雷公藤多苷诱导大鼠肾细胞凋亡的NF-KB信号转导通路机制研究

目的:通过给予不同剂量的雷公藤多苷,观察在使用雷公藤多苷后不同时间点,大鼠肾脏损伤的情况,从"时-效"、"量-效"角度研究其对肾毒性的作用,并探讨雷公藤多苷的肾毒性毒理机制方法:SD大鼠灌胃不同剂量的雷公藤多苷,连续给药5周,动态处死大鼠,检测大鼠体重变化、肾功、肾病理,研究雷公藤多苷对大鼠肾的毒性作用;并检测肾凋亡相关基因Fas、Bcl-2、p53等的表达;流式细胞术检测大鼠肾细胞凋亡百分率:Western Blot检测NF-KB在肾组织中的表达情况,探讨雷公藤多苷对大鼠肾的免疫毒理机制.结果:雷公藤多苷对大鼠体重、脏器指数、肾功和肾病理形态学结果表明,雷公藤具有确定的肾毒性作用,且以剂量依赖的方式上调肾细胞表面膜分子Fas、p53、NF-kB蛋白表达;下调bcl-2表达;并可使肾细胞凋亡数增多.结论:雷公藤多苷给药剂量在6.25 mg/kg～56.25 mg/kg范围内,表现出明显的量效关系,给药剂量越高,其肾毒性越大,雷公藤多苷可诱导肾细胞凋亡,且*诱导肾细胞凋亡与NF-kB蛋白表达有关,通过NF-kB这条信号转导通路诱导肾细胞凋亡是其毒性作用的可能机制之一.     

雷公藤多甙诱导类风湿关节炎滑膜细胞凋亡的研究

目的:评估抗风湿中药雷公藤多甙(TripterygiumGlycosides,TG)诱导滑膜细胞凋亡(Apo)在类风湿关节炎(RA)治疗中的作用,探讨其药理机制。方法:用光镜、电镜、共聚焦显微镜、流式细胞仪(FCM)及DNA凝胶电泳检测不同浓度TG诱导RA滑膜细胞凋亡情况。结果:TG组凋亡细胞百分率显著高于骨性关节炎(OA)组(P<0.01)和正常人组(P<0.01),TG组凋亡细胞百分率为(55±11.2)%。结论:TG可以诱导滑膜细胞凋亡,并且这可能是其治疗RA的机制之一。     

雷公藤诱导细胞凋亡的研究进展

雷公藤Tripterygium wilfordii提取物在临床上常用于治疗类风湿关节炎等多种疾病，其疗效已被广泛认可，近5年来国内外学者从其提取物诱导细胞凋亡的角度，对其药理机制进行了细胞分子水平的探讨，现对其研究进展进行综述。     

雷公藤甲素诱导大鼠肾上腺皮质细胞凋亡研究

目的：了解雷公藤甲素诱导大鼠肾上腺皮质细胞凋亡的发生。方法：体外分离培养大鼠肾上腺皮质细胞,以蛋白因子添加素V和碘化丙啶（PI）联合标记,流式细胞仪检测,观察雷公藤甲素诱导细胞凋亡的特征。结果：雷公藤甲素以时间和剂量依赖的方式诱导细胞凋亡,0、12．5、25、50、100和200μg／L雷公藤甲素处理细胞2h,凋亡率分别为1．67％、16．54％、32．53％、47．62％、57．12％72．77．45％;100μg／L雷公藤甲素染毒0、0．5、1、2、3和4h,细胞凋亡率分别为1．12％、14．37％、35．26％、4975％、62．65％及78．46％。结论：雷公藤甲素可诱导肾上腺皮质细胞凋亡。     

甘草酸拮抗雷公藤多苷所致肾毒性的分子机制研究

目的 从转运体角度探究甘草酸拮抗雷公藤多苷所致肾毒性的分子机制.方法 采用网络药理学预测雷公藤多苷和甘草酸作用于肾毒性的靶点,从中选出与肾脏转运体有关的靶点,并通过动物实验对其进行验证.采用ELISA法测定大鼠血清中BUN和Scr含量,通过HE染色判断大鼠肾脏病理情况,采用qPCR和Western blot检测转运体基...     

芒果苷诱导白血病K562细胞凋亡机制的研究

目的研究芒果苷诱导慢粒白血病细胞系K562细胞凋亡的机制。方法采用RT-PCR检测芒果苷(25~200μmol/L)处理(24、48、72、96h)后K562细胞中bcl-2 mRNA、bax mRNA、survivin mRNA基因表达变化;采用Western blotting方法检测K562细胞BCR/ABL融合蛋白质P210水平。结果芒果苷作用K562细胞后,P210蛋白质水平下调,并呈时间及剂量依赖性,bax基因表达显著上调,bcl-2基因表达轻度下调,survivin mRNA基因表达下调。结论芒果苷诱导K562细胞凋亡的机制可能是通过下调BCR/ABL融合蛋白质P210、bcl-2和sur-vivin mRNA基因表达及上调bax基因表达来实现的。     

雷公藤内酯醇通过p38MAPK信号通路诱导Hut102细胞凋亡

目的 探讨雷公藤内酯醇(triptolide,TP)诱导皮肤T细胞淋巴瘤蕈样肉芽肿细胞株Hut102的凋亡及其机制.方法 体外培养的Hut102细胞与12.5、25、50、100 nmol/L雷公藤内酯醇共同孵育,分别在24、48、72 h用MTT法检测Hut102细胞的增殖抑制率,Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术分析细胞凋亡,Western blot检测Hut102细胞中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38)、caspase-3蛋白的表达水平.结果 不同浓度雷公藤内酯醇(12.5、25、50、100 nmol/L)作用Hut102细胞24 h后的增殖抑制率分别为8.67%、30.02%、52.54%、59.62%.Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术检测经25、50、100 nmol/L雷公藤内酯醇处理24 h后Hut102细胞凋亡率分别为9.19%、21.49%、26.34%,当50 nmol/L雷公藤内酯醇组预先用p38MAPK特异性抑制剂SB203580干预后,Hut102细胞凋亡率下降为14.35%.不同浓度雷公藤内酯醇(50、100 nmol/L)处理Hut102细胞后p38、caspase-3蛋白的表达被激活,同样50 nmol/L雷公藤内酯醇组也预先用p38MAPK特异性抑制剂SB203580干预,结果p-p38的表达降低,caspase-3激活被抑制.结论 雷公藤内酯醇可以抑制Hut102细胞的增殖,其作用机制可能是通过激活p38MAPK信号通路使部分Hut102细胞产生凋亡.     

雷公藤多苷对肺纤维化大鼠的干预作用

目的 观察雷公藤多苷对肺纤维化大鼠肺形态学、凝血酶原时间、趋化因子及细胞凋亡的影响,探讨其作用机制.方法 大鼠气管内注入博来霉素造模,随机分为模型组、雷公藤多苷高剂量组、低剂量组、泼尼松组、空白组,造模次日起每天给药,28d后处死大鼠,观察大鼠肺形态学变化、血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血...     

中药复方对抗雷公藤多苷毒性的研究Ⅲ.对雷公藤多苷抗炎作用的影响

以瓜菱、石斛、白芍、川芎、生地、元参、牛膝、五味子、菟子、枸杞子、车前子、覆盆子、益母草、泽兰、麦冬、当归组成的中药复方,其水提剂１１．２７,５．６４,２．８２ｇ／ｋｇ与等量雷公藤多苷组成复方制剂级动物ｉｇ。小剂量复方中药＋雷公藤多苷组对小鼠急性、慢必琰症及大鼠急性和免疫炎症均有明显的抑制作用,且该作用优于等剂量的雷公藤多苷。中药复方剂量过大可拮抗雷公藤多苷的抗炎作用。     

雷公藤多苷对糖尿病大鼠肾组织缺氧诱导因子-1α及内皮素-1表达的影响

目的研究雷公藤多苷对糖尿病大鼠肾组织缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及内皮素-1（ET-1）表达的影响,探讨雷公藤多苷对
糖尿病大鼠肾脏损伤的保护作用及可能机制。方法采用链脲佐菌素（55 mg/kg体质量）诱导致糖尿病大鼠,动物分为正常对照
组,糖尿病对照组,雷公藤多苷低、高剂量治疗组（8、16 mg/kg）及阳性对照组（厄贝沙坦50 mg/kg）,灌胃给药,每日1次,8周末
检测大鼠空腹血糖（BG）,血肌酐（Scr）,尿素氮（BUN）,24 h尿蛋白（24 h Upro）;HE染色光镜观察肾组织形态学的改变;病理图
像分析系统分析平均肾小球面积（MGA）及平均肾小球体积（MGV）;免疫组织化学及Western blot检测肾组织HIF-1α及ET-1蛋
白表达;实时荧光定量PCR检测肾组织HIF-1α及ET-1mRNA表达。结果糖尿病大鼠肾组织HIF-1α及ET-1表达增高。与糖尿
病对照组比较,各治疗组大鼠Scr、BUN、24 h Upro、肾重指数（KW/BW）、MGA、MGV显著降低,肾组织病理形态学明显改善;
HIF-1α、ET-1mRNA及蛋白表达显著减少;雷公藤多苷高剂量组各指标改善较显著。相关性分析显示ET-1表达与HIF-1α表达
呈正显著相关,HIF-1α及ET-1mRNA及蛋白表达与肾重指数（KW/BW）、24 h Upro、MGA、MGV呈显著正相关。结论糖尿病
大鼠肾组织HIF-1α及ET-1表达增加,雷公藤多苷可通过抑制HIF-1α及ET-1的表达,改善糖尿病大鼠肾脏损害,延缓糖尿病肾
病的发生发展。
     

中药复方对抗雷公藤多苷毒性的研究：Ⅱ.对抗雷公藤多苷对雌性大鼠生 …

以瓜蒌，石斛，白芍，川芎，生地，元参，牛膝，五味子，兔丝子，枸杞子，车前子，覆盆子，益母草，泽兰，麦冬，当归组成的中药复方，其水提剂１１．２７、５．６４，２．８２ｇ／ｋｇ与雷公藤多苷合用给大鼠ｉｇ，３个剂量均能不同程度地纠正雷公藤多苷所致的大鼠动情周期异常、子宫重量减轻及子宫肌层变薄，光镜下各试验组卵巢均无明显改变。     

大鼠肾切除术后留存肾代偿早期细胞凋亡状态的研究

探讨调控脏器形态稳定的重要因素－细胞凋亡在肾代偿性生长中的作用。方法用荧光染色、ＤＮＡ梯度电泳分析、原位ＤＮＡ片段末端标记等凋亡检测的最新手段，系统研究青、老年大鼠正常肾及代偿肾内细胞凋亡情况的差异。结果青年正常肾无细胞凋亡表现，而老年正常肾皮、髓质小管均有细胞凋亡存在，且皮质凋亡水平高于髓质；青年肾代偿３天时细胞凋亡明显增加，且髓质高于皮质，老年肾代偿３天时，留存肾细胞凋亡水平明显降低，且以皮质降低更为明显。结论凋亡是肾代偿性生长形态学改变的重要组成部分，肾代偿性生长的年龄差异与细胞凋亡有关。     

雷公藤多甙对肾性蛋白尿患者外周血单个核细胞作用的研究

通过琼脂糖凝胶电泳, Ｈ Ｅ 染色和流式细胞仪检测用雷公藤多甙治疗肾性蛋白尿患者 ２ 周后外周血单个核细胞的凋亡情况。经治疗后患者外周血单个核细胞在形态上出现典型的细胞核固缩、碎裂,琼脂糖凝胶电泳显现特征性的“梯状”带,流式细胞仪上出现亚二倍体峰。提示雷公藤多甙能诱导肾性蛋白尿患者外周血单个核细胞的凋亡。     

雷公藤多苷对慢性肾炎的作用机制研究

目的 探讨雷公藤多苷治疗慢性肾炎大鼠的作用机制.方法 采用C-BSA肾炎大鼠模型,将SD大鼠分为正常对照组、模型组、肾炎康复片组、雷公藤多苷15、7.5、3.75 mg/kg剂量组.观察雷公藤多苷对慢性肾炎大鼠的尿蛋白、血清中BUN、Cr、TNF-α、IL-1、IL-6的含量.结果 雷公藤多苷能够有效地降低尿蛋白、血清中BUN、Cr、TNF-α、IL-1、IL-6的含量,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01).结论 雷公藤多苷对慢性肾炎大鼠具有一定的保护作用.     

黄芪总苷诱导NB4细胞凋亡的线粒体通路的研究

目的 研究黄芪总苷(TA)对体外培养的人早幼粒细胞白血病细胞株凋亡的线粒体传导通路的影响.方法 将不同浓度的TA(200、300、400 μg/ml)作用于NB4细胞,体外培养48 h,使用流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位的变化;采用RT-PCR测定细胞内Bcl-2和Bax mRNA变化;使用分光光度法测定细胞内caspase-3的活性变化.结果 TA作用于NB4细胞48 h后,各浓度组的凋亡率与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),在TA(200、300、400 μg/ml)组凋亡率呈浓度依赖性增加,各组之间差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,各浓度组Bcl-2 mRNA及线粒体膜电位的表达明显下降,caspase-3的表达明显升高(P<0.05);Bax mRNA的表达无明显差异.结论 TA可以诱导NB4细胞凋亡,具有体外抗白血病效应,并且可能通过线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡.