素(SE)的情况及耐药现状。方法对从临床标本中分离出的260株SA,用反向间接血凝试验检测其肠毒素,按2005年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)的标准,用K-B法对260株SA进行药物敏感性试验,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检测分别用检测头孢西丁及乳胶凝集检测PBP2a方法进行。结果260株SA中有172株携带肠毒素,占66.2%,主要为SEA型10.8%(28/260)、SEB型14.6%(38/260)、SEC型10.0%(26/260),同时携带二种或二种以上肠毒素的占23.8%(62/260);其中MRSA134株,全部携带肠毒素,且以SEA、SEB和SEC为主,分别为19.4%、16.4%和13.4%;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)126株,携带肠毒素率为30.0%(38/126),以SEB为主,占9.5%。用头孢西丁及检测PBP2a的方法检测MRSA,检出率无显著意义(P>0.05);SA对临床常用的抗菌素除万古霉素及替考拉宁较敏感(100.0%敏感),其它的抗菌素存在多重耐药性,且MRSA的耐药性比MSSA的强。结论临床分离的SA株大部分都携带肠毒素,MRSA的带毒率及耐药性均高于MSSA;临床应重视SA肠毒素和MRSA的检测,合理使用抗菌素。     

金黄色葡萄球菌肠毒素对兔上颌窦上皮通透性的影响

金黄色葡萄球菌肠毒素为较强的致炎物质 ,可直接激活Ｔ细胞等免疫细胞 ,在局部释放致炎物质而引起炎症[1] ,而葡萄球菌是上颌窦炎的常见致病菌[2 ] ,我们利用亚森室技术探讨金黄色葡萄球菌肠毒素对兔上颌窦上皮通透性的影响。一、材料和方法1 兔上颌窦定位及粘膜分离技术 :新西兰白兔购于本校实验动物中心。动物用ｋｅｔａｍｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ(35ｍｇ/ｋｇ)加1/ 9的ｘｙｌａｚｉｎｅ麻醉。手术显微镜下 ,用耳科电钻自中线旁开3～ 5ｍｍ ,距鼻前孔 10～ 15ｍｍ ,骨质微微隆起处开始磨除骨质。待粘膜暴露后观察 ,如果粘膜随呼…     

金黄色葡萄球菌肠毒素A基因的克隆及原核表达

目的从分离培养的金黄色葡萄球菌中提取肠毒素A(SEA)基因,亚克隆入表达载体pET-28a(+),诱导融合蛋白的表达,为肠毒素A应用研究奠定基础。方法根据GenBank中SEA的序列,设计一对特异性引物,以金黄色葡萄球菌DNA为模板PCR扩增SEA,纯化DNA进行BamHⅠ、XholⅠ双酶切鉴定及测序鉴定,并与做相应酶切的pET-28a(+)连接,转化大肠杆菌BL21,并对质粒进行双酶切鉴定及基因序列分析,用IPTG诱导融合蛋白的表达,His标签单克隆抗体进行免疫印迹验证融合蛋白的表达。结果以金黄色葡萄球菌DNA为模板,成功扩增了SEA基因,基因大小为774bp,重组PET-28a(+)-SEA双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示SEA在正确读框中,序列比对分析显示其与相关报道核苷酸序列一致性达99.9%。经IPTG诱导后,SDS-PAGE可见pET-28a(+)-SEA/BL21在相应分子量(约30000Mr)条带大量表达,免疫印迹能检测到目的蛋白条带,说明其与His标签融合表达。结论克隆了金黄色葡萄球菌SEA基因,并成功在大肠杆菌BL21中融合表达,为肠毒素A应用研究奠定了基础。     

金黄色葡萄球菌肠毒素基因定位研究

对40株产1种或1种以上肠毒素的金黄色葡萄球菌（以下简称金葡菌）进行分析，结果全部金葡菌肠毒素A（SEA，12/12）、金葡菌肠毒素C（SEC，19／19）、大部分金葡菌肠毒素B（SEB，23／28）的产生不因质粒的消除而消失，说明SEA、SEC的基因位点在染色体上。有5株金葡菌因质粒消除而失去产SEB的能力，其基因位点，可能在质粒或染色体上。4株金葡菌亦均因质粒消除失去产金葡菌肠毒素D的能力，其基因位点可能在质粒上。     

金黄色葡萄球菌L型产B型肠毒素及其基因的研究

目的: 探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌)L型肠毒素B的产生量及其基因存在情况。方法: 将金葡菌诱导成稳定L型后,用ELISA法检测葡萄球菌肠毒素B(SEB),用PCR法检测SEB基因。结果: 金葡菌L型SEB的产生量与原菌比差别无显著性(P>0.05),PCR发现478bp的阳性条带。结论: 金葡菌变异为L型后SEB产生量不变,其基因也未丢失。     

超抗原和肿瘤抗原修饰树突状细胞的活性研究

目的金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)和肿瘤抗原修饰树突状细胞(dendritic cell,DC)后,活化的DC与淋巴细胞(lymphocyte cells,LC)共孵,观察DC激活的LC在体外对结肠癌细胞的排斥性杀伤作用,以评价抗原修饰的DC活性。方法外周血分离出LC、单个核细胞,细胞因子诱导DC扩增,DC活化LC,对同种异型肿瘤细胞排斥性杀伤实验。结果SEB 肿瘤抗原修饰后的DC具有显著的淋巴细胞活化作用。加SEB比单独使用肿瘤抗原修饰DC后的活化淋巴细胞的功能强(P<0.05)。结论SEB和肿瘤抗原联合修饰可以明显增强DC的活性(P<0.05)。     

一起食物中毒的金黄色葡萄球菌肠毒素检测

目的 对一起食物中毒样品进行致病菌检测,准确分析食物中毒原因,为食物中毒的处理提供依据.方法 依据《食品卫生微生物学检验》国家标准GB4789.10-2010、GB 14938-94《食物中毒诊断标准及技术处理总则》和WS/T80-1996《葡萄球菌食物中毒诊断标准及处理原则》方法对采集的12份食物中毒样品进行病原菌金黄色葡萄球菌检测;应用荧光定量PCR法对检出的金黄色葡萄球菌进行肠毒素检测.结果 在12份样品中检出5株金黄色葡萄球菌,分别来自患者呕吐物4份,砧板棉拭子1份,全部检出A型肠毒素,未检出其他病原菌.金黄色葡萄球菌总检出率为41.7％.结论 金黄色葡萄球菌A型肠毒素是此次食物中毒的病原体.实时荧光PCR快速检测方法适用于金黄色葡萄球菌肠毒素的基因分型.