基于Rho/Rho-kinase信号通路探讨丙泊酚减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的效果

目的 基于Rho/Rho-kinase信号通路探讨丙泊酚减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的效果.方法 SD大鼠100只分成:对照组、模型组、丙泊酚低、中、高剂量组(20.0、40.0、80.0 mg/kg),模型组、丙泊酚低、中、高剂量组建立脑缺血再灌注损伤模型,建模成功后,丙泊酚低、中、高剂量组给予相应剂量丙泊酚灌胃,对照组...     

脑缺血再灌注损伤涉及的信号通路研究进展

缺血性脑血管疾病严重危害着人类的生命健康,目前最有效的治疗方法是及时恢复血流实现再灌注,但在挽救患者生命的同时又带来了新的损伤,即脑缺血再灌注损伤.脑缺血再灌注损伤作用机制复杂,涉及的相关信号通路十分广泛,如磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路、NF-κB信号通路、丝裂原活化蛋白激酶...     

地氟烷预处理对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨地氟烷预处理对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法 96只Wistar雄性大鼠随机分为4组：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）、地氟烷组（D组）、5-羟葵酸组（5-HD组），每组24只。采用双侧颈总动脉夹闭＋全身低血压（MAP控制在35～45mmHg）法制备全脑缺血再灌注损伤模型，实验过程中监测MAP、血气各项指标。全脑缺血10min恢复灌注。D组脑缺血前吸入5．9％（1．0MAC）地氟烷1h，5-HD组在吸地氟烷前即刻静脉注射5-羟葵酸5mg／kg。分别于再灌注6、24和48h进行神经行为学评价，神经行为学评价后各处死8只大鼠，光镜下观察海马CA1区组织病理学改变，并计数该区神经细胞存活数目。结果缺血再灌注导致大鼠出现行为学缺陷，D组再灌注各时点、5-HD组再灌注6h神经行为学好于I／R组，I／R组再灌注各时点海马CA1区存活神经细胞数目减少，D组再灌注各时点、5-HD组再灌注6h海马CA1区存活神经细胞数目增加（P〈0．05）。结论1．0MAC地氟烷预处理对大鼠全脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用，可能与ATP敏感性钾离子通道的激活有关。     

氢溴酸西酞普兰预处理对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤的影响

目的 观察氢溴酸西酞普兰预处理对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤所致脑梗死体积、海马CA1区细胞凋亡及超微结构的影响.方法 将90只SD大鼠分为假手术组、缺血再灌注组(模型组)、氢溴酸西酞普兰预处理高、中、低剂量组(给药剂量分别为20、10、5 mg/kg,每天灌胃给药1次,持续7 d),末次灌胃2h后采用线栓法制作大脑中动脉缺血2h再灌注模型,再灌注24h后,红四唑氮(TTC)染色法检测脑梗死体积,透射电镜观察损伤侧海马CA1区细胞超微结构,TUNEL法检测损伤侧海马CA1区细胞凋亡并采用激光共聚焦显微镜进行观察和数据测定.结果 经氢溴酸西酞普兰预处理各剂量组与模型组相比,大鼠脑梗死体积减小,差异有统计学意义(P＜0.05);海马CA1区凋亡细胞表达明显减弱,差异有统计学意义(P＜0.05);透射电镜观察可见氢溴酸西酞普兰预处理各剂量组大鼠损伤侧脑海马CA1区细胞超微结构损伤较模型组明显减轻;以上改变高剂量预处理组效果更为明显.结论 氢溴酸西酞普兰预处理可减少脑缺血再灌注损伤所致细胞凋亡和梗死面积,具有脑保护作用.     

全脑缺血再灌注对大鼠海马及齿状回核酸的影响

目的：观察全脑缺血再灌注对大鼠海马及齿状回核酸的影响。方法：采用4－血管阻断（4－VO）方法建立大鼠急性全脑缺血模型,用吖啶橙染色法进行全脑缺血再灌注对大鼠海马及齿状回的核酸保护作用的研究。结果：与正常对照组比较,全脑缺血再灌注大鼠海马及齿状回核酸吖啶橙染色后的荧光强度明显减弱。结论：缺血再灌注可导致大鼠海马及齿状回核酸损伤。     

大鼠脑缺血/再灌注后海马CA1区HSP90的表达

目的观察大鼠脑缺血/再灌注后海马CA1区热休克蛋白90（HSP90）的表达。方法应用免疫印迹法观察大鼠脑缺血/再灌注后不同时间点海马CA1区HSP90的表达。结果缺血/再灌注30 min后HSP90的表达开始增高,6 h达最高峰,持续升高至第3天,6 h后HSP90的表达与对照组相比较有显著性差异（P〈0.05）。结论大鼠脑缺血/再灌注早期可诱导海马CA1区HSP90的合成及表达增加,表明HSP90参与了脑缺血有关的病理及生理过程。     

巴豆叶对脑缺血再灌注大鼠海马CA1区JNK蛋白表达的影响

目的 探讨巴豆叶对脑缺血再灌注模型大鼠海马CA1区c-Jun-氨基末端激酶（JNK）通路的影响。方法将216只SD雄性大鼠按随机数表法分为假手术组、模型组、尼莫地平组、巴豆叶低、中、高浓度组,各组按取材时间点不同又分为1 d、3 d和7 d亚组,尼莫地平组灌胃尼莫地平混悬液1.08 g·L-1,巴豆叶低、中、高浓度组灌胃药物浓度分别为60 g·L-1、120 g·L-1、180 g·L-1,假手术组和模型组灌胃等体积蒸馏水,2次/d。以Garcia JH评分法进行神经功能评测,HE观察神经元形态;TUNEL法检测大鼠海马CA1区细胞凋亡;Western blot检测蛋白表达。结果 1）神经功能评分：同一处理时间下,模型组和各干预组评分较假手术组均降低（P均<0.01）;各干预组评分较模型组均升高,随着干预浓度的增加,评分也逐渐升高,尼莫地平组评分高于低、中浓度组（P均<0.01）;除假手术组外,各组评分均随着干预时间的延长升高（P均<0.01）。2)HE染色：模型大鼠神经细胞出现不同程度的损伤;各药物干预组均能不同程度改善损伤;随着干预浓度的增加,修复程度也逐渐明显,...     

DJ-1通过Nrf2信号通路减轻大鼠脑缺血-再灌注引起的氧化应激损伤

目的 探讨DJ-1（Park7）在脑缺血再灌注损伤中的抗氧化作用及相关机制。方法 构建SD大鼠大脑缺血再灌注损伤模型,将SD大鼠随机分为假手术组、MCAO 组、Scramble组和 DJ-1 siRNA组、NC组和 Overexpression组。通过DJ-1 siRNA干扰片段干扰DJ-1的表达,以及DJ-1过表达腺相关病毒载体过表达DJ-1的表达。通过测定MCAO/R后各组神经功能学评分和脑含水量,同时应用HE和Nissl 染色法评估脑组织的形态学变化和皮层梗死区神经元的损伤情况,评价 DJ-1 对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。用超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）分析脑组织氧化应激状态。免疫印迹法检测脑组织中 DJ-1,Nrf2,HO-1以及NQO1的表达水平,以及免疫荧光染色法观察Nrf2的表达及核转位情况,探讨DJ-1减轻大鼠脑缺血再灌注氧化应激损伤的可能机制。结果 与 MCAO 组相比,DJ-1 siRNA 组的神经功能学评分（P?0.001）、脑含水量（P?0.001）均明显增加;HE 和Nissl 染色显示脑缺血区神经元损伤进一步加重;SOD 含量进一步降低,MDA 含量进一步增加（P?0.001）;干扰DJ-1后,其蛋白水平明显降低（P=0.003）,同时Nrf2及其下游的HO-1和NQO1也明显降低（P?0.001）。而过表达DJ-1以后,其DJ-1 （P=0.006）、Nrf2（P=0.006）及其下游的HO-1（P=0.004）和NQO1明显增加（P=0.014）。结论 DJ-1作为体内重要的神经保护因子,可以减少大鼠脑缺血再灌注氧化应激损伤,并可能是通过激活Nrf2信号通路来实现的。     

大鼠全脑缺血再灌流后海马CA1区P53mRNA及蛋白的表达

海马对缺血损伤尤其敏感,以往认为,脑缺血后海马ＣＡ１区迟发性神经元死亡（ＤＮＤ）的发生主要是一种被动的坏死过程［１］。然而,近年来的资料表明,主动的细胞凋亡与ＤＮＤ紧密相关［２,３］,但目前对脑缺血后细胞凋亡的分子机制尚不清楚。Ｌｉ等［４］报道,ｐ５...     

丙泊酚对糖尿病SD大鼠局部脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的 采用糖尿病Sprague-Dawley(SD)大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,观察神经功能缺损评分、脑梗死体积、脑组织病理形态改变情况,探讨预防性应用丙泊酚对糖尿病sD大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤是否有保护作用.方法 50只雄性健康sD大鼠,腹腔注射链脲佐菌素(strepozotocin,STZ)55 mg/kg复制糖尿病大鼠模型,72h后剪尾尖采血测定血糖,以后每周测血糖,血糖持续≥16.7mmol/L为糖尿病大鼠(50只大鼠造模成功36只).36只糖尿病大鼠,建立高血糖模型后随机分为2组:高血糖组(n=18)、丙泊酚+高血糖组(简称丙泊酚组n=18),各组按脑缺血90 min再灌注3 h(n=6)、6 h(n=6)、24 h(n=6)分为3个亚组.采用线栓法制作大脑中动脉栓塞模型.比较丙泊酚组与高血糖组各再灌注时间点神经功能缺损评分、脑梗死体积和脑组织病理形态的改变.结果 相同再灌注时间点,丙泊酚组比高血糖组神经功能缺损程度减轻,P<0.05;相同时间点丙泊酚组较高血糖组梗死体积缩小,其中再灌注3、6 h组间比较P<0.05,再灌注24 h组间比较P<0.01.结论 预防性应用丙泊酚能减轻高血糖条件下的局灶性脑缺血再灌注损伤,减轻经功能缺损症状,缩小梗死体积.     

电针预处理对缺血再灌注损伤大鼠脑自由基含量的影响

目的：观察电针预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织的二醛（MDA）,谷胱甘肽（GSH）含量的影响,方法：用线栓法复制大鼠局灶性脑缺血模型,观察大鼠缺血2h再灌注后24h脑组织MDA,GSH的含量,结果：电针预处理能够显降低脑缺血再灌注大鼠脑组织MDA的含量（P＜0．01）,同时GSH含量有升高趋势（P＞0．05）,结论：电针预处理可以抑制大鼠脑缺血再灌注过程中自由基的生成,增强自由基清除力,从而起到抗脑缺血再灌注引起的自由基损伤,实现对中枢神经元的保护作用。     

大鼠脑缺血再灌注时右美托咪定对JAK1/STAT1信号通路的影响

目的:探讨大鼠脑缺血再灌注时右美托咪定对JAK1/STAT1信号通路的影响。方法:选取体重220～260g,SD大鼠40只,随机分为5组(n=8):假手术组(C组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、右美托咪定25μg/kg组(D1组)、右美托咪定50μg/kg组(D2组)、右美托咪定75μg/kg组(D3组),实验开始时,C组仅进行外科操作暴露颈外动脉而不造成脑缺血,I/R组进行脑缺血操作30min前腹腔内注射无菌生理盐水1ml,D1组、D2组、D3组分别于脑缺血操作30min前腹腔内注射右美托咪定25μg/kg、50μg/kg、75μg/kg(均稀释至1ml)。缺血120min后,将I/R组、D1组、D2组、D3组预留的尼龙线线栓退出,恢复大脑中动脉血供,实现再灌注。术后24h后,每组选取2只大鼠取脑组织采用Western Blot方法检测其p-JAK1、p-STAT1表达水平。结果:脑缺血再灌注时,脑皮质缺血半暗带区p-JAK1、p-STAT1的表达均增高,在右美托咪定治疗组中p-JAK1、p-STAT1的表达均有所减低,其中右美托咪定50μg/kg组降低最为明显。结论:右美托咪定对大鼠脑缺血再灌注损伤时保护作用与其下调JAK1/STAT1信号转导通路有关,其中右美托咪定50μg/kg组更为明显。     

异丙酚对缺血性脑损伤的抗氧化应激作用

氧化应激与缺血性脑损伤有关,氧化剂在脑损伤中起到重要作用。这些在氧化应激过程中产生的氧化剂直接参与细胞大分子(例如脂质、蛋白和核苷酸)的氧化损伤,最终导致细胞死亡。许多研究显示,丙泊酚具有一定的脑保护作用。异丙酚可通过提高脑缺血/再灌注后大鼠脑组织的抗氧化能力,减少脂质过氧化和抑制兴奋性氨基酸的兴奋性毒性而发挥对脑缺血/再灌注时的保护作用。     

糖尿病对大鼠心脏缺血/再灌性室颤及缺血预处理的影响

采用大鼠四氧嘧啶糖尿病模型，观察糖尿病对心脏缺血／再灌注性室颤的累计持续时间（ＶＦｔ）、发生率（ＶＦｒ）及缺血预处理（ＩＰ）后心脏缺血保护作用的影响。结果：糖尿病大鼠与非糖尿病大鼠相比再灌期ＶＦｒ明显降低（４６％比９３％，Ｐ＜０．０５），缺血期室颤出现时间延迟〔（１４．３６±３．６７）ｓ比（５．８１±１．０２）ｓ，Ｐ＜０．０１〕；缺血１０ｍｉｎＶＦｔ〔（０．４３±０．２５）ｓ比（３９．００±２６．２７）ｓ，Ｐ＜０．０５〕及再灌期ＶＦｔ〔（５．００±２．９７）ｓ比（２３４．０７±６４．６８）ｓ，Ｐ＜０．０１〕均显著缩短，提示早期糖尿病大鼠心电稳定性较好。糖尿病大鼠心肌缺血预处理对心脏缺血再灌期的ＶＦｒ及ＶＦｔ皆无影响，而缺血１０ｍｉｎ的ＶＦｔ较糖尿病非预处理组大鼠增加，说明早期糖尿病时心脏缺血的自身保护作用有所减弱。     

大川芎丸对大鼠脑缺血的保护作用

目的　研究大川芎丸对大鼠脑缺血的保护作用。方法　采用大鼠大脑中动脉缺血 (MCAO)模型 ,将2 0只 SD大鼠随机分成治疗组和对照组 ,每组各 10只 ,分别于术后每天予以大川芎丸提取物 4 .13g/kg或相应剂量生理盐水 ,72 h后参照 L onga法行神经功能评分后处死 ,取脑组织作石蜡切片行 HE染色 ,计算脑体梗死积比。结果　大川芎丸治疗组神经功能评分 (1.5± 0 .71)低于对照组 (2 .3± 0 .82 ) ,差异有显著性 (P=0 .0 32 )。大川芎丸治疗组梗死体积比 (10 .81± 1.6 0 )与对照组 (17.82± 1.4 8)相比较 ,脑梗塞体积比明显减少 ,差异有显著性 (P=0 .0 0 0 )。结论　中药大川芎丸对大鼠脑缺血有保护作用。     

黄连素预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨黄连素预处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:60只SD大鼠被随机分为3组:假手术组、缺血再灌注损伤组、黄连素预处理组;黄连素预处理组给予黄连素腹腔注射,假手术组和缺血再灌注组腹腔注射等量生理盐水,均连续腹腔注射7 d,末次于冠脉结扎前2 h腹腔注射给药。于左冠状动脉前降支中上1/3处结扎,结扎1 h后剪开结扎线,再灌注2 h。检测心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及血清LDH和CK水平;测定心肌梗死面积。结果:与缺血再灌注组比较,黄连素预处理组SOD活性显著升高(P<0.05)、心肌梗死面积、MDA、LDH、CK含量均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:黄连素预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与增加SOD活性、增强心肌抗氧化能力、稳定心肌细胞膜电位有关。     

孕酮对大鼠脑缺血再灌注后脑水肿的影响

目的观察孕酮对脑缺血后脑水肿的影响,并从孕酮对血-脑屏障通透性的影响和抗氧自由基两方面进一步探讨其可能的作用机制。方法雄性SD大鼠72只随机分为假手术组、I／R组、孕酮组。进行脑组织含水量测定,伊文思蓝渗透法血-脑屏障通透性定量分析,电镜下血-脑屏障超微结构形态学观察,脑组织SOD活性和MDA含量测定。结果孕酮能明显减轻脑水肿,降低血-脑屏障通透性,抑制SOD活性的降低和MDA含量的增高。结论孕酮抑制氧自由基的损害,降低血-脑屏障通透性,减轻脑缺血后脑水肿。