异丙酚或氯胺酮对内毒素性急性肺损伤大鼠肺小动脉BMP-2表达的影响

目的评价异丙酚或氯胺酮对内毒素（LPS）性急性肺损伤大鼠肺小动脉骨形态构建蛋白-2（BMP-2）表达的影响。方法雌性Wistar大鼠60只，体重220—260g，6—7周龄。随机分为6组，每组10只。对照组（C组）：1．5h内经股静脉输注生理盐水5ml；LPS组（L组）：1h内输注生理盐水3ml，然后30min内输注内毒素1mg／kg（溶于2ml生理盐水中）；异丙酚20mg／kg＋LPS组（P1组）、异丙酚50mg／kg＋LPS组（P2组）、氯胺酮20mg／kg＋LPS组（K1组）、氯胺酮50mg／kg＋LPS组（K组）1h内经股静脉分别输注不同剂量的药物，然后30min内输注LPS1mg／kg（溶于2ml生理盐水中）。输注完毕后72b断头处死大鼠。RT-PCR法测定肺小动脉BMP-2mRNA、BaxmRNA表达。免疫组织化学法、Western blot测定肺小动脉BMP-2、Bax、Bcl-2表达。显微成像分析系统测量肺小动脉中膜厚度。结果各组肺小动脉BMP-2、Bax、Bcl-2均有表达。与C组比较，其余组BMP-2、Bax蛋白水平和mRNA表达降低，Bcl-2水平升高（P〈0．05或0．01）。与L组比较，异丙酚或氯胺酮使BMP-2、Bax蛋白水平及mRNA表达升高，Bcl-2水平降低（P〈0．05）。各组肺小动脉中膜厚度较C组增加（P〈0．05）；异丙酚或氯胺酮减轻了肺小动脉中膜的增厚（P〈0．05）。结论异丙酚或氯胺酮可以抑制大鼠LPS致急性肺损伤肺血管的重建，其机制可能与BMP-2、Bax基因表达上调，Bcl-2基因表达下调有关。     

异丙酚对内毒素性急性肺损伤大鼠中性粒细胞NF-κB活化的影响

目的 探讨异丙酚对内毒素性急性肺损伤(ALI)大鼠中性粒细胞NF-κB活化的影响.方法 健康清洁级SD大鼠60只,3月龄,体重250～350 g,雌雄不拘,随机分为5组(n=12):对照组(C组)、ALI组和不同剂量异丙酚组(Pl组、P2组、P3组).ALI组经股静脉注射LPS 5 mg/kg;Pl组、P2组和P3组经股静脉注射LPS 5 mg/kg后立即分别静脉输注异丙酚5、10和15 mg·kg-1·h-1,输注时间2 h;C组经股静脉注射10 ml生理盐水.异丙酚输注结束时,行肺组织病理学评分,采集颈动脉血样,测定中性粒细胞总NF-κB和活化的NF-κB的表达水平.结果 与C组比较,ALI组、P1组和P2组肺组织病理学评分和中性粒细胞活化的NF-κB表达水平升高,P3组肺组织病理学评分升高(P＜0.05);与ALI组比较,P2组和P3组肺组织病理学评分降低,P1组～P3组中性粒细胞活化的NF-κB表达水平降低(P＜0.05);P1组～P3组肺组织病理学评分和中性粒细胞活化的NF-κB表达水平依次降低(P＜0.05);各组中性粒细胞总NF-κB表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异丙酚减轻大鼠内毒素性急性肺损伤的机制可能与抑制外周血中性粒细胞NF-κB的活化有关.     

L-精氨酸对内毒素诱导急性肺损伤大鼠肺表面活性物质的影响

目的 评价L-精氨酸对内毒素(LPS)诱导急性肺损伤大鼠肺表面活性物质的影响.方法 健康雄性SD大鼠48只,随机分为4组:正常对照组(C组,n=16)、LPS组(n=16)、LPS 3 h+L-精氨酸治疗组(L1组,n=8)和LPS 6 h+L-精氨酸治疗组(L2组,n=8).LPS组、L1组和L2组静脉注射LPS 5mg/kg,C组给予等容量生理盐水.L1组和L2组分别于给予LPS后3 h或6 h腹腔注射L-精氮酸500 mg/kg.L1组和L2组于给予L-精氨酸后3 h(C组和LPS组分别于给予生理盐水或LPS后6、9 h)取8只大鼠,取肺组织,测定表面活性物质结合蛋白A(SP-A)mRNA的表达水平、肺泡灌洗液(BALF)中总磷脂(TPL)和总蛋白(TP)浓度,光镜下观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,LPS组SP-A mRNA表达下调,BALF中TPL浓度降低,TP浓度升高(P＜0.01).与LPS组比较,L1组SP-A mRNA表达上调,BALF中TPL浓度升高,TP浓度降低(P＜0.05或0.01);L2组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).L1组肺损伤程度轻于LPS组和L2组.结论 L-精氨酸可促进肺表面活性物质合成,从而对大鼠内毒素诱导急性肺损伤具有治疗作用.     

rhBMP-2对内毒素致急性肺损伤大鼠肺动脉构型重建的影响

目的探讨重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）对内毒紊致急性肺损伤大鼠肺动脉构型重建的影响及其机制。方法Wistar大鼠60只,随机分成3组（n=20）：对照组（C组）、LPS组（L组）和rhBMP-2组（R组）。C组：在1．5h内经股静脉输注生理盐水5ml；L组：在1h内经股静脉输注生理盐水3ml,然后在30min内再输注LPS 1mg/kg（溶于生理盐水2ml中）；R组：在1h内经股静脉输注rhBMP-2 10μg/kg（溶于3ml生理盐水中）,然后输注LPS（方法同上）,并且分别在输注LPS后24、48h时静脉注射rhBMP-24μg/kg。输注LPS或生理盐水后72h处死大鼠,取肺组织,光镜下进行病理学观察并测定肺小动脉中膜厚度,免疫组织化学荧光标记法测定肺小动脉Survivin、cyclinD1、p21的表达,增殖细胞核抗原测定肺动脉平滑肌细胞（PASMC）的增殖情况,TUNEL法测定PASMC的凋亡情况；取肺动脉,用RT-PCR法测定Survivin mRNA、p21 mRNA、cyelinD1 mRNA,用Western blot法测定Survivin、p21、cyclinD1蛋白表达及活化的caspase-3水平。结果与C组比较,L组肺小动脉中膜厚度百分比明显增加,Survivin mRNA、cyclinD1 mRNA、Survivin、eyclinD1水平增加,p21 mRNA、p21及活化的caspase-3水平降低,肺小动脉中膜PASMC增殖指数增加,凋亡指数降低（P＜0．01）；rhBMP-2可抑制上述改变。R组肺组织病理学损伤及肺动脉构型重建程度轻于L组。结论rhBMP-2通过抑制Survivin、cyclinD1的表达,上调p21蛋白表达与活化caspase-3,促进了PASMC的凋亡,抑制了内毒素致ALI大鼠肺动脉构型重建。     

地塞米松对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织MKP-1表达的影响

目的 评价地塞米松对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)表达的影响.方法 成年雄性SD大鼠54只,体重180～ 230 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组:对照组(C组,n=6)、急性肺损伤组(ALI组,n=24)和地塞米松组(D组,n=24).ALI组和D组尾静脉注射LPS 5 mg/kg制备大鼠急性肺损伤模型,C组给予等容量生理盐水,D组于注射LPS前30 min时腹腔注射地塞米松6 mg/kg.C组于注射生理盐水后1 h(T1)时,ALl组和D组分别于注射LPS后1、3和6 h(T1-3)时,随机处死8只大鼠,取肺组织,检测MKP-1和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶MAKP(p-p38MAPK)的表达.T3时回收支气管肺泡灌洗液(BALF),测定蛋白和TNF-α的浓度;观察肺组织病理学结果.另取32只SD大鼠,体重180～ 230 g,采用随机数字表法,将其随机分为2组(n=16):急性肺损伤组(ALI1组)和地塞米松组(D1组),处理方法同上.观察48 h内大鼠生存情况.结果 与C组比较,ALI组BALF中蛋白和TNF-α的浓度升高,T1-3时p-p38MAKP表达上调,T2.3时MKP-1表达下调,D组BALF中TNF-α浓度升高,T1-3时p-p38MAKP和MKP-1表达上调(P＜0.05);与ALI组比较,D组BALF中蛋白和TNF-α的浓度下降,T1-3时p-p38MAKP表达下调,MKP-1表达上调(P＜0.05),病理学损伤减轻.D1组大鼠生存率高于ALI1组(P＜0.05).结论 地塞米松减轻大鼠内毒素性急性肺损伤的机制与上调肺组织MKP-1的表达,抑制p38MAPK的磷酸化,降低炎性反应有关.     

体温对内毒素致急性肺损伤大鼠肺微血管通透性的影响

目的探讨亚低温和高温对内毒素致急性肺损伤(ALI)大鼠肺微血管通透性的影响。方法健康雄性SD大鼠48只,体重300～350 g,随机分为4组(n=12),常温对照组(A组)静脉注射37℃生理盐水;常温内毒素组(B组)静脉注射脂多糖(LPS)5 mg·kg-1;亚低温 内毒素组(C组)静脉注射LPS 5 mg·kg-1,维持直肠温31.5～32℃;高温 内毒素组(D组)静脉注射LPS 5 mg·kg-1,维持直肠温39.5～40℃。动脉血氧合指数(PaO2/FiO2)≤300 mm Hg即ALI模型制备成功。于ALI 6 h后处死大鼠,取肺组织,清洗固定后测定肺微血管通透性指标:肺湿/干重量比(W/D)、肺泡灌洗液(BALF)蛋白(BALFpro)、肺通透性指数(PPI)、肺微血管通透性指数(PMPI)及肺组织硝基酪氨酸(NT)、髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)含量,观察肺组织病理学改变。结果与A组比较,B组、C组、D组PPI、W/D、BALFpro、PMPI和肺组织MPO、MDA、NT均升高(P<0.05);与B组比较,C组上述指标降低,D组上述指标升高(P<0.05);与C组比较,D组PPI、W/D、BALFpro、PMPI和肺组织MPO、MDA、NT升高(P <0.05)。结论高温加重内毒素血症大鼠ALI程度,亚低温通过抑制ONOO-生成,抑制了肺微血管通透性的升高,可减轻大鼠内毒素致ALI。     

姜黄素预先给药对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的作用

目的 研究姜黄素预先给药对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的作用及其可能机制。方法 48只雄性Wistar大鼠，随机分为4组（n=12），对照组（S组）、姜黄素组（C组）分别静脉注射10％二甲基亚砜（DMSO）2 ml／kg、姜黄素40 mg／kg（溶于DMSO），30 min后静脉注射生理盐水2 ml／kg;内毒素组（L组）、姜黄素预先给药组（C-L组）分别静脉注射10％DMSO 2 ml／kg、姜黄素40 mg／kg，30 min后静脉注射脂多糖（LPS）6 mg／kg。注射LPS后4 h处死动物。每组中6只大鼠在处死前15 min静脉注射伊文思蓝（EB）20mg／kg，用于测定肺组织EB含量，每组的其余大鼠用于测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中髓过氧化物酶（MPO）活性和中性粒细胞（PMN）计数及肺组织湿干重比（W／D）、MPO活性、PMN趋化因子-1（CINC-1）mRNA、CINC蛋白表达，并在光镜下观察肺组织病理学改变。结果 与S组比较，L组BALF中MPO、PMN计数和肺组织W／D、EB及MPO、CINC-1 mRNA、CINC蛋白水平升高（P〈0．05或0．01），C组上述指标差异均无统计学意义（P〉0．05）;与L组比较，C-L组上述指标均降低（P〈0．05或0．01）。C-L组肺组织病理学损伤较L组减轻。结论 姜黄素40mg／kg预先给药对内毒素诱导急性肺损伤大鼠肺产生一定的保护作用，与下调肺组织CINC-1的表达进而抑制PMN在肺组织的聚集、激活有关。     

异丙酚对机械通气相关肺损伤大鼠肺组织p38MAPK信号通路的影响

目的 探讨异丙酚对机械通气相关肺损伤大鼠肺组织p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的影响.方法 雄性清洁级Wistar大鼠30只,体重230～300 g,2～3月龄,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=10):对照组(C组)保留自主呼吸;机械通气组(V组)和异丙酚组(P组)行机械通气4h,P组在机械通气开始时静脉注射异丙酚5 mg/kg,机械通气期间以10mg·kg-1 ·h-1的速率静脉输注异丙酚.于机械通气15 min、1h、2h和4h时记录MAP,并采集股动脉血样,进行动脉血气分析,记录PaO2;机械通气结束时,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白、TNF-α和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)的浓度;取肺组织,测定湿干重比(W/D比)、MDA含量、SOD活性、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和p38MAPK、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白的表达水平,计算p-p38MAPK/p38MAPK,并观察病理学结果,进行肺损伤评分.结果 与C组比较,V组和P组肺损伤评分、W/D比、肺组织MDA含量、ICAM-1表达、BALF中总蛋白浓度、TNF-α和MIP-2浓度和肺组织p-p38MAPK蛋白表达水平和p-p38MAPK/p38MAPK升高,V组肺组织SOD活性降低(P＜0.05),P组SOD活性差异无统计学意义(P＞0.05);与V组比较,P组肺损伤评分、W/D比、肺组织MDA含量、ICAM-1表达、BALF中总蛋白浓度、TNF-α和MIP-2浓度和肺组织p-p38MAPK蛋白表达和p-p38MAPK/p38MAPK降低,肺组织SOD活性、MAP和PaO2升高(P＜0.05).三组肺组织p38MAPK蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异丙酚可能通过抑制p38MAPK信号转导通路的活化减轻大鼠机械通气相关肺损伤.     

氟比洛芬酯预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响

目的 评价氟比洛芬酯预先给药对大鼠内毒索性急性肺损伤的影响.方法 雄性SD大鼠40只,体重190～220 g,随机分为3组:对照组(C组,n=8)、脂多糖组(LPS组,n=16)和氟比洛芬酯组(FA组,n=16).C组尾静脉注射生理盐水(NS)1 ml;LPS组尾静脉注射LPS 5 mg/kg(1 m1);FA组尾静脉注射氟比洛芬酯6 mg/kg(1 m1)后0.5 h注射LPS 5 mg/kg(1 m1).LPS组和FA组于注射LPS后2、4 h时、C组于注射NS后4 h时,各随机处死8只大鼠,取股动脉血样8 ml,行血气分析;采用放免法测定血清血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keto PGF1α)的浓度;采用ELISA方法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和IL-10的浓度.取左肺上叶组织,计算肺组织湿/干重比值(W/D)和肺含水量(LC).注射LPS或NS后4 h时取左肺下叶组织,光镜下观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,LPS组PaO2和PaO2/FiO2下降,PaCO2、W/D和LC升高,血清TXB2、6-keto PGF1α浓度和TXB2/6-keto PGF1α比值升高,血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度升高,FA组W/D和LC升高,血清TXB2和6-keto PGF1α浓度升高,血清TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10浓度升高(P<0.05或0.01).与LPS组比较,FA组PaCO2、W/D和LC降低,PaO2和PaO2/FiO2升高,血清TXB2、6-keto PGF1α浓度和TXB2/6-keto PGF1α比值降低,血清IL-1β、IL-6和TNF-α浓度降低,血清IL-10浓度升高(P<0.05).FA组肺组织病理学损伤较LPS组轻.结论 氟比洛芬酯预先给药可减轻内毒素性急性肺损伤,可能与维持血液TXA2和PGI2平衡及抑制炎性反应有关.     

微量肺源性内毒素对大鼠呼吸机相关性肺损伤的影响

目的 评价微量肺源性内毒素对大鼠呼吸机相关性肺损伤的影响.方法 成年雄性SD大鼠32只,体重370～390 g,随机分为4组(n=8):自主呼吸组(C组)、内毒素+自主呼吸组(LC组)、机械通气组(M组)和内毒素+机械通气组(LM组).LC组和LM组气管内滴入内毒素100 μg/kg;M组和LM组行机械通气,潮气量20 ml/kg,呼气末正压0,1:E 1:1,维持P_(ET)CO_235～45 mm Hg;C组和LC组保持自主呼吸.于机械通气前、机械通气1、2和3 h时行血气分析,并记录血液动力学指标.机械通气3 h时放血处死大鼠,测定肺组织病理学损伤评分、湿/干重比(W/D比)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数和肺蛋白透性系数,采用ELISA法检测血浆TNF-α和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)的浓度.C组和M组采用RT-PCR法测定肺组织CD14 mRNA的表达水平,免疫组化法测定BALF中CD14的表达水平.结果 C组和M组血浆中未检测到TNF-α;与C组比较,LC组肺组织病理学损伤评分、W/D比、BALF中自细胞计数、肺蛋白透性系数和血浆MIP-2浓度差异无统计学意义(P>0.05),血浆TNF-α浓度升高,M组肺组织病理学损伤评分、BALF中白细胞计数和血浆MIP-2浓度升高,LM组肺组织病理学损伤评分、W/D比和BALF中白细胞计数、肺蛋白透性系数、血浆MIP-2和TNF-α的浓度升高(P<0.05或0.01);与M组比较,LM组肺组织病理学损伤评分、W/D比、BALF中自细胞计数、肺蛋白透性系数、血浆MIP-2和TNF-α的浓度升高(P<0.05或0.01).与C组比较,M组BALF中CD14表达和肺组织CD14 mRNA表达上调(P相似文献   

肺组织γ-氨基丁酸A型受体在大鼠内毒素诱发急性肺损伤中的作用

目的 探讨肺组织γ-氨基丁酸A型受体(GABAAR)在大鼠内毒素诱发急性肺损伤中的作用.方法 成年健康雄性Wistar大鼠32只,8周龄,体重200 ～ 230 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=8)∶正常对照组(C组)、内毒素组(LPS组)、γ-氨基丁酸预先给药+内毒素组(GABA组)和GABAAR拮抗剂荷包牡丹碱预先给药+内毒素组(BIC组).LPS组、GABA组和BIC组尾静脉注射LPS 5 mg/kg,C组给予等容量生理盐水;GABA组和BIC组分别于给予LPS前30 min时腹腔注射γ-氨基丁酸50 mg/kg和荷包牡丹碱10 μmol/kg.于给予LPS后6h时,采集动脉血样,测定PaO2,然后取肺组织,测定肺湿/干重比(W/D)、GABAAR表达、IL-6、TNF-α、MDA的含量和SOD活性,光镜下观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,LPS组、GABA组和BIC组PaO2降低,LPS组和GABA组肺组织W/D、TNF-α、IL-6和MDA的含量升高,肺组织GABAAR表达上调,肺组织SOD活性降低(P＜0.05);与LPS组比较,GABA组肺组织W/D、TNF-α、IL-6和MDA的含量升高,肺组织GABAAR表达上调,肺组织SOD活性降低(P＜0.05),而BIC组上述指标差异无统计学意义,GABA组和BIC组PaO2差异无统计学意义(P＞0.05).结论 肺组织GABAAR参与了大鼠内毒素诱发急性肺损伤的发展.     

盐酸氨溴索预先给药对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的作用

目的探讨盐酸氨溴索（AMB）预先给药对内毒素（LPS）诱导大鼠急性肺损伤（ALI）的作用及其机制。方法雄性SD大鼠108只，体重196～273g，12～14周龄。随机分为6组（n=18），A组生理盐水（NS）0．5ml腹腔注射（i．p．）1h后，再i．p．NS0．5ml；B组i．p．AMB 10mg／kg 1h后i．p．NS0．5ml；C组i.p．NS0．5ml 1h后i．p．LPS 5mg／kg；D、E、F组分别i．p．AMB5、10、20mg／kg后1hi．p．LPS5mg／kg。i．p．NS（A、B组）或LPS（C、D、E、F组）后1、2、4h各处死5只大鼠，采用双夹心抗体酶联吸附免疫法测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和巨噬细胞炎性蛋白-2（MIP-2）浓度，蛋白印迹法检测肺组织细胞胞浆中磷酸化／非磷酸化c—Jun氨基末端激酶（JNK）的表达。另外3只i．p．NS（A、B组）或LPS（C、D、E、F组）后4h观察大鼠肺组织形态学变化。结果与A组比较，C、D、E、F组BALF中TNF-α、IL-1β和MIP-2升高；与C组比较，E、F组上述三指标均降低。与A组比较，C、D、E、F组磷酸化JNK表达增多；与C组比较，E、F组磷酸化JNK表达减少，D、E、F组非磷酸化JNK表达增多（P〈0．05或0．01）。AMP预先给药可减轻i．p.LPS诱导的肺组织损伤。结论AMB预先给药可减轻LPS诱导大鼠ALI，其机制与抑制肺组织JNK的活化、下调TNF-α、IL-1β和MIP-2的表达有关．且呈剂量依赖性。     

利多卡因预先给药对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织层粘连蛋白表达的影响

目的探讨利多卡因预先给药对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织层粘连蛋白（LN）表达的影响。方法健康雄性Wistar大鼠32只,体重220～250g,随机分为4组（n=8）：对照组（C组）、脂多糖组（LPS组）、利多卡因2mg/kg组（L1组）和利多卡因4mg/kg组（L2组）。腹腔注射3%戊巴比妥钠20mg/kg麻醉后,建立尾静脉通路。C组尾静脉输注生理盐水3ml;LPS组依次尾静脉输注2ml生理盐水及1ml LPS（LPS 2mg/kg溶于1ml生理盐水）;利多卡因2、4mg/kg各溶于2ml生理盐水中,L_1组、L_2组分别先输注利多卡因再输注LPS,各组输注速率均为0.05ml/min。输注完毕后5h处死大鼠,迅速取右肺下叶肺组织,测定LN表达;取左肺上叶肺组织,透射电镜观察超微结构。结果与C组比较,LPS组肺组织LN表达上调（P〈0.05）;与LPS组比较,L1组和L2组肺组织LN表达下调（P〈0.05）;与L1组比较,L2组肺组织LN表达下调（P〈0.05）。L1组和L2组肺组织病理损伤较LPS组轻。结论利多卡因预先给药可通过抑制内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织LN表达上调,减轻肺部炎性反应及肺损伤,且呈剂量依赖性。     

阿米洛利预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响

目的 探讨阿米洛利预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响.方法 清洁级雄性SD大鼠32只,体重200～250 g,随机分为4组(n=8):对照组(C组)、急性肺损伤组(ALI组)、阿米洛利组(A组)和阿米洛利预先给药组(AL组).C组股静脉输注生理盐水3 ml,ALI组股静脉输注生理盐水1 ml、内毒素6 mg/kg,A组股静脉输注阿米洛利10 mg/kg、生理盐水2 ml,AL组股静脉输注阿米洛利10 mg/kg、内毒素6 mg/kg,输注速率均为0.05 ml/rain,给药间隔均为30 min.于输注内毒素结束后6 h时处死大鼠取肺,观察肺组织病理学,并行病理学评分,称重后计算肺湿干重比,检测髓过氧化物酶(MPO)活性,测定支气管肺泡灌洗液总蛋白、TNF-α和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)的浓度,采用Western blot法检测肺组织钠氢交换体1(NHE1)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和细胞外信号调节激酶(ERK)的表达水平.结果 与C组比较,ALI组和AL组肺组织病理学评分、肺湿干重比、MPO活性、支气管肺泡灌洗液总蛋白、TNF-α和MIP-2浓度、肺组织NHE1、p38MAPK和ERK的表达水平明显升高(P＜0.01),A组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与ALI组比较,AL组肺组织病理学评分、肺湿干重比、MPO活性、支气管肺泡灌洗液总蛋白、TNF-α和MIP-2浓度、肺组织NHE1和ERK的表达水平明显降低(P＜0.01),p38MAPK表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 阿米洛利预先给药可减轻大鼠内毒素性急性肺损伤,其机制可能与抑制ERK信号转导通路激活有关.     

高迁移率族蛋白1在内毒素性急性肺损伤大鼠肺血管重构中的作用

目的 评价高迁移率族蛋白1 (HMGB1)在内毒素性急性肺损伤大鼠肺血管重构中的作用.方法 健康清洁级雄性Wistar大鼠30只,体重220 ～ 250 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=10)∶对照组(C组)、内毒素性急性肺损伤模型组(M组)和HMGB1抗体组(H组).C组尾静脉输注生理盐水5 ml/1.5 h;M组输注生理盐水3 ml/1.0h,再输注LPS 2 ml(1 mg/kg)/0.5 h;H组于注射LPS后12、24和36 h时尾静脉注射HMGB1抗体2 mg/kg.于注射LPS后72 h时处死取肺,光镜下观察肺组织病理学结果,采用图像分析软件测量并计算肺小动脉中膜/血管面积百分比,免疫组化法检测肺血管增殖细胞核抗原(PCNA)表达,Western bolt法检测HMGB1表达.结果 与C组比较,M组和H组肺小动脉中膜/血管面积百分比、PCNA和HMGB1表达水平升高(P＜0.05),肺组织急性炎症细胞增多,血管壁明显增厚;与M组比较,H组肺小动脉中膜/血管面积百分比、PCNA和HMGB1表达水平降低(P＜0.05),肺组织急性炎症和血管壁增厚明显减轻.结论 HMGB1可能是诱发内毒素性急性肺损伤大鼠肺血管重构的重要因素.     

CPB诱发犬急性肺损伤时肺组织转化生长因子β1 mRNA表达的变化

目的 观察CPB诱发犬急性肺损伤时肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达的变化.方法 成年健康杂种犬36只,体重15～16 kg,随机分为2组(n=18):对照组(C组)和CPB组.CPB组制备CPB诱发急性肺损伤模型,C组除不进行CPB外,其余操作同CPB组.分别于CPB前(T0)、CPB停机后30 min(T1)、60 min(T2)时各处死6只犬,取肺组织,光镜下观察肺组织病理学结果,计算肺通透性指数(PPI),测定肺组织TGF-β1 mRNA表达和MDA含量.结果 C组肺组织结构清晰,未见炎性细胞浸润,肺泡壁光滑、完整,肺泡腔及间质无出血和渗出;CPB组肺泡腔内可见水肿液和中性粒细胞浸润,并可见大量的红细胞,肺泡隔增宽,局灶性肺不张.与C组比较,CPB组TGF-β1 mRNA表达上调,MDA含量和PPI升高(P<0.05或0.01).CPB组TGF-β1 mRNA表达水平与MDA含量和PPI呈正相关(MDA:r=0.867,P<0.01;PPI:r=0.821,P<0.01).结论 犬CPB后肺组织TGF-β1 mRNA 表达上调,可能是CPB诱发急性肺损伤发生发展的重要因素之一.     

不同剂量6%羟乙基淀粉130/0.4预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响

目的 研究不同剂量6%羟乙基淀粉130/0.4(6% HES 130/0.4)预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响.方法 72只健康清洁级雄性SD大鼠随机分为6组(n=12),对照组(C组)经尾静脉注射生理盐水30 ml/kg;肺损伤组(L组)经尾静脉注射脂多糖(LPS)5 mg/kg;不同剂量6%HES130/0.4组分别经尾静脉注射6%HES 130/0.4 7.5 ml/kg(H1组)、15 ml/kg(H2组)和30 ml/kg(H3组),1 h后再经尾静脉注射LPS 5 mg/kg;H4组经尾静脉注射6%HES 130/0.4 30 ml/kg.各组给药速率均为0.2ml/min.注射LPS后4 h行动脉血气分析,气管插管.每组取6只大鼠,测定肺组织微血管通透性指数(PMPI);每组取6只大鼠,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白浓度、肺组织湿/干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性,血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、丙二醛(MDA)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性,观察肺组织病理学.结果 与L组比较,H2组血清TNF-α、IL-1β、MDA浓度和肺组织MPO活性降低,血清IL-10浓度和SOD活性升高,H1组IL-1β浓度降低,H1组、H2组和H3组PMPI、BALF蛋白浓度和W/D均降低(P＜0.05);与H2组比较,H1组和H3组血清TNF-α、MDA浓度和肺组织MPO活性升高,血清SOD活性、IL-10浓度降低,H3组血清IL-1β浓度升高(P＜0.05).H1组、H2组和H3组较L组肺组织损伤较轻,其中H2组损伤最轻.结论 15 ml/kg6%HES 130/0.4预先给药可减轻大鼠内毒素性急性肺损伤,其机制可能与抑制炎性因子释放、减少肺内中性粒细胞聚集和氧自由基生成、改善肺微血管通透性有关.     

硝普钠对内毒素致大鼠急性肺损伤保护作用的机制

目的 研究外源性一氧化氮（NO）供体一硝普钠对内毒索（LPS）致大鼠急性肺损伤（Au）保护作用的机制。方法 32只Wistar大鼠随机分为4组（n=8），假手术组（S组）、内毒素组（LPS组）、HO-1诱导剂氯化高铁血红素预处理组（HM组）和硝普钠治疗组（SNP组）。采用气管内滴入750μg／kg（溶于300ml生理盐水中）LPS建立大鼠ALI模型，HM组在给LPS前12h腹腔注射氯化高铁血红素40μmol／kg，SNP组将LPS与硝普钠（25μg／kg）同时滴入气管。滴人LPS后8h处死大鼠，测定肺组织湿／干重比（W／D）、丙二醛（MDA）含量、诱导型血红素加氧酶（HO-1）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表达及支气管肺泡灌洗液（BALF）蛋白浓度，并观察肺组织病理变化。结果 与S组比较，LPS组、HM组、SNP组肺组织iNOS、HO-1蛋白表达均增强，LPS组、HM组肺组织W／D及MDA含量增加，LPS组BALF蛋白浓度增加；与LPS组比较，HM组和SNP组肺组织iNOS蛋白表达减弱，肺组织HO-1蛋白表达增强，肺组织W／D、MDA含量及BALF蛋白浓度降低（P〈0．05或0．01）。SNP及HM组肺组织病理损伤程度明显轻于LPS组。结论 硝普钠可通过诱导HO-1进而抑制iNOS／NO，减轻LPS所致ALI．     

促红细胞生成素预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响

目的 探讨促红细胞生成素(EPO)预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响.方法 成年雄性SD大鼠32只,体重180～220 g,随机分为4组(n=8),C组腹腔注射生理盐水4 ml/kg(EPO溶剂对照),30 min后静脉注射生理盐水2 ml/kg[脂多糖(LP3)溶剂对照];EPO组腹腔注射EPO3 000 U/kg,30 min后静脉注射生理盐水2 ml/kg;LPS组腹腔注射生理盐水4 ml/kg,30 min后静脉注射LPS 6 mg/kg;EPO+LPS组腹腔注射EPO 3 000 U/kg,30 min后静脉注射LPS 6 mg/kg.于静脉注射LPS后4 h时处死大鼠,观察肺组织病理学结果 ,计算肺组织湿/干重(W/D)比;测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量;采用Western blot法测定肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和硝基酪氨酸(NT)的表达.结果 与C组相比,LPS组和EPO+LPs组肺组织W/D比、MPO活性、MDA和NO含量升高,iNOS和NT表达上调(P<0.01);与LPS组相比,EPO+LPS组肺组织W/D比、MPO活性、MDA和NO含量降低,iNOS和NT表达下调(P<0.01).结论 EPO预先给药可减轻大鼠内毒素性急性肺损伤,与其下调iNOS表达,减少NO生成有关.     

MLK3-MKK3/6-p38MAPK信号转导通路在大鼠内毒素性急性肺损伤中的作用

目的 探讨MLK3-MKK3/6-p38MAPK信号转导通路在大鼠内毒素性急性肺损伤中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠78只,体重200～250 g,随机分为4组:对照组(C组,n=6)、急性肺损伤组(ALI组,n=24)、MLK3抑制剂K252a组(MK组,n=24)和p38MAPK特异性抑制剂SB203580组(MS组,n=24).ALI组尾静脉注射内毒素5 mg/kg制备大鼠急性肺损伤模型,C组给予等容量生理盐水,MK组和MS组于注射内毒素前30 min经尾静脉分别注射K252a 75μg/kg、SB203580 10 mg/kg.ALI组、MK组和MS组于注射内毒素后1、3、6、12 h(1-4)时各组随机取6只大鼠,C组于给予生理盐水后即刻处死取肺,采用ELISA法测定支气管肺泡灌洗液中TNF-α浓度,称重后计算肺湿干重比,采用Western b1ot法测定p-MLK3、p-MKK3/6及p-p38MAPK的表达,观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,ALI组、MK组和MS组各时点支气管肺泡灌洗液中TNF-α浓度、肺湿干重比、p-MLK3、p-MKK3/6及p-p38MAPK的表达水平升高(P＜0.01);与ALI组比较,MK组上述指标降低,MS组支气管肺泡灌洗液中TNF-α浓度、肺湿干重比、p-p38MAPK表达水平降低(P＜0.05).病理学结果显示:MK组和MS组肺组织损伤较ALI组减轻.结论 MLK3-MKK3/6-p38MAPK信号转导通路在大鼠内毒素性急性肺损伤中起重要作用.