ELISA检测血清HBsAg、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV灰区设定的探讨

正酶联免疫吸附测定(ELISA)因具有特异性强、灵敏度高、操作简便、结果报告快、成本低廉等优点,现已成为临床检验科最基础、应用最广泛的检验项目之一[1]。常用于乙型病毒性肝炎(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、梅毒螺旋体(TP)、人类免疫缺陷病毒(HIV)等感染性疾病抗原和抗体的检测。但是,由于ELISA是一种半定量试验,检测的过程会导致检测结果变异系数较大,进而使得灰区的范围相对较宽。因此,设置合理的     

长沙大专院校学生无偿献血者HBsAg、抗-HCV的检测

自《中华人民共和国献血法》实施以来 ,无偿献血工作不断发展 ,在长沙市参加无偿献血的低危人群中 ,大专院校学生占有不可忽视的构成比 ( 60 %～70 % ) ,重视大学生献血群体 ,了解他们 HBs Ag、抗- HCV感染情况 ,有助于保证血液质量 ,促进高校无偿献血动员工作的持续稳定发展。为此笔者对2 0 0 1年长沙市 2 8所高校学生中无偿献血者的HBs Ag、抗 - HCV进行统计分析 ,现报告如下。材料与方法1　标本　长沙市 2 8所高校 (普通高校、军事院校 )2 0 0 1年两次由市献血办计划安排献血 8479人次 ,街头流动献血车自愿献血者中高校学生 3797人…     

胶体金免疫层析法急诊检测HBsAg漏检风险评价

目的评价胶体金免疫层析法(简称胶体金法)急诊检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的漏检风险。方法新疆生产建设兵团医院2014年急诊手术前或急诊侵入性检查前胶体金法检测HBsAg患者3 887例,检测结果经酶联免疫吸附试验(ELISA)验证。采用胶体金法和ELISA检测4个浓度水平HBsAg质控品,评价检测方法灵敏度。以ELISA检测结果为参照,评价胶体金法的漏检风险。结果胶体金法检测HBsAg的灵敏度为2~4IU/mL,ELISA检测灵敏度小于或等于0.5IU/mL。患者标本胶体金法和ELISA检测结果比较差异有统计学意义(P0.05)。ELISA结果阳性而胶体金法检测结果为阴性的相对风险为0.003 91(95%CI:0.002 318~0.006 597)。ELISA检测的标本光密度与临界值的比值(S/CO)为15.314~21.210时,可初步估计胶体金法检测结果。结论在急诊手术前或急诊侵入性检查前采用胶体金法检测HBsAg存在漏检风险,应引起实验室和临床的关注。     

胶体金免疫层析法检测HBsAg的效果评价

目的 为进一步了解胶体金免疫层析测定(GICA)法在检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的灵敏度及有无"带现象".方法 采用上海实业科华生物技术有限公司的酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒与杭州艾康生物技术有限公司的GICA试条对定值质控品和临床上800份标本进行检测,ELISA法以A值＜0.1为阴性,A值0.1～0.5为弱阳性,A值＞0.5为阳性.再用GICA法对其阳性、弱阳性及随机抽取阴性标本中的80份进行复检.结果 在800份标本中经ELISA法检出阳性42份,弱阳性8份,余为阴性.用GICA法复检出阳性45份,弱阳性3份,余为阴性.结论 GICA法与ELISA法相比较最大的优点是不受抗原过量的影响,即避免产生"带现象",因此具有较高的特异性.GICA的灵敏度要比成熟的ELISA法偏低.GICA法检测HBsAg方便、快速.     

荧光免疫层析法降钙素原检测试剂盒临床性能评估

  目的  评估荧光免疫层析法试剂盒检测降钙素原的性能。  方法  参照美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI)EP5-A和EP6-A文件方法, 对荧光免疫层析法试剂盒(TEBSUN)检测降钙素原的精密度、线性、方法学比对、相对灵敏度和特异性进行评估。  结果  荧光免疫层析法试剂盒检测降钙素原精密度较好, 低浓度和高浓度样本精密度的变异系数分别为8.3%和4.7%;线性验证试验结果显示, 在试剂盒标示的检测范围内具有良好的线性梯度关系(r=0.9989);方法学比对结果显示, 荧光免疫层析法试剂盒与梅里埃VIDAS酶联免疫荧光法分析系统的降钙素原试剂盒检测结果一致性良好(r=0.9770);在0.5和2.0 ng/ml两个浓度水平, 荧光免疫层析法试剂盒相对于酶联免疫荧光法试剂盒的灵敏度和特异性均大于86%, 与其测定结果的总体符合率为93.75%。  结论  荧光免疫层析法试剂盒检测降钙素原的精密度、线性、方法学比对、相对灵敏度和相对特异性等性能评价较好, 适用于临床标本检测。     

输血患者抗-HCV、HBsAg、抗-TP和抗-HIV检出情况分析

目的分析100例输血患者输血前丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、梅毒螺旋体抗体(抗-TP)和人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)检出情况。方法选择2016年1月至2018年12月该院收治的100例输血患者,输血前对患者血清中抗-HCV、HBsAg、抗-TP和抗-HIV进行检测。结果 100例输血患者中女性患者血清抗-HCV、HBsAg、抗-TP和抗-HIV 4种标志物的阳性率显著低于男性,差异有统计学意义(P0.05);不同年龄段患者抗-HCV和HBsAg的阳性率比较,差异有统计学意义(P0.05);抗-HCV阳性率最高的年龄段为20～40岁,HBsAg阳性率最高的年龄段为60岁;抗-TP和抗-HIV阳性率在各个年龄段比较,差异无统计学意义(P0.05);4种标志物阳性率排在前三位的科室分别为普外科(25.81%)、血液科(22.58%)和肿瘤科(16.13%)。结论在输血前对患者血清中抗-HCV、HBsAg、抗-TP和抗-HIV进行检测,有助于减少血液传染性疾病的传播,应予以高度重视。     

胶体金免疫层析法与ELISA检测HBsAg的比较

胶体金免疫层析法测定 ( GICA)乙型肝炎表面抗原 ( HBs Ag) ,具有简便、快速 ,不需要仪器设备等优点。我们介绍应用此法与酶联免疫吸附试验( ELISA)比较检测HBs Ag的结果。一、材料与方法1 .标本来源　本院患者和体检者血清 986份。2 .试剂　 GICA试剂由郑州博赛生物试剂实验研究所提供 ,ELISA试剂为上海科华生物技术有限公司产品。3.方法　 986份血清以 GICA、ELISA2种方法平行检测 ,操作均按说明书。二、结果和讨论1 .GICA的灵敏度　用 GICA试纸条检测 2ng/ml,1 mg/ml的质控品 ,其灵敏度可达 1 ng/ml,与文献报道相同。2 …     

血浆金标法快速筛查HBsAg在流动采血中的应用

HBsAg检测是保证输血安全的重要检测项目之一。在流动采血中，本站采用血浆金标免疫层析法检测试条，现场筛查无偿献血者HBsAg，经与EIA法比较，发现其特异性和灵敏度与EIA法相近，现报道如下。     

2种方法在HBsAg检测中的评价

目的探讨2种方法在检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)结果中的符合程度,并查找出现差异性的原因。方法分别采用胶体金免疫层析法(胶体金法)和酶联免疫吸附试验(ELISA)对HBsAg进行检测,并对结果进行统计学分析。结果 2种方法检测HBsAg阳性率无显著性差异,阳性符合率为97.84%。结论胶体金法具有快速、简便、人为影响因素少等特点,适合于无偿献血、急诊检验的初筛,但对HBsAg浓度较低的样品易出现假阴性,造成漏检。     

丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂盒的临床应用评价

目的采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测丙型肝炎病毒核心抗原（HCVcAg）。方法对苏州市吴中人民医院2011年2月至2012年2月的2 523份输血、手术前住院患者血清标本进行抗-HCV初、复检检测。将初、复检均阳性的其中10份、仅初检阳性的15份和仅复检阳性的17份血清标本分别采用ELISA检测HCVcAg和采用RT聚合酶链反应（RT-PCR）检测HCV。结果 ELISA检测HCVcAg阳性结果为4份（40%）。32份仅初检或复检抗-HCV阳性标本采用ELISA检测HCVcAg阳性6份,阳性率为18.75%。采用RT-PCR荧光定量检测HCV 10份初、复检抗-HCV均阳性的血清标本结果均为阳性,32份仅初检或复检抗-HCV阳性标本采用RT-PCR荧光定量检测HCV阳性5份,阳性率为15.63%。结论 HCVcAg的敏感性与RT-PCR荧光定量检测HCV类似,能对HCV的感染作出早期诊断。     

常规检测孕产妇及婴幼儿人类免疫缺陷病毒抗体的临床意义

目的研究对孕产妇及婴幼儿进行人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体常规检测的临床意义。方法用酶联免疫吸附试验对48450例患者血清进行HIV抗体初筛试验,阳性者送甘肃省疾病预防控制中心确认。结果2000-2007年,初筛阳性19例,确认阳性12例,HIV抗体检测不确定4例,阴性3例。12例阳性中,5～9岁儿童占6例,16-53岁占6例。结论甘肃省孕产妇和婴幼儿HIV感染已时有发生,为防止疾病扩散,应早发现、早治疗。针对孕产妇和婴幼儿开展HIV抗体常规检测具有十分重要的临床意义和社会意义。     

抗-TP 抗体临床检测结果分析及感染趋势评估

目的：了解广西钦州地区梅毒螺旋体（TP）临床感染状况,并分析其感染趋势。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对该院2009～2012年住院及门诊患者血液标本进行抗-TP 抗体检测。结果4年间共检测19362份标本,抗-TP 抗体阳性率为6．13％,性病泌尿科的阳性率高达29．42％,且逐年增长,其差异有统计学意义（χ2＝9．738,P ＜0．05）。女性的抗-TP 抗体阳性率（7．03％）高于男性（5．47％）,20～40岁组抗-TP 抗体阳性率最高。结论近年来钦州地区 TP 感染率逐年递增,应在预防宣传上加大力度,防止梅毒的进一步扩散。     

不同梅毒螺旋体抗体检测方法的临床应用评价

目的通过对不同梅毒血清抗体检测试验临床应用价值的评价,为临床医师合理选择梅毒血清抗体检测方法提供依据。方法使用的梅毒血清学试验分别是:梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、胶体金层析试验、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)。结果对该院2009年7月至2010年7月输血前、手术前患者6 539例和门诊患者714例进行TP-ELISA检测,前者阳性率为1.72%,后者阳性率为21.57%。其中207例TP-ELISA阳性的患者进行了TPPA确证,阳性率为91.8%;做胶体金层析试验快速检测,阳性率为97.1%;做TRUST检测,阳性率为19.81%。对诊断为梅毒TRUST滴度大于1∶4的17例患者进行抗梅毒治疗后,14例症状消失,复检TRUST滴度小于1∶2。结论 TP-ELISA是良好的梅毒感染筛查试验;TPPA用于梅毒感染的确证能有效排除TP-ELISA和胶体金层析试验的假阳性问题,同时检测TPPA滴度可提高梅毒感染的早期诊断率;TRUST不适合用于梅毒感染的筛查,但TRUST滴度检测有利于判断疗效。     

ELISA法检测抗-HIV结果影响因素的研究

目的探讨标本中溶血、脂血、血液保存液对抗-HIV ELISA法检测结果的影响。方法采用模拟对照实验,用溶血、脂血、血液保存液和小牛血清分别对抗-HIV阳性质控血清进行系列梯度稀释,用ELISA法检测,观察溶血、脂血、血液保存液对检测结果的影响。结果含有血液保存液的抗-HIV阳性质控血清的检测结果均明显低于小牛血清对照组(P<0.01),且在60%稀释度内,随血液保存液浓度逐步增加,降幅有加大趋势;而溶血、脂血对抗-HIV阳性质控血清的检测结果影响差异无统计学意义(P>0.05)。结论血液保存液对ELISA法检测抗-HIV结果影响明显;而溶血、脂血对抗-HIV ELISA法检测结果无影响。     

金免疫层析试验检测丙型肝炎抗体应用评价

目的评价金免疫层析试验（GICA）检测丙型肝炎抗体（抗-HCV）临床应用价值。方法对1611例样本（其中输血前常规检查样本1420例;抗-HCV阳性样本82例;HBsAg阳性样本18例;抗-HAVIgM阳性样本5例;类风湿患者样本15例;脂血样本12例;溶血样本14例;健康体检样本45例）。同时用酶联免疫吸咐试验（ELISA）和GICA检测抗-HCV。结果1611例样本,ELISA检测抗-HCV阳性168例;GICA检测抗-HCV阳性166例,且HBsAg阳性样本、抗-HAVIgM阳性样本、脂血样本、溶血样本和健康体检样本检测结果皆阴性,两种实验方法阳性检出率基本一致,差异无统计学意义（＞0.05）。结论利用GICA检测抗-HCV简便、快速,干扰因素少,可信度高,适用于常规检测抗-HCV。     

HBsAg弱阳性及HBsAg和HBsAb同时阳性的结果分析

目的对ELISA法检测乙肝五项结果中的HBsAg弱阳性结果及乙型肝炎HBsAg和HBsAb同时阳性的结果进行分析。方法从35 280例乙肝五项ELISA法检测结果中筛出HBsAg弱阳性115例,HBsAg和HBsAb双阳性结果95例,对筛出的210例标本再进行电化学发光(ECLIA)定量检测。结果 115例HBsAg弱阳性结果用ECLIA检测,结果一致为90例。符合率为78.3%。HBsAg和HBsAb双阳性结果95例用ECLIA检测,结果一致为11例。符合率为11.6%。结论 ELISA法检测乙肝五项对HBsAg弱阳性及HBsAg和HBsAb双阳性结果要慎重。HBsAg弱阳性结果中以HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性和HBsAg、HBcAb阳性标本占大多数。HBsAg和HBsAb同时阳性的结果可靠性差,要慎重发出报告。     

人类免疫缺陷病毒抗体酶联免疫诊断试剂的质量评价

目的 评价市场流通中HIV抗体酶联免疫诊断试剂的质量。方法 从使用单位抽取20家试剂，用国家参考品、确证为阳性的样品和阴性样品对其进行检测和分析。结果 20家试剂均符合200107批国家参考品的质量要求，对76份确证为阳性样品的检出率为100．0％，16家试剂对88份阴性样品的检出率为100．0％，3家试剂为98．9％，1家试剂为97．7％。结论 我国HIV抗体诊断试剂的灵敏度较高，但某些试剂的特异性仍需提高。     

胶体金法代替酶联免疫吸附法检测人血清蛋白HBsAg的研究

目的：探讨胶体金法和酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测人血清蛋白乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的一致性,并分析存在的差异。方法用胶体金法（血清/全血）法和ELISA对43批次市售人血清蛋白 HBsAg 进行检测,并将检测结果进行比较。结果 ELISA与胶体金法（血清）检测结果的一致性为100％;ELISA 与胶体金法（全血）检测结果一致性为65．12％。结论胶体金法简便快速,可以用于人血清蛋白 HBsAg快速筛查,但是还不能代替ELISA法作为常规检测人血清蛋白 HBsAg 的方法。     

应用CLSI EP12-A2文件评价HBsAg酶联免疫吸附试验试剂盒的分析性能

目的：应用CLSI EP12-A2文件评价乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒的性能,并比较2个不同厂家试剂盒之间的性能差异。方法按照CLSI发布的EP12-A2文件,对实验室使用的2个不同厂家的 HBsAg ELISA试剂盒的性能进行评价。结果2个厂家的试剂盒对分析物浓度为120％临界值的标本的检测阳性率均大于或等于95％,对分析物浓度为80％临界值浓度的标本的检测阴性率大于或等于95％,批内变异系数小于或等于15％,批间变异系数小于或等于20％。2个厂家试剂盒的灵敏度分别为94．2％（95％CI：84．3％∽98．0％）和92．3％（95％CI：81．8％∽97．0％）;特异性分别为98．0％（95％CI：89．5％∽99．6％）和100．0％（95％CI：92．8％∽100．0％）。2个厂家试剂盒灵敏度差值95％区间为-5．46％∽10．19％,特异性差值95％区间为-2．00％∽5．32％。结论2个厂家试剂盒检测 HBsAg 临界值＆#177;20％的浓度范围之外标本,能够得到稳定、可靠的检测结果,并具有较高的灵敏度和特异性,两者的检测灵敏度和特异性相近。