应用ITS1-ITS2区域鉴定口腔念珠菌

目的 :建立快速、准确鉴别念珠菌的方法。方法 :通过CHROMagarCandida培养基显色培养与PCR扩增ITS1 ITS2 区域相结合的方式对 13例口腔念珠菌标本进行细胞及分子水平鉴定 ,并对CHROMagarCandida培养基能否引起念珠菌ITS1 ITS2 区域碱基序列改变问题进行探讨。结果 :13例念珠菌标本分别属于最常见的白色念珠菌、热带念珠菌及光滑念珠菌三种类型 ,并在CHROMagarCandida显色培养基上分别呈现出草绿色 (白色念珠菌 )、蓝灰色 (热带念珠菌 )以及紫红色 (光滑念珠菌 )菌落 ;这三种念珠菌类型在ITS1 ITS2 区域的片断长度或碱基序列上表现出特异性差异。结论 :使用PCR扩增ITS1 ITS2 区域的方法可以对以上三种临床念珠菌进行准确鉴定及种内分型。     

健康老年人口腔念珠菌与义齿修复的相关研究

目的 研究健康老年人群中口腔念珠菌的定植状况,分析义齿修复对老年人口腔念珠菌定植的影响。方法 212例健康老年人分为4组：A1组（男性,有义齿）,B1组（男性,无义齿）,A2组（女性,有义齿）和B2组（女性,无义齿）。标准含潄法取样,样本接种于沙堡琼脂培养基培养念珠菌,CHROMagar CandidaTM鉴定培养基鉴定白色念珠菌,碳水化合物同化反应鉴定体系鉴定念珠菌菌种。培养基中念珠菌菌落计数为每个样本的念珠菌检出强度。比较4组健康老年人念珠菌检出率和检出强度有无统计学差异。结果 212例老年人中116例检出念珠菌,检出率为54.72％。检出念珠菌包括白色念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌等10个菌种。A1、B1、A2和B2组念珠菌检出率分别为66.67%,36.07%,64.15%和56.00%;白色念珠菌检出率分别为56.25%,21.31%,56.60%和38.00%。A1组念珠菌、白色念珠菌检出率高于B1组（P<0.05）。高念珠菌强度者在A1、A2组所占比例分别较B1、
B2组高（P<0.05）。结论 健康老年人口腔总念珠菌及白色念珠菌检出率和检出强度增高与义齿修复相关。老年人
口腔念珠菌检出率和检出强度的差异主要是白色念珠菌检出率和检出强度的差异所造成。     

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱用于口腔念珠菌菌株鉴定的准确性研究

目的： 探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS）用于口腔念珠菌菌株鉴定的准确性。方法： 本研究分为2部分,第一部分采集170例口腔念珠菌病患者唾液,使用沙保弱琼脂培养基培养48 h,MALDI-TOF MS进行菌种鉴定,以PCR检测结果为金标准,评价MALDI-TOF MS诊断的灵敏度、特异度等诊断学指标。第二部分采集42例口腔念珠菌病患者含漱液,使用液体培养基培养, MALDI-TOF MS鉴定,评价诊断准确性。采用SPSS 18.0软件包对数据进行统计学分析。结果： 纳入212例患者,分离临床菌株230株。PCR检测结果显示,白色念珠菌为最常见的口腔念珠菌（65.65%,151/230）,其次为光滑念珠菌（11.74%,27/230）。第一部分中,MALDI-TOF MS诊断白色念珠菌的灵敏度为93.33%,特异度为92.73%;诊断非白色念珠菌的灵敏度为83.64%,特异度为89.17%;对所有念珠菌菌株的诊断准确率为90.29%。第二部分结果显示,沙保弱液体培养基培养24 h,MALDI-TOF MS诊断准确率最高（78.42%）。结论： 白色念珠菌是口腔念珠菌病最常见的致病菌。MALDI-TOF MS可用于沙保弱固体培养基培养的口腔念珠菌菌种的快速鉴定,诊断准确性高于液体培养基。     

新生儿口腔中白色念珠菌来源的分子遗传学初探

目的 :比较新生儿口腔中与其母亲口腔和阴道白色念珠菌基因型的差异 ,探讨新生儿口腔中白色念珠菌的来源。方法 :采集 2 0 8例产妇产前 48h以内的口腔含漱液标本和阴道拭子标本及其足月新生儿 1、3、5d和 1月的口腔拭子标本 ,进行白色念珠菌的培养和鉴定。再选取母子均分离出白色念珠菌的标本进行DNA提取和随机引物扩增DNA多态性分析法 (RAPD)分析 ,比较基因型是否具有差异。结果 :产后 5d内仅有不到 1%的新生儿口腔中检出了念珠菌 ,产后 1月新生儿口腔中白色念珠菌的检出率增高为 2 1.3 9%。并且 ,从新生儿分离得到的白色念珠菌的基因型与从其母亲口腔或阴道分离得到的白色念珠菌的基因型均不相同。结论 :母婴垂直传播可能并非新生儿口腔中的白色念珠菌的主要定植来源     

HIV感染患者口腔念珠菌的培养鉴定

目的 :比较科玛嘉念珠菌显色培养基 (Chromagar)和API 2 0CAUX酵母菌系统 (API 2 0C)在人体免疫缺陷病毒 (HIV )感染者口腔念珠菌鉴别中的优缺点。方法 :6株念珠菌标准菌株和 17例HIV感染合并口腔念珠菌病患者舌背白色刮取物 ,分别接种于沙氏培养基和Chromagar ,3 7℃ 48h后取沙氏培养基上生长物作API 2 0C鉴定。结果 :API 2 0C、Chromagar在鉴定白色念珠菌上无显著性差异 ,API 2 0C鉴定非白色念珠菌准确率高于Chromagar ,但Chromagar可鉴别混合菌种感染。 结论 :在HIV感染患者口腔念珠菌分型初筛可用Chromagar ,做准确分型时需用API 2 0C鉴定 ,两种方法互有裨益。     

科玛嘉念珠菌培养基在儿童牙菌斑中白色念珠菌分离培养的应用

目的:探讨科玛嘉念珠菌培养基(CAC)对儿童牙菌斑中白色念珠菌分离培养的有效性。方法:分别采用CAC和沙保培养基(SDA)分离培养儿童龋损牙体组织及无龋牙体龈上菌斑中的白色念珠菌,通过生化鉴定及PCR技术等方法对分离菌株进行鉴别,运用卡方检验比较两种培养基对白色念珠菌的检出情况。结果:CAC和SDA对牙菌斑中白色念珠菌的检出率分别为35.3%、31.7%(P<0.05)。培养24~48 h后,CAC平板通过颜色判读白色念珠菌的结果与生化鉴定和PCR基因分型的结果一致。结论:CAC是一种快速、有效、特异性较强的念珠菌培养基,适合用于分离培养儿童牙菌斑中的白色念珠菌。     

兰州市母婴间念珠菌传播的流行病学研究

目的:调查兰州市产妇念珠菌的定殖以及母婴间念珠菌的传播状况.方法: 采集产妇的阴道分泌物及口腔分泌物样本(共104×2 例),及其新生婴儿的口腔分泌物样本(共104 例).采用CHROMagar念珠菌显色培养基进行培养、分离及鉴定,同时应用分子生物学技术对结果进行验证鉴定.结果:312 例样本(母亲104×2,新生儿104)中81 例分离培养出念珠菌,产妇阴道念珠菌检测阳性率39.42 %(41 例),产妇口腔念珠菌阳性率33.65%(35 例),其中21.15%(22 例)阴道与口腔同时阳性; 新生儿口腔念珠菌培养阳性率为4.81%(5 例).检出阳性样本中菌种分布为,白色念珠菌53 株,光滑念珠菌33 株,克柔念珠菌2 株,热带念珠菌1 株.有2 对母婴同时分离出白色念珠菌,经PCR检测,其基因型相同.结论:兰州市新生儿念珠菌检出率以及母婴间念珠菌的传播率较其他地区高.新生儿念珠菌感染与念珠菌的水平传播和垂直传播都相关.监控医院内念珠菌的传播及预防母亲产前阴道念珠菌感染可减少新生儿念珠菌感染的可能性.     

木糖醇对四型常见念珠菌生长和产酸的影响

目的通过分析念珠菌培养基中OD鲫和pH值变化,探讨木糖醇对念珠菌生长和产酸的影响,为临床念珠菌感染的防治提供实验依据。方法将白色念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌4型常见念珠菌加入后沙堡弱培养基,记录24、48、72、96、120h的pH值;同时利用木糖醇逐步替代培养基中的葡萄糖,测定不同木糖醇浓度培养基的0D600和pH值。结果白色念珠菌和光滑念珠菌在培养72h时pH值明显降低;热带念珠菌培养96h时pH值明显降低;克柔念珠菌培养基pH值无明显变化,但总体呈下降趋势;4型念珠菌在全木糖醇培养基中的0D600值最低,pH值最高;随着培养基中木糖醇浓度的升高,白色念珠菌和克柔念珠菌pH值呈上升趋势,热带念珠菌和光滑念珠菌培养基pH值随着木糖醇浓度升高而降低。结论木糖醇对念珠菌生长和产酸的有抑制作用,可为临床念珠菌感染的防治提供参考。     

口腔粘膜鳞状细胞癌及癌旁上皮中p53及C-erbB-2癌基因蛋白的表达

本文通过对ｐ5 3、Ｃ ｅｒｂＢ 2癌基因蛋白在口腔粘膜鳞状细胞癌 (ＯＭＳＣＣ)及癌旁形态学上正常的上皮、异常增生的上皮中表达的研究来探讨ｐ5 3、Ｃ ｅｒｂＢ 2在ＯＭＳＣＣ发生、发展中的意义。1　材料与方法1 1　标本2 9例ＯＭＳＣＣ标本均来自上海第二医科大学附属第九人民医院口腔病理科 1995 1997年的档案标本 ,其中 2 1例标本中存在癌旁正常上皮 ,19例存在癌旁异常增生上皮。男性2 2例 ,女性 7例 ;病理分级鳞癌Ⅰ级 17例、Ⅱ级 12例。1 2　方法经 4%甲醛固定 ,石蜡包埋的标本作 5 μｍ连续切片 ,ＨＥ及免疫组化染色 (ＡＢＣ法 )…     

白色念珠菌对铸钛、Co-Cr合金、Ni-Cr合金修复体失泽腐蚀的影响

研究口腔白色念珠菌对铸钛（Ｇｒ２）、Ｃｏ－Ｃｒ合金、Ｎｉ－Ｃｒ合金修复体的失泽影响,方法：将Ｃｏ－Ｃｒ合金,Ｎｉ－Ｃｒ合金、纯钛分别铸造制备成１０ｍｍ＊１０ｍｍ＊１ｍｍ板片,将每组３０片随机分空白对照组、培养基对照组、实验组各１０片。需氧环境将白色念珠菌接种到沙保罗葡萄糖琼脂培养基后,将试件贴附其表面每周转换传递１次,共周。０．５ｇ／Ｌ戊二醛消灭细菌清洗,２周后,用ＭｉｎｏｌｔａＣＲ－１００型色度     

免疫抑制剂对口腔白色念珠菌的分布及基因分型的影响

目的:研究服用免疫抑制剂患者口腔中白色念珠菌的分布及基因分型。方法:含漱液浓缩法取样,CHROM agar Cand ida鉴定培养基分离鉴定,PCR方法鉴定白色念珠菌和基因分型,PCR结果测序验证。结果:实验组白色念珠菌的检出率为20%,对照组7.69%,差异有显著性,实验组中多种念珠菌共存的现象多见。对照组白色念珠菌基因型以A型为主,实验组白色念珠菌基因型呈多态性。结论:长期服用免疫抑制剂影响口腔念珠菌及不同基因型白色念珠菌的检出。     

HIV感染患者口腔念珠菌的培养鉴定及耐药性研究

目的：研究HIV感染患者口腔念珠菌感染的菌株种类和耐药情况,比较CHROMagar显色培养基（CHROMagar）和API 20C AUX酵母菌鉴定系统（API）在HIV感染者口腔念珠菌鉴别中的应用,指导临床抗真菌药物的使用。方法：6株念珠菌标准菌株和17例HIV感染合并口腔念珠菌病患者舌背白色刮取物,分别接种于沙氏培养基和CHROMagar,37℃48h后取沙氏培养基上生长物作API 20C AUX鉴定和耐药性检测。结果：白色念珠菌8例,热带念珠菌4例,近平滑念珠菌4例,白色念珠菌和克柔念珠菌混合感染1例。念珠菌对特比萘芬耐药,对氟康唑、酮康唑、眯康唑、克霉唑中度敏感,对制霉菌素、伊曲康唑、两性霉素B、氟胞嘧啶高度敏感。API 20C AUX、CHROMagar在鉴定白色念珠菌上无显著性差异,API20CAUX鉴定非白色念珠菌准确率高于CHROMagar,但CHROMagar可鉴别混合菌种感染。结论：HIV感染患者口腔念珠菌以非白色念珠菌居多（52．9％）,分型初筛可用CHROMagar,准确分型需用API20CAUX鉴定,两种方法互有裨益。临床用药建议选择制霉菌素、伊曲康唑、两性霉素B、氟胞嘧啶中的两种任意综合治疗。     

慢性牙周炎者龈下酵母菌的检出及毒力初探

目的:研究慢性牙周炎患者龈下酵母菌的检出及白色念珠菌分离株的蛋白酶和磷脂酶活性。方法:采用真菌分离培养鉴定法,考察慢性牙周炎患者龈下酵母菌的检出及其分布;应用BSA-琼脂培养基及蛋黄培养基分别测量白色念珠菌分离株蛋白酶和磷脂酶活性大小。结果:43例慢性牙周炎者龈下酵母菌检出率为30.2%,其中白色念珠菌占46.2%;患者是否携带酵母菌与性别、年龄、吸烟、牙周袋深度、龈沟出血指数无关;白色念珠菌分离株中蛋白酶高毒力株占53.3%;深牙周袋组白色念珠菌磷脂酶活性明显高于浅牙周袋组,P=0.00<0.01。结论:慢性牙周炎患者牙周袋内白色念珠菌的毒力特征与CP的发生和发展可能相关。     

HIV感染者口腔念珠菌负荷及生物型研究

目的调查人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染者口腔中念珠菌负荷状况、生物分型及与口腔念珠菌病临床表现的关系。方法采取漱口法对64例HIV感染者和42名健康对照者进行口腔念珠菌的定量分离培养，并综合利用革兰染色、厚壁孢子生成实验、CHROMagar显色培养和API 20C AUX酵母菌鉴定系统对分离株进行生物型鉴定。结果64例HIV感染者中，52例中可分离出念珠菌74株，阳性分离率为81．3％，而42名健康对照者口腔念珠菌阳性分离率仅为16．7％（P〈0．001）。通过对74株念珠菌的生物型进行鉴定，发现有39株白色念珠菌，15株热带念珠菌及其他6个生物型20株。健康对照组中，分离出5株白色念珠菌和其他裂2株。结论HIV感染者口腔念珠菌感染率明显增加，其口腔念珠菌的检出率和负荷量亦明显增加，白色念珠菌和热带念珠菌为其主要分离菌；与健康对照组相比，HIV感染者的口腔念珠菌分离株生物类型旱现多样化。     

维吾尔族儿童口腔白色念珠菌的检测及与龋病的关系初探

目的:研究乌鲁木齐市维吾尔族不同龋敏感性儿童及不同性别儿童牙菌斑和唾液中白色念珠菌检出差异性,并探讨其与龋病的相关性。方法:选择新疆乌鲁木齐市维吾尔族3~5岁儿童104名,通过唾液法与菌斑法采集样本,用科玛嘉念珠菌显色培养基进行口腔白色念珠菌分离培养,生化及PCR分子生物学鉴定。结果:51例高龋组中菌斑法、唾液法得到的白色念珠菌的检出率分别为47.1%和27.5%(P<0.05),53例无龋组中分别为3.8%和1.9%(P>0.05),高龋组白色念珠菌的检出率高于无龋组(P=0.000);维吾尔族男、女口腔白色念珠菌的检出无统计学意义(P>0.05)。结论:口腔白色念珠菌可能是维吾尔族幼儿龋病的危险因素且与性别无关。     

RPDs基托材料对口腔念珠菌定植的影响

目的：初步研究可摘局部义齿（RPDs）不同基托材料对口腔念珠菌的定植的影响。方法：临床随机选择RPDs修复患者147例。其中树脂基托义齿（A组）58例,钴铬合金铸造基托义齿（B组）63例,纯钛及钛合金铸造基托义齿（C组）26例。吐唾法取样,用CHROMagar培养基鉴定念珠菌菌种。培养基中念珠菌菌落计数为每个样本的念珠菌检出强度。通过统计学方法,比较3组不同基托材料义齿戴用人群念珠菌检出率和检出强度的差异。结果：147例不同基托材料义齿戴用人群中检出的念珠菌包括白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌3个菌种。A、B、C组白色念珠菌和非白色念珠菌检出率无显著差异。白色念珠菌的菌落形成单位数,A组显著高于B、C组（P〈0.05）;B组显著高于C组（P〈0.05）。非白色念珠菌间的菌落形成单位数无明显差异。结论：戴不同材料义齿患者口腔除了能检出白色念珠菌,还可检出非白色念珠菌;口腔念珠菌的菌落形成单位数与义齿基托材料密切相关,钛及钛合金基托义齿应为预防义齿性口炎的首选义齿。     

头颈部癌放疗患者口腔念珠菌定植特征及分析

目的 了解头颈部癌(head and neck cancer,HNC)接受放射治疗患者临床分离口腔念珠菌的菌株定植特征,为临床防治方案的制定提供依据。方法 随机抽取60例HNC患者,于放疗前、放疗期间、放疗结束采用口腔含漱法取样,CHROMagar显色培养基、API 20C AUX 酵母菌鉴定系统进行分离培养鉴定,比较2组念珠菌的检出率和不同念珠菌种的检出量的差异。采用SPSS 17.0软件包进行统计学处理。结果 60例HNC放疗患者中,54例出现口干和吞咽困难,50例产生放射性口腔黏膜炎（radiation-induced oral mucositis,RIOM）,18例感染口腔念珠菌病;60例HNC放疗患者放疗期间和放疗结束口腔念珠菌的检出率分别为56.7%和63.3%,较放疗前（26.7%）明显升高,具有显著差异(χ²=18.320,P<0.001);54例临床分离株以白念菌为主（n=42）,其次是近平滑念珠菌（n=6）、热带念珠菌（n=4）和光滑念珠菌（n=2）;放疗患者口腔念珠菌致病菌的检出率量为30%,定植菌占46.7%。结论 HNC放疗患者口腔念珠菌的定植率明显升高,念珠菌感染可能是RIOM发生的重要原因。     

原位杂交、免疫组化及AgNOR染色法在口腔念珠菌性白斑诊断中的应用

目的:探讨原位杂交、免疫组化及AgNOR染色法在口腔念珠菌性白斑(OCL)诊断中的综合应用。方法:采用原位杂交、免疫组化及AgNOR染色法,并对照PAS染色法,检测154例口腔白斑及鳞癌组织中念珠菌的感染情况。结果:经统计学处理,4种检测方法之间无显著性差异;白斑真菌感染率为71.8%(89/124),白色念珠菌感染率为56.5%(70/124)。本研究中只发现1例热带念珠菌感染。真菌感染中78.7%(70/89)为白色念珠菌。鳞癌真菌感染率63.3%(19/30),均为白色念珠菌感染。结论:AgNOR染色法、原位杂交和免疫组化的综合应用,可以从组织、细胞、分子水平对OCL进行定位研究,为OCL的准确诊断提供客观的实验依据。     

各年龄段儿童口腔中念珠菌的分布研究

目的 研究以白色念珠菌为代表的念珠菌群在不同年龄阶段儿童口腔中的分布情况。方法 对4个不同年龄阶段的儿童口腔中的念珠菌群进行研究，颊黏膜拭子取样，鉴定培养基培养鉴定，比较培养法和PCR法对其中一组样本的白色念珠菌检出率的影响。结果念珠菌的检出率分别是：新生儿7．5％，乳牙列儿童组70％，混合牙列儿童组56．36％，恒牙列儿童组49．12％；白色念珠菌的比例各有不同，PCR方法比培养法更加敏感。结论 各个年龄阶段儿童口腔中均有念珠菌的检出，但检出率不同，白色念珠菌是主要成分。     

婴幼儿龋菌斑生物膜中白色念珠菌的检出情况

目的初步探讨白色念珠菌检出情况与婴幼儿龋（early childhood caries,ECC）的相关性。方法采用CHROMagar Candida、革兰氏染色及厚膜孢子形成试验,对ECC菌斑生物膜中的白色念珠菌进行分离鉴定,并应用Pearsonχ2检验分析白色念珠菌检出情况与ECC关系。结果白色念珠菌的检出率在ECC组中为44.1%,无龋（caries-free,CF）组为19.2%。ECC组中,男、女生白色念珠菌的检出率分别为59.7%、34.9%;CF组中,白色念珠菌检出率男生为21.1%,女生为18.5%。白色念珠菌的检出率与dmft分级的关联系数为0.35。结论白色念珠菌的检出情况与ECC相关,且白色念珠菌的检出情况与dmft的分级具有关联性。