Ad-Rb94联合照射对体外人大肠癌细胞的抑瘤作用

目的 探讨人视网膜母细胞瘤Rb94基因重组腺病毒载体(Ad-Rb94)联合γ射线照射对体外人大肠癌细胞生长的联合抑瘤作用及其机制.方法 将Ad-Rb94于体外转染大肠癌HT29细胞,转染后12h进行4Gy 137Csγ射线照射.实验分组为5组:对照组、β-半乳糖苷酶基因重组腺病毒载体组(Ad-lacZ组)、Ad-Rb94组、照射组和Ad-Rb94联合照射组.用噻唑蓝法检测HT29细胞的生长,用流式细胞术检测HT29细胞的细胞周期和细胞凋亡的变化.结果 当Ad-Rb94有效转染HT29细胞后,从转染第4日开始,照射组和联合照射组细胞生长速率较对照组和Ad-lacZ组缓慢;与Ad-Rb94组和照射组相比,Ad-Rb94联合照射组细胞的生长表现出更强的抑制效应(t=15.02、17.30,P＜0.01).细胞周期结果表明,与对照组、Ad-lacZ组和Ad-Rb94组相比,照射组大量细胞停留在G2期,各组间差异有统计学意义(t=18.65、15.23、16.38,P＜0.01);但Ad-Rb94联合照射组停留在G2期细胞更多(约40％),远高于照射组(t=7.78,P＜0.05).细胞凋亡结果表明,与对照组相比,Ad-Rb94组和照射组细胞凋亡率明显增加(t=16.19、10.72,P＜0.01);Ad-Rb94联合照射组细胞凋亡率最高(21％),与Ad-Rb94组和照射组相比,差异有统计学意义(t=6.17、9.25,P＜0.05).结论 腺病毒介导的Rb94基因联合照射对大肠癌细胞的抑瘤作用具有协同效应,其机制可能是促进细胞G2期阻滞和凋亡.     

人Rb94基因联合γ射线照射对K150细胞 生长影响的体外研究

目的 探讨外源性Rb94基因联合γ射线照射对食管癌细胞株K150生长的抑制作用,为临床上进行Rb94基因-放射治疗肿瘤奠定实验基础。方法 将重组腺病毒 Ad-Rb94于体外转染K150细胞,转染后进行6 Gy¹³⁷Csγ射线照射,数字随机表法分为空白对照组、Ad-LacZ对照组、Ad-Rb94组、照射组和Ad-Rb94联合照射组,观察K150细胞的生长曲线、细胞周期、细胞凋亡和Rb94基因表达的变化。结果 Ad-Rb94组、照射组和联合照射组对K150细胞生长均具有抑制作用,联合照射组的抑制效应最强(45.49%),明显高于Ad-Rb94组(20.26%)和照射组(35.11%)(χ²=14.25, P <0.05)。联合照射组K150细胞出现明显的G₁期阻滞和细胞凋亡,G₁期细胞和凋亡细胞所占比例最高,分别达到73.4%和15.7%。联合照射组K150细胞中Rb94基因表达量最多,分别是Ad-Rb94组和空白对照组的1.87倍和2.92倍。结论 Rb94基因联合γ射线照射对食管癌细胞的抑瘤作用具有协同效应,有效地抑制肿瘤细胞的生长。     

白细胞介素21基因联合不同剂量γ射线照射对乳腺癌细胞生长的影响

目的 研究人白细胞介素21基因重组腺病毒载体(Ad-IL-21)联合不同剂量γ射线照射对人乳腺癌细胞体外生长的抑制作用.方法 采用随机数字表法设立空白对照组、β-半乳糖苷酶基因重组腺病毒载体(Ad-LacZ)对照组、Ad- IL-21组、γ射线照射组和Ad- IL-21联合γ射线照射组(联合照射组),将Ad-IL-21于体外转染人乳腺癌MCF-7细胞,转染6h后进行0～10 Gy 137Cs γ射线照射,用噻唑蓝法检测MCF-7细胞的生长抑制率.结果 Ad-IL-21转染MCF-7细胞后,MCF-7细胞生长受到的抑制效应显著高于Ad-lacZ组(F=26.34,P＜0.05),单独照射组和联合照射组的抑制率均显著高于Ad-IL-21组(F=23.51,F=27.55,P均＜0.05),随着照射剂量的增大,细胞抑制率逐渐增高.同一照射剂量中,联合照射组对MCF-7细胞的抑制作用均显著高于γ射线照射组,联合照射组抑制率最高,与Ad-IL-21组和γ射线照射组比较,差异具有统计学意义(F=35.68,F=38.67,P均＜0.05).结论 IL-21基因联合γ射线照射对乳腺癌细胞的抑瘤作用具有协同效应,有效地抑制肿瘤细胞的生长.     

腺病毒介导的人视网膜母细胞瘤94基因对人食管癌细胞辐射增敏作用的研究

目的 探讨重组腺病毒人视网膜母细胞瘤94基因(Ad-Rb94)对γ射线杀伤人食管癌 EC109细胞的增敏作用。方法 将Ad-Rb94体外转染后的EC109细胞,按数字随机表法,分为空白对照组、Ad-LacZ对照组、Ad-Rb94组、照射组和Ad-Rb94联合照射组,观察EC109的细胞的抑制率、细胞周期和Rb蛋白的表达。结果 Ad-Rb94组、照射组和Ad-Rb94联合照射组对EC109细胞生长均具有抑制作用,Ad-Rb94联合照射组的抑制效应最强,明显高于Ad-Rb94组和照射组(F=23.31,P<0.05)。Ad-Rb94联合照射组EC109细胞出现明显的G₂期阻滞,G₂期细胞所占比例达50%。Ad-Rb94联合照射组表达Rb蛋白的细胞明显增加,阳性率达71%,较Ad-Rb94组和照射组差异有统计学意义(χ²=8.31和6.73,P<0.05)。结论 Rb94基因联合照射能明显提高对人食管癌细胞的辐射增敏性。     

干扰血管内皮生长因子表达联合γ射线对食管癌细胞移植瘤的影响

目的 研究反义cDNA干扰血管内皮生长因子(VEGF)表达联合γ射线对裸鼠移植瘤的影响,并观察各组裸鼠肿瘤病理组织学和细胞生物学特征的变化,为VEGF基因治疗联合放射治疗食管癌提供理论依据。方法 将32只Balb/c/nu裸鼠随机分为4组:对照组、单纯照射组、反义组和反义+照射组,使用已转染和未转染反义VEGFcDNA TE-1食管癌细胞株,分别建立裸鼠爪垫移植瘤模型, 瘤体直径0.8~1.0 cm,⁶⁰Co γ射线18 Gy单次照射单纯照射组与反义+照射组裸鼠移植瘤,对比观察各组移植瘤生长情况,检测移植瘤组织中VEGF mRNA和蛋白的表达,并分析肿瘤组织中细胞凋亡情况。结果 与未转染两组比较,转染两组瘤体生长速度慢,成瘤潜伏期延长(t=13.898, P<0.01)。反义组肿瘤体积为(1207.50±97.07)mm³,反义+照射组为(1057.5±91.50)mm³,两者差异无统计学意义(t=1.124,P>0.05),而此2组与对照组(5442.50±185.08)mm³ 和单纯照射组(2922.50±152.773)mm³ 体积间差异有统计学意义(t=9.475~21.238,P<0.01)。反义组与反义+照射组VEGF mRNA和蛋白表达较对照组和单纯照射组差异有统计学意义(F=387.394、13.519, P<0.01)。结论 抗VEGF治疗可有效地抑制裸鼠移植瘤的生长,但单纯抑制VEGF表达对增加裸鼠移植瘤放射治疗增敏效果有限,需进一步研究。     

γ射线照射对平滑肌细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨近距离腔内放射治疗预防血管成行术后再狭窄的机理。方法 培养的动脉平滑肌细胞分别接受吸收剂量为３．５、７．０、１４和２８Ｇｙ＾６０Ｃｏβ射线照射,１２ｈ持以流式细胞仪检测细胞各周期百分率及凋亡率。结果 吸收剂量为３．５、７．０、１４和２８Ｇｙ组Ｇ０～Ｇ１期细胞数分别占细胞总数的５８．１３％、８３．６％、８８．７９％、８９．１５％,与对照组（５６．２９％）相比,７．０、１４、２８Ｇｙ组差异有非常显著性（Ｐ〈０．０１）;而３．５Ｇｙ组差异无显著性（Ｐ〉０．０５）;照射各组细胞凋亡率分别为０．８５％、１．０４％、１０．３８％、１６．００％,与对照组（０．８４％）相比,１４、２８Ｇｙ组差异有非常显著性（Ｐ〈０．０１）。结论 ３．５Ｇｙ＾６０Ｃｏγ射线照射对血管平滑肌细胞的增殖和凋亡均无影响,７Ｇｙ能抑制细胞增殖     

基因治疗联合放射治疗恶性肿瘤

肿瘤治疗是目前医学研究的重点之一,基因治疗与放射治疗方法的结合倍受重视,根据技术特点这种联合治疗方法主要有:免疫基因治疗联合放疗、直接杀伤或抑制肿瘤细胞的基因治疗联合放疗、抗肿瘤血管生成的基因治疗联合放疗以及辐射保护性基因治疗.综述了近年来基因治疗联合放射治疗恶性肿瘤的研究现状以及可能的作用机制.     

fas基因修饰食管癌细胞的体外抑瘤效应

为研究fas基因转导对食管癌细胞的体外抑制作用，构建fas基因真核表达3载体fas-pBK并将其转导入食管癌细胞EC109.Western blot结果证实fas基因转导株Fas-EC109表达高水平的Fas蛋白；细胞生长曲线和软琼脂集落形成实验结果显示，与对照细胞相比，Fas-EC109的群体倍增时间延长，克隆形成能力降低，MTT比色法表明Fas-EC109对CDDP、VCR、5－FU的敏感性明显增加。本研究结果提示，转导fas基因能有效抑制体外培养的食管癌细胞的生长，增强癌细胞对化疗药物的敏感性。     

宫颈癌基因治疗联合放射治疗的研究进展

目前宫颈癌基因治疗尚存在许多问题,距临床应用还有相当的距离,但是在传统的放疗、化疗和手术治疗的基础上,放射治疗与基因治疗的有机结合在宫颈癌治疗中却显示出可喜的前景。本文探讨了宫颈癌基因治疗联合放射治疗的应用前景。     

γ射线照射对IER5基因mRNA表达的影响

目的 应用实时PCR技术分析⁶⁰Co γ射线照射正常人淋巴母细胞(AHH1)、宫颈癌细胞(HeLa)与接种人肿瘤细胞的裸鼠后IER5基因表达的影响。方法 对于离体培养的AHH1 、HeLa与BALB/c-nu裸鼠,按照不同剂量(0.5、2、4、6、10、15 Gy)与照射后不同时间点(2、4、8、12、24 h)进行分组进行提取mRNA、反转录与IER5基因表达量测试。结果 在相同条件下AHH1对照射比HeLa更灵敏,其表达量的峰值对应的剂量比HeLa的要低。对于AHH1细胞,对2 Gy低剂量的照射反应比10 Gy的高剂量反应要快,而HeLa细胞,对于2 Gy的低剂量与10 Gy的高剂量的照射反应没有太大差异,在照射后2 h都出现基因表达的最大值。此外,人肝肿瘤的IER5基因对照射比较敏感,而人肺与脑肿瘤的IER5基因不敏感。结论 IER5基因有可能成为宫颈癌与肝肿瘤新的辐射损伤生物分子的一个标记物,对肝肿瘤放疗具有潜在的应用价值。     

恶性肿瘤的放射治疗联合基因治疗研究进展

放射治疗是恶性肿瘤治疗的常规手段之一,并早已用于临床。而基因治疗是一种新型的治疗方法,但由于肿瘤的形成是多因素、多基因参与的复杂过程,单纯基因治疗的效果并不理想。因此,放射治疗联合基因治疗是目前的研究热点,也将成为肿瘤治疗研究的重要方向之一。     

恶性肿瘤基因治疗和放射治疗相互作的机制及联合治疗展望

放疗和基因治疗是恶性肿瘤治疗的两种手段,放疗通过提高基因的转移效率、DNA的重组整合及诱导基因的表达等机制增强基因治疗的效果,基因治疗通过提高辐射敏感性、减少正常组织放疗损伤、修复辐射受损的基因及提高血管的功能等机制提高放疗的效果,两者的联合治疗有协同作用。     

RHEpo联合三维适形放疗对食管癌的近期疗效观察

目的观察RHEpo联合三维适形放疗对Ⅲ期食管癌的近期疗效及毒副反应。方法将62例欲接受根治性放疗的Ⅲ期食管癌患者随机分为试验组和对照组。试验组：在放疗前1周给予RHEpo3万U,皮下注射,每周1次,至放疗结束。放疗用6MVX射线进行三维适形照射,DT1.8～2.0Gy/次,每周5次,中位剂量为DT64Gy。对照组行单纯三维适形照射,照射野和剂量同试验组,中位剂量为DT65Gy。结果放疗DT20Gy时,试验组完全消退率（CRR）6.7%（2/30）,对照组CRR6.7%（2/30）（χ2=0.2679,P=0.6048）;放疗DT40Gy时,试验组CRR33.3%（10/30）,对照组CRR16.7%（5/30）（χ2=2.2222,P=0.1360）;放疗结束时,试验组CRR50.0%（15/30）,对照组CRR26.7%（8/30）（χ2=3.4548,P=0.0631）;放疗后1个月,试验组CRR63.3%（19/30）,对照组CRR36.7%（11/30）（χ2=4.2667,P=0.0389）;放疗后6个月,试验组CRR66.7%（20/30）,对照组CRR40.0%（12/30）（χ2=4.2857,P=0.0384）。两组在血液学毒性方面有统计学差异（χ2=8.1481,P=0.0043）。结论RHEpo联合三维适形放疗能明显提高Ⅲ期食管癌的近期疗效,血液学毒性轻微,并可预见能延长患者的远期生存,值得临床上试用推广。     

SKP2表达对食管癌细胞辐射敏感性的影响

目的 探讨S期激酶相关蛋白2(SKP2)高表达和低表达对食管癌细胞辐射敏感性的影响.方法 用Western-blotting方法筛选SKP2低表达和高表达的食管癌细胞系;构建SKP2正义表达载体p-pcDNATM3.1/myc-His A-SKP2和RNA干扰载体SKP2 RNAi,分别转染SKP2低表达和高表达的食管癌细胞系,用5 Gyγ射线照射各组细胞,通过克隆形成实验检测细胞辐射敏感性的差异.结果 SKP2在4种食管癌细胞中的表达水平依次为KYSE510＞KYSE450＞EC9706＞KYSE150.用p-pcDNATM 3.1/myc-His A-SKP2表达载体转染KYSE 150细胞后SKP2表达水平升高,5 Gyγ射线照射后细胞的克隆形成能力显著高于对照组(F=3.53,P＜0.01),表明SKP2高表达可以降低食管癌细胞的辐射敏感性.RNA干扰载体转染KYSE510细胞后SKP2表达水平降低,5 Gyγ射线照射后细胞的克隆形成能力显著低于对照组(F=5.23,P＜0.05),表明敲降SKP2表达可以增加食管癌细胞的辐射敏感性.结论 SKP2表达与食管癌细胞的辐射敏感性密切相关,具体机制还需要进一步研究.     

基因治疗联合放射治疗恶性肿瘤的分子机制

放射治疗是恶性肿瘤治疗的常规手段之一,对放射治疗的耐受性是影响放疗疗效的主要障碍之一.基因治疗联合放疗代表了恶性肿瘤治疗的一种新方式,在一系列联合治疗的研究中发现,基因治疗可以提高肿瘤的辐射敏感性,减少肿瘤的复发和转移,改善放射治疗的疗效.该文综述肿瘤基因治疗联合放射治疗的有关分子机制.     

直肠癌术前不同方法照射对肿瘤切除率的影响

直肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一 ,其最有效的治疗方法为手术治疗。但有部分患者因肿瘤粘连和固定使根治性切除的可能性明显下降 ,其切除率一般仅为 44 % ,而术前放疗可提高肿瘤切除率。 1995～ 1999年我院收治病理确诊直肠癌患者 15 8例 ,其中 84例作术前放疗 ,74例直接手术 ,现就术前进行放疗的肿瘤切除率及术前放射治疗的临床价值进行分析。一、材料和方法1 病例 :病理确诊直肠癌患者为 15 8例 ,其中术前直肠指检肿瘤浸润肠管半周以上、肿瘤基底粘连和固定的 84例患者做术前放疗 (放疗组 ) ,男 48例 ,女 36例 ,年龄 15～ 76岁 ;74例患者…     

125 I-脱氧尿嘧啶核苷对肝癌细胞HepG2生长的抑制作用

目的评价125I-脱氧尿嘧啶核苷(UdR)对肝癌细胞HepG2生长的抑制作用及影响因素.方法 HepG2细胞在含有125I-UdR培养基中培养后测量其放射性,观察HepG2细胞对125I-UdR的摄取;用细胞克隆形成法评价125I-UdR对HepG2细胞生长的抑制作用.结果 HepG2摄取125I-UdR量随培养基中125I-UdR浓度增加而增加,两者显著相关(r=0.99).HepG2对125I-UdR的摄取明显高于Na125I.HepG2细胞摄取125I-UdR后其生长受到抑制,两者呈明显负相关(r=-0.943),半数致死剂量(LD50)为(0.87±0.29) kBq/mL.125I-UdR组细胞存活分数明显低于Na125I组.结论 125I-UdR对HepG2细胞生长有明显抑制作用,HepG2细胞摄取125I-UdR量有浓度依赖性.     

OPN基因与食管癌浸润及青蒿琥酯抑制食管癌细胞生长的关系研究

目的 探讨骨桥蛋白(OPN)基因与食管癌发生及浸润转移的关系,以及青蒿琥酯(Art)抑制食管癌细胞生长的作用与OPN蛋白表达的关系.方法 应用原位杂交及免疫组织化学方法检测45例食管鳞癌组织、21例不典型增生组织、24例正常的食管黏膜上皮组织中OPN基因及蛋白的表达,并分析其与食管癌临床病理特征的关系.以不同浓度(0、30、60、120μmol/L)青蒿琥酯干预食管鳞癌Eca109细胞24h,采用流式细胞术检测细胞周期及细胞中OPN蛋白的表达水平.结果 OPN基因及蛋白在食管鳞癌组织中的表达水平显著高于不典型增生及正常组织(P<0.01),且不典型增生组织中的表达水平显著高于正常组织(P<0.05).OPN基因及蛋白在食管鳞癌组织中的表达与淋巴结转移及浸润深度呈正相关(P<0.05),与患者性别、年龄及肿瘤的分化程度无明显相关(P>0.05).青蒿琥酯作用24h后,Eca109细胞增殖指数及OPN蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),且具有浓度依赖性.结论 OPN基因在食管鳞癌组织中异常高表达,可能参与了食管癌的发生及浸润转移.青蒿琥酯抑制食管癌细胞生长的作用可能与其下调细胞中OPN蛋白的表达有关.     

食管内照射支架治疗食管癌的临床对照研究

目的比较食管内照射支架、普通覆膜支架治疗食管癌的临床疗效。方法53例晚期食管癌患者分成试验组27例，采用内照射食管支架置入术治疗；对照组26例，采用单纯自膨覆膜食管支架置入术治疗。对试验组、对照组术后相关并发症、患者吞咽困难缓解情况、生存期等作对照研究。结果试验组、对照组所有患者支架置入术都获得成功。试验组术后全身发射型计算机体层摄影术（ECT）显像未发现γ射线泄漏，胸部X线片未发现放射粒子脱落。食管病灶定期CT复查显示20例患者病灶较术前缩小。5例置入无覆膜内照射支架的患者中3例于术后2和4个月发现接近放射粒子的肿瘤局部发生完全坏死，代之以炎性组织增生；支架内腔光整，未见过度生长的肿瘤组织，支架两端尤其上端表现为肉芽组织增生。2组术后各种并发症发生率差异均无统计学意义（Fisher精确检验，P值均〉0．05）。术后2组患者吞咽困难均明显改善，术后2个月2组吞咽困难平均指数差异有统计学意义（试验组1．37±0．56，对照组1．82±0．50，P=0．004）。试验组、对照组中位生存期分别为7和4个月；平均生存期分别为8．3和3．5个月，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论食管内照射支架不仅具有一般支架重塑食管通道的功能，而且有抑制肿瘤组织生长的作用；能较长时间缓解患者吞咽困难症状并有效的延长患者生存时间。     

节律基因mPeriod2过表达对体外Lewis肺癌细胞γ射线敏感性的影响

目的评价mPeriod2(mPer2)基因转染后过表达对小鼠Lew is肺癌细胞(LLCs)60Coγ-射线放射敏感性的影响。方法采用脂质体介导方法将mPer2基因转染至LLC细胞,以空白组及空载体质粒pcD-NA3.1为对照,采用RT-PCR及流式细胞术检测mPer2基因在LLC细胞中的表达,给予60Coγ-射线4Gy单次照射后,流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡,采用增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化、细胞集落形成实验检测细胞增殖及存活情况。结果60Coγ-射线照射后,与转染空载体质粒组及空白组比较,转染mPer2基因细胞表现为G2/M期阻滞,凋亡率下降(contro l:8.10±0.03;pcDNA3.1-vector:11.20±0.07;pcDNA3.1-mPer2:4.40±0.02;P<0.05),细胞克隆形成增加(contro l:14%;pcDNA3.1-vec-tor:11%;pcDNA3.1-mPer2:32%;P<0.01)及PCNA阳性表达增加(contro l: ,pcDNA3.1-vector: ,pcDNA3.1-mPer2: ,P<0.05)。结论节律基因mPer2过表达使60Coγ-射线照射的小鼠Lew is肺癌细胞凋亡下降,细胞增殖明显,降低了该细胞对放射损伤的敏感性。