冰冻保存M-H琼脂的质量评价

目的 评价冰冻(-20℃)保存对M-H琼脂培养基的质量效果及有效期.方法 1将预先制好并经灭菌后的M-H琼脂培养基置于-20℃保存,在1月、3月、6月、1年、2年后取出,隔水加热浇制成平板,用标准质控菌株做质量监测;2将预先制好并经灭菌后的M-H琼脂培养基置于-20℃保存,1个月后取出,加热融解浇制一部分平板后再冰冻1天,如此反复6次,每次均用标准质控菌株来鉴定其质量.结果 1用标准质控菌株鉴定各期限冰冻保存的M-H琼脂培养基的质量,均与新鲜时一样,用丁胺卡那霉素或庆大霉素药敏试纸监测的抑菌圈直径均符合质量控制鉴定标准.2用标准质控菌株鉴定反复冻融6次以内的M-H琼脂培养基的质量均与新鲜时一样,均符合质量控制鉴定标准.结论 冰冻保存不影响M-H琼脂培养基的质量,其有效期长达2年,且可反复冻融6次,该保存法适用于基层医院,也为商品化批量生产提供了长期保存方式,值得推广应用.     

冰冻保存麦康凯琼脂的质量研究

目的评价冰冻（-20℃）保存对麦康凯琼脂培养基的质量效果及有效期。方法（1）将预先制好并经灭菌后的麦康凯琼脂培养基置于-20℃保存,在1、3、6个月和1、2年后取出,隔水加热浇制成平板,用标准质控菌株做质量控制;（2）将预先制好并经灭菌后的麦康凯琼脂培养基置于-20℃保存,1个月后取出,加热融解浇制一部分平板后再冰冻2d,如此反复6次,用标准质控菌株来鉴定其质量。结果（1）用标准质控菌株鉴定各期限冰冻保存的麦康凯琼脂培养基的质量,均与新鲜时一样,其中金黄色葡萄球菌不生长,大肠埃希菌生长,菌落呈红色与新鲜时一致,变形杆菌生长,菌落呈无色也与新鲜时一致,均符合质量控制鉴定标准。（2）用标准质控菌株鉴定反复冻融6次以内的麦康凯琼脂培养基的质量均与新鲜时一样,均符合质量控制鉴定标准。结论冰冻保存不影响麦康凯琼脂培养基的质量,其有效期长达2年,且可反复冻融6次,该保存法适用于基层医院,也为商品化批量生产提供了长期保存方式,值得推广应用。     

上海市M-H培养基抽样调查分析

目的　对所抽查的M H培养基质量进行调查分析。方法　通过对M H培养基作一般性状(厚度、pH值)、无菌试验以及性能检测以判断其质量。结果　所抽查的4种品牌成品培养基(15个批号)的一般性状与无菌试验结果均合格;性能检测中二价阳离子浓度全部全格;有2种品牌4个批号的M H培养基胸腺嘧啶或胸腺嘧啶核苷含量不合格。3种品牌(8个批号)的干粉自制培养基除厚度外(厚度<4mm的占18% ),pH值、无菌试验、二价阳离子浓度均合格;胸腺嘧啶或胸腺嘧啶核苷均不合格。结论　所抽的4种品牌成品培养基中只有2种M H培养基质量符合要求,市售3个品牌的水解酪蛋白干粉不适合制备M H培养基。     

上海市M-H培养基抽样调查分析

目的 对所抽查的M-H培养基质量进行调查分析.方法 通过对M-H培养基作一般性状(厚度、pH值)、无菌试验以及性能检测以判断其质量.结果 所抽查的4种品牌成品培养基(15个批号)的一般性状与无菌试验结果 均合格;性能检测中二价阳离子浓度全部全格;有2种品牌4个批号的M-H培养基胸腺嘧啶或胸腺嘧啶核苷含量不合格.3种品牌(8个批号)的干粉自制培养基除厚度外(厚度＜4 mm的占18%),pH值、无菌试验、二价阳离子浓度均合格;胸腺嘧啶或胸腺嘧啶核苷均不合格.结论 所抽的4种品牌成品培养基中只有2种M-H培养基质量符合要求,市售3个品牌的水解酪蛋白干粉不适合制备M-H培养基.     

国产双糖铁琼脂使用效果的评价及其质量控制方法

双糖铁培养基在鉴定革兰阴性杆菌中很重要。而某些国产双糖铁培养基上，细胞的硫化氢试验和氧化发酵试验不正确。经选择部分菌种对４个厂家生产的双糖铁培养基进行评价，认为培养基的ＰＨ是个关键，在ＰＨ７．５时双糖铁培养基才能正确反映上述两种试验的结果。建议选择硫化氢阳性的大肠埃希菌、弗劳地枸橼杆菌、腐败假单胞菌等针对硫化氢试验，不动杆菌针对氧化－发酵试验对双糖铁培养基进行质量控制。     

应用6种M-H培养基测试磺胺类药物抑菌圈直径的结果分析

目的对6种M-H培养基进行比较,选择测试磺胺类药物的最佳Mueller-Hinton(M-H)培养基。方法按照NCCLS的要求,采用纸片扩散法,在6种M-H培养基上用3株标准菌株粪肠球菌(ATCC29212),大肠埃希菌(ATCC25922),金黄色葡萄球菌(ATCC25923)对(SMZco)分别进行50次测定。用10株测试菌株在6种M-H培养基上对SMZco分别进行10次测定。结果美国Difco公司和英国Oxoid公司的M-H培养基在用粪肠球菌ATCC29212测试SMZco抑菌圈直径时,50次抑菌圈直径测定值均大于20mm,其他四种M-H培养基的测定值都小于20mm。用大肠埃希菌(ATCC25922),金黄色葡萄球菌(ATCC25923)测试SMZco抑菌圈直径时,6种M-H培养基的全部测定值都在NCCLS规定的范围内。10株测试菌株对SMZco的抑菌圈直径测定,除Difco公司和Oxoid公司M-H培养基外,其他4种M-H培养基均存在不同程度的双环现象。结论Difco公司和Oxoid公司M-H培养基合格,其他4种均不符合要求。     

冰冻保存血小板制备过程中的质量控制

22℃保存的血小板 ,保存期短 ,已不能满足日益增长的临床需求 ,且易受到细菌污染 ,而低温条件下贮存血小板 ,可使血小板得到长时间有效地贮存 ,从根本上解决了临床输注血小板供不应求的难题。冰冻保存血小板具有良好的临床止血效果 ,可有效防止细菌的污染 ,且具有长期大量保存稀有血型血小板的优点 [1] ,目前在临床已被广泛使用 ,但只有正确掌握冰冻血小板的制备和质量控制方法 ,才能提高冰冻血小板的数量和质量。1　制备过程中易出现的质量问题　冰冻保存血小板是由全血制备成富含血小板血浆 ( FPRP) ,在无菌条件下加入防冻剂二甲基亚砜 …     

两种不同方法制备40％（重量体积比）甘油冰冻保存人红细胞-80℃的破损率

1981年以来，作者一直使用海军血液研究室冰冻法来制备人冰冻红细胞。首先红细胞用40％(重量体积比)甘油处理，除去上浮甘油，然后冰冻在800mlPVC塑料袋中，外包-聚酯塑料袋，再放置于-硬皱卡纸盒中，在-80℃机械冰箱内保存。1989年，作者实验室开始一项研究，来比较Meryman-Hornblower法制备的运输以后的被损率和NBRL法制备的运     

两种冰冻保存Rh抗血清效价变化观察

为了观察Rh抗血清在低温保存时间及效价变化．笔者对-20℃和-45℃两种冰冻保存3年Rh抗血清进行抗体效价测定，并用四种方法进行对比观察。现报告如下。     

两种简便保存菌种的方法比较

目的为寻找一种较为简便经济实用的临床菌种保存方法,对纸片法与CRYOBANK菌种保存管法进行比较。方法将需保存的菌种纯化后分别用纸片法和CRYOBANK菌种保存管保存1、2、3、6、9、12个月后,进行复苏,比较存活率。结果苛氧菌用纸片法和CRYOBANK菌种保存管保存时,3个月后两种方法的存活率差异无统计学意义,保存6个月后两种方法的存活率差异有统计学意义;非苛氧菌用纸片法和CRYOBANK菌种保存管保存时,在各时间段两种方法的存活率差异无统计学意义。结论从经济实用的角度出发,非苛氧菌保存1年时适于用纸片法,而苛氧菌保存3个月内可用纸片法,保存6个月以上时必须用CRYOBANK菌种保存管。     

两种方法保存无菌镊子的细菌学评价

采用细菌学评价方法对两种方法保存无菌镊子的效果进行了观察。结果,用含20 g/L戊二醛消毒剂湿式保存1周,合格率可保持在95.8%;用干式保存法,2 h后即出现阳性,6 h后合格率只有84.9%。结论,用灭菌剂湿式保存无菌镊子比干式保存法有效时间长,但灭菌剂保存使用时需要冲洗,比较麻烦。     

国产双糖铁琼脂使用效果的评价及其质量控制方法

双糖铁培养基在鉴定革兰阴性杆菌中很重要。而某些国产双糖铁培养基上，细菌的硫化氢试验和氧化发酵试验不正确。经选择部分菌种对４个厂家生产的双糖铁培养基进行评价，认为培养基的ｐＨ是个关键。在ｐＨ７．５时双糖铁培养基才能正确反映上述两种试验的结果。建议选择硫化氢阳性的大肠埃希菌、弗劳地枸橼酸杆菌、腐败假单胞菌等针对硫化氢试验，不动杆菌针对氧化。发酵试验对双糖铁培养基进行质量控制。     

保存期末红细胞冰冻保存效果体外评估

目的探讨应用冰冻技术将离体后较长时间的红细胞的保存期延长至数年,确保解冻后红细胞的质量,提高输血的应急能力。方法收集血站2015年10月至2016年2月CPD保存液保存了34d的红细胞(2u/袋)30袋,利用全自动细胞处理系统(Haemonetics ACP215)对红细胞进行冰冻及解冻复苏操作,比较产品与《全血与成分血质量要求》的差异性。结果利用全自动细胞处理系统(Haemonetics ACP215)对红细胞进行冰冻及解冻操作,终产品在外观、容量、血红蛋白含量、游离Hb、甘油残留量、白细胞残留量和细菌培养结果等方面与标准无显著差异。结论无论从延长红细胞保存时间,还是提高输血应急能力,冰冻红细胞都起到了实效。     

质控血清的不同保存方法对测定结果的影响

目的：评价进口质控血清溶解后的不同保存方法对测定结果的影响。方法：将溶解后的进口质控血清用两种不同方法进行保存，用Dimendion RxL全自动生化分析仪对两种血清分别进行平行测定20项生化指标。结果：分装后冰冻保存的血清稳定性明显好于不分装组，除了TG外，CV均小于5％，而不分装组CV有近1／3的测试项目结果高于5％。结论：质控血清溶解后分装冰冻，使用时再复融是一种较好的保存方法。     

应用MRSA ID产色琼脂培养基等四种方法检测和鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的比较MRSAID产色琼脂培养基及其他3种方法检测和鉴定甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）。方法选择临床118株葡萄球菌用（118株葡萄球菌中金黄色葡萄球菌108株，凝固酶阴性葡萄球菌10株）细菌鉴定仪鉴定到种，用MRSAID琼脂筛选法、苯唑西林平板筛选法、头孢西丁纸片法比较MRSA的检测情况，同时检测金黄色葡萄球菌的mecA基因作为金标准，同时用大肠埃希菌ATCC25922，金黄色葡萄球菌ATCC25923，铜绿假单胞菌ATCC27853和粪肠球菌ATCC29212做干扰试验。结果金黄色葡萄球菌用PCR检测其meeA基因，共检测到80株阳性菌株；用MRSAID琼脂筛选法符合率为100％，苯唑西林平板筛选法符合率为97．5％，头孢西丁纸片法符合率为100％；有1株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）和1株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）对MRSAID琼脂的显色有干扰，出现了浅绿色的细小菌落。用标准菌株做对照均没有生长。结论MRSAID琼脂平板可以对MRSA进行主动快速监测。     

问：β溶血链球菌药敏试验如何进行质量控制？

答：β溶血链球菌包括具有A群（化脓性链球菌）、B群（无乳链球菌）C或G群抗原形成较大菌落（直径≥0．5mm）的化脓性链球菌，需要用肺炎链球菌ATCC49619进行质量控制。需要使用M-H琼脂＋5％脱纤维羊血培养基，放35℃，5％CO2，20～24h读取结果。     

温度对冰冻红细胞保存的影响

目的观察不同温度条件下红细胞在冰冻、融化、洗涤后的质控指标,分析不同的保存、融化温度对红细胞的影响.方法各取20袋保养液为输血用复方枸橼酸钠抗凝剂(ACD-B)的全血,于采血后6 d内离心制成红细胞悬液,直接滴入(红细胞表面温度在5℃～10℃)红细胞低温保护剂或将红细胞和保护剂在37℃水浴后(红细胞表面温度20℃～22℃)再保存,-80℃冰冻保存数日后取出融化、洗涤.分别于融化后以及洗涤后立即取样测定红细胞回收率、游离血红蛋白.结果与未经加温而直接保存的红细胞相比,37℃水浴后的冰冻红细胞,融化洗涤后的红细胞回收率明显升高,游离血红蛋白明显减少.结论红细胞及低温保护剂经过37℃水浴后能更好地冰冻保存红细胞.但由于操作条件的限制,红细胞融化、洗涤后必须24 h内输注.     

支原体确证琼脂培养基检测泌尿生殖道支原体的优势分析

[目的]评价支原体确证琼脂培养基在诊断泌尿生殖道标本中锵脲脲原体（Ureaplasma urealyticum，Uu）和人型支原体（Mycoplsma hominis，Mh）的优势，为提高临床泌尿生殖道支原体感染实验室诊断的准确性提供依据。[方法]取经过12h Uu／Mh肉汤增菌的临床疑似标本洗脱液直接接种于支原体确证琼脂培养基，在5％CO2和95％N2的气体环境中培养24h～48h后，低倍镜下观察特征性菌落，计数其菌落形成单位（Colony Forming Units，cfu）。同时用支原体药敏试剂盒作对照，观察Uu孔、Mh孔及计数孔颜色的变化。[结果]172例泌尿生殖道标本中，支原体确证琼脂培养基检出Uu感染59例，Mh感染19例，混合感染16例，Uu计数≥10^4cfu者40例，Mh计数≥10^4cfu者15例；支原体药敏试剂盒检出uu感染63例，Mh感染13例，混合感染13例，uu计数≥10^4cfu者45例，Mh计数≥10^4cfu者10例。[结论]支原体确证琼脂培养基，简便易行，观察菌落准确性高，提高Mh的检出率及液体培养基的确证性。     

红细胞保存研究的新策略——冰冻干燥

成分血的输注在发达国家已占血液输注的90%以上,因此红细胞的保存研究倍受重视.血细胞的保存通常是在4℃条件下进行,保存时间可以有效地延续至42d.特殊情况下实行深低温保存,放在-80℃冰箱或液氮(-196℃)中长期保存[1].这两种方法都需要低温设备,在进一步改进保存技术的研究中,冰冻干燥红细胞已成为细胞保存研究的新策略,引起了人们的关注.现将以此为主要内容的研究作一简要文献回顾.